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      • KCI등재

        1-Deoxynojirimycin 생산 균주 Bucillus subtilis MORI 3K-85의 단백질 분석

        조용석(Yong Seok Cho),강경돈(Kyung-Don Kang),박영식(Young Shik Park),이재연(Jae Yeon Lee),김현수(Hyun Su Kim),육원정(Won Jeong Yuk),Shizuo George Kamita,황교열(Kyo Yeol Hwang),성수일(Su-Il Seong) 한국생물공학회 2011 KSBB Journal Vol.26 No.6

        In our previous study, we isolated and characterized a 1-deoxynojirimycin (DNJ)-producing bacterium, Bacillus subtilis MORI, from chungkookjang, a Korean traditional food. B. subtilis MORI was subjected to γ-irradiation and the resulting bacteria were screened for increased DNJ production. A mutant was identified that produced 7.6 times more DNJ and named B. subtilis MORI 3K-85. In this study, the protein profiles of both strains were compared by one-dimensional and two-dimensional gel electrophoresis (1-DE and 2-DE, respectively) under both native and denaturing conditions. The 1-DE native-PAGE and 1-DE SDS-PAGE analyses identified 5 and 7 bands, respectively, that were found at higher concentrations in B. subtilisMORI 3K-85 than in B. subtilis MORI. Similarly, 2-DE analyses identified 20 protein spots which were found at higher concentrations in B. subtilis MORI 3K-85. The peptide mass profiles of these 20 proteins were analyzed by MALDI-TOF and compared with peptide sequences of B. subtilis and B. amyloliquefaciens in the MASCOT database. This screening suggested that three dehydrogenases, an aldolase, a synthetase, an isomerase, a reductase, and a peroxidase are elevated in B. subtilis MORI 3K-85. Based on this data, one or more of the elevated 8 enzymes might be related to the DNJ biosynthetic pathway.

      • KCI등재

        1-Deoxynojirimycin을 생산하는 Bacillus subtilis S10 배양액의 혈당강하 효과

        조용석(Yong Seok),박영식(Young Shik Park),이재연(Jae Yeon Lee),강경돈(Kyung-Don Kang),황교열(Kyo Yeol Hwang),성수일(Su Il Seong) 한국식품영양과학회 2008 한국식품영양과학회지 Vol.37 No.11

        본 연구는 α-glucosidase의 강력한 효소저해제인 1-deoxynojirimycin(DNJ)을 고효율로 생산하는 균주의 선발 및 동정, 배양최적화 및 균 배양액의 혈당강하효과 등에 관하여 조사하였다. 먼저 토양으로부터 α-glucosidase에 대해 강력한 저해능을 나타내는 9균주를 대상으로 이 중에서 DNJ 생산성이 가장 우수한 한 개 균주를 최종 선발하였고, 이 균주를 16S rDNA 염기서열분석으로 균주동정을 하여 Bacillus subtilis S10이라 명명하였다. 본 균주의 배양액을 이온교환수지법(Amberlyst 15 H? form, Dowex 1×2-100 OH? form, Amberlite CG-50 NH₃? form)에 의해 DNJ를 정제하고, 정제된 DNJ를 LC-MS로 분석한 결과 표준 DNJ와 동일한 물질임을 확인하였다. DNJ 대량생산을 위한 S10균주의 배양최적탄소원 및 최적질소원과 이들의 최적농도를 조사한 결과 각각 1% galactose, 1.6% polypeptone임이 밝혀졌으며, 확립된 최적화 조건에서의 DNJ 생산량은 0.75 g/L이었다. 고혈당 유도 마우스를 대상으로 각종 혈당강하제의 효과를 알아보기 위해 혈당치를 비교한 결과 무처리구의 혈당치 510±10.9 ㎎/dL에 비해 acarbose 처리구는 139.4±33.1 ㎎/dL, 누에분말 처리구는 209.1±19.6 ㎎/dL, 그리고 S10 균주 배양액 처리구는 208.6±39.8 ㎎/dL로써 무처리구에 비해 각각 72.7%, 59.0%, 그리고 59.1%의 혈당 억제율을 나타냈다. 이상의 연구결과 S10균주 배양액은 누에분말과 같은 수준의 고혈당 억제 및 완화효과가 있음이 확인되었으며 향후 S10균주의 대량생산을 통해 식후혈당조절을 위한 건강기능식품 개발이 기대된다 하겠다. 1-Deoxynojirimycin (DNJ) is a strong α-glucosidase inhibitor which inhibits hyperglycemia in animals. To select the Bacillus strains highly producing DNJ, 4,000 strains were isolated from soil and grain samples. By the inhibitory activity against α-glucosidase, nine Bacillus strains were selected and then identified by 16S rDNA sequencing. B. subtilis S10 was finally selected as the best strain for the production of DNJ. Various carbon sources and nitrogen sources in culture medium were evaluated for the highest production of DNJ. As the results, the optimized concentration of carbon source and nitrogen source was 1.0% galactose and 1.6% polypeptone and the concentration of DNJ produced was 0.75 g/L. The effect of culture supernatant of B. subtilis S10 on lowering blood glucose level was investigated in streptozotocin (STZ)-induced diabetic mice model. Mice were randomly assigned to control group (saline) and three test groups such as acarbose group, silkworm powder group and B. subtilis S10 group. After eight-week oral feeding, blood glucose levels of the B. subtilis S10 and silkworm powder groups were respectively 209.1±19.6 ㎎/dL (59.1%) and 208.6±39.8 ㎎/dL (59.0%) lower than 510±10 ㎎/dL of the control group. These results indicated that the culture supernatant of B. subtilis S10 was able to reduce the blood glucose level in STZ-induced diabetic mice.

      • The Design and Numerical Analysis of Ultra Miniature Eddy Current Sensor

        Cheol-Woong Kim(김철웅),Cheon-Woong Park(박천웅),Gwang-Je Kim(김광제),Kyung-Don Kang(강경돈) 대한기계학회 2012 대한기계학회 춘추학술대회 Vol.2012 No.11

        Shielding in magnetic field is more difficult than in electric field. So, it can be said that magnetic field influences the bio-compatibility more than electric field. In order to prevent distortions in the image or magnetic field by the micro-pin after permanent transplant of an anastomotic ring during free flap or plastic reconstruction, the current density, magnetic susceptibility, and electrical conductivity of Ti-6Al-4V must be evaluated. The result of Finite Element Model (FEM) can be highly trusted when it contains finite plane as in electrical instruments. However, the evaluative analysis is rather vague for magnetic fields, thus limits 3-dimensional region segmentation. Consequently, it is more accurate to apply Biot-Savarts law if there is no dielectric substance. In this study, human tissue model was hypothesized to be a magnetic cube cell, modeled through Impedance Network, and analyzed after converting the Maxwell equation to Circuit equation. Impedance method is highly effect for finding the inner current density or induced electric field if the frequency is low. When human tissue is exposed to a time-variant magnetic field, the human body becomes non-assimilative, hence, a critical factor that could influence the magnetic field. The eddy current can be calculated by forming an electrical network from the complex conductivity of the tissue.

      • KCI등재

        바실러스 발효대사물이 함유된 신규 칼슘보충용식품의 성장기 쥐 장골 성장촉진효과

        이재연(Jae-Yeon Lee),박영식(Young-Shik Park),김영훈(Young-Hoon Kim),오경환(Kyung-Hwan Oh),황교열(Kyo-Yeol Hwang),조용석(Yong-Seok Cho),강경돈(Kyung-Don Kang),김근(Keun Kim),주동관(Dong-Kwan Joo),성수일(Su-Il Seong) 한국식품영양과학회 2008 한국식품영양과학회지 Vol.37 No.12

        기존 칼슘보충용식품의 성장촉진효능을 증진시키기 위하여 칼슘흡수 관여 물질인 γ-PGA를 다량 생산하는 Bacillus subtilis SE4 균주를 선발하였다. 선발된 B. subtilis SE4의 발효대사물을 기존 칼슘보충용식품에 첨가하여 성장기 수컷 흰쥐에 28일간 경구투여 한 결과 발효대사물이 첨가된 신규칼슘보충용식품군에서 혈청 내 IGF-Ⅰ 함량이 대조군이나 기존칼슘보충용식품군에 비해 유의적으로 높게 나타났다(p<0.05). 일일증체량, 일일사료섭취량, 장골길이, 장골 무게, 장골폭 등의 성장관련 지표에서도 장골의 길이와 일부 부위별 두께에서의 유의적 결과를 포함하여 전반적으로 신규칼슘보충용식품군이 대조군과 기존칼슘보충용식품군에 비해 양호한 성적을 나타내었다. 이러한 결과는 기존칼슘보충용식품에 발효대사물을 첨가함으로써 나타난 칼슘의 생체흡수율 증대 및 성장호르몬의 분비활성화 등 여러 성장관련요인들이 흰쥐 성장에 긍정적으로 작용한 때문으로 생각되어진다. This study was conducted to investigate the effect of administration of calcium supplementary food containing fermented product of Bacillus subtilis SE4 highly producing poly-γ-glutamic acid on the growthparameters of adolescent male rats. Four-week old male Sprague-Dawley (SD) rats were fed for 4 weeks and assigned to the following 4 groups: two groups administered orally with new calcium supplementary food (such as 150 ㎎/㎏ and 300 ㎎/㎏) containing fermented product of B. subtilis SE4, one group administered with conventional calcium supplementary food product (150 ㎎/㎏) and one saline group as control. Daily weight gain and daily food intake in the two new food product groups were higher than those of conventional food product group and control group. Especially, the content of serum IGF-Ⅰ in the two new food product groups were significantly higher than those in conventional food product group and in control group (p<0.05). In addition, length and weight of longitudinal bone in the two new food product groups were longer and heavier than those of conventional food product group and control group. Therefore, the addition of fermented food product of B. subtilis SE4 into the conventional calcium supplementary food increased all the parameters examined for the growth of the adolescent male rats.

      • KCI등재

        뽕잎 함유 대두발효물이 신생 당뇨유도쥐에 미치는 혈당강하효과

        황교열(Kyo-Yeol Hwang),김영훈(Young-Hoon Kim),조용석(Yong-Seok Cho),박영식(Young-Shik Park),이재연(Jae-Yeon Lee),강경돈(Kyung-Don Kang),김근(Keun Kim),주동관(Dong-Kwan Joo),안덕균(Duk-Kyun Ahn),성수일(Su-Il Seong) 한국식품영양과학회 2008 한국식품영양과학회지 Vol.37 No.4

        당뇨 환자를 위한 기존의 뽕잎 건강식품의 기능을 보완할 목적으로 뽕잎분말과 DNJ 생산균주인 Bacillus subtilis MORI균의 대두발효 혼합물을 신생 당뇨유도쥐에 4주간 경구투여 하여 먹이섭취량, 체중변화, 혈당량, 내당능, 혈중 지질함량, 장기무게 등을 조사하였다. 전체적으로 당뇨유도 시험군은 정상시험군(NC군)과 비교하여 사료섭취량은 많았으나 증체량이 적어 낮은 사료효율을 보였다. 그러나 뽕잎(M군) 및 뽕잎함유대두발효물(MM군)의 투여에 의해 사료효율이 개선되었으며 특히 MM-60군에서 가장 높은 사료효율을 나타내었다. 1주일 간격으로 4주간에 걸쳐 시행한 혈당량 측정 결과 뽕잎이나 뽕잎함유대두발효물의 투여는 공복혈당을 크게 감소시켰으며 특히 MM-60군과 MM-120군은 당뇨대조군(DC군)에 비해 유의적으로 낮게 나타났다. 4주간의 시료투여 후 경구당부하시험에 의한 내당능 조사 결과 뽕잎투여나 뽕잎함유대두발효물의 투여는 혈당량을 꾸준히 감소시켰으며 특히 포도당 투여 후 120분에서의 MM-60군과 MM-120군은 DC군에 비해 유의적으로 낮은 혈당량을 보여 뽕잎 단독보다는 대두발효배양물 첨가에 의해 내당능이 크게 개선된 것으로 나타났다. 혈중 총콜레스테롤 및 중성지질 역시 DC군에서 높은 함량을 나타냈으나 뽕잎이나 뽕잎함유대두발효물 투여에 의해 지질함량이 감소하였으며 그 감량 정도는 총콜레스테롤에서는 MM-60군과 MM-120군에서 그리고 중성지질의 경우에는 M군, MM-60군, MM-120군에서 DC군에 비해 유의적인 감소를 나타내었다. 당뇨 유발에 의해 쥐의 간, 신장, 비장, 심장 등 체내 주요장기의 무게는 크게 증가하였으나 뽕잎 또는 뽕잎함유대두 발효물 투여에 의해 이들 장기의 무게는 대부분 감소하였으며 특히 MM-60군, MM-120군은 DC군에 비해 유의적인 감소를 나타내었다. 이상의 실험결과 뽕잎분말과 DNJ 생산균주인 B. subtilis MORI균의 대두발효물의 혼합물은 신생 당뇨유도쥐의 제반 당뇨증세 완화에 긍정적으로 작용하는 것이 확인되었으며 따라서 뽕잎함유대두발효물은 앞으로 당뇨환자들에 대한 건강식품 소재로 그 활용이 크게 기대된다 하겠다. The effect of fermented soybean culture of Bacillus subtilis MORI mixed with mulberry leaves on the lowering the levels of blood glucose and cholesterol was examined using neonatal streptozotocin-induced diabetic (n-STZ) rats. B. subtilis MORI produces 1-deoxynojirimycin (DNJ), an α-glucosidase inhibitor. The content of DNJ of soybean fermented culture mixed with mulberry was higher (4.1±0.0 ㎎/g dry base) than that (1.5±0.0 ㎎/g) of mulberry. The concentration of 50% inhibition (IC50) against rat intestinal α-glucosidase of soybean fermented culture mixed with mulberry was 5.6±0.1 ㎍/mL and that of mulberry was 17.0±0.5 ㎍/mL. Experimental groups of diabetic rats were randomly assigned to normal control group (NC group), diabetic control group (DC group) and three diabetic groups fed with DNJ food product. One of the three diabetic groups was M group (60 ㎎ DNJ food product/㎏) (DNJ food product containing 30% mulberry) and the other two were MM-60 group (60 ㎎/㎏) and MM-120 group (120 ㎎/㎏) (DNJ-fortified food product containing 30% fermented soybean culture mixed with mulberry leaves). The glucose in serum was significantly decreased in the MM-60 and MM-120 groups fed with DNJ-fortified food product for 4 weeks, compared with DC group. Total cholesterol and triglyceride in serum were also lower in MM-60 and MM-120 groups than the DC group. These results support that the fermented soybean culture of B. subtilis MORI mixed with mulberry leaves improved the metabolism of blood glucose and lipid in the n-STZ rat model.

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