콘택트렌즈 소독제 및 PHMB의 3종 가시아메바 포낭에 대한 살충능력 평가

신종원,유학선,공현희,정동일 慶北大學校 醫科大學 1996 慶北醫大誌 Vol.37 No.3

목적 : 국내에 시판되고 있는 콘택트렌즈 보존 및 소독액, 그리고 아메바성 각막염의 치료제로서 인정받고 있는 polyhexamethylene biguanide (PHMB)의 가시아메바 포낭에 대한 살충효과를 평가하고자 한다. 대상 및 방법 : 카스텔라니가시아메바 Ma주, 대식가시아메바 Nagington주 및 담수가시아메바 KA/LI주에 대한 소독액의 살충효과의 평가는 한천 plate위에서 수행하였고, 최저살충농도(minimal cysticidal concentration : MCC)의 결정은 microplate를 이용하였다. 7일간 관찰 후, 탈낭하지 않는 가시아메바 포낭은 사멸한 것으로 판정하였다. Chlorhexidine 및 PHMB의 MCC를 결정하기 위해 8시간 및 48시간 처리 실험을 분리하여 시행하였다. 결과 : 시판 소독액 중 chlorhexidine과 thimerosal를 함유하는 용액 C만이 가시아메바 포낭에 대한 살충효과가 있었고, 나머지 3종의 소독액은 살충효과가 없었다. 0.02% PHMB로 4시간 이상 처리한 가시아메바 포낭은 충주에 관계없이 사멸되었다. Chlorhexidine 과 PHMB, 두 약제 모두 8시간 처리 MCC가 48시간 처리 MCC보다 다소 높았다. PHMB에 대한 감수성은 가시아메바 충주에 따라 차이가 격심하였다. 결론 : 3종 가시아메바 포낭에 대한 PHMB의 MCC (0.29∼9.38㎍/㎖)가 chlorhexidine의 그것(2.73∼18.75㎍/㎖)보다 낮아 PHMB는 아메바성 각막염의 치료제 및 콘택트렌즈 소독제로 사용 될 수 있을 것으로 사료되며 화학소독액에 PHMB를 10㎍/㎖ 첨가하는 것이 요망된다. In order to evaluate the cysticidal effects of contact lens disinfectants and polyhexamethylene biguanide(PHMB) against 3 clinical isolates of Acanthamoeba. in vitro cysticidal assay was performed on agar plates covered with heat-inactivated Escherichia coli. Three clinical isolates of Acanthamoeba were A. castellanii Ma strain. A. polyphaga Nagington strain, and A. lugdunensis KA/LI strain. After treatment of Acanthamoeba cysts with the disinfectants or PHMB, the cysts were cultivated for 7 or more days. Cysts which were not excysted in 7 days after treatment were recognized killed. Among commercial disinfectants, the solution C. which contains chlorhexidine and thimerosal. was the only one with cysticidal effects on Acanthamoeba cysts. PHMB of 0.02% concentration was also cysticidal. Sensitivity to PHMB varied profoundly from isolate to isolate. Minimal cysticidal concentration (MCC) of chorhexidine and PHMB were determined by cultivation of cysts treated for 8 or 48 hours with serially diluted chlorhexidine and PHMB in wells of a 96-well microplate containing axenic culture media for amoebae. MCC of 48-hour treatment with both chemicals was lower than that of 8-hour treatment. MCC of PHMB against amoebic cysts was lower than that of chlorhexidine. In the light of these results. PHMB could be a contact lens disinfectant as well as a chemotherapeutic agent of amoebic keratitis.

난소의 소세포암종, 고칼슘혈증형 대세포 변종 : 1예 보고 A Case Report

이종실,이종학,김유경,박선후,고경혁 대한병리학회 2001 Journal of Pathology and Translational Medicine Vol.35 No.4

제주도 토양에서 분리한 가시아메바의 riboprinting에 의한 동정

김현동,전자호,유학선,공현희 慶北大學校 醫科大學 1996 慶北醫大誌 Vol.37 No.4

목적 : 가시아메바의 국내 분리주를 확보하고 국내 분포하는 가시아메바의 종류를 파악하며 그 분리주들의 병원성을 간접적으로 평가하기 위해 제주도의 토양에서 분리한 가시아메바 분리주를 riboprinting을 이용하여 종 동정을 하고자 한다. 재료 및 방법 : 제주도의 서로 다른 일곱 장소에서 무균 튜브에 흙을 담아와서 agar plate에서 배양한 후 서로 다른 형태적 특징을 보이는 포낭을 cloning하여 무균배양으로 키웠다. 각각의 핵 DNA를 분리하여 small subunit ribosomal RNA coding DNA 중 일부를 증폭하여 나온 PCR 산물을 8가지 제한효소로 소화시켜 그 RFLP양상을 16비교주와 비교한 후 Nei & Li의 공식에 대입한 후 UPGMA program로 유전적 거리를 구하였다. 결과 : 포낭의 형태는 KA/CS8주를 제외한 7주는 모두 Pussard 및 Pons의 분류에 따른 제 2군에 속하였고 KA/CS8주는 제 3군에 속하였다. 가시아메바 KA/CS1주와 KA/CS2주는 동일한 RELP양상을 나타내었으며 이들은 카스텔라니 가시아메바 Castellani주와 가장 유전적으로 가까왔고, KA/CS3주와 KA/CS6주는 A. triangularis SH621주와, KA/CS4주는 대식가시아메바 Jones주와, KA/CS5주는 대식가시아메바 P23주와. KA/CS7주는 카스텔라니 가시아메바 Neff주와 각각 유전적으로 가장 가까왔고, KA/CS8주는 비교주 중 어느 종과도 유전적으로 가깝지 않았다. 결론 : Acanthamoeba KA/CS1, KA/CS2, KA/CS3, KA/CS4, KA/CS6분리주들은 카스텔라니 가시아메바 complex에 속하였고, KA/CS5, KA/CS7분리주들은 대식가시아메바 complex에 속하였다. In order to collect and identify Acanthamoeba Korean strains. Acanthamoeba strains were isolated from soil of Cheju-do and were identified by comparison of the riboprints with the reference strains. Seven out of eight isolates from soil of Cheju-do belonged to the morphological group Ⅱ (Pussard and Pons, 1977) and the other one belonged to group Ⅲ by cyst morphology. The riboprints of seven isolates belonging to group Ⅱ were compared to those of Acanthamoeba reference strains (11 species 16 strains). KA/CS1, KA/CS2, KA/CS3, KA/CS4 and KA/CS6 strains belonged to A. castellanii complex. KA/CS1 and KA/CS2 strains showed identical riboprints to each other and were the most closely related to A. castellanii Castellani strain. KA/CS3 and KA/CS6 strains were the most closely related to A. triangularis SH621 strain, and KA/CS4 strain to A. polyphaga Jones strain. KA/CS5 and KA/CS7 strains belonged to A. polyphaga complex. KA/CS5 strain was the most closely related to A. polyphaga P23 strain and KA/CS7 strain to A. castellanii Neff strain. KA/CS8 strain belonging to group Ⅲ showed more than 20% estimated sequence divergence from the reference strains (5 species) and made a distinct division in a phenogram reconstructed based on the riboprints.

국내 원자력발전소의 사용후핵연료 선원항 평가에 관한 연구

윤인식,정운관,김성영,염유선,심재학 조선대학교 에너지.자원신기술연구소 2003 에너지·자원신기술연구소 논문지 Vol.25 No.2

우리나라에서도 원자력발전이 상용화된지 이십여년을 넘어서면서 원자력발전을 하고 있는 다른 나라와 마찬가지로 사용후핵연료 관리가 국가적인 문제로 심각히 대두되고 있다. 중간저장 시설은 1997년부터 운영예정이었으나 현재 그의 부지가 아직 확보되지 못한 상태에서 그 운전개시 시점이 불확실하다. 그리고 중간저장 이후의 사용후핵연료 정기관리 전략이 아직 마련되어 있지 못한 실정이다. 그러므로 발전소에서 발생되는 사용후핵연료 양과 그에 따른 선원항 평가는 반드시 선행되어야 할 것이다. 이제 본 연구에서는 국내 사용후핵연료 형태중 17×17에 대해서 농축도와 연소도 그리고 냉각시간별로 선원항 평가를 하였다. 사용후핵연료 선원항 평가를 위해 미국 Nuclear Regulatory Commission(NRC)의 인·허가 코드인 SCALE 코드를 이용하였다. 선원항 평가는 SCALE 코드의 모듈을 이용하였다. 선원항 평가 결과 농축도와 3.5 w/o와 연소도 35 GWD/MTU 일때 Cooling Time 0.3년은 7.5651E+16, 1년 2.8954E+16, 3년 9.8242E+15, 5년 5.4000E+15, 10년 3.0945E+15으로 계산되었으며, Cooling Time이 0.3년일때와 10년일때의 Source Term이 크게 차이가 남을 알 수 있었다. 방사선량율은 10 ㎝부터 500 ㎝ 까지 거리에 따라 선량율에 대하여 10 ㎝ 4.8365E+03(㏉/hr)에서 500 ㎝ 7.8456E+01으로 감소함을 알 수 있었다. 현재 국내 사용후핵연료에 대한 선원항 평가가 이루어지지 않았으며, Data Base 구축이 기초단계 이므로 이러한 기초자료는 추후 저장조가 건설되면 사용후핵연료 안전성과 관련하여 사용할 수 있는 것이고 기초 Data Base구축하는데 이용할 수 있을 것이다 As nuclear power has been used in our country over 20 years, spent fuel management is raised seriously as one of the national`s problems, which lies in similar situation to other countries having nuclear power plants. An interim storage facility has been planned to operate in 1997, it is highly uncertain whether this facility will start to operate by the time because the site has not been decided yet. After the intermediate storage, the spent fuel periodical management strategy has not prepared yet. Therefore it has to be preceded that the spent fuel quantity which is happening at the power station and the following source term. Now the main have evaluated the source term according to enrichment, burn-up, and cooling time for 17×17 of spent fuel form. I used the SCALE code which were certified by Nuclear Regulatory Commission(NRC) for the source term calculations of Spent Fuel. The source term was calculated, which reflected the feature of target nuclear fuel using ORIGEN-S, a module of the SCALE Code, and the exposure dose rates were calculated by using the QADS modules, considering the geometry. When the enrichment in the evaluated result of source term is 3.5 w/o and the burn-up is 35 GWD/MTU, the cooling time 0.3year is 7.561E+16(photon/second), 1year 2.8954E+16, 3year 9.8242E+15, 5year 5.400E+15, 10year 3.0945E+15 and found that the big difference in Photon Spectrum of cooling time 0.3year and 10year. I have found that radiation dose rate is decreased in 10㎝ 4.8365E+03(㏉/hr) into 500 ㎝ 7.8456E+01 for dose rate according to distance from 10 ㎝ to 500 ㎝. It is not made the source term evaluation on the domestic spent fuel, and since the data base construction is basic level, some time later, if the storage place is constructed, in connection with the safety, these basic data can be used and we can construct these basic data base.

콘택트렌즈 보존 용기 유래 Acanthamoeba lugdunensis KA/L5주의 내공생세균

정동일,공현희,김태호,황미열,유학선,윤호철,설성용 경북대학교 의학연구소 1999 경북대학교병원의학연구소논문집 Vol.3 No.1

콘택트렌즈 보존 용기 유래 가시아메바 KA/L5주의 세포질 내에 존재하는 bacterial endosymbiont(내공생세균)를 투과전자현미경으로 관찰하여 확인하였다. 숙주인 가시아메바 KA/L5주는 형태학적으로 제2군에 속하였고, rDNA PCR-RFLP 결과 A. lugdunensis로 동정되었다. 미토콘드리아 DNA RFLP와 동위효소 분석상 이 충주는 국내 콘택트렌즈 보존용기에서 가장흔히 분리되는 type인 KA/Ll주, 국내 임상 분리주 중 하나인 KA/E2주, 내공생세균을 가지는 것으로 보고된 병원 냉각수 유래 KA/W4주 및 L3a주와 동일하거나 매우 유사한 성적을 보였다. 내공생세균은 약 1.38× 0.507㎛의 크기였고, 아메바 세포질 내에 불규칙하게 분포하고 있었으며. 그 표면에 아메바의 ribosome이 부착되어 있었다. 내공생세균을 둘러싼 lacunae나 막과 같은 구조는 관찰되지 않았다. Legionella 특이 primer를 이용한 효소중합반응(PCR)에서 내공생세균의 염색체 DNA는 증폭되지 않았다. A. lugdunensis의 우리말 이름을 담수가시아메바로 제안한다. Transmission electron microscopy of an Acanthamieba isolate (KA/L5) from a contact lens case revealed bacterial endosymbionts within cytoplasm of the amoebae, The Acanthamoeba isolate belonged to the morphological group II. Based on the polymerase chain reaction (PCR) - restriction fragment length Polymorphism (RFLP) of 18S ribosomal RNA coding DNA (rDNA), the Isolate was identified as A. lugdunensis. Strain typing by isoenzyme analysis using isoelectric focusing (IEF) and mitochondrial (Mt) DNA RFLP revealed that the isolate was closely related with KA/Ll , the most predominant type of isolates from contact lens storage cases, KA/E2, a clinical isolate, KA/W4, preciously reported to host endosymbionts, and L3a strains of A. lugdunensis. The endosymbionts were similar to those of KA/W4 In aspects that they were randomly distributed in both trophozoites and cysts, and were rod-shaped bacteria measuring approximately 1.38x 0.50㎛. But the number of endosymbionts per amoeba was significantly lower than that of KA/W4. They were neither limited by phagosomal membranes nor included In lacunae- like structure.

Cloning and characterization of Giardia intestinalis cyclophilin

Hak-Sun YU,Hyun-Hee KONG,Dong-Il CHUNG 대한기생충학열대의학회 2002 The Korean Journal of Parasitology Vol.40 No.3

Molecular characterization of Acanthamoeba isolated from amebic keratitis related to orthokeratology lens overnight wear

Sun Joo LEE,Hae Jin JEONG,Ji Eun LEE,Jong Soo LEE,Ying Hua XUAN,Hyun-Hee KONG,Dong-Il CHUNG,Mee-Sun OCK,Hak Sun YU 대한기생충학열대의학회 2006 The Korean Journal of Parasitology Vol.44 No.4

Up-regulation of Galectin-3 in HIV-1 tat-transfected Cells

Yu Hak Sun,Kim KoanHoi Korean Society of Life Science 2005 생명과학회지 Vol.15 No.2

Previous studies have demonstrated that expression of galectin-3, a member of family of beta-galactoside-binding animal lectin, is associated with pathological conditions including cancer, atherosclerosis, and viral infection. An increase of this lectin has been observed after infection by Kirsten murine sarcoma, human T lymphotropic virus-l (HTLV-l), and human immunodeficiency virus-l (HIV-l). Viral transactivation protein Tax of HTLV-l mediates the increase in the lectin. In case of HIV-1, there are evidences that Tat would be related with increase in galectin-3. We investigated whether Tat directly induced galectin-3 expression in cells. We found that HIV-l tat gene activated galectin-3 promoter in RAW264.7 cells. To demonstrate direct induction of galectin-3 by HIV-l tat, we transfected the tat into a rabbit smooth muscle cell line (Rb1) and obtained RblTatCl-2, a clone of cell stably transfected with tat gene. The Rb1TatCl-2 cells exhibited activation of LTR promoter and up-regulation of galectin-3 transcript as well as protein. Our results indicate that HIV-l tat alone is sufficient to induce the expression of galectin-3. The Rb1TatCl-2 cells could be valuable for study of the effect of HIV-1 tat on expression of cellular genes.

Natural occurrence of Mycobacterium as an endosymbiont of Acanthamoeba isolated from a contact lens storage case

Hak Sun YU,Hae Jin Jeong,Yeon-Chul HONG,Seong-Yong SEOL,Dong-Il CHUNG,Hyun-Hee KONG 대한기생충학열대의학회 2007 The Korean Journal of Parasitology Vol.45 No.1

Role of Protease Activated Receptor 2 (PAR2) in Aspergillus Protease Allergen Induces Th2 Related Airway Inflammatory Response

Hak Sun Yu(유학선) 한국생명과학회 2010 생명과학회지 Vol.20 No.4

대부분의 알려진 알러젠들은 단백분해효소의 성격을 가지고 있고 이는 알레르기 반응에서 Th2 면역 반응을 일으키는 데 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 이러한 단백분해효소들과 반응하는 것으로 알려진 protease activated receptor (PAR)는 4가지 종류가 있으며, 이 중 PAR2의 경우 알레르기 질환과 많은 상관관계를 보여 많은 연구가 되고 있다. 본 연구는 Aspergillus protease 알러젠에 의한 초기 및 만성 Th2 면역반응에서 PAR2의 역할을 규명하기 위해 Aspergillus protease 알러젠으로 정상쥐와 PAR2 유전자 결핍쥐 모두 Th2 반응을 유도한 후 면역세포의 침윤 정도 및 Th2 관련 cytokine 및 chemokine 유전자들의 발현 정도를 비교하였다. 그 결과 Aspergillus protease 알러젠으로 비강내로 1회 처리했을 경우 중성구의 침윤이 두드러지는데, 이때 PAR2 결핍 마우스는 이러한 면역세포의 침윤이 유의적으로 감소하였다. 또한, 이와 관련된 IL-25, TSLP, Eotaxin 유전자들의 발현 역시 PAR2 결핍 마우스에 현저히 감소하였다. 한편, Aspergillus protease 알러젠으로 비강내로 6회 처리했을 경우 중성구 대신 호산구의 침윤이 두드러지지만 PAR2 결핍 마우스에서 그 정도가 유의적으로 낮았다. OVA 특이 IgE와 IgGl 농도 역시 현저하게 PAR2 결핍 마우스에서 낮았고, CCL21의 발현이 PAR2 결핍마우스 MEF cells에서 현저히 감소하였다. Th2 초기 면역반응에서 가장 중요한 IL-25의 발현에 MAKP p38 pathway가 관여한다는 것을 이번 연구에서 알 수 있다. 본 연구를 통해 Aspergillus protease 알러젠으로 유도된 알러지성기관지 염증 반응에서 초기 반응뿐만 아니라 만성반응에서도 PAR2가 중요한 것을 알 수 있다. Most allergens have protease activities, suggesting that proteases may be a key link between Th2-type immune reactions in allergic responses. Protease activated receptor (PAR) 2 is activated via the proteolytic cleavage of its N-terminal domain by proteinases. To know the role of PAR2 in Aspergillus protease allergen activated Th2 immune responses in airway epithelial cells, we investigated and compared immune cell recruitment and level of chemokines and cytokines between PAR2 knock out (KO) mice and wild type (WT) mice. There were evident immune cell infiltrations into the bronchial alveolar lavage fluid (BALF) of WT mice, but the infiltrations in PAR2 KO mice were significantly lowered than those of WT mice. The IL-25, TSLP, and eotaxin gene expressions were profoundly increased after Aspergillus protease, but their expression was significantly lowered in PAR2 KO mice in this study. Compared to PAR2 KO mice, OVA specific IgE concentrations in serum of WT mice were quite increased; moreover, the IgE level of PAR2 KO mice was lower than in WT mice. The IL-25 expression by Aspergillus protease stimulation was significantly reduced by p38 specific inhibitor treatment. In this study, we determined that Th2 response was initiated with IL-25 and TSLP mRNA up-regulation in lung epithelial cells via PAR2 after Aspergillus protease allergen treatment.