폐렴구균의 용혈능 변화와 pneumolysin 유전자의 변이 양상

오원섭,장현하,정숙인,김연숙,이혁,김신우,김성민,백경란,이남용,송재훈 대한화학요법학회 2002 대한화학요법학회지 Vol.20 No.3

목적 : 폐렴구균은 인체에서 폐렴, 수막염 및 패혈증 등을 일으키는 중요한 병원균으로 현재 전 세계적으로 항균제 내성이 큰 문제가 되고 있다. 하지만 폐렴구균의 항균제 내성에 따라 병독성이 어떻게 변화하는지에 대해서는 구체적으로 알려져 있지 않다. 이에 기능적 및 구조적 분석을 통하여 폐렴구균의 주요 병독성 인자인 pneumolysin의 병인론적 역할을 규명하고자 하였다. 방법 : 임상 검체에서 분리된 페니실링 감수성 균주 20주와 내성 균주 20주를 대상으로 하였다. Pneumolysin의 세포 독성의 변화를 관찰하기 위하여 각각의 균주들의 용혈능을 측정하였고, pneumolysin 유전자를 중합효소 연쇄반응으로 증폭한 후 증폭 산물의 유전자 구조를 분석하였다. 결과 : 페니실린 감수성 균주와 내성 균주간의 용혈능은 유의한 차이를 보이지 않았으나, 일부 용혈능이 매우 낮은 균주에서 Lys152→Thr, Thr-172→Ile, Lys-224→Arg와 같은 변이가 관찰되었다. 결론: pneumolysin의 세포 독성의 변화는 항균제 내성 정도와는 무관하였으나, 일부 용혈능이 저하된 균주에서 발견된 pneumolysin 유전자의 변이가 pneumolysin의 세포 독성에 영향을 주는 것으로 보인다. Background : Pnumolysin (Ply) is one of the most important virulence factors of Streptococcus pneumoniae. To investigate the functional and structural variation of Ply, hemolytic activity (HA) and gene sequences of pneumolvsin were determined. Methods : A total of 40 invasive pneumococcal isolated (20 penicillin-susceptible & 20-resistant strains) were analyzed. HA of each isolate was measured in crude extracts (1×10^8 CFU/mL) hourly from the time of inoculation to 9h. Crude extracts (50㎕) and DTT buffer (100㎕) were serially diluted in 96-well plate and mixed with 1% sheep blood (50㎕). HA was represented as the reciprocal of the greatest dilution, which resulted in the complete lysis. Two sets of oligonucleotide primers were used to amplify a 1,474-bp fragment containing the coding region and a 578-bp fragment of upstream region of ply gene, respectively. Amplified products were directly sequenced. Results : HA showed a wide variation from 0 to 87,480 regardiess of penicillin MICs, serotypes or specimen sources. Two bacteremic strains showed completely no hemolytic activity. No significant differences in HA between penicillin-susceptible (Mean± SE : 15,468± 4,693) and penicillin-resistant strains (21,384± 4,087) were found (p > 0.05).Sequencing of the coding region showed unique alterations in amino acids in strains with markedly reduced hemolytic activity (≤ 40): Thr-172-Ile and Lys-224-Arg. However, upstream region of ply gene was highly conserved. Conclusions : Ply activity was not related with antibiotic resistance. Absence of HA in some strains was associated with unique alterations in amino acid sequences in ply gene. Relationnship between genomic alteration and functional changes in pneumolysin should be further investigated.

단계적 온도 하강법을 이용한 췌도세포 냉동보존법

정인경,오승훈,김병준,양태영,이병완,하창영,노정현,정재훈,민용기,이명식,이문규,김광원 대한당뇨병학회 2002 Diabetes and Metabolism Journal Vol.26 No.1

연구배경:최근 당뇨병의 새로운 치료법으로 시도되고 있는 췌도이식은 충분한 췌도수의 확보와 췌도생존율을 높이기 위한 면역억제제 사용이 제한점이 되고 있다. 본 연구의 목적은 이식 전 충분한 췌도 수의 확보를 위해 분리한 췌도를 냉동보존하는 방법을 확립하고 냉동보존한 백서 췌도세포의 시험관내 그리고 생체내 기능을 조사하였다. 방법:분리한 백서의 췌장소도를 48시간 배양한 후 한 시험관당 췌도세포 1000개씩 나누었다. 냉동보존은 6개의 시험관에 DMSO를 첨가한 후 초 냉각(supercooling), 핵화(nucleation)단계를 거친 후 99% isopropanol과 액체질소가 들어있는 dewer를 이용하여-0.25℃/분의 냉각속도로 -40℃까지 단계적으로 얼린후-70℃ 액체질소 탱크에 보관했다. 해동은 냉동시킨 vial들을 액체 질소 태으에서 꺼내 37℃ 항온조에 담가 급격히 해동시킨 후, 원심분리하여 상층액을 제거하고 각 vial에 0.75M sucrose 용액을 가한 후, 10% fetal calf serum이 함유된 RPMI 1640 media에서 배양하였다 각각 6개의 시험관에서 해동한 췌도들을 광학현미경 및 형광현미경하에서 췌도의 모양과 생존율에 대해 조사하고 인슐린 정적반응을 알아보았다. 또한 분리한 췌도를 냉동보존하지 않고 이식한 경우를 대조군(6마리)과 생체내 기능을 비교하였다. 결과:① 냉동보존후 획득한 췌도의 수와 생존율 해동후 획득한 췌도의 수는 해동시킨 당일날이 902±21, 24시간 배양 후에는 857±16, 72시간 후에는 817±18개로 점차 감소되었다. AO/PI 염색상 각 췌도의 생존율은 냉동 전을 100으로 하였을 때 해동당일, 24시간 후, 72시간 후가 각각 60±5, 80±5, 90±5%로 해동후 3일간 배양하였을 때 냉동전의 수준으로 회복하였다. ② 냉동보존후 췌도의 포도당에 대한 정적 인슐린 분비능:냉동직후 감소된 경향을 보였으나 해동후 3일간 배양한 췌도의 인슐린 분비는 냉동전과 통계적으로 의미있는 차이가 없이 냉동보존 전의 수준으로 회복되었다. ③ 냉동보존후 췌도의 포도당에 대한 동적 인슐린 분비능:냉동보존한 췌도를 해동후 3일째의 인슐린 동적 분비능은 냉동 전과 마찬가지로 자극 인슐린의 반응의 제1기와 2기가 잘 관찰되었다. ④ 냉동보존한 췌도세포 이식 후 혈당 변화:스트렙토조토신으로 유도된 당뇨병 쥐에 췌도이식 후 혈당은 냉동보존한 췌도이식군에서 대조군에 비해 혈당의 조절효과가 더 오래 지속되었다. 결론:소동물에서 단계적 온도 하강법을 이용한 췌도세포 냉동보존법을 확립하였으며 이는 기능, 구조 및 생존율에 큰 이상을 보이지 않았으므로 장차 사람의 췌도세포 동종이식시 부족한 췌도세포수를 극복하고 면역반응을 줄일 수 있는 매우 유용한 방법이 될 것으로 판단된다. Background : Although islet transplantation has been attempted to reverse the state of diabetes, achieving a critical number of islets and modulating the immune response limit the success of islet transplantation. Cryo-preservation of islets offers many important benefits for islet transplantation by collecting islets with a wide variety of HLA phenotypes and islet MHC expression. The aims of this study was to determine the optimal conditions for cryo-preservation by using a controlled cooling method and to evaluate in vitro and in vivo functional properties of the cryo-preserved islets. Methods : Collagenase-isolated, Ficoll-purified islets were cultured for 48 hours. They were aliquoted into freezing tubes (1000 islets per tube), equilibrated with 2M dimethyl sulfoxide (DMSO) in three steps, supercooled, nucleated, and controll-cooled at rate of 0.25℃/min to - 40℃ prior to storage at - 196℃. Rapid thawing and removal of DMSO with 0.75 M sucrose preceded 48 hour of culture and the morphology, viability, glucose-induced insulin secretion, and in vivo function of rats transplanted with cryopreserved islets was reexamined. Results : ① Recovery was 90.2±0.2%, 85.7±0.1% and 81.7±0.1% immendiately after, 24 hours and 72 hours after thawing respectively. The viability was 60±5%, 80±5%, 90±5% immediately after, 24 hours and 72 hours after thawing respectively. ② The glucose-stimulated-insulin secretion (GSIS) tended to decrease immediately after thawing, but GSIS increase to the level of pre-cryopreservation 72 hours after thawing. ③ The in dynamic GSIS, the first and the second phase of insulin secretion were well preserved in islets cultured for 72 hours after thawing. ④ The cryopreserved islets were cultured for 3 days and transplanted into renal sub-capsular space of streptozotocin (STZ) induced diabetic rats. The duration of normoglycemia in the STZ-induced diabetic rats transplanted with cryopreserved islets was significantly longer than of the fresh islets. Conclusion : The optimal condition of cryopreservation using the controlled cooling method was established in rat pancreatic islets. This cryopreservation method can be a feasible approach for human islet transplantation (J Kor Diabetes Asso 26:64~74, 2002).

Astromicin sulfate의 약동학 및 안전성 평가

정숙인,김연숙,오원섭,복혜숙,김명민,최경업,김연화,김성민,백경란,송재훈 대한화학요법학회 2001 대한화학요법학회지 Vol.19 No.3

목적 : Astromicin은 aminoglycoside계 항생제와 유사한 화학구조와 특성을 지니고, 기존의 aminoglycoside와 유사하거나 향상된 임상효과 및 부작용을 지닌 것으로 알려져 있다. 저자들은 astromicin의 약동학적 특성을 분석하고, astromicin 투여 환자를 대상으로 한국인에서 그 임상적 및 세균학적 효과와 안전성을 평가하고자 하였다. 대상 및 방법 : 약동학적 지표는 정상성인 남자를 대상으로 astromicin 200㎎을 30분간 정주한 후 24시간까지 혈장 및 뇨 검체를 수집하여 one-compartment open model에 따라 분석하였다. 중증으 세균감염이 있는 18세 이상의 환자를 대상으로 병용 또는 단독 투여한 후 임상적 효과와 세균학적 효과를 판정하였고, 치료전과 후의 순음청력검사와 혈청 크레아티닌으로 이독성과 신독성을 평가하였다. 결과 : 정상 성인 남자 12명을 대상으로 약동학적 지표를 평가하였고, 최고혈장농도는 투여 종료시점(C_(0))에서 16.87±1.68㎍/mL였으며, 반감기는 1.86±0.43 시간 이었고, AUC_(0-12h)은 38.12±10.57㎍ㆍhr/mL, Vd는 0.18±0.02L/㎏, CL은 5.25±2.07L/hr였다. 이러한 약동학적 지표는 다른 aminoglycoside와 유사한 결과를 보였다. 59명의 환자를 대상으로 시행한 임상적 효과 분석에서는 단독요법을 시행한 50명 중 임상적 치유율 94%, 세균학적 치유율 100%를 보였고, 순음청력검사를 시행한 48례의 환자중 의미있는 청력감소 소견은 관찰되지 않았으며, 신독성 또한 전혀 나타나지 않았다. 결론 : Astromicin의 약동학적 지표는 다른 aminoglycoside의 약동학적 지표와 비슷한 양상을 보이므로 향후 astromicin의 약물농도 감시에 있어서 다른 aminoglycoside의 치료적 약물 농도 감시 방법과 유사한 방법을 적용할 수 있으리라 기대된다. 또한 임상적 치유율이 우수하면서 신독성이나 이독성이 적어 세균 감염 환자의 치료에 있어서 단독 또는 병합 요법으로 비교적 안전하게 사용할 수 있으리라 생각된다. Astromicin(Fortimicin®) has some characteristics in common with other aminioglycoside antibiotics, although it has a unique chemical structure, which is different from them. This study was performed to elucidate the pharmacokinetic (PK) parameters of astromicin following single-dose intravenous infusion of 200 mg and to evaluate clinical efficacy and safety of astromicin in Korean populations. PK parameters of astromicin were determined in 12 healthy volunteers (65.5±5.2㎏). The plasma and urine samples were collected up to 24hrs. PK variables were calculated by fitting individual concentration-time curves to a one-compartment open model. Plasma level at the end of infusion was 16.87?1.68 ㎍/mL and declined to 1.05±0.35 (㎍/mL 8hr later. The half-life was 1.86±0.43 hr. Apparent volume of distribution was 0.18±0.02 L/㎏g, and total body clearance was 5.25±2.07 L/hr. These values were similar to those of other aminioglycosides. Clinical efficacy and safety were eviuated in 59 patients with moderate to severe bacterial infections who needed parenteral antibiotics. Among 50 patients who recieved astromicin monotherapy, 49 (98%) had favorable clinical reponse and 28 (100%) had favorable bacteriological response. Serial audiograms revealed no change in all of 48 patients. No nephrotoxicity was observed in all patients. Conclusively, our data suggest that therapeutic drug monitoring of astromicin can be conducted in a similar fashion as other aminioglycosides and astromicin is a useful and safe antibiotic in the treatment of severe bacterial infections.

폐렴구균 감염증에서 항생제 내성의 임상적 의미 : Asian Network for Surveillance of Resistant Pathogens(ANSORP) Study

정숙인,기현균,손준성,고관수,김나영,장현하,오원섭,백경란,이남용,김신우,이혁,--,송재훈 대한감염학회 2003 감염과 화학요법 Vol.35 No.5

목적 : 전 세계적으로 폐렴구균의 페니실린을 포함한 β-lactam과 마크로라이드 및 퀴놀론 계열의 항생제에 대한 내성이 급격히 증가하여 임상적으로 문제가 되고 있으나, 시험관내 내성이 실제 임상적 예후에 미치는 영향에 대해서는 아직까지 논란이 되고 있다. 본 연구는 폐렴구균의 항생제 내성률이 높은 아시아 지역에서 항생제 내성이 폐렴구균 감염증의 임상경과에 미치는 영향을 평가하기 위하여 시행되었다. 방법 : ANSORP에서 주관한 전향적 임상 연구로서 1999년 11월부터 2001년 8월까지 아시아 지역 11개국의 14개 기관에서 진단된 침습성 폐럼구균 감염증 환자를 대상으로 내성 균주 감염의 위험요인, 임상양상, 예후 등의 임상적 분석을 시행하였다. 결과 : 총 646명 환자의 평균연령은 30.1세(6일-89세)였고, 이전 3개월 내에 항생제 사용력이 있는 환자는 159명(32.4%)이었다. 질환별로는 폐렴이 377예(58.4%)로 가장 많았고, 중이염 67예, 뇌수막염 66예(10.2%), 일차성 균혈증 65예(10.1%)였다. 총 646균주 중 347균주(53.7%)가 페니실린 비감수성(중등도 내성 23.1%, 고도 내성 23.1%)이었고, 페니실린에 대한 MIC_(90)은 0.03㎍/mL에서 4㎍/mL까지의 분포를 보였다. 페니실린 비감수성 균주에 의한 감염증과 차이가 없었다. 페니실린 내성 폐렴구균 폐렴에 의한 사망률은 페니실린 감수성 폐렴구균 폐렴에 의한 사망률과 차이가 없었다(p=0.846). Erythromycin에 대한 고도 내성을 보이는 균주의 비율이 매우 높았으나, 실제 임상상이나 치사율에는 영향을 미치지 않았다(p=0.092). 페니실린 비감수성 폐렴구균에 의한 뇌수막염의 치사률도 감수성 균주에 의한 사망률과 차이가 없었다(p=0.059). 결론 : 본 연구의 결과 페니실린 및 베타 락탐 제제에 대한 시험관 내성은 폐렴구균 폐렴이나 뇌수막염의 임상상이나 치사율에 영향을 미치지 않는 것으로 확인되었다. 이는 내성의 정도와 연관될 것으로 생각되므로, 향후 고도 내성 균주가 증가할 때 추가 검증을 요한다. 아울러 macrolide 및 퀴놀론계 항생제 내성의 임상적 의미에 대한 후속 연구가 필요할 것으로 사료된다. Background : Despite the widespread emergence of antimicrobial resistance among pneumococcal strains worldwide, clinical implications of in vitro resistance still remain an open question. To evaluate the clinical impact of pneumococcal resistance in Asian countries where the prevalence of pneumococcal resistance was reported to be highest in the world, ANSORP has performed a prospective, multinational surveillance study with cases with invasive pneumococcal diseases in Asian countries. Methods : In vitro susceptibility of pneumococcal isolates was determined by broth microdilution tests with 16 antimicrobial agents. All enrolled cases of pneumococcal infections were analyzed with regard to demographic data, clinical features, risk factors and mortality. Results : A total of 646 patients with pneumococcal infections were enrolled from 14 centers in 12 countries between the period from November 1999 to August 2001. Pneumonia (58.4%) was the most common clinical disease followed by bacteremia (33.4%), otitis media (10.4%), and meningitis (10.2%). Among 646 isolates, 347 (53.7%) were penicillin non-susceptible (intermediate 23.1%, resistant 30.7%). MIG_(90)s for penicillin ranged from 0.03 (India) to 4.0 ㎍/mL (Korea, Taiwan, Vietnam, and Hong Kong). Overall mortality from pneumococcal diseases by penicillin non-susceptible strains was not different from that by susceptible strains. Pneumococcal pneumonia caused by penicillin- or erythromycin-resistant strains showed similar mortality, severity of illness, or complications to that by susceptible strains. Mortality from pneumococcal meningitis caused by penicillin non-susceptible strains was also similar to that by susceptible strains. Conclusion : Data suggest that current situation of in vitro resistance to penicillin or macrolides may not affect the mortality from pneumococal pneumonia or meningitis caused by antibiotic-resistant strains.

가야산지역 계곡부와 능선부의 해발고와 사면부위에 따른 삼림구조

박인협,조재창,오충현 순천대학교 기초과학연구소 1990 基礎科學硏究誌 Vol.1 No.-

가야산지역 계곡부와 능선부의 해발고와 사면부위에 따른 삼림구조를 조사하기 위하여 해인사-두리봉 동측 계곡부(해발 600∼1,000m)에 해발고와 사면부위에 따라 63개 조사구 국일암-가야산 정부 능선부(해발 700m∼1,430m)에 해발고에 따라 38개 조사구를 설치하였다. 계곡부 전체의 군집형은 신갈나무-조록싸리군집이었으며, 능선부는 소나무, 신갈나무-진달래군집이었다. 계곡부와 능선부의 유사도지수는 38.2%이었다. 계곡부 전체의 종 다양도는 1.3402, 능선부는 1.0098이었다. 식생천이는 소나무, 잣나무 → 신갈나무 → 졸참나무, 서어나무로 진행되는 것으로 추정되었다. 계곡부의 사면 하부에서 상부로 감에 따라 상대우점치가 증가하는 수종은 신갈나무, 갈참나무, 진달래, 조록싸리 등이었으며, 상대우점치는 증가하는 반면, 소나무는 감소하는 경향을 보였다. 계곡부에서는 해발고가 높아짐에 라다 모두 감소하였다. 계곡부의 사면 상, 중, 하부간 유사도 지수는 66.6∼69.2%, 해발고대간 유사도지수는 25.9∼79.8%로써 사면 부위보다 해발고에 따른 종구성 상태의 차이가 심한 것으로 나타났다. 능선부에서는 해발고가 높아짐에 따라 교목상층 밀도, 흉고단면적은 감소하는 경향을 보였으며, 종다양도는 일정한 경향을 보이지 않았다. 능선부의 해발고대간 유사도 지수는 27.9∼98.2%이었다. A valley and a ridge forest in Mt. Gaya area was studied to investigate forest structure in relation to altitude and part of slope. Sixty-three quadrats were set up in the valley forest along altitude of 600m to 1,000m and part of slope, and thirty-eight quadrats were set up in the ridge forest along altitude of 700m to 1,430m. According to the importance values, the valley forest was Quercus mongolica-Lespedeza meximowiczii community and the ridge forest was Pinus densiflora, Quercus mongolica-Rhododendron community. Similarity index between the valley forest community and the ridge forest community was 37.2%. Shannon's species diversities of the valley forest community and the ridge forest community were 1.3402 and 1.0098, respectively. According to importance values by crown stories and DCA ordination, successional trends of tree species may be from Pinus densiflora and Pinus koraiensis through Quercus mongolica to Quercus serrata and Carpinus laxiflora. As going from the lower part to upper part of the slope in the valley forest, the importance values of Quercus mongolica and Quercus aliena, Rhododendron mucronulatum and Lespedeza meximowiczii increased while those of Carpinus laxiflora and Fraxinus rhynchophylla decreased. With increasing elevation in the valley and ridge forest, the importance value of Pinus densiflora decreased while that of Quercus mongolica increased. In the valley forest, densities of canopy and shrubstratum increased as increasing elevation, and the number of species and species diversity decreased as increasing elevation and going from the lower part to the upper of slope. The range similarity indices between parts of the slope, and the elevation belts of 100m in the valley forest were 66.6∼69.2 and 25.9∼79.8%, respectively. In the ridge forest, density and basal area of canopy tended to decreased as increasing elevation, and the range of similarity indices between elevation belts of 100m was 27.9∼98.2%.

국내 5개 3차 병원의 β-lactam계 항생제 사용 실태 및 Klebsiella pneumoniae의 항생제 내성과의 상관 관계

정숙인,박경화,권기태,고관수,오원섭,정두련,백경란,염준섭,장현하,김신우,손준성,송재훈 대한감염학회 2007 감염과 화학요법 Vol.39 No.4

Background : This study was performed to evaluate the prescribing pattern of β-lactam antibiotics and the relationship between antimicrobial resistance and antimicrobial use in 5 tertiary care hospitals in Korea. Materials and Methods : Data on annual patient-days and annual consumption (defined daily dose (DDD) per 100 patient-days) of β-lactam antibiotics from 2003 to 2005 in 5 tertiary hospitals were analyzed. To determine the antimicrobial resistance in K. pneumoniae, broth microdilution test and double disk synergy were performed according to the CLSI performance standards. Spearman's correlation coeffient was used to determine the relationship between antibiotic consumption and resistance. Results : The prescription of β-lactam antibiotics in 5 tertiary hospitals markedly varied. In two hospitals, increase in consumption of β-lactam antibiotics was more than 30% during recent 3 years. The higher consumption of β-lactam antibiotics significantly correlated with the higher rate of antibiotic-resistant K. pneumoniae in 5 tertiary care hospitals. Conclusion : Continuous surveillance of antibiotic use is needed to encourage appropriate prescribing of antibiotics and to reduce antibiotic resistance. 목적 : 항생제의 오남용으로 인한 내성균의 발현 및 급속한 확산이 전세계적으로 문제시 되고 있다. 특히 병원은 항생제 내성의 중심점에 있는 것으로 여겨진다. 본 연구에서는 최근 3년간 국내 5개 3차 병원의 β-lactam계 항생제의 사용량을 조사하고, 각 병원별 항생제 사용량과 K. pneumoniae의 항생제 내성률과의 상관관계를 알아보고자 하였다. 재료 및 방법 : 국내 5개 3차 병원에서 2003년 1월부터 2005년 12월까지 병원 입원 환자를 대상으로 연도별 재원연인원수와 각 β-lactam계 항생제의 총사용량을 수집하여 DDD (defined daily dose) per 100 patient-days로 환산하여 비교하였다. 2005년 6월부터 8월까지 각 병원의 임상검체에서 동정된 K. pneumoniae를 수집하여 액체배지미량희석법으로 항생제 감수성 검사를 시행하였고 ESBL(extended-spectrum β-lactamase) 생성 여부는 double disk synergy test를 시행하였다. 항생제 사용량과 내성의 상관관계는 Spearman 상관관계 분석을 시행하였다. 결과 : 5개 병원 중 3개 병원에서는 연도별 β-lactam계 항생제 사용량이 비슷하게 유지되었으나, 2개 병원에서는 2003년에 비해 2005년에 항생제 사용량이 30% 이상 증가하였다. β-lactam계 항생제 중 제제별 비율은 각 병원마다 차이가 있었으나, 3세대 cephaosporin의 사용이 가장 많았고 2세대 ceaphlosporin, β-lactam/β-lactamase inhibitor, 1세대 cephalosporin 순이었다. 경구용 β-1actam계 항생제의 사용량(r=0.900, P<0.037)과 2세대 cephalosporin의 사용량(r=0.900, P<0.037)은 각각 K. pneumoniae의 ESBL 생성과 양의 상관관계가 있었다. Ceftazidime의 사용량은 K. pneumoniae의 ceftazidime 내성률과 양의 상관관계가 있었다(r=0.900, P<0.037). 반면 imipenem의 사용량은 piperacillin/tazobactam 내성과 음의 상관관계가 있었다(r=-0.900, P<0.037). 결론 : 최근 3개년간 항생제 사용량은 병원별로 차이가 있으나 일부 병원에서는 증가하였다. β-lactam계 항생제의 사용량은 K. pneumoniae의 항생제 내성과 상관관계가 있었다. 항생제 사용을 줄임으로써 항생제 내성을 감소시킬 수 있을 것으로 기대되며, 병원별로 항생제 사용에 대한 지속적인 감시가 필요할 것이다.

저신장 어린이에서 Insulin 자극에 대한 성장호르몬과 Cortisol의 반응

김화인,오재화,최두영,김종덕 대한소아내분비학회 1999 Annals of Pediatirc Endocrinology & Metabolism Vol.4 No.2

서울의 Penicillinase Producing Neisseria Gonorrhoeae 발생빈도(1996)

김재홍,황동규,전재홍,김윤석,김중환,김용준,이창균,임동진,김현수,조창근,김경문,박상훈,전우형,김희성,이호정,차명수,김갑형,김형석,김석우,황지환,박병순,권오상,이민수,송기훈,성소영,이인섭,부태성 대한화학요법학회 1999 대한화학요법학회지 Vol.17 No.2

Background : In recent years, gonorrhea has been panedemic and remains one of the most commom STDs in the world, especially in developing countries. Objective & Methods: For the detection of a more effective therapeutic regimen and assessing the prevalence of PPNG, we have been trying to study the patients who have visited the VD Clinic of Choong-Ku Public Health Center in Seoul since 1980 by means of the chromogenic cephalosporin method. Results: In 1996, 139 strains of N. gonorrhoeae were isolated, among which 53(39.0%) were PPNG. Conclusion: Our results suggests that after a peak of 74.3% in 1993, the prevalence of PPNG in Seoul is gradually declining.

IL-β의 인슐린 분비 자극효과와 그 과정에 관여하는 인자들

정인경,오승훈,강동묵,정재훈,민용기,이명식,이문규,김광원 대한당뇨병학회 2002 Diabetes and Metabolism Journal Vol.24 No.4

연구배경: IL­1β는 용량과 노출시간에 따라 인슐린분비에 대해 상반되는 효과를 가지고 있다. IL­1β의 인슐린 분비 억제효과는 제1혁명 당뇨병의 자가면역 기전과 관련되어 잘 알려져 있으나 인슐린 자극효과에 대해서는 아직 명백히 밝혀지지 않았다. 이에 저자 등은 IL­1β의 다양한 농도에 따라 백서의 췌도세포에서 인슐린 분비에 미치는 영향을 살펴보고, 그 기전으로 인슐린 생합성, iNOS의 발현, 칼슘통로의 활성도 변화여부를 알아보고자 하였다. 방법:200∼300g인 수컷 Sprague­Dawley 백서의 췌도를 변형된 Lacy&Kostianovsky's 방법으로 분리한 후 IL­1β의 다양한 농도(0, 0.5, 5, 50, 500pmol/L)에 2, 6, 24시간 노출시켜 췌도세포의 형태, 생존능을 관찰하고 인슐린 분비능 및 췌도세포내 인슐린 함량을 측정하였으며, 전전구 인슐린 mRNA발현, iNOS mRNA발현을 RT­PCR을 통해 확인하였고, 세포의 칼슘 통로 활성도 변화 여부를 측정하였다. 결과:1) IL­1β에 노출되 췌도의 생존능:2시간 노출시는 대조군과 차이가 없었으나, 6시간 고농도군과 24시간 모든 군에서 생존능이 감소되었다. 2)인슐린 분비능은 IL­1β를 2시간 5poml/L이상의 고농도와 6시간 0.5pmol/L 저농도 처리시 대조군에 비해 의미있게 증가하였으나, 6시간과 24시간 5poml/L이상의 고농도에서는 의미있게 인슐린의 분비가 억제 되었다. 3)췌도내 인슐린양의 변화는 IL­1β의 시간과 농도에 따라 배지내의 인슐린 변화와 비슷한 경향을 보였으나 통계학적으로 의미있는 차이는 없었다. 4)전전구인슐린의 mRNA발현은 2시간 50pmol/L이상 고농도의 IL­1β에서 의미있게 증가하였고, 6시간 처리군에서는 의미있는 차이는 없었으나, 24시간에서 IL­1β의 용량의존적으로 억제되었다. 5)iNOS mRNA는 IL­1β 처리 후 2시간부터 발현되기 시작하여, 6시간에 최고에 달한 후 24시간에는 점차 감소하였다. IL­1β의 처리시간과 무관하게 5poml/L이상의 고농도에서 용량에 따라 발현이 증가하였다. 6)칼슘통로 활성도는 IL­1β의 농도나 시간에 따라 유의한 차이가 없었다. 결론: IL­1β는 단시간 고용량이나 장기간 저용량에서 인슐린 분비와 생합성을 증가시키며, 이런 효과는 iNOS나 칼슘 통로 활성도 변화와는 무관한 것으로 생각된다. Background : The inhibitory effort of IL-1β on the insulin secretion has been validated in pathogenesis of type 1 diabetes, but complex results about the stimulatory effect of IL-1β have been reported. The aims of this study are to clarify the effects of IL-1βon insulin secretion of pancreatic islets and to investigate the mechanisms in terms of preproinsulin synthesis, inducible NOS expression, and calcium channel activity. Method : Islets were isolated from male Sprague-Dawley (SD) rat by modified Lacy-Kostianovsky's method. After islets were treated with different concentrations (0, 0.5, 5, 50, 500 pmol/L) and exposure time (2, 6, 24 hours) of IL-1β, morphology, viability, static stimulation of insulin to glucose, insulin content, preproinsulin mRNA expression, iNOS mRNA expression and calcium channel activity were measured. Results : 1) Viability o islets was reduced in high concentrations of long term exposure of IL-1β. 2) Insulin secretion was stimulated in islets treated with 5, 50, and 500 pmol/L of IL-1β for 2 hours. 3) Insulin content was not significantly different regardless of concentration and exposure time of IL-1β. 4) Preproinsulin mRNA expression increased in islets treated with 50, 500 pmol/L of IL-1β for 2 hours. After 24 hours, it decreased in dose dependent manner. 5) iNOS mRNA expression was detectable after 2 hours in the presence of IL-1β, peaks at 6 hour and decreased after 24 hours. It was increased above 5 pmol/L of IL-1β in dose dependent manner. 6) Activities of the voltage-dependent Ca^2+ channels were not different among groups. Conclusion : IL-1β plays a positive role in terms of insulin secretion and insulin synthesis in high concentration of short term or low concentration of long term. These effects of IL-1β might be neither dependent of iNOS pathway nor Ca^2+ channel activity (J Kor Diabetes Asso 431~443, 2000).

제1형 당뇨병 환자에서 췌도세포 동종이식의 반복시행

양태영,정인경,서인아,오은영,조건영,오승훈,김성주,정재훈,민용기,이명식,이문규,김광원,도영수,주성욱 대한당뇨병학회 2002 Diabetes and Metabolism Journal Vol.24 No.4

연구배경:췌도세포 이식은 시술이 간편하고 안전하기 때문에 반복이식이 가능하여 그 동안 여러 센터에서 반복이식의 성공을 보고한 바 있다. 국내에서도 본 병원을 비롯하여 몇몇 센터에서 췌도세포 이식이 활발히 시도되고 있으나 사람에서의 동종이식 및 동종 이식의 반복시행은 보고된 바 없는 실정이다. 저자 등은 국내 최초로 췌도세포 동종이식을 시행하여, 혈청 C­펩타이드가 증가하고 인슐린 요구량이 감소하였으며, 혈당농도와 당화혈색소의 안정을 보였다. 그러나 이식 70일 후 다시 인슐린 요구량이 증가하고 C­펩타이드가 감소하여 췌도세포 이식을 다시 시행한 바 있다. 2차 이식 후 70여일이 지난 현재 다시 혈청 C­펩타이드가 증가하고, 인슐린 요구량이 더 감소되어 췌도세포 이식에서 반복 시행의 유용성을 보고하는 바이다. 방법:환자는 32세 남자로 17년전 당뇨병 진단 후 인슐린 치료 중이었으며, 3년전 부터는 만성신부전증으로 혈액툭석을 하고있었다. 1999년 12월 25일 신장이식을 하였고 3일 후 췌도이식을 하였으며, 두번째 이식은 70일 후 시행하였다. 췌도분리는 변형된 Recordi방법과 비연속성 자당 농도차(discontinuous density gradient)를 이용하였으며 분리한 췌도는 배양 후 환자의 신장기능이 정상화되고 미생물학 검사에서 음성을 확인한 후 경피경간으로 간문맥을 접근하여 16G 폴리 에틸렌 카테터를 이용하여 간실질에 이식하였다. 결과:1차 췌도이식시 순수분리전 췌도수는 210,000개, 순수분리후 획득한 췌도수는 90,000개, 순도 95%, 세포양 1.0mL 이었고, 2차 췌도이식시 순수분리전 췌도수는 420,000개, 순수분리후 획득한 췌도수는 370,000개, 순도 95%, 세포양 1.5mL 이었다. 1,2차 모두 간문맥을 통해 약 20분에 걸쳐 간실질에 주입하였다. 췌도이식전 인슐린요구량은 75∼75U/일, HbA1e 8∼10%, C­펩타이드 0.6ng/mL 였으며, 1차 췌도이식수 7일째 인슐린 요구량은 40U/일, C­펩타이드 1.5ng/mL, FPS 109mg/mL 였고, 40일 추적관찰 후 인슐린 요구량이 36U/일, C­펩타이드 1.8ng/mL, HbA1e 6.5∼7.0%로 안정되었다. 그러나 이식 50일째부터 인슐린 요구량이 50∼56U/일, C­펩타이드 0.6ng/mL, FPS 130∼200mg/dL로 혈당 조절이 불안정하여 다시 췌도이식을 시행하였다. 2차 이식후 50일이 경과한 현재, 인슐린 요구량은 26U/일, C­펩타이드 1.8ng/mL, FPS 90∼120mg/dL로 다시 안정되었다. 결론:췌도이식은 반복이식이 가능하며, 본 환자의 경우 인슐린요구량 감소, 혈당의 안정화 및 C­펩타이드가 상승하여 이식한 췌도의 기능을 확인할 수 있었고, 향후 스테로이드 등 면역억제가 유지 용량으로 감량되면 인슐린 요구량은 더 감소될 것으로 기대된다. Over the past 20 years, significant advances have been made in human islet transplantation. However, cases of prolonged insulin independence after islet allotransplantation have rarely been reported and over time, a slight, gradual decrease in insulin secretion appears to occur, as suggested by the lower C-peptide. Although preliminary clinical success achieved over the past few years has been considerably higher with whole pancreatic transplant than with isolated islet grafts, both approaches remain experimental. Islet grafts might gain, over time, increasing credibility and might eventually provide an easier alternative in terms of grafting procedures and patient management, as compared with the more "traumatizing" whole-pancreas transplantation. Also, using islet, re-transplantation is possible. But it is not known whether re-transplantation of islet could be suitable for those patients who lost grafted islet function. The aim of the present study was to investigate the benefits of re-transplantation of islet in previously simultaneous islets-kidney transplant (SIK) patient who have lost graft function. Methods : The recipient was a 32 year old male. First islet transplantation was underwent at December 25, 1999. However, the grafted islets lost function after 70 days. So we performed re-transplantation of islets. The isolation of islet was conducted sterilely on a laminarflow hood and isolated by a modified Recordimethod. The islet was injected slowly into the liver via a cannular placed in the potalvein for 20 minutes. Results : Transplanted islets were 90,000 IEq at first islet transplantation, 370,000 IEq at second islet transplantation. The insulin requirement was reduced from 75-85 to 35-40 U/day, the basal C-peptide level was 1.5 ng/mL at 7 days posttransplant Unfortunately, the grafted islets lost function after 70 days. After second transplantation, the insulin requirement was reduced to 26 U/day. Conclusions : Despite the continuous need for exogenous insulin therapy, islet transplantation can prevent wide glucose fluctuations, thus resulting in normalization of glycemic control and improvement in HbAlc, and also, show that islets can be successfully and safely re-transplanted intraportally in patients who have lost previously grafted islet function (J Kor Diabetes Asso 457~466, 2000).