Sosteoblast 분화에 미치는 BMP-2의 역할

류현모 대한내분비학회 2001 Endocrinology and metabolism Vol.16 No.4-5

可姙期 女性의 唾液中 Peroxidase, N-acetyl-β-D-glucosaminidase의 活性度 및 遊離 sialic acid 含量의 週期的 變動

柳顯模,卞鍾秀,曺準承 慶北大學校 齒科大學 1990 慶北齒大論文集 Vol.7 No.1

In order to determine the possible effects of hormonal changes on the salivary components, the activities of peroxidase and N-acetyl-β-D-glucosaminidase, and the content of free sialic acid were measured in saliva during menstrual cycles of 11 healthy women. Elevations of salivary peroxidase and N-acetyl-β-D-glucosaminidase activities were found around the time of ovulation in 8 cycling woment : the highest enzymatic activities which were measured 15.38, 14.63 days before menstruation were 118.76±10.01 Unit/min/g of protein, 21.95±1.04 nmol/min/mg of protein in peroxidase and N-acetyl-β-D-glucosaminidase, respectively. These value of highest activity significantly increased, compared to those of menstrual period, 38.24% and 21.48% in peroxidase and N-acetyl-β-D-glucosaminidase, resectively. Large cyclic variation without any clear tendency occured in the content of the free sialic acid. J. Kyungpook Univ. Sch. Dent. Vol. 7, No. 1,23∼32, 1990

Mouse의 치아 발육시 Runx2의 발현 양상

김태완,류현모,남순현,김영진,김현정 大韓小兒齒科學會 2004 大韓小兒齒科學會誌 Vol.31 No.4

Runx2는 runt gene family에 속하는 전사조절 인자로써 뼈의 형성과 골아세포의 분화에 중요한 역할을 담당하고 있다. Runx2-haploinsufficency는 쇄골의 저형성 및 두개 봉합의 지연을 특징으로 하는 쇄골두개 이형성증을 일으키며, 치아에 있어서는 법랑질의 저형성, 영구치 맹출지연 등을 보인다. 이에, 치아의 발육 및 맹출에 미치는 Runx2의 영향을 알아보기 위해 in situ hybridization 방법으로 태생 1, 4, 7, 14. 21일 된 쥐의 하악 및 제1대구치를 사용하여 실험을 실시하였다. Runx2-full length는 태생 1일과 4일에 치낭 및 주위조직에 보이지만 Runx2-typeⅡ는 보이지 않았다. Runx2-full length는 태생 7일에 치관 교합면 부위의 법랑모세포에 발현하였고, 1주일 후인 태생 14일에는 백악법랑경계 상방의 치관인 접면 법랑모세포에서 발현되었다. 이에 반해 Runx2-typeⅡ는 법랑모세포에서 발현하지 않았다. 또한 태생 21일에서는 두가지 이성질체가 모두 하악골에서 발현을 보였다. 이런 결과를 종합해볼 때, Runx2-full length는 치아의 맹출과 연관이 있으며, 법랑모세포의 분화 및 이로 인한 법랑질형성에 영향을 주지만 Runx2-typeⅡ는 하악골의 형성에만 영향을 미치는 것으로 사료된다. Runx2 is a transcription factor in homologous with Drosophila runt gene and it is essential for bone formation during embryogenesis and a critical gene for osteoblast differentiation and osteoblast function. Runx2-haploinsufficency causes cleidocranial dysplasia (CCD). CCD is an autosomal-dominant inherited disorder characterized by hypoplastic clevicle and delayed ossification in fontanelles and wormian bones. Dental defects are possibly shown to CCD patients : multiple supernumerary teeth, irregular and compressed permanent tooth crowns, hypoplastic and hypomineralized defects in enamel and dentin, an excess of epithelial root remnants, the absence of cellular cementum, and abnormally shaped roots. In addition, delayed eruption of the secondary dentition is a constant finding. The aim of this study is to evaluate the role of Runx2 in the tooth development and eruption through analyzing the expression pattern of Runx2 by in situ hybridization during crown (late bell stage) and root formation of tooth, using postnatal day 1, 4, 7, 14 and 21 mice mandibular molar teeth. mRNA of Runx2-full length is expressed in dental follicle and surrounding tissue at postnatal day1 and 4. At post-natal day 7, it is expressed in ameloblasts of occlusal surface of enamel and bone area surrounding the tooth. In comparison with previous stage, at postnatal day 14, it is expressed in ameloblasts of proximal surface of enamel. At postnatal day 21 it's expression is observed only in bone area. mRNA of Runx2-typeⅡ is not expressed At postnatal day 1 and 7. At postnatal day 14 and 21, it's expression is observed in the bone area. In this study, we suggest that Runx2 have a relation of ameloblasts differentiation and an important role to tooth eruption made by dental follicle during intraosseous eruption stage. Also we can confirm that Runx2 has a role to bone formation.

Sirius red를 이용한 교원질의 측정

김병천,유현모,조준승 慶北大學校 醫科大學 1990 慶北醫大誌 Vol.31 No.3

간 및 피부조직으로 부터 교원질을 분획 정량하는 과정에서 보다 간편하고 덜 위험한 방법을 개발하기 위하여 교원질에 대한 특수 염색제인 Sirius red F3BA를 도입하여 가용성 교원질을 정량하였다. 정제된 교원질 표품으로 측정한 값은 종래에 사용해 오던 hydroxyproline을 이용하여 측정한 값과 거의 일치하였으며, 교원질에 의해 침전된 Sirius red의 양과 상청에 잔존하는 Sirius red 공히 교원질 측정에 사용할 수 있을 정도의 좋은 상관관계를 나타내었다. Sirius red에 의해 측정된 각 분획 별 교원질의 양은 neutral soluble, acid soluble 및 pepsin soluble fraction에서 각각 hydroxy proline을 이용하여 측정한 교원질의 양과 높은 상관관계를 나타내었다. Neutral soluble fraction의 경우 비록 높은 상관관계를 나타내었다고 하나 항상 Sirius red로 측정한 군에서 높은 값을 나타내었으며, 특히 교원질 함량이 낮은 용액에서 더욱 심한 오차를 나타내었다. Acid soluble 및 pepsin soluble fraction의 경우 상관계수 뿐 아니라, 실제의 측정치도 거의 일치하는 결과를 나타내어 가용성 교원질 특히 정제된 교원질을 빠르고 간편하게 측정할 수 있었다. In order to estimate the concentration of collagen in solution more rapidly and simply, we used collagen specific dye, Sirius red F3BA, which interact by means of ionic binding with basic groups of the collagen molecule. Collagen content was determined by evaluation spectrophtometrically the absorbance decrease of a Sirius red in acetic acid solution. This method compares well with the hydroxyproline assay method in purified standard collagen. Decrease of the optical density of the Sirius red assay solution showed proportionality with the added amounts of collagen. Moreover amounts of stain eluted from pellet showed proportionality with the collagen content. Comparing the collagen content in tissue fraction determined from this method and hydroxyproline method, it was found that the solution which contained much noncollagenous proteins like neutral soluble fraction showed higher value of collagen in this method than in hydroxyproline method, but relatively pure collagen solution, acid soluble and pepsin soluble fraction, showed much higher correlation in both methods.

Smad에 의한 alkaline phosphatase 유전자의 발현 조절기전

김난진,류현모,김현정,김영진,남순현 대한소아치과학회 2001 大韓小兒齒科學會誌 Vol.28 No.2

본 실험은 탁월한 골유도능으로 관심의 대상이 되고 있는 RMP의 세포내 신호 전달자로 알려진 Smad 1과 Smad 5가 조 골세포 초기 분화표지인자인 ALP 유전자의 발현에 미치는 영향 및 그 조절기전을 알아보고자 하였다. BMP 처리 없이도 Smad에 의해 ALP가 발현되는가를 알아보기 위해 Smad 1과 Smad 5가 각각 stably transfection된 C2C12 세포를 3일간 배양후 histochemical assay를 하였고, Smad 1과 Smad 5의 expression vector와 ALP promoter vector를 transient co-transfectiongksgn ALP promoter activity를 측정하였다. Smad에 의한 BMP의 효과를 알아보기 위해서 100ng/ml의 BMP-2를 처리한 군과 처리하지 않은 군으로 나누어 세포를 배양한후 ALP 유전자의 발현을 northern blot analysis로 확인하였다. Smad가 ALP 유전자의 발현을 직접적으로 조절하는가를 알아보기 위여서는 단백질 합성억제제인 cycloheximide를 전처리하여 ALP 유전자의 발현을 northern blot analysis하였다. 이상의 실험결과 다음과 같은 결론을 얻었다. ·Smad 1과 Smad 5가 과발현된 세포에서는 BMP 처리없이도 ALP가 발현된다. ·Smad 1과 Smad 5가 과발현된 세포에서 RMP 처리후 ALP 발현 증가율이 대조군 보다 현저히 높게 나타나 Smad가 BMP 효과를 증가시킨다는 것을 알수있다. ·Smad는 새로운 단백질의 합성을 통해 ALP 유전자를 발현시킨다. Bone morphogenetic proteins(BMPs), members of the transforming growth factor β(TGF-β) superfamily were first identified as the factors that induce ectopic bone formation in vivo, when implanted into muscular tissue. Especially BMP-2 inhibits terminal differentiation of C2C12 myoblasts and converts them into osteoblast lineage cells. In the molecular mechanism of the signal transduction of TGF-β and related factors, intracellular signaling proteins were identified as Smad. In previous study, it has been reported that Smad 1 and Smad 5, which belong to the R-Smad family mediate BMP signaling, were involved in the induction of osteoblast differentiation in C2C12 cells. To understnad the role of Smads involved in osteogenic transdifferentiation in C2C12 cell, in present study, after we stably transfected C2C12 cells with each. Smad(Smad 1, Smad 5) expression vector, cultured for 3 days and stained for alkaline phophatase activity. ALP activity positive cells appeared in the Smad 1, Smad 5 stably transfected cell even in the abscence of BMP. After transiently co-transfected C2C12 cells with each Smad expression vector and ALP promoter, it was excence of MBP. These result suggested that both Smad 1 and Smad 5 were involved in the intracellular BMP signals which induce osteoblast differentiation in C2C12 cells. The effect of BMP on C2C12 cells with Smad 1, Smad 5 transfected were studied by using northern blot analysis. the treatment of BMP upregulated ALP mRNA level in three groups, especially upregulation of ALP was larger in Smad 1, Smad 5 transfected cell than control group. Pretreatment with cycloheximide(10㎍/ml), a protein synthesis inhibitor resulted in blocking the ALP gene expression even in BMP(100ng/ml) treated cell. These results suggested that Smad increased the level of ALP mRNA via the synthesis of a certain transcriptional regulatory protein.

파골세포 활성에 있어 gp130과 PTH의 연관성

김영준,류현모,김신윤,신홍인 경북대학교 병원 2002 경북대학교병원의학연구소논문집 Vol.6 No.1

gp130,a subunit for serveral cytokine signal transducing receptors, mediates diverse activities including osteoclastogenesis. In vitro obaervations suggest that PTH also triggers the gp130-mediated signal for bone resorption by stimulating secretion of IL-6,IL-11 and LIF from osteoblast/stromal cells. Though this gp130 signaling is required for full activation of bone resporption by PTH in vitro, the relationship between PTH and gp130 signaling pathway in vitro is not yet clanified. To address the importance of gp130 as a mediator of PTH action in osteoclast activation, the blood ionized calium and blood serum PTH level was investigated in gp130-/- and wild type mice at E18.5 using a CIBA/Coming 634 Ca^+2/pH analyzer and rat intact PTH Kit, respectively.In addition, calium transport efficiency was assessed from gp130 mice at E17.5. The resorptive activity of osteoclasts from intact calvariae by a ^45Ca release assay and the osteoclastic developmental condition in tibiae were also analyzed, respectively.The gp130-/- micerevealed significantly lower ionized calcium level(1.44±0.03 vs1.77±0.03 mmol/ℓ, p<0.001)and significantly higher blood serum PTH(251.8±5.3 VS 20.5±5.3 pg/㎖,p<0.001) compared to wild type littermates.There was no remarkable pathologic change of placenta in gp130-/- and the ^45Ca transport though placenta was accelerated in gp130-/- compared to wild type littermates(%to Het 83%in -/- vs 148% in +/+).The gp130-/- embryos had small skeletons with bones containing little primary spongiosa, and large multinucleated TRAP+ cells along the lower border of the growth plate. Release of ^45Ca from prelableled calvarial bone(E18.5)in response to either 10^-7 M hpTH(1-34)or 20 ng/㎖ sRANKL was lower in gp130-/-calvarial bone compared to gp130+/+ calvarial bone (PTH 1.83±0.6 fold over basal in-/- vs 2.79±0.6 in +/+and sRANKL1.3±0.4 in -/- vs 2.79±0.6 in +/+ and sRANKL1.3±0.4 in -/- vs 2.0±0.4 in +/+,p<0.5). These result strongly support the hypothesis that PTH activates bone resortion,in part, by stimulating ostedtrophic cytokine secretiom from osteoblast/stromal cells, which tirggers gp130-mediated signaling for osteoclastic activation.

두개골 및 두개봉합부 초기발육과정에서의 전사조절인자인 Msx2와 DIx5의 역할

송민호,박미현,남순현,김영진,류현모,김현정 大韓小兒齒科學會 2003 大韓小兒齒科學會誌 Vol.30 No.3

두개봉합부의 조기융합으로 일컬어지는 craniosynostosis는 두개봉합부에서의 골아세포의 조기분화 및 석회화의 결과로 나타나는 선천성 발육이상이다. 최근 유전학적 연구에 의하면 homeobox gene인 Msx2의 변이에 의해 Boston-type craniosynostosis가 야기되며, 또한 Dlx5 homozygote mutant mouse의 표현형에서 두개골의 골화지연을 포함한 다양한 두개안면부위의 이상을 발견하였다는 보고가 있었다. 게다가 Msx2와 Dlx5 homeodomain protein의 상호작용에 의해 성숙골아세포의 표지자인 osteocalcin의 전사를 조절할 수 있다는 사실이 알려져 있다. 이러한 일련의 결과들은 Msx2, Dlx5 및 osteocalcin 유전자들이 두개골의 골화과정과 두개봉합부의 형태발생에 중요한 역할을 담당하고 있음을 제시해주고 있다. 두개골의 성장과 두개봉합부의 형태발생시 이러한 유전자들의 기능을 알아보기위해 mouse의 태생기 (E15-E18) 동안 osteocalcin, Msx2, 및 Dlx5 유전자들의 발현양상을 조사하였다. Osteocalcin은 E15부터 두정골의 골막에서 관찰되었으며, 발생시기가 후기일수록 강한 발현양상을 나타내었다. Msx2는 시상봉합부의 미분화간엽조직과 osteogenic front에서 강하게 발현되었으며 경막과 hair follicle에서도 관찰되었다. Dlx5는 osteogenic front를 포함한 두정골의 골막에서 강하게 발현되었으나 시상봉합부의 미분화간엽조직에서는 발현되지않아, Msx2와는 발현양상의 차이를 나타내었다. 이 결과들을 종합해볼 때, Msx2와 Dlx5 유전자는 두개골과 두개봉합부의 성장발육과정에 중요한 역할을 담당하고 있으며, BMP signaling은 두 전사조절인자들을 조절하므로써 두개골의 골화과정과 두개봉합부의 형태발생 및 유지에 관여하고 있음을 제시해주고 있다. 특히 BMP signaling에 specific downstream gene인 Msx2 및 Dlx5의 발현양상의 차이는 골아세포의 분화시 이들 유전자가 각각의 독특한 기능을 가지고 있음을 시사해주고 있다. Craniosynostosis, known as a premature fusion of cranial sutures, is a developmental disorder characterized by precocious differentiation and mineralization of osteoblasts in the calvarial sutures. Recent genetic studies have demonstrated that mutation in the homeobox gene Msx2 causes Boston-type human craniosynostosis. Additionally, the phenotype of Dlx5 homozygote mutant mouse presents craniofacial abnormalities including a delayed ossification of calvarial bone. Furthemore transcription of osteocalcin, a mature osteoblast marker, is reciprocally regulated by the nomeodomain proteins Msx2 and Dlx5. These facts suggest important roles of osteocalcin, Msx2 and Dlx5 genes in the calvarial bone growth and suture morphogenesis. To elucidate the function of these molecules in the early morphogenesis of mouse cranial sutures, wer have first analyzed by in situ hybridization the expression of osteocalcin, Msx2 and Dlx5 genes in the developing parietal bone and sagittal suture of mouse calvaria during the embryonic (E15-E18) stage. Osteocalcin mRNA was found in the periosteum of parietal bones from E15, and gradually more highly expressed with aging. Msx2 mRNA was intensely expressed in the sutural mesenchyme, osteogenic fronts and midly expressed in the dura mater during the embryonic stage. Dlx5 mRNA was intensely expressed osteogenic fronts and the periostem of parietal bones. To further examine the upstream signaling molecules of transcription factor Msx2 and Dlx5, we have done in vitro experiments in E15.5 mouse calvarial explants. Interestingly, implantation of BMP2-, BMP4-soaked beads onto the osteogenic fronts after 48 hours organ culture induced etopic expressions of Msx2 and Dlx5 genes. On the other hand, overexpression of TGFβ1, GDF-6, -7, FGF-2, -4 and Shh did not induce the expression of Msx2 and Dlx5. Taken together, these data indicate that transcription factor Msx2 and Dlx5 play critical roles in the calvarial bone and suture development, and that BMP siganling is involved in the osteogenesis of calvarial bones and the maintenance of cranial sutures through these two transcriotpn factors. Furthermore, different expression patterns between Msx2 and Dlx5 suggest their specific functions in the osteoblast differentiation.

Nd-Fe-B 자석의 정자기장이 MC3T3-E1 세포의 alkaline phosphatase 활성도에 미치는 영향

김숙희,권오원,류현모 대한치과교정학회 2000 대한치과교정학회지 Vol.30 No.2

Nd-Fe-B 자석의 정자기장 (Static Magnetic Field)이 MC3T3-E1 세포의 alkaline phosphase (ALP) 활성도에 미치는 영향을 알아보기 위하여, MC3T3-E1 세포를 12 well 세포배양접시의 1열과 3열에 접종하고 1열과 3열의 첫째 칸 하방에 Nd-Fe-B자석을 가하여 7일, 13일, 19일, 25일간 배양한 후 세포의 ALP 활성도를 측정하였으며, 100 mm세포배양접시의 한 쪽 가장자리 하방에 Nd-Fe-B자석을 가하여 7일, 13일, 19일, 25일간 배양한 후 ALP염색을 하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1.정자기장을 가한 13, 19, 25일에 각각 100 mT에서는 대조군에 비해 ALP 활성도가 감소된 반면 4.6 mT와 0.5 mT에서는 대조군에 비해 ALP 활성도가 증가되었다 (P〈0.01). 2.ALP 염색에서 전체적으로는 19일까지 ALP가 증가되었다가 25일에 다소 감소되는 양상을 나타내었으며, 각 세포배양접시에서는 7일에는 뚜렷한 차이를 보이지 않았으나 13, 19, 25일에는 자석이 놓인 부위 (100 mT) 가 그 반대편(0.5 mT)에 비해 ALP가 감소되었음을 육안으로나 도립위상차현미경으로 관찰할 수 있었다. 이상의 결과 0.5 mT와 4.6 mT의 낮은 자기 장에서는 ALP 활성도가 증가되었으며 100 mT의 높은 자기장에서는 ALP활성도가 감소되어, Nd-Fe-B 자적의 정자기장이 MC3T3-E1 세포의 ALP활성도에 영향을 미쳐 골조직의 형성 및 개조에 영향을 미칠 수 있을 것으로 생각된다. Recently, the magnetic force has been considered as a method for a more efficient tooth movement. The purpose of this study was to evaluate the effects of different static magnetic fields of Nd-Fe-B magnet on MC3T3-E1 cells by measuring the alkaline phosphatase activity and observing the amount of stained alkaline phosphatase. For measuring of alkaline phosphatase activity, MC3T3-E1 cells were seeded in first and third row of 12 well culture plates. And Nd-Fe-B magnets were positioned under the first column of first and third row to apply different static magnetic fields(first column:100mT ; second column:4.6mT ; third column:0.5mT ; forth column:0.0mT) to the cells for 7, 13, 19, and 25 days. For staining of alkaline phosphatase, MC3T3-E1 cells were seeded in 100mm culture plates. And Nd-Fe-B magnets were positioned under the comer of plates to apply different static magnetic fields (magnet side:100mT, the opposite side:0.5mT) to the cells for 7, 13, 19, and 25 days. The results were as follows : 1.ALP activity was increased until day 19 in biochemical determination as well as in histochemical staining. 2.The application of higher magnetic field(100mT) suppressed ALP activity at day 13, 19, 25. On the contrary, the application of the lower magnetic field(4.6mT, 0.5mT) significantle enhanced the ALP activity. 3.Consistent with enzyme assay, histochemical staining of ALP also demonstrated that higher magnetic field(100mT) suppressed ALP activity, lower one(0.5mT) enhanced.

Bisphosphonate가 조골세포 분화에 미치는 영향

이인순,김현정,류현모,김영진,남순현 대한소아치과학회 2000 大韓小兒齒科學會誌 Vol.27 No.2

본 실험은 bisphosphonate가 조골세포 분화 및 파골세포 분화에 미치는 영향을 알아보고자, etidronate와 alendronate를 조골세포에 투여하여 조골세포 전사인자인 Cbfa1, 조골세포 표시인자의 발현, 석회화된 골결절 형성을 평가하였다. Bisphosphonate가 조골세포의 석회화된 골결절 형성에 미치는 영향을 평가하기 위하여 배양액에 □ M의 etidronate 및 □ M의 alendronate를 첨가하였으며, 배양 15일 후에 alizarin red로 염색하여 관찰하였다. 또 조골세포의 분화에 미치는 bisphosphonate의 영향을 평가하고자 백서 두개관에서 얻은 조골세포에 etidronate □ M 및 alendronate □ M을 투여하고 배양 8일 후 총RNA를 수집하였고, 전기영동 및 Northern blot hybridization하여 Cbfa1, alkaline phosphatase, type Ⅰ collagen, osteopontin, osteocalcin의 발현을 조사하였다. 이상의 실험결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 1.Etidronate는 농도 의존적으로 골결절 석회화를 억제하였으나, alendronate는 골석회화를 억제하지 않았다. 2.Etidronate는 Cbfa1의 발현을 농도 의존적으로 억제하였으나, alendronate는 오히려 촉진하였다. 3.Etidronate는 type Ⅰ collagen, osteocalcin 및 osteopontin의 발현을 농도 의존적으로 억제하였으나, alendronate는 오히려 증가시켰다. 4.Alkaline phosphatase의 발현은 사용된 etidronate와 alendronate에 의해 영향 받지 않았다. 이상의 결과에서 etidronate는 조골세포의 전사인자인 Cbfa1의 발현을 억제하며, 이에 의하여 조골세포의 분화표지인자인 type Ⅰ collagen, osteopontin 및 osteocalcin의 합성이 억제되고, 결과적으로 석회화된 골결절의 형성을 억제하는 것으로 사료된다. 주요어 : bisphosphonate, 조골세포, Cbfa1, Type Ⅰ교원질, alkaline phosphatase, osteopontin, osteocalcin, 석회화된 골결절

FGF signaling이 연골 형성에 미치는 영향

박충제,이상원,남순현,김영진,류현모,김현정 大韓小兒齒科學會 2003 大韓小兒齒科學會誌 Vol.30 No.4

막내골화와 연골내골화 등의 정상적인 골격 성장은 섬유아세포 성장인자 (FGF) 와 이들 수용체들 (FGFR) 에 의한 신호전달체계에 의해 조절된다. 또한 전사조절인자인 Runx2 (Cbfa1/Pebp2αA/AML3) 는 골아세포분화 뿐만 아니라 골형성에도 필수적인 유전자로 알려져 있다. FGF signaling이 mouse의 두 개관과 하악에서의 연골 형성에 어떤 영향을 미치고 있으며, 이 과정에서 Runx2의 연관성을 알아보고자 in vivo 및 in vitro 실험을 시행하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 두 개관의 하악을 Alcian blue 염색한 결과 시상두개봉합부 연골은 태생16일부터, Meckel's 연골은 태생11일부터 형성되기 시작하였다. 이들 연골세포들의 성사을 알아보기위한 in situ hybridization 결과 시상두개봉합부 연골 및 Meckel's 연골 모두에서 type Ⅱ collagen은 발현되었으나, Type X collagen은 발현되지 않았다. Runx2 mRNA는 시상두개봉합부 연골과 Meckel's 연골 모두에서 발현되지 않았지만, 이들 연골들의 가장자리를 둘러싸고 있는 독특한 발현양상을 나타내었다. 두개 봉합부에서의 FGF2 protein의 국소적 적용은 두개봉합부 하방의 연골형성을 억제하였다. 또한 하악의 Meckel's 연골 발생부위에 FGF2 protein의 국소적 적용 역시 Meckel's 연골의 형성을 억제하였다. FGF2 protein은 시상두개봉합부상의 bead 주위로 Runx2의 발현을 유도하였다. 이 결과들을 종합해볼 때, FGF signaling은 골아세포와 연골아세포가 공존하고 있는 조직에서의 연골 형성을 억제하고 있음을 시사해 주고 있으며, 이 과정에서 FGF signaling은 부분적으로 Runx2 유전자의 발현을 조절하므로써 연골세포의 증식과 분화에 관여할 것으로 사료된다. Figroblast growth factor (FGF) / FGF receptor (FGFR) mediated signaling is required for skeletogenesis including intramembranous and endochondral ossifications. Runx2 (Cbfa1/Pebp2αA/AML3) is an essential transcription factor for osteoblast differentiation and bone formation. Murine calvaria and mandible are concurrently undergoing both intramembranous bone and cartilage formations in the early development stage. However the mechanism by which these cartilage formations are regulated remains unclear. To elucidate the effect of FGF signaling on development of cranial sutural catilage and Meckel's cartilage and to understand the role of Runx2 in these processs, we have done both in vivo and in vitro experiments. Alcian blue staining showed that cartilage formation in sagittal suture beings from embryonic state 16 (E16), Meckel's cartilage formation in mandible from E12. We analyzed by in situ hybridization the characteristics of cartilage cells that type Ⅱ collagen, not type X collagen, was expressed in sagittal sutural cartilage and Meckel's cartilage. In addition, Runx2 was not expressed in Meckel's cartialge as well as sagittal sutural cartilage, except specific expression pattern only surrounding both cartilages. FGF signaling pathway was further examined in vitro. Beads soaked in FGF2 placed on the sagittal suture and mandible inhibited both sutural and Meckel's cartilage formations. We next examined whether Runx2 gene lies in FGF siganling pathway during regulation of catilage formation. These results suggest that FGF signaling inhibits formations of sagittal sutural and Meckel's cartilages, also propose that FGF siganling is involved in the proliferation and differentiation of chondroblasts through regulating the transcription factor Runx2.