HPTLC에 의한 鹿茸의 Glycolipids 分析

錢吉子,朴恩貞 梨花女子大學校 韓國生活科學硏究院 1990 韓國生活科學硏究院 論叢 Vol.45 No.-

녹용에서 생리 활성 물질을 찾기위한 첫번째 연구로 녹용 중의 당지질을 분석하였다. chloroform : methanol : 0.88% KCI 용매를 사용하여 수용성 녹용 추출액 중에서 당지질을 추출 한 후 HPTLC 방법에 의해 chloroform : methanol : 0.02% CaCl_2 전개 용매 중에서 분리하여 orcinol : ferric chloride : sulfuric acid 발색시약으로 확인하였다. 그 결과 녹용에는 4 종류의 당지질이 존재하고 있음을 알 수 있었고 그 band 1은 ganglioside GD_1a로, band 3는 GM_1으로 간주된다. 녹용의 부위에 따라 분석해 본 결과 상중대가 하대보다 더 많은 당지질을 함유하고 있음을 알 수 있었다. 이 분석 방법을 이용해서 녹용이 들어 있는 생약제제를 분석해 본 결과 녹용의 존재를 확인할 수 있었다. 따라서 다른 생약 제제에 들어 있는 녹용의 존재 확인 실험에 이용될 수 있다. In this study, the composition of glycolipids in deer antler was investigated. All nonpolar glycolipids were extracted by chloroform : methanol : 0.88% KCI mixture from the aqueous extract of deer antler. Most glycolipids including gangliosides appeared as blue zones on a light background of TLC plate by spray reagent, orcinol-ferric chloride-sulfuric acid. The aqueous extract of antler contained 4 kinds of glycolipids and among them band 1, 3 were suggested to be GD_la and GM_l. The top and middle parts of antler contained more glycolipids than the bottom part. The Chinese natural medicines, such as Ginseng Antlertonic Extract and Ginseng Astragali Antler Extract, were confirmed to contain antler by this method. This method can be used for the identification of existence of antler in natural medicines containing deer antler.

태아 쥐와 임신 쥐의 간에서 Protein Carboxyl Methylation

전길자,최혜정,이준승 이화여자대학교 생명과학연구소 1990 생명과학연구논문집 Vol.1 No.-

Protein carboxyl methyltransferase(EC 2.1.1.77) which has specificities for the protein containing abnormal asparty residues is investigated in lysosome, mitochondria, peroxisome in liver of fetus, pregnant rat and vacuole vesicles in beet root. The level of this enzyme in brain cytosol of normal rat was almost same as that in brain cytosol of pregnant rat. But in liver cytosol, PCM activity of fetal rat was increased 17-fold more than that of normal rat. Total enzyme activities in lysosome, mitochondria and peroxisome of fetal and pregnant rat were not changed. But the total methylatability of fetal rat were increased about 2-fold comparing to pregnant rat. Vacuole vesicles showed the enzyme activities and methylatabilities.

HPTLC에 의한 鹿茸의 Glycolipids 分析

錢吉子,朴恩貞 이화여자대학교 생명과학연구소 1990 생명과학연구논문집 Vol.1 No.-

녹용에서 생리 활성 물질을 찾기 위한 첫 번째 연구로 녹용중의 당지질을 분석하였다. chloroform : methanol : 0.88% KCI 용매를 사용하여 수용성 녹용 추출액 중에서 당지질을 추출 한 후 HPTLC 방법에 의해 chloroform : methanol : 0.02% CaCl_2 전개 용매 중에서 분리하여 orcinal : ferric chloride : sulfuric acid 발색시약으로 확인하였다. 그 결과 녹용에는 4 종류의 당지질이 존재하고 있음을 알 수 있었고 그 band 1은 ganglioside GD_1a로, band 3는 GM_1으로 간주된다. 녹용의 부위에 따라 분석해 본 결과 상중대가 하대보다 더 많은 당지질을 함유하고 있음을 알 수 있었다. 이 분석 방법을 이용해서 녹용이 들어 있는 생약제제를 분석해 본 결과 녹용의 존재를 확인할 수 있었다. 따라서 다른 생약 제제에 들어 있는 녹용의 존재 확인 실험에 이용될 수 있다. In this study, the composition of glycolipids in deer antler was investigated. All nonpolar glycolipids were extracted by chloroform: methanol : 0.88% KCI misxture from the aqueous extract of deer antler. Most glycolipids including gangliosides appeared as blue zones on a light background of TLC plate by spray reagent, orcinol-ferric chloride-sulfuric acid. The aqueous extract of antler contained 4 kinds of glycolipids and among them band 1, 3 weresuggested to be GD_1a and GM_1. The top and middle parts of antler contained more glycolipids than the bottom part. The Chinese natural medicines, such as Ginseng Antlertonic Extract and Ginseng Astragali Antler Extract, were confirmed to contain antler by this method. This method can be used for the identification of existence of antler in natural medicines containing deer antler.

녹용에서 당 함유 물질의 분리 및 분석

한나영,전길자 이화여자대학교 생명과학연구소 1992 생명과학연구논문집 Vol.3 No.-

녹용의 생리활성 물질을 연구하기 위하여 당이 함유된 부분의 성분을 Folch-Suzuki분배방법,Sephadex G-50 chromatography, DEAE-Sephadex A-25 chromatography, High Performance Liquid Chromatograpy (HPLC)로 분리 정제하고 FAB-MS를 이용하여 구조를 분석하였다. 각 단계에서 당지질을 확인하는 방법으로 High Performance Thin Layer Chromatography(HPTLC)를 수행하였다. Chloroform-methanol-0.88% KCI수용액을 사용하여 분배된 수용액층을 Sephadex G-50 column에서 분리하였을 때, void volume에서 대부분의 당지질이 용출되는 것으로 보아 micelle을 형성하고 있음을 알 수 있었다. Sephadex G-50 column에서 용출되는 당지질을 DEAE-Sephadex A-25 chromatography결과 band 1(녹용에 존재하는 당지질중 주요성분)을 포함하는 대부분의 당지질이 농도 기울기를 걸기 전에서 용출되었다. 따라서 band1을 중성 당지질로 예측할 수 있었다. Band 1을 HPLC로 분석한 결과 4개의 peak로 분리되었다. 그 중 가장 많은 양으로 존재하며(48.5%), 3.17분 대에서 용출되는 부분만을 모아 negative-ion FAB-MS로 분석한 결과 이미지 물질은 분자량이 1058이고, 98-240-240-240-240Ehsms 98-98-142-98-142-98 -124-98-142의 분자구조를 가지는 것으로 확인할 수 있었다. The major component of glycolipids in antler was investigated by Folch-Suzuki partition method, Sephadex G-50 chromatography, DEAE-Sephadex A-25 chromatography, High Performance Liquid Chromatograpy HPLC, and FAB-MS. Glycolipids, extracted in aqueous phase by chloroform-methanol-0.88% KCI aqueous solution, were analyzed on Sephadex G-50 column and most glycolipids containing band1 were eluted in void volume because of the formation of micelles. The major fractions pooled from Sephadex G-50 column were eluted before gradient elution on DEAE-Sephadex A-25 column due to neutral property. Band 1 extracted from HPTLC plate was injected on HPLC column(μ-Bondapak NH_2 column)and four peaks were separated. The fractions containing major peak(3.17 min,48.5%)werepooled and analyzed by negative-ion FAB-MS. As the result, it has been identified that molecular weight of major component is 1058 and structural fragments is 98-98-142-98-142-98-142-98-142 or 98-240-240-240-240.

당뇨병쥐 뇌에서 Gangliosides 분석

박은정,전길자 이화여자대학교 생명과학연구소 1993 생명과학연구논문집 Vol.4 No.-

본 연구에서는 alloxan으로 유발시킨 당뇨병 쥐의 뇌에서 gangliosides 조성 변화를 조사하였다. 뇌 조직은 alloxan 주사후 3일째 희생되어 얻었으며, gangliosides는 Folch-Suzuki 방법을 이용하여 추출하였다. Periodate-resorcinol 법으로 sialic acids를 정량한 결과, 당뇨병쥐 뇌에서 sialic acids 양 (375㎍)이 정상(783㎍)에 비해 반으로 감소하였다. 당뇨병 쥐 뇌에서 GT1b, GD1b, GD1a는 감소하였고 GM3와 band 1은 증가하였다. Sialidase 처리로 band 1은 sialic acid가 없는 당지질임이 확인되었다. 2D-HPTLC로 당뇨병 쥐 뇌에서 GM1a와 GD1a 사이에 존재하는 미확인된 ganglioside가 증가함이 밝혀졌다. 미지의 ganglioside를 preparative TLC로 분리하여 b-galactosidase를 처리한 후 HPLC로 확인한 결과 Ga1-GM1, Ga1-Ga1-GM1임이 확인되었다. The changes of ganglioside pattern from alloxan-induced diabetic rat brain, were investigated. Gangliosides were isolated by Folch-Suzuki method and analyzed by HPTLC. Sialic acid was determined by periodate-resorcinol method. The amount of gangliosides decreased 2 folds in diabetic brain. We found decreasing GT1b, GD1b, and GD1a, increasing GM3 and band 1, and no change of GM1a. In diabetic brain band 1 was identified as simple glycolipid with no sialic acid by the treatment of sialidase. The increase of unidentified ganglioside separated between GM1a and GD1a in diabetic brain found by 2-dimensional HPTLC. Unidetified ganglioside was collected by preparative HPTLC, treated with b-galac-tosidase and analyzed by HPLC. As the result, this ganglioside revealed Ga1-GM1 and Ga1-Ga1-GM1.

견과류에서 Ganglioside 분석

김현수,전길자 이화여자대학교 생명과학연구소 1992 생명과학연구논문집 Vol.3 No.-

소수성인 지방 부분과 친수성인 당 부분을 가진 양쪽성 물질로서 N-acetylneuraminic acid를 포함하는 ganglioside가 견과류에 존재하는지를 확인하기 위해서 잣, 호도, 살구씨, 아몬드로부터 Folch-Suzuki방법으로 당지질을 분리하였다. 또한 periodate-resorcinol 방법으로 N-acetylneuraminic acid를 정량한 결과 각각 10당 잣은 0.013㎛ol, 호도는 0.015㎛ol,살구씨는 0.05㎛ol, 아몬드는 0.015㎛을 포함하고 있었다. 견과류에서 추출해낸 당지질을 HPTLC로 분석한 결과 다양한 당지질의 존재를 확인할 수 있었다. 그 중 잣과 살구씨에서 분리한 당지질을 DEAE-Sephadex A-25 column chromatography를 수행한 결과 잣에서는 여러 종류의 중성 당지질과 monosialoganglioside를, 살구씨에서는 여러 종류의 중성 당지질과 disialoganglioside를 분리할 수 있었다. 본 연구결과 식물에도 ganglioside가 존재하는 것을 밝히게 되었다. The compositions of gangliosides in Pinus koraiensis S. et Z.(pine nut), Juglans sinensis DODE (walnut), Armeniaca semen (apricot seed), and Prunus dulicis D.A. Webb(almond) were investigated by Folch partition, HPTLC. DEAE Sephadex A-25 column chromatography. Total polar glycolipid was extracted in aqueous phase by Folch-Susuki method. Extracted glycolipids were separated on HPTLC glass plate in the solvent system(chloroforn: methanol: water containing 0.02% CaCl_2 ? 2H_2O=55:45:10,v/v/v). Glycolipids including ganglioside were visualized with resorcinol reagent or orcinol-ferric chloride-sulfuric acid reagent. The amount of total N-acetylneuraminic acid was determined using the periodate-resorcinol method. Pinus koreaiensis S. et Z.,Juglans sinensis DODE, Armeniaca semen, and Prunus dulicis D. A. Webb contained 0.013,0.015,0.050, 0.010㎛ol of N-acetylneuraminic acid per 10g samples respectively. Glycolipids extracted from pine nuts 100g and apricot seeds 100g were analyzed on DEAE Sephadex A-25 column (acetate form, 1.3×14㎝). The gangliosides were eluted with continuous gradient of ammonium acetate in methanol (0 to 0.6M) and our results suggest that monosialoganglioside exists in pine nuts and disialoganglioside exists in apricot nuts.

Symposia : Women in Life Science ; Governmental policy for supporting women in science & technology in korea

( Gil Ja Jhon ) 한국생화학분자생물학회 (구 한국생화학회) 2007 생화학분자생물학회 춘계학술발표논문집 Vol.2007 No.-

OCTOXYNOL PRESENCE IN BEAR-BILE

Jhon, Gil-Ja,Hong, Jung-Eun,Yoon, Hae-Jung,Rhyu, Gyung-Ihm,Kim, Yong-Han,Yoo, Jong-Shin,Chang, Yoon-Seok 이화여자대학교 생명과학연구소 1996 생명과학연구논문집 Vol.7 No.-

The presence of pf octoxynol from dried bear-bile was examined. Octoxynal was coextracted when glycolipids by Folch-Suzuki partition method. Octoxynol formed mixed-micelles with glycosphingolipids. The glycolipids were purified by DEAE-Sephadex A-25 column chromatography. The fractions containing mixed micelles were obtained from linear gradient solvent of 0.05M-0.5M ammonium acetate in methanol. HPLC(Bondapak-NH_2-linked to a Bondapak-C_18 column)chromatogram showed five peaks. Two possible structures for the fourth peak fraction were proposed as (CH_3)_3C-CH_2-C(CH_3)_2-C_6H_4-OR and (CH_3)_3C-C(CH_3)_2CH_2-C_6H_4-OR by NMR spectroscopy. The structure was further confirmed by electrospray tandem mass spectrometry(ESI MS/MS). The spectrum showed a protonated molecule at m/z 559 and three different series of ions with mass difference of 44 were detected in the MS/MS specturm. Therefore, the structure of the fourth peak fraction from HPLC was confirmed as octoxynol, (CH_3)_3C-CH_2-C(CH_3)_2-C_6H_4-(OCH_2-CH_2)_n-OH, based on mass spectrometry and NMR spectroscopy.

POSTERS / PT-005 : ISOLATION AND CHARACTERIZATION OF MONACETYLDIGL YCERIDES FROM BOVINE AND A COMPARATIVE STUDY OF THE ACTIVATION OF PROTEIN KINASE C BY DIFFERENT MONOACETYLDIGLYCERIDES AND DIACYLGLYCEROLS

(Gil Ja Jhon),(Jin Kyung Limb),(Young Hwan Kim),(So Yeop Han),(Yun Soo Bae) 한국생화학분자생물학회 (구 한국생화학회) 1999 6th IUBMB SEOUL CONFERENCE Vol.- No.-

The Increase of Activity of Erythrocyte Glucose Transporter by Carboxyl Methylation

Jhon, Gil-Ja,Hah, Jong-Sik 이화여자대학교 생명과학연구소 1991 생명과학연구논문집 Vol.2 No.-

Protein carboxyl methyltransferase(EC 2.1.1.77)에 의한 메칠화반응의 생리적 기능을 알아보기 위해 사람 적혈구에서 포도당 이동체를 분리하여 메칠화시켰다. 메칠화 됨으로써 이동체의 포도당 이동능력이 메칠화 되지 않은 것에 비해 34% 증가하였다. 당뇨병 쥐의 적혈구에서 포도당 이동체가 정상 쥐의 것에 비해 54% 밖에 존재하지 않으나 메칠화가 많이 되었다. 이러한 결과로 당뇨병 쥐의 포도당 이동체가 메칠화 됨으로써 포도당의 이동능력이 증가되었다고 설명할 수 있다. 따라서 포도당 이동체의 메칠화는 비정상 아미노산에 작용하여 이동체의 포도당 운반능력을 증가시킨 것으로 추정할 수 있다. For the purpose of showing the physiological role of methyl esterification by protein carboxyl methyltransferase as a post-translational modification, the glucose transporter of human erythrocyte membrane was partially purified using octyl glucoside. The activity of human transporter was increased by 34% as a result of the methylation of transporter. The increase of methylatability and decrease(47%)of the amount of glucose transporter in erythrocyte of diabetic rats could be explained from the above result. It was also found that a small amount of glucose transporter (about 1/20 of human erythrocytes) was existed in rat erythrocytes. The physiological significance of this methylation is not clear, but our results support that protein carboxyl methyltransferase functions in increasing the activity of damaged erythrocyte glucose transporter.