An S-locus receptor-like kinase in plasma membrane interacts with calmodulin in <i>Arabidopsis</i>

Kim, Ho Soo,Jung, Mi Soon,Lee, Kyunghee,Kim, Kyung Eun,Yoo, Jae Hyuk,Kim, Min Chul,Kim, Doh Hoon,Cho, Moo Je,Chung, Woo Sik Elsevier 2009 FEBS letters Vol.583 No.1

<P><B>Abstract</B></P><P>Calmodulin-regulated protein phosphorylation plays a pivotal role in amplifying and diversifying the action of calcium ion. In this study, we identified a calmodulin-binding receptor-like protein kinase (CBRLK1) that was classified into an S-locus RLK family. The plasma membrane localization was determined by the localization of CBRLK1 tagged with a green fluorescence protein. Calmodulin bound specifically to a Ca<SUP>2+</SUP>-dependent calmodulin binding domain in the C-terminus of CBRLK1. The bacterially expressed CBRLK1 kinase domain could autophosphorylate and phosphorylates general kinase substrates, such as myelin basic proteins. The autophosphorylation sites of CBRLK1 were identified by mass spectrometric analysis of phosphopeptides.</P><P><B>Structured summary</B></P><P>MINT-6800947:<I>CBRLK1</I> (uniprotkb:Q9ZT06) and <I>AtCaM2</I> (uniprotkb:P25069) <I>bind</I> (MI:0407) by <I>electrophoretic mobility shift assay</I> (MI:0413)</P><P>MINT-6800966:<I>AtCaM2</I> (uniprotkb:P25069) and <I>CBRLK1</I> (uniprotkb:Q9ZT06) <I>bind</I> (MI:0407) by <I>competition binding</I> (MI:0405)</P><P>MINT-6800930:<I>CBRLK1</I> (uniprotkb:Q9ZT06) <I>binds</I> (MI:0407) to <I>AtCaM2</I> (uniprotkb:P25069) by <I>far Western blotting</I> (MI:0047)</P><P>MINT-6800978:<I>AtCaM2</I> (uniprotkb:P25069) <I>physically interacts</I> (MI:0218) with <I>CBRLK1</I> (uniprotkb:Q9ZT06) by <I>cytoplasmic complementation assay</I> (MI:0228)</P>

Protective Effect of Heme Oxygenase-1 on High Glucose-Induced Pancreatic β-Cell Injury

Lee, Eun-Mi,Lee, Young-Eun,Lee, Esder,Ryu, Gyeong Ryul,Ko, Seung-Hyun,Moon, Sung-Dae,Song, Ki-Ho,Ahn, Yu-Bae Korean Diabetes Association 2011 Diabetes and Metabolism Journal Vol.35 No.5

<P><B>Background</B></P><P>Glucose toxicity that is caused by chronic exposure to a high glucose concentration leads to islet dysfunction and induces apoptosis in pancreatic β-cells. Heme oxygenase-1 (HO-1) has been identified as an anti-apoptotic and cytoprotective gene. The purpose of this study is to investigate whether HO-1 up-regulation when using metalloprotophyrin (cobalt protoporphyrin, CoPP) could protect pancreatic β-cells from high glucose-induced apoptosis.</P><P><B>Methods</B></P><P>Reverse transcription-polymerase chain reaction was performed to analyze the CoPP-induced mRNA expression of HO-1. Cell viability of INS-1 cells cultured in the presence of CoPP was examined by acridine orange/propidium iodide staining. The generation of intracellular reactive oxygen species (ROS) was measured using flow cytometry. Glucose stimulated insulin secretion (GSIS) was determined following incubation with CoPP in different glucose concentrations.</P><P><B>Results</B></P><P>CoPP increased HO-1 mRNA expression in both a dose- and time-dependent manner. Overexpression of HO-1 inhibited caspase-3, and the number of dead cells in the presence of CoPP was significantly decreased when exposed to high glucose conditions (HG). CoPP also decreased the generation of intracellular ROS by 50% during 72 hours of culture with HG. However, decreased GSIS was not recovered even in the presence of CoPP.</P><P><B>Conclusion</B></P><P>Our data suggest that CoPP-induced HO-1 up-regulation results in protection from high glucose-induced apoptosis in INS-1 cells; however, glucose stimulated insulin secretion is not restored.</P>

연잎, 연자육, 연자방 에탄올 추출물의 항염증 활성

이은주(Eun-Joo Lee),서유미(Yu-Mi Seo),김용현(Yong-Hyun Kim),정정욱(Chungwook Chung),성화정(Hwa-Jung Sung),손호용(Ho-Yong Sohn),박종이(Jong-Yi Park),김종식(Jong-Sik Kim) 한국생명과학회 2019 생명과학회지 Vol.29 No.4

연은 아시아 국가에서 음식과 약재로 널리 사용되는 재료이다. 본 연구에서는 연의 잎(leaf, NL), 자육(seed, NS), 자방(seedpod, NSP)으로부터 에탄올 추출물을 제조하고 이들의 항염증 활성과 작용기전을 규명하였다. 이들의 항염증 활성을 연구하기 위하여 LPS로 자극된 RAW 264.7 세포에서 nitric oxide (NO) 생산을 측정하였다. NL, NS, NSP는 세포 생존율에 영향을 주지 않으면서, 농도의존적으로 NO의 생산을 현저하게 저해하였으며, iNOS 및 COX-2와 같은 pro-inflammatory 중재자들의 단백질 발현을 감소시켰다. 또한, NL, NS, NSP는 MAPKs 단백질의 인신화를 감소시키고 NF-κB p65의 핵으로의 이동을 저해함으로써, 세 추출물에 의한 항염증 활성은 MAPKs 경로와 NF-κB 경로를 조절함으로써 이루어짐을 제시한다. 게다가, ROS의 생성이 세 추출물에 의해서 모두 저해되었으며, HO-1의 발현과 HO-1의 전사조절인자인 Nrf2의 핵으로의 이동이 증가되었다. 결론적으로, 이러한 연구결과는 연의 다양한 부위의 추출물인 NL, NS 그리고 NSP는 항염증 활성을 가지고 있으며, MAPKs, NF-κB, Nrf2/HO-1 등 다양한 신호경로를 통해 조절할 수 있음을 제시한다. Nelumbo nucifera, also known as sacred lotus, has mainly been used as a food throughout the Asian countries. In the present study, we prepared ethanol extracts from leaf (NL), seed (NS), and seedpod (NSP) of Nelumbo nucifera and investigated their anti-inflammatory activities in mouse macrophage RAW 264.7 cells. To evaluate the anti-inflammatory activities of NL, NS, and NSP, nitric oxide (NO) production was measured in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. NL, NS, and NSP significantly reduced NO production in a dose-dependent manner without affecting cell viabilities. NL, NS, and NSP dramatically decreased the protein expression of pro-inflammatory genes such as iNOS and COX-2. NL, NS, and NSP also suppressed phosphorylation of MAPKs and the nuclear translocation of NF-κB p65 indicating they have their anti-inflammatory activities via regulating mitogen-activated protein kinases (MAPKs) and nuclear factor kappa B (NF-κB) pathways. In addition, we analyzed the production of reactive oxygen species (ROS) by the treatment of NL, NS, and NSP. All extracts reduced ROS production in a dose-dependent manner. And also, they increased heme oxygenase-1 (HO-1) protein expression and the nuclear translocation of nuclear respiratory factor 2 (Nrf2). In conclusion, our results suggest that Nelumbo nucifera has its anti-inflammatory activity via regulating MAPKs, NF-κB, and Nrf2/HO-1 pathways.

건조 상추 에탄올 추출물의 항염증 활성

이은주(Eun-Joo Lee),서유미(Yu-Mi Seo),김용현(Yong-Hyun Kim),정정욱(Chungwook Chung),성화정(Hwa-Jung Sung),손호용(Ho-Yong Sohn),박종이(Jong-Yi Park),김종식(Jong-Sik Kim) 한국생명과학회 2019 생명과학회지 Vol.29 No.3

상추는 가장 선호하는 녹색 채소 중 하나이다. 상추는 폴리페놀성 화합물을 비롯한 다양한 성분을 함유하고 있으며, 항균, 항산화, 항염증 등의 생리활성을 가지고 있는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 건조상추의 에탄올 추출물(DLE)을 제조하고 이들의 항염증 활성을 연구하였다. DLE의 항염증 활성을 측정하기 위하여 LPS로 활성화된 마우스 대식세포 RAW 264.7 세포주에서 nitric oxide (NO) 생성을 측정하였다. DLE는 세포주의 생존에는 영향을 미치지 않으면서 NO 생산을 현저하게 저해하였다. DLE에 의해 염증 유전자인 iNOS와 COX-2의 유전자와 단백질의 발현이 모두 감소하였으며, 6개의 염증관련 cytokine 유전자(IL-1α, IL-1β, IL-1F6, TNF-α, CSF2, 그리고 CXCL10)의 발현이 모두 감소하였다. 또한, DLE의 처리는 MAPKs 경로의 인산화를 모두 저해하였으며, NF-κB p65의 핵으로의 이동을 저해하였다. 이러한 결과는 DLE의 항염증 활성은 MAPKs 경로와 NF-κB 경로를 조절함으로써 이루어짐을 시사한다. 또한, DLE는 농도의존적으로 reactive oxygen species (ROS)의 생산을 저해하였으며, hemeoxygenase-1 (HO-1) 단백질의 발현을 증가시켰으며, HO-1의 전사조절인자인 Nrf2의 핵으로의 이동을 증가시켰다. 결론적으로, 이러한 연구결과는 DLE가 염증관련 유전자의 발현을 감소시키며, MAPKs, NF-κB, 그리고 Nrf2/HO-1 등 다양한 경로를 조절함으로써 항염증 활성을 가지는 것을 제시한다. Lettuce (Lactuca sativa L.) is one of the most popular green leafy vegetables, and it contains various beneficial components including polyphenolic compounds and has been known to possess various biological functions such as anti-microbial, anti-oxidative, and anti-inflammatory activities. In the present study, we prepared ethanol extract of dried lettuce (DLE) and investigated its anti-inflammatory activity. To evaluate the anti-inflammatory activity of DLE, nitric oxide (NO) production was measured in LPS-activated mouse macrophage RAW 264.7 cells. DLE significantly suppressed NO production in these cells without affecting cell viabilities while resveratrol was used as a positive control. DLE dramatically decreased the expression of pro-inflammatory genes such as iNOS and COX-2 at the mRNA and protein levels and reduced the expression of several cytokines including IL-1α, IL-1β, IL-1F6, TNF-α, CSF2 and CXCL10. In addition, DLE suppressed phosphorylation of MAPKs and the nuclear translocation of NF-κB p65 indicating DLE shows its anti-inflammatory activity via regulating MAPKs pathway and NF-κB pathways. And also, DLE reduced the production of reactive oxygen species in a dose-dependent manner. DLE increased HO-1 protein expression, and also increased the nuclear translocation of Nrf2. Overall, our results suggest that lettuce down-regulate various pro-inflammatory genes and have its anti-inflammatory activity via regulating MAPKs, NF-κB, and Nrf2/HO-1 pathways.

죽상경화 혈관 합병증의 예측 인자로서의 경동맥 내중막 두께 및 대동막 판막 두께

박은미,김연경,송미진,최준호,윤경호,오석규,정진원,김남호 圓光大學校 醫科學硏究所 2006 圓光醫科學 Vol.21 No.1

심근 허혈-재관류 백서 모델에서 mitogen-activated protein kinase 활성화에 대한 α-lipoic acid의 효과

김연경,박은미,최준호,윤경호,유남진,이은미,김남호,정진원,김민선,박병림,오석규 圓光大學校 醫科學硏究所 2006 圓光醫科學 Vol.21 No.1

관상동맥 스텐트 삽입술을 시행한 환자에서 안지오텐신 전환효소 억제제와 안지오텐신 수용체 차단제가 재협착에 미치는 영향

김연경,정진원,윤경호,박은미,송미진,최준호,이은미,유남진,김남호,오석규 圓光大學校 醫科學硏究所 2006 圓光醫科學 Vol.21 No.1

급성 관동맥증후군 환자의 신기능 이상과 주요 심장사건과의 관계

이상재,윤경호,최준호,송미진,김연경,박은미,김현정,이은미,유남진,김남호,오석규,정진원 圓光大學校 醫科學硏究所 2006 圓光醫科學 Vol.21 No.1

TNT 분해세균 Pseudomonas sp. HK-6에서 정제한 NAD(P)H-nitroreductase의 특성연구

호은미,오계현 순천향대학교 기초과학연구소 2003 순천향자연과학연구 논문집 Vol.9 No.2

The aim of this work was to characterize NAD(P)H-nitroreductase purified from Pseudomonas sp. HK-6, which could utilize 2,4,6-trinitrotoluene. In initial experiments, NAD(P)H-nitroreductase from actively growing HK-6 cells was separated by ammonium sulfate precipitation, DEAE-sepharose, and Q-sepharose. Specific activity of NAD(P)H-nitroreductase was approximately 4.46 unit/㎎. Optimum temperature and pH of the enzyme were approximately 30℃ and 7.5, respectively. Specific activity of NAD(P)H-nitroreductase on the effect of several metal ions was monitored. Fe^(3+) showed stimulatory effect on the activity of NAD(P)H-nitroreductase, whereas the specific activity of the enzyme was determined to approximately 27 kDa by SDS-PAGE.

IMT-2000서비스가 國內 經濟에 미치는 影響

李明豪, 金銀美, 全孝悧 서울대학교 경제연구소 2000 經濟論集 Vol.39 No.1

정보통신산업은 우리나라 총수출의 27.6%, 전체 무역흑자의 60.0%를 차지(1999년)하고 있는 등 국민경제에서 큰 비중을 차지하고 있다. 특히 차세대이동통신으로 알려진 IMT-2000서비스는 관련사업자의 직접적인 이해관계 및 경제적 파급효과 측면에서 세간의 큰 주목을 받고 있다. 본 논문에서는 이러한 IMT-2000서비스 도입의 파급효과를 통신서비스산업에 미치는 영향, 관련산업에 미치는 영향, 국민경제에 미치는 영향, 국민생활에 미치는 영향 등으로 나누어 살펴보고 있다. IMT-2000서비스 도입에 따른 긍정적 효과를 극대화하기 위해서는 첫째, 해외의 사업자 허가 추세에 비추어 볼 때 IMT-2000사업자를 조속히 선정하여 경쟁력을 확보하는 것이 중요하며, 둘째, 특히 멀티미디어 컨텐츠 관련산업의 보다 적극적인 지원 육성이 필요하고, 셋째, 기술표준의 결정이 국내 기술력과 시장성에 대한 정확한 분석과 예측을 바탕으로 이루어지는 한편 이에 대한 연구개발의 지원 및 단말기나 시스템부품의 기술력을 보유한 벤처기업 육성 등의 대책이 필요하다.