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구름버섯 망간 과산화효소를 도입한 아교버섯 형질전환체에 의한 내분비장애 물질의 생분해
금현우,김명길,최형태,Kum, Hyun-Woo,Kim, Myung-Kil,Choi, Hyoung-T. 한국미생물학회 2009 미생물학회지 Vol.45 No.1
내분비장애물질은 분해가 매우 어려워 자연계에서 먹이그물을 통하여 사람에게 농축 전달된다. 이들은 정상적인 내분비계에 혼란을 일으키며, 특히 성호르몬의 작용에 많은 피해를 준다. 이를 효율적으로 분해하고 이들의 에스트로겐 활성을 제거하고자 백색부후균의 하나인 아교버섯(Phlebia tremellosa)을 활용하여 4가지 내분비계 장애물질의 분해에 대한 실험을 수행하였다. 아교버섯의 manganese peroxidase (MnP) 활성을 높이기 위하여 구름버섯의 MnP 유전자를 아교버섯에 도입하여 형질전환체를 확보하였으며 이들은 유전적으로 MnP 활성을 안정되게 나타냈다. 내분비 장애물질을 분해하는 조건에서 내분비장애 물질에 따라 30${\sim}$45%의 분해율을 보인 야생형에 비하여 이 형질전환체들 중 T5는 70${\sim}$88%의 분해율을 보였으며 에스트로겐 활성의 제거에도 약 2배 향상된 능력을 보였다. Endocrine disrupting chemicals (EDCs) disturb animal hormonal system even at very low concentrations, and finally give harmful effects to human through the food web. A white rot fungus Phlebia tremellosa isolated in Korea, was reported to have good degrading activity against the endocrine disrupting phthalates. However, this fungus has very low manganese peroxidase (MnP) activity under various culture conditions while laccase and lignin peroxidase activities were high. We have isolated an MnP cDNA from Trametes versicolor which was involved in the degradation of EDCs, and constructed an MnP expression vector to use in the genetic transformation of P. tremellosa in order to get higher MnP producing strains. Many transformants had integrated expression vector in their chromosomal DNAs, and showed increased MnP activity. One of two transformants showed increased degradation of 4 EDCs (70${\sim}$88%) than the wild type (30${\sim}$45% degradation rates), and showed twice better removal of estrogenic activities generated by the EDCs than the wild type.
아교버섯(Phlebia tremellosa)의 리그닌 분해효소 형질전환체를 이용한 염료의 탈색
금현우,이성숙,유선화,최형태,Kum, Hyun-Woo,Ryu, Sun-Hwa,Lee, Sung-Suk,Choi, Hyoung-T. 한국미생물학회 2010 미생물학회지 Vol.46 No.1
리그닌 분해효소 군을 가진 백색부후균들은 다핵방향족 화합물을 포함하여 염료와 폭약 및 내분비장애 물질의 분해 등 다양한 난분해성 물질을 분해할 수 있다. 리그닌 분해효소 중 laccase와 manganese peroxidase (MnP)를 각각 발현하는 벡터를 국내에서 분리한 백색부후균류의 하나인 아교버섯(Phlebia tremellosa)에 형질전환 방법으로 도입시킨 형질전환체를 사용하여 염료의 탈색능력을 분석하였다. Methyl green의 경우 3일 후 약 50%의 탈색을 보인 야생형에 비하여 laccase 형질전환체(TF2-1)와 MnP 형질전환체(T5) 모두 90% 이상의 탈색을 보였다. Remazol brilliant blue R (RBBR)에서는 야생형이 약 67%의 탈색을 보인 반면 두 가지 형질전환체들은 약 85%의 탈색을 보였다. 각각의 형질전환체들은 laccase와 MnP의 활성 및 유전자 발현도 활발한 것으로 확인되었다. White rot fungi which have lignin degrading enzymes show high degrading activity to diverse recalcitrant compounds such as polycyclic aromatic compounds, dyes, explosives and endocrine disrupting chemicals. We have examined decolorizing activity of dyes by Phlebia tremellosa and two transformants which had genetically transformed using laccase or manganese peroxidase (MnP) gene. In case of methyl green, wild type strain showed 50% decolorization while laccase transformant (TF2-1) and MnP transformant (T5) showed more than 90% decolorization on day 3. Remazol brilliant blue R(RBBR) was decolorized up to 85% by two transformants while the wild type showed 67% decolorization on day 3. Transformants TF2-1 and T5 both showed increased laccase and MnP activity respectively during the whole growing phase.