양성혈액배양에서 메치실린 내성 황색 포도알균의 직접검출을 위한 PBP2a 라텍스 응집법, PBP2a 신속 면역크로마토그래픽법 및 Chromogenic 배지법의 비교

홍승복,손보라,신경섭 대한임상미생물학회 2012 Annals of clinical microbiology Vol.15 No.1

Background: This study compared three non-molecular methods for the detection of methicillin-resistance directly from blood cultures containing Staphylococcus aureus: penicillin-binding protein (PBP) 2a latex agglutination (LA), PBP2a immunochromatographic assay (ICA) and MRSA chromogenic medium (CM). Methods: Fifty methicillin-resistant S. aureus (MRSA) and 50 methicillin-susceptible S. aureus (MSSA) were seeded into blood-culture bottles. When isolates returned a positive signal, 5 mL of culture was added to serum separator tubes and centrifuged at 1,300 g for 10 min. The pellets were then used as the inoculum for the PBP2a LA, MRSA-CM and PBP2a ICA. The pure colony was used for PBP2a LA test, additionally. Results: The respective sensitivities and specificities were 98 and 100% for PBP2a ICA, and 100 and 100% for MRSA-CM in direct detection of MRSA from positive blood culture. The results of PBP2a LA test using pure colony were entirely compatible with those by mecA gene PCR but the PBP2a LA test using the pellets directly isolated from positive blood culture showed sometimes ambiguous agglutination; its sensitivity and specificity were 78 and 100%, if ambiguous results were scored as negative, and were 90 and 92%, if ambiguous results were scored as positive, respectively. Conclusion: For direct detection of MRSA in positive blood culture, MRSA-CM and PBP2a ICA provided excellent results. The PBP2a LA test using pure colony also gave excellent results but the PBP2a LA test by the direct method using pellet of positive blood culture was slightly less sensitive than the other two methods.

일개 고등학교 환경에서 메치실린 내성 포도알균의 오염도 조사

홍승복,백윤희 대한임상검사과학회 2017 대한임상검사과학회지(KJCLS) Vol.49 No.4

Methicillin-resistant Staphylococcus (MRS) can be colonized in various body sites and is more frequently isolated in healthcare associated persons. This study aimed to evaluate the contamination rate of MRS in a high school environment, those living with closed life style. Staphylococcus aureus was isolated from only the hands of 2 students among a sample of 28 students, and S. aureus were susceptible to methicillin antibiotics. Coagulase negative Staphylococci (CoNS) were isolated from the hands of 26 students (26/28, 92.9%), and among them, 14 (53.8%) isolates were methicillin-resistant CoNS (MRCoNS). Among the 14 MRCoNS, S. warneri was the most common (8/14, 57%) and susceptible to most non-β-lactam antibiotics, such as clindamycin, erythromycin, ciprofloxacin, tetracycline, gentamicin, and vancomycin. In a culture of 31 desks, S.aureus was not isolated but CoNS were isolated from 26 desks (26/31, 83.6%), which did not harbor the mecA gene. The other bacteria isolated from the hands and desks were Micrococcus and Bacillus spp. In conclusion, methicillin-resistant S. aureus was not isolated from the hands and desks of high school students. However, the frequency of MRCoNS harboring mecA gene were high in the hands of high school students. Therefore, to prevent and to control the transfer of infection, intensifying preventive education, such as hand washing, and active surveillance systems, such as an investigation of contamination or carrier rate of resistant bacteria are necessary. 메치실린 내성 포도알균(methicillin resistant Staphylococci, MRS)는 인체 여러 부위에서 집락화 될 수 있으며 의료기관과 연관된 사람에서 흔히 분리된다. 이 연구는 밀접한 단체생활을 하는 일개 고등학교 한 개 반의 학생들 손과 그들이 사용하는 책상에서 MRS 균의 오염 정도를 평가하고자 하였다. Staphylococcus aureus가 28명의 학생의 손 중에서 2 균주가 분리되었으며 모두 메치실린에 감수성이었다. 응고인자 음성 포도알균(coagulase negative Staphylococci, CoNS)는 26 균주가(26/28, 92.9%) 분리되었으며 이들 균주 중 14 균주는 메치실린 내성균(MRCoNS) 이었다. 14 MRCoNS 중 S. warneri가 가장 흔하였으며(8/14, 57%), 이들은 대부분의 non-β-lactam 항생제에 감수성 이었다. 31개의 책상에서는 S. aureus는 분리되지 않았으나 26 CoNS (26/31, 83.9%)가 분리되었다. 손과 책상에서 분리된 포도알균 이외의 균은 Micrococcus와 Bacillus spp.이었다. 결론적으로 MRSA는 이번 연구에서 분리되지 않았으나 mecA 유전자를 갖고 있는 MRCoNS는 학생들의 손에서 높은 비율로 분리되었다. 손씻기와 같은 예방 교육을 강화할 뿐만 아니라 이들 균의 오염 및 보균율 등의 조사와 같은 능동적 감시 등이 이들 균의감염예방과 전파 차단을 위해 필요할 것으로 사료된다.

당화혈색소 측정을 위한 Norudia^® HbA1c 키트의 평가

홍승복,김은중,Hong, Seung-Bok,Kim, Eun-Joong 대한임상검사과학회 2009 대한임상검사과학회지(KJCLS) Vol.41 No.1

Measurement of hemoglobin A1c is used as an objective indicator of long-term blood glucose control in diabetic patients. We evaluated recently introduced Norudia$^{(R)}$ HbA1c (Daiichi Pure Chemical Co. Ltd, Tokyo, Japan) test reagent using enzyme method for HbA1c assay. Linearity, precision and correlation with VARIANT$^{TM}$ II Turbo HbA1c analyzer (BIO-RAD, Hercules, CA, USA) were evaluated. The reference range was determined from 201 healthy subjects. The Norudia$^{(R)}$ HbA1c test reagent was founded to be linear in a range of 5.6% to 14.0% ($r^2=0.9885$). The within-run and between-day precision were 0.954% and 1.03% for low level (HbA1c 5.24%), 0.67% and 1.28% for high level (HbA1c 9.01%), respectively. Comparison study between Norudia$^{(R)}$ HbA1c test reagent and VARIANT$^{TM}$ II Turbo showed good correlation with a slope of 1.0489. an intercept at -0.9717, and coefficient of correlation was 0.9907. The reference range of HbA1c obtained from this reagent was 4.07-5.50%. The Norudia$^{(R)}$ HbA1c test reagent showed good linearity, precision and correlation with HbA1c analyzer with HPLC method. In addition, the exclusive analyzer is not required for assay and then this kit may be useful for HbA1c assay in clinical laboratory.

Metallo-${\beta}$-lactamase를 생성하여 Imipenem에 내성인 Pseudomonas aeruginosa에 대한 항균제 병합요법의 효과

홍승복,김홍철,이장원,손승렬,Hong, Seung-Bok,Kim, Hong Chul,Lee, Jang-Won,Son, Seung-Yeol 한국미생물학회 2008 미생물학회지 Vol.44 No.4

This study was to detect MBL (metallo-${\beta}$-lactamase) among glucose non-fermenting Gram-negative bacilli isolated from clinical specimen and to search antimicrobial combination therapy against MBL producing Pseudomonas aeruginosa. Among fifty one isolates of Gram-negative bacilli with reduced imipenem susceptibility ($MIC{\ge}8{\mu}g/ml$), nine isolates have shown positive results in MBL detection test. They were seven Achromobacter xylosoxidans subsp. xylosoxidans and two P. aeruginosa. The results from EDTA-DDST coin-cided with those of PCR and nucleotide sequence analysis which showed the presence of $bla_{VIM-2}$. The combination of aztreonam (AZT) and piperacillin-tazobactarn (TZP) or AZT and amikacin (AN) screened by one disk synergy test showed no synergistic effect. Triple antibiotic combination therapy with AZT, TZP and AN, however, was shown to be effective and the most synergistic after 8 hrs of exposure. This result strongly suggest that the triple combination therapy of AZT, TZP, and AN could be useful for the treatment of infection caused by MBL producing Gram-negative bacilli. 국내 대학병원에서 분리되어 imipenem 에 대한 최소억제농도가 $8{\mu}g/ml$ 이상인 51개의 포도당비발효 그람음성 간균들 중 metallo-${\beta}$-lactamase (MBL)을 생성하는 균주들을 분리하고, 그들 중에서 내성이 강한 Pseudomonas aeruginosa에 대한 항균제 병합요법의 효과를 알아보기 위하여 상승효과를 보이는 항균제 조합을 찾아보았다. 9개의 균주(Pseudomonas aeruginosa 2주 및 Achromobacter xylosoxidans subsp. xylosoxidans 7주)가 MBL 양성을 나타냈으며, PCR 결과 9주 모두에서 $bla_{VIM-2}$ 유전자가 관찰되었다. 이들 중에서 P. aeruginosa DK569는 aztreonam (MIC; $8{\mu}g/ml$)을 제외하고 실험한 모든 ${\beta}$-lactam 항균제, aminoglycoside, ciprofloxacin에 내성을 보여 aztreonam 함유 배지를 이용하여 상승효과률 보이는 항균제를 찾고자 하였다. One disk synergy test 에서 선별된 항균제 조합을 이용하여 생존률 검사 실험을 한 결과, aztreonam (AZT)와 piperacillin-tazobactam (TZP)의 병합은 항균제 노출 6시간 후에 AZT 또는 TZP의 단독 항균제 노출시 보다 균수가 1/18.7로 감소하였다. 그리고 AZT와 amikacin (AN)의 병합에서도 항균제 노출 6 시간 후에 AZT 또는 AN의 단독항균제의 투여보다 균수가 1/17.1 로 감소하였다. 결국 위 두 조합은 의미있는 상승효과를 보이지 못하여 위 세 항균제를 조합하여 실험하였다. 위의 세 항균제를 병합하였을 때 항균제 노출 8시간 후에 AZT, TZP 및 AN의 단독 투여에 비하여 병합요법에 의해 균수가 1/183.3 로 감소하여 의미있는 상승효과를 보였다. 이 결과는 치료가 쉽지 앓은 MBL 생성균에 의한 감염에 대한 치료에 AZT, TZP 및 AN의 세 가지 항균제 병합요법이 유용할 것이라는 것을 의미한다.

Synergistic Anti-bacterial Effects of Phellinus baumii Ethyl Acetate Extracts and β-Lactam Antimicrobial Agents Against Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus

홍승복,이만휘,윤봉식,임영훈,송형근,신경섭 대한진단검사의학회 2016 Annals of Laboratory Medicine Vol.36 No.2

Background: The development of new drugs or alternative therapies effective against methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) is of great importance, and various natural anti-MRSA products are good candidates for combination therapies. We evaluated the antibacterial activities of a Phellinus baumii ethyl acetate extract (PBEAE) and its synergistic effects with β-lactams against MRSA. Methods: The broth microdilution method was used to determine the minimal inhibitory concentration (MIC) and minimal bactericidal concentration (MBC) of the PBEAE. The PBEAE synergistic effects were determined by evaluating the MICs of anti-staphylococcal antibiotic mixtures, with or without PBEAE. Anti-MRSA synergistic bactericidal effects of the PBEAE and β-lactams were assessed by time-killing assay. An ELISA was used to determine the effect of the PBEAE on penicillin binding protein (PBP)2a production. Results: The MICs and MBCs of PBEAE against MRSA were 256-512 and 1,024-2,048 μg/mL, respectively. The PBEAE significantly reduced MICs of all β-lactams tested, including oxacillin, cefazolin, cefepime, and penicillin. However, the PBEAE had little or no effect on the activity of non-β-lactams. Time-killing assays showed that the synergistic effects of two β-lactams (oxacillin and cefazolin) with the PBEAE were bactericidal in nature (Δlog10 colony forming unit/mL at 24 hr: 2.34-2.87 and 2.10-3.04, respectively). The PBEAE induced a dose-dependent decrease in PBP2a production by MRSA, suggesting that the inhibition of PBP2a production was a major synergistic mechanism between the β-lactams and the PBEAE. Conclusions: PBEAE can enhance the efficacy of β-lactams for combined therapy in patients infected with MRSA.

예비 임상병리사의 실무중심 교육의 강화를 위한 병원-학교 검사실 융합형(L2L) 교수학습 모형의 개발

홍승복,정수하,신인수,윤영배,유영오,Hong, Seung Bok,Jeoung, Su-Ha,Shin, In Soo,Yoon, Young-Bae,You, Young O 대한임상검사과학회 2018 대한임상검사과학회지(KJCLS) Vol.50 No.2

The development of teaching models to strengthen practical education and actively participate in the classes of students is now required in recent education situations. This study examined the participation and satisfaction level of students' classes after applying a teaching model-integrated hospital and school laboratory (named L2L). A total of 33 students who took the subject of a clinical microbiology experiments were involved in this study. Each group representative participating in a pre-class field exercise in the hospital microbiology laboratory was asked to conduct the experiment. After applying the L2L teaching models, the academic self-efficacy ($2.87{\pm}0.58{\rightarrow}3.38{\pm}0.55$), class participation ($2.60{\pm}0.92{\rightarrow}3.62{\pm}0.78$), and class satisfaction ($2.48{\pm}1.01{\rightarrow}3.85{\pm}0.87$) increased significantly (P<0.05). This means that pre-class field exercises created interest in the student's class and boosted self-confidence, leading to increased participation and satisfaction for the class. In conclusion, the L2L teaching model is an effective teaching method to enhance the practical training for preliminary clinical laboratory technologists.

일반연제(포스터) : P-6 ; MRSA에 대한 천연물(상황버섯, Phellinus baumii)의 항균효과 측정에 비색법에 기초한 미량액체배지희석법의 적용

홍승복,손영일,신경섭 대한임상병리사협회 2013 임상미생물검사학회 발표자료집 Vol.2013 No.-

배경: 최근 내성세균의 증가에 따른 천연물 항균 효과에 대한 연구가 많이 시행되고 있다. 그러나 항균제와는 달리 천연물은 종류에 따라 색소를 가지고 있는 물질들이 있어 최소억제농도(MIC)의 표준 측정법인 미량액체배지희석법의 육안 판독에 어려움이 있다. 저자들은 노란색소를 가지고 있는 상황버섯(Phellinus baumii)의 methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA)에 대한 항균효과의 평가에 다양한 염료를 첨가한 비색법을 이용한 미량액체배지 희석법을 적용하여 보았다. 방법: 임상에서 분리 된 MRSA 10 균주, MSSA 10 균주를 대상으로 상황버섯에 대한 항균효과를 CLSI guideline에 따른 미량액체배지희석법을 이용하여 육안판독과 세 가지 비색법(TTC, alamar Blue®, MTT)을 비교 평가하였다. 염료들의 농도는 기존 논문에 제시된 방법을 참고하여 TTC는 MH broth에 최종농도 40 ug/mL로 맞추어 사용하였고, alamar Blue®는 10 uL씩 96 well에 분주하여 배양하였다. MTT는 배양이 끝난 후 육안판독 후에 10 mg/mL 농도를 10 uL씩 분주하여 빛을 차단하여 실온에서 20분 방치 후 판독하였다. 최종 균 농도는 5x105 CFU/mL로 35℃에서 16~20시간 배양하였다. 또한 표준균주 S. aureus ATCC 29213을 이용하였으며, 결과의 신뢰성을 위해 3가지 항균제(ceftazidime, imipenem, amikacin)의 MIC 측정에 비색법과 육안 판독법을 적용하여 결과를 비교하였다. 결과: 상황버섯에 대한 MIC 값은 MRSA, MSSA 모두에서 1024 ug/ml이었다. P. baumii는 노란색의 물질이기 때문에 MIC 육안 판독으로 균의 증식 유무를 확인할 수 없어 육안으로 상황버섯의 MIC를 판독할 수 없었다. 2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride(TTC)염료, 3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazoliumbromide(MTT)염료, alamar Blue® 염료를 육안법과 비교한 결과 MTT 비색 방법이 판독에 가장 우수하였다. MTT 결과의 신뢰도를 위해 MRSA 5균주, MSSA 5균주를 대상으로 시행한 ceftazidime, imipenem, amikacin의 MTT비색법과 육안판독에 의한 MIC결과는 서로 일치하였다. 결론: RSA와 MSSA에서 상황버섯(P. baumii)의 항균 효능은 동일한 결과가 나왔다. 상황버섯의 항균효과 판독을 위한 육안판독법과 세 가지의 비색법을 비교 하였을 때 MTT 비색법의 결과 판독이 가장 우수하여 천연물 항균효과에 편리하게 이용할 수 있을 것으로 사료된다. 세 가지 항균제의 MIC 측정에서도 MTT 비색법은 육안판독과 일치하였으며 앞으로 항균제의 MIC 측정법에도 적용하여 육안판독의 편리성을 도모할 수 있을 것이다.

화학발광면역측정법을 이용한 호르몬 검사시 Serum Separation Tube(SST)의 사용

홍승복,김현수,이도대 대한임상검사정도관리학회 1999 臨床檢査와 精度管理 Vol.21 No.1

공공 화장실에서 사용하는 액체 손세정제의 세균 오염도 조사

홍승복,Hong, Seung Bok 대한임상검사과학회 2020 대한임상검사과학회지(KJCLS) Vol.52 No.3

세정제로 손을 씻는 것은 감염의 가능성이 있는 미생물을 줄이는 중요한 방법이지만 재사용하는 액체 형 세정제는 외부의 오염에 취약하다. 이 연구의 목적은 공공화장실에서 사용하고 있는 액체 세정제의 오염도를 측정하는 것이다. 저자는 6개 건물에 있는 58개의 공공 화장실에서 액체 형 손 세정제를 조사하였다. 균의 동정은 전통적인 생화학적 검사와 질량분석기를 이용하였으며 항균제 감수성 검사는 Vitek II 시스템을 이용하였다. 58개의 화장실 중 27개(46.55%)의 화장실에서 세정제를 다시 채워 재사용하고 있었으며, 이들 중 25개(92.59%) 화장실의 세정제가 세균에 오염되어 있었다. 오염된 균은 1.6×10³ to 2.7×10⁵ CFU/mL의 범위였으며, Serratia liquefaciens (12 균주), Achromobacter xylosoxidans (9 균주), Serratia marcescens (4 균주), Staphylococcus pastueri (1 균주), Achrombacter spanius (1 균주) 순으로 분리되었다. A. xylosoxidans 1 균주를 제외하고 같은 건물에서 분리된 같은 균 종은 동일한 감수성 양상이었다. 결론적으로 오염된 손 세정제로 손을 씻는 것은 공공보건 시설에서 세균의 전파가능성이 높일 수 있으므로 면역이 감소한 환자들이 이용하는 병원의 화장실은 손 세정제를 재사용하는 것을 제한할 필요가 있다. Handwashing with soap is an important practice to reduce the transmission of potentially pathogenic microorganisms, but liquid soaps with refillable dispensers are prone to extrinsic bacterial contamination. This study investigated the bacterial contamination of liquid soaps in 58 public restrooms in six buildings. The bacteria were identified by a biochemical test and MALDI-TOF mass spectrophotometry. The antimicrobial susceptibility was determined using the Vitek II system. Of the 58 restrooms examined, 27(46.55%) were using a refill dispenser, of which 25(92.59%) were contaminated with bacteria. The bacteria recovered from the soaps ranged from 1.6×10³ to 2.7×10⁵ CFU/mL. Serratia liquefaciens (12), Achromobacter xylosoxidans (9), S. marcescens (4), Staphylococcus pastueri (1), and Achromobacter spanius (1) were isolated. Except for one A. xylosoxidans, bacteria of the same species isolated in the same building showed a unique resistance pattern. In conclusion, handwashing with contaminated soap may play a role in the transmission of bacteria in public health settings. Therefore, it is necessary to limit the use of refillable liquid soaps in the restrooms of hospitals used by patients with reduced immunity.

D대학을 중심으로 한 학생들의 방사선 인식 조사

홍승복,양은주,김영재 한국방사선학회 2020 한국방사선학회 논문지 Vol.14 No.4

This survey was willing to suggest the basic data required for strategic planning to improve the recognition rate on radiation by investigating the difference between the college students who major in radiology and who don't about using radiation. As the results of questionnaire survey on 'knowledge, degree of self-consciousness, danger, convenience and management' targeting 441 students who belonged to D college, 75% of them answered that radiation exists in their daily lives and 54% of them answered they did not know about radiation well. It showed that radiation is dangerous no matter how much the amount is (56%) and it is not dangerous if it is managed well (81%). They answered that they enjoy the convenience of radiation (82%) and the use for medical purpose took the highest percentage among them (58%). It showed that it is important to manage the radiation and should be controlled by the government in institutional way than the individual (64%). The negative answer to the question of 'do you trust the government?' was dominant (75% below average). As the results of this survey, it was recognized that both of them who major in radiology or not were aware of positive aspect of radiation (especially medical technology field) well and the improving the perception of radiation led by the government and definite restriction on its safety should be preceded for safe use. 방사선 이용에 대해 대학생 중 방사선 관련 전공자와 비전공자의 인식차이를 파악하여 방사선 인식률 향상의 전략 구상에 필요한 기초자료를 제공하고자 하였다. D대학에 재학중인 441명의 학생을 대상으로 ‘방사선에 대한 지식·자각정도·위험·편익·관리’와 관계된 설문을 한 결과 일상에서도 방사선이 있다는 인식이 75% 였으며, 54%의 학생은 방사선에 대해 잘 알지 못한다고 답했다. 방사선의 위험 측면에서는 적은 양이든 많은 양이든 위험하다(56%) 그리고 관리를 잘 한다면 위험하지 않다(81%)로 나타났다. 또한, 방사선의 이용으로 편익을 추구하고 있다(82%)고 답했으며 이 중 의학적 이용(58%)이 가장 높았다. 이에 방사선 관리가 중요하며 이 관리의 주체는 개인보다 정부의 제도적 통제가 중요하다(64%)고 나타났다. 정부를 신뢰하는가에 대한 질문에는 부정적인 대답(보통이하 75%)이 지배적이었다. 본 연구의 결과 방사선의 전공이나 비전공자들은 모두 방사선에 대해 긍정적인 면(특히, 의료기술분야)을 잘 알고 있었던 것으로 확인되었으며 보다 안전한 활용을 위해선 정부 주도의 국민 방사선지식의 올바른 인식 개선과 방사선안전에 대한 명확한 규제가 선행되어야 하겠다.