효소이용 첨단 농업생명공학기술 ( 심포지움 ) : 임상진단용 효소의 개발 - Nucleoside oxidase 와 Peroxidase

최양문,조홍연,양한철 한국응용생명화학회(구 한국농화학회) 1996 한국응용생명화학회 학술발표회 Vol.1996 No.3

뇌동맥류 조기수술후 발생한 뇌혈관연축에 영향을 미치는 임상적 인자

최양문,장태안,강성돈,김종문 대한신경외과학회 1995 Journal of Korean neurosurgical society Vol.24 No.12

Much controversies still exist with respect to the risk factors influencing symptomatic cerebral vasospasm. In our study, the patient group had some unique characteristics, ie. : 42.5%(65) of the 153 patients were aged 60 years or older(mean : 55.6 years) and consequently the proportion of Hunt-Hess grade 3-5 was higher than grade 1-2(57.5% vs. 42.5%). The authors analyzed the relationship between vasospasm and Hunt & Hess grade, Fisher grade, hydrocehalus, age & hypertension among these 153 early operative cases after a 3 year follow up study. The incidence of vasospasm was significantly higher in the Hunt-Hess grade, Ⅲ, Ⅳ, Ⅴ and the Fisher grade Ⅲ, Ⅳ, compared to grade Ⅰ& Ⅱ, and also in preoperative hydrocehalus but it was insignificant in old and hypertensive patients. These results suggest initial severe direct insults and complicating preoperative hydrocephalus increase the chance of postoperative symptomatic vasospasm in this older aged, poorer grade study group.

성상세포종의 MIB-1, AgNORs 및 PCNA 발현에 대한 비교연구

최양문,김태영,김종문,윤기중,문형배 대한신경외과학회 1997 Journal of Korean neurosurgical society Vol.26 No.4

Flavobacterium meningosepticum 기원 Peroxidase의 정제 및 특성

최양문,조홍연,양한철 한국미생물생명공학회 ( 구 한국산업미생물학회 ) 1996 한국미생물·생명공학회지 Vol.24 No.5

Peroxidase를 Flavobacterium meningosepticum의 cell free extract로부터 약 8% 수율로 80배 정제하였다. Peroxidase의 분자량은 Sephacryl S-300으로 측정한 결과 220,000이였으며, subunits는 SDS-FAGE에 의해 54,000의 동일한크기의 4개로 구성되어진 것으로 추정되었다. 본 효소의 visible absorption spectra는 410, 500 및 630 nm에서 최대흡수를, 환원형에서는 435와 500 nm에서 최대흡수를 나타내어 전형적인 hemoprotein으로 관찰되었으며, 등전점은 4.1이였다. 수소공여체로서 N-ethyl-n-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)-m-toluidine (Toos)를 사용할 때 반응최적 온도는 50℃, 반응 최적 pH는 5.5였으며, carbonyl reagent 및 Hg^2+ 이온에 의해 효소활성저해를 받았다. Peroxidase was purified to homogeneity from cell free extract of Flavobacterium meningosepticum. The molecular weight of the enzyme estimated by gel filtration column chromatography was 220,000. A identical subunit (54,000) was detected on SDS-PAGE of the enzyme. From these results, the enzyme was supposed to have four identical subunits. On the basis of the visible absorption spectra of the purified enzyme, the enzyme was a typical hemoprotein. The isoelectric point of the enzyme was 4.1. On using N-ethyl-n-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)-m-toluidine (Toos) as a hydrogen donor, the enzyme showed optimum activity at the pH 5.5 and 50℃. The enzyme activity was inhibited by carbonyl reagent and Hg^2+.

Ohmic heating시 Chemical marker를 이용한 입자식품의 살균도 평가

최양문,배송환,박장우 안성산업대학교 1997 論文集 Vol.29 No.1

Chemical market를 이용한 살균도의 평가는 B. stearothermophilus의 포자를 이용하여 행하였으며 chemical market의 전구체로는 10% glucose를 같은 소고기에 첨가하여 meatball를 만들었으며 사용한 ohmic heater는 용량이 5KW 연속적 살균장치를 사용하였다. 미생물의 사멸율과 chemical market의 생성율은 meatball의 중앙부위와 표면이 거의 비슷하거나 표면에서 오히려 높게 나타났다. 같은 온도에서 가열시 포자의 사멸율과 chemical market의 생성량과는 좋은 상관관계를 나타내었다. 따라서 chemical market는 입자식품 ohmic heating시 미생물학적 안정성을 평가하는데 사용될 것으로 사료된다. Microbial validation of the chemical marker approach was carried out using B spore beads and meatball contained 10% glucose. Experiments were performed with the 5 KW ohmic heating system. The rate for microbial destruction and chemical marker formation at the center of the meatball were either similar or higher than those at the surface. There existed a reasonably good correlation between decadic reduction of the spore and marker yield under different conditions as long as the temperature was same. These microbial validation of the chemical marker approach can be used to help obtain the safety of ohmic heating of particulate foods.

Flavobacterium meningosepticum T - 2799 가 생산하는 nucleoside oxidase 와 peroxidase 에 관한 연구

최양문 한국농화학회 1992 Applied Biological Chemistry (Appl Biol Chem) Vol.35 No.5

Nucleoside의 대사경로는 nucleoside phosphorylase에 의한 phosphorylation 분해 경로를 포함하여 nucleoside에 작용하는 효소에 관한 연구는 많았지만 nucleoside의 산화에 대한 연구는 거의 보고된 바 없었다. 최근에 이르러 Isono 등이 Pseudomonas maltophilia로부터 분리 정제하여 그 효소학적 성질과 효소의 응용성에 관하여 보고하였다. 이들이 보고한 nucleoside oxidase의 stoichiometry는 1 mole의 nucleoside와 1 mole의 산소로 부터 H₂O₂의 생성없이 1 mole의 nucleoside 5'-carboxylic acid를 생성함을 밝혔다. 본 연구에서는 Pseudomonas maltophilia의 nucleoside oxidase와는 다른 stoichiometry를 갖는 nucleoside oxidase 즉, nucleoside의 5'위치의 CH₂OH를 carboxylic acid로 산화시 H₂O₂를 생성하는 새로운 종류의 효소를 토양에서 분리된 Flavobacterium meningosepticum-2799로부터 발견하였으며, 또한 Flavobacterium meningosepticum T-2799로부터 nucleoside oxidase 생산조건을 검토 중 hydrogen peroxidase가 nucleoside oxidise의 생산에 비례하여 생산되어지는 것을 발견하고 이 두 효소를 정제하여 효소학적 성질을 검토하였다. Nucleoside oxidase는 분자량이 480,000이였으며, subunit는 SDS-PAGE에 의해 81,000, 69,000, 32,000과 16,000이였다. Visible absorption spectra 결과로 본 효소는 hemoprotein이며, enzymatic method에 의해 1 mole의 nucleoside oxidise는 3 mole의 FAD를 포함하고 있는 hemoflavoprotein으로 확인되었다. 본 효소는 adenosine, inosine, thymidine, uridine, cytidine과 같은 nucleoside는 산화시켰으나, nucleotide와 ribose는 전혀 산화시키지 못하였다. Flavobacterium meningosepticum T-2799가 생산한 peroxidase는 분자량이 220,000이였으며, subunit는 분자량이 54,000으로 동일한 크기의 4개로 구성되어진 것으로 사료되어 현재까지 알려진 다른 기원의 peroxidase에 비해 분자량이 크며, subunit수가 많았다. 본 효소의 visible absorption spectra는 410, 500 및 630nm에서 최대흡수를, 환원형에서는 435와 500nm에서 최대 흡수를 나타내어, 다른 기원의 peroxidase와 마찬가지로 hemoprotein으로 관찰되었으며, 등전점은 4.1이었다. 본 효소의 기질특이성은 phenol, 2,4-dichlorophenol, N,N-diethylaniline, guaiacol, N-ethyl-N-(2-hydroxy-3-sulfop-ropyl)-m-toluidine, 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) 등의 검토된 모든 수소공여체에서 활성을 나타냈다. 이러한 폭 넓은 기질특이성은 horseradish의 peroxidase를 대체하여 임상진단시약으로 사용할 수 있음을 나타내고 있다.

Flavobacterium meningosepticum이 생산하는 Nucleoside Oxidase의 정제 및 Stoichiometry

최양문,조홍연,양한철 한국산업미생물학회 1993 한국미생물·생명공학회지 Vol.21 No.1

토양으로부터 nucleoside oxidase 생산균주를 분리하고 Flavobacterium meningosepticum으로 동정하였다. 생산균주의 cell free extract로부터 본 효소를 정재배율 180배, 수율 18%로 전기영동적으로 균일하게 정제하였으며 정제효소의 기질특이성을 검토한 결과 nucleoside만을 산화시키는 전형적인 nucleoside oxidase이었다. Adenosine을 기질로 한 표준효소반응계에서 stoichiometry를 검토한 결과 본 효소는 1 mol adenosine을 중간 생성물인 adenosine 5’-carboxylic acid 까지 2단계로 산화시키면서 동시에 2 mol H_2O_2를 생성하는 새로운 type의 nucleoside oxidase로 확인되었다. 본 효소의 높은 기질 특이성과 H_2O_2를 생성하는 반응성은 nucleoside의 신속 간편한 효소학적 정량법 및 임상진단용 시약의 개발에 응용될 수 있음을 시사하였다. A bacterial strain producing a nucleoside oxidase was isolated from soil and identified as Flavobacterium meningosepticum by its taxonomical characteristics. The enzyme has been purified 150-fold to electrophoretic homogeneity in an overall yield of 18% from the cell free extract of the producer. The enzyme catalyzed oxidation of only nucleosides related to both purine and pyrimidine with very high substrate specificity. The nucleoside oxidase was proved to be a noble enzyme by stoichiometry that 1 mol adenosine as a substrate was especially oxidized via adenosine 5’-aldehyde to 1 mol adenosine 5’-carboxylic acid with the formation of 2 mol H_2O_2.

14세 여아의 뇌실질내에 발생한 뇌경막과 연결이 없는 뇌수막종 : 증례보고 Case Report

최양문,김태영,김종문 대한신경외과학회 1996 Journal of Korean neurosurgical society Vol.25 No.5

Meningiomas are thought to arise from the arachnoid cap or meningothelial celns. This frequent apposition to the dura mater probably accounts for the usual attachment of the neoplasm to this layer. We report a case of intraparenchymal meningioma without dural attachment in a 14-year-old girl. A survey of the literature reveals that the majority of cases of meningiomas without dural attachment occur either in children of below the tentorium, and most of them located in the ventricle the deep sylvian fissure the suprasellar region. on the convexity posterior fossa and intraosseous location within the cranial vault. Intraparenchymal meningioma without dural attachment. however, are extremely rare. The uncommon locations of meningiomas at sites distant from the dura mater is believed to reflect the rare occurrence of arachnoid cap cells in the Virchow-Robin spaces along the cerebral vasculature or in the pial layers distant from the dura mater.

Flavobacterium meningosepticum T-2799 로 부터의 Nucleoside Oxidase 의 Stoichiometry 및 효소 기질특성

최양문,양한철,S . Koga,S . Shimizu,H . Yamada 한국미생물생명공학회 1992 한국미생물생명공학회 학술발표초록집 Vol.1992 No.-

Flavobacterium meningosepticum T - 2799 가 생산하는 Nucleoside Oxidase 와 Peroxidase 에 관한 연구

최양문 한국응용생명화학회 1992 한국응용생명화학회 학술발표회 Vol.1992 No.-

N/A