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        • 한국 군장병 삼일열 말라리아(P. vivax) 진단에 OptiMAL 검사와 GENEDIA Malaria (P. vivax) Ab Rapid I, II 검사의 비교

          조덕,임재균,이상오,소병조,임채승,양동욱 대한감염학회 2001 감염 Vol.33 No.4

          Background : The diagnosis of malaria has been usually made using microscopic examination of Wright stained thin blood films in Korean army. This method is labor-intensive, time consuming and requires the microscopic expertise. Therefore, the alternative techniques, rapid diagnostic test, have been sought for use in Korean army. We performed a comparison of the OptiMAL test with GENEDIA Malaria (P. vivax) Ab Rapid I, II to assess its sensitivity and specificity of Plasmodium vivax malaria. Methods : Blood specimen were collected from 51 patients who were presented and initially diagnosed for P. vivax by the microscopy of blood smears and from 30 control patients without malaria infection at the Capital Armed Forces General Hospital (CAFGH) between October 2000 and February 2001. Among the 51 patients, we also collected 24 samples from 24 patients at 2 or 3 days after therapy. The OptiMAL test and GENEDIA Malaria (P. vivax) Ab Rapid I, II were performed according to the manufacturer's instructions on all samples respectively. Results : Compared with the blood firm, sensitivities and specificities of the OptiMAL test, GENEDIA Malaria (P. vivax ) Ab Rapid I and GENEDIA Malaria (P. vivax) Ab Rapid II were 94.1∼100% (29/29), 80.4∼83.3%, 96.1 ∼96.7% respectively. One case was interpreted as 'undetermined' by OptiMAL test. In 24 patients during therapy, the sensitivities of the OptiMAL test, GENEDIA Malaria (P. vivax) Ab Rapid I and GENEDIA Malaria (P. vivax) Ab Rapid II on 8 specimens with mean 120/□ parasitemia and 16 specimens with negative parasitemia were 75∼43.8%, 87.5∼81,3%, 100∼100% respectively. Conclusion : Our data demonstrated that the sensitivity and specificity of the GENEDIA Malaria (P. vivax) Ab Rapid I were not satisfactory, but the sensitivity and specificity of the OptiMAL test and GENEDIA Malaria (P. vivax) Ab Rapid II were relatively high and useful diagnostic tests for diagnosis of , P. vivax in areas like the militaries where laboratory facilities are poor or non-existent. (Korean J Infect Dis 33:267∼272, 2001)

        • KCI등재
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          K562 세포주와 IL-2를 이용하여 말초혈액 단핵구로부터 자연살세포의 선택적 증폭

          조덕,신시원,박정선,강현규,김상기,Nguyen Pham,TNZhu XW,신명근,서순팔,양동욱,남종희,김영진,이제중 대한혈액학회 2006 Blood Research Vol.41 No.1

          배경: NK 세포를 이용한 면역치료를 위해서 사람의 말초혈액 단핵구로부터 NK 세포를 증폭시키려는 많은 연구가 있었다. 저자들은 말초혈액 NK 세포를 IL-2와 K562 세포주를 활용하여 선택적 증폭, 증폭된 NK 세포의 활성화 및 억제성 수용체의 발현 양상, 그리고 이들 NK 세포의 세포독 성능을 평가해 보았다.방법: 정상 성인 7명의 말초혈액 단핵구를 Cellgro SCGM 배지에 IL-2 (500IU/mL)와 feeder cell로 K562 세포주를 사용하여 14일간 배양을 하였고, NK 세포의 활성화 및 억제성 수용체를 분석하기 위해 배양을 하기 전의 NK 세포와 IL-2 단독배양법과 K562와 IL-2를 함께 사용한 배양법으로 72시간 배양한 NK 세포의 활성화 및 억제성 수용체를 분석하였다. 세포 독성능 평가는 증폭 전과 7일간 증폭된 NK 세포를 이용하여 K562 세포주를 표적세포로 하여 유세포를 활용한 독성 검사로 실시하였다. 결과: NK 세포는 7일간 배양 후 4.5배(범위 2.5~10) 증폭되었으며, CD3-CD56+ 세포는 56.5%를 보였다. IL-2 단독 혹은 IL-2와 K562를 함께 사용한 배양법에 의한 NK 세포의 수용체 중 CD158b (mean florescence intensity, MFI), CD158e1/e2 (MFI), NKp44 (MFI) 및 NKp46 (%)는 그 발현이 증가하였고, NKp30 (%), CD16 (MFI) 및 2B4 (MFI)는 그 발현이 감소하였다. 세포독 성능 평가에서 비 증폭된 NK 세포는 표적세포인 K562 세포주와 1:1 및 5:1에서 각각 9.0%와 27.6%를 살생했으며, 7일간 증폭된 NK 세포는 표적세포를 각각 36.9%와 57.2%를 살생했다.

        • KCI등재

          The M142T Mutation Causes B3 Phenotype: Three Cases and an in vitro Expression Study

          조덕,신동준,Mark Harris Yazer,임춘화,허영문,기승정,김수현,신명근,신종희,서순팔,양동욱 대한진단검사의학회 2010 Annals of Laboratory Medicine Vol.30 No.1

          The B3 phenotype is the most common B subtype in Korea. The B305 allele (425 T>C, M142T) was first reported in 2 Chinese individuals; however, it has not yet been reported in the Koreans, and the impact of the M142T mutation on the expression of the B3 phenotype has also not been studied. To resolve an ABO discrepancy between a group O neonate and her group O father and A1B3 mother, blood samples from these individuals and other family members were referred to our laboratory for ABO gene analysis. The B305 allele was discovered in the neonate (B305/O01), her mother (A102/B305), and her maternal aunt (B305/O02), while her father was typed as O01/O02. Transient transfection experiments were performed in HeLa cells using the B305 allele synthesized by site-directed mutagenesis; flow cytometric analysis revealed that this transfect expressed 35.5% of the total B antigen produced by the B101 allele transfect. For comparison, Bx01 allele transfects were also created, and they expressed 11.4% of the total B antigen expressed on the surface of B101 transfects. These experiments demonstrate that the M142T (425 T>C) mutation is responsible for the B subtype phenotype produced by the B305 allele. (Korean J Lab Med 2010;30:65-9)

        • KCI등재

          대립유전자특이중합효소연쇄반응법에 의한 간편한 ABO 유전형 검사

          조덕,전미정,오봉준,송정원,신명근,신종희,서순팔,양동욱 대한진단검사의학회 2005 Annals of Laboratory Medicine Vol.25 No.2

          배경 :ABO 유전형 검사는 간혹 ABO 불일치나 아형을 결정할 때 혈청학적 검사보다 유용한 정보를 제공할 수 있다. 저자들은 제한효소를 사용하지 않고A, B, O allele 뿐 아니라 한국인에서 흔한 cis-AB allele를 검출할 수 있는 간편한 allele-specificpolymerase chain reaction (AS-PCR)을 개발하고자 하였다. 방법 : AS-PCR은 A, B, O allele의염기서열 중 261, 526, 803번째의 염기서열 차이를 이용하여 ARMS (amplification refrac-tory mutation system)으로활용하여 고안한 시발체를 이용하였다. PCR은 2002년 7월부터 2003년 2월까지 광주전남 적십자혈액원의 공혈자 중 기존의 polymerase chain reaction-restric-tion enzyme length polymorphism (PCR-RFLP)법으로 유전형 검사를 실시한 후 -70℃에서 보관하고 있던 60명의 DNA 검체에 실시하였다.결과 :새로 고안한 PCR을 실시한 결과, 기존에 PCR-RFLP로실시했던 결과 즉, A/O (n=10), A/A (n=5), B/O (n=10),B/B (n=5), O/O (n=10), cis-AB/A (n=5), cis-AB/B (n=10), cis-AB/O (n=5)와 모두 일치하였다. 결론 : 새로 고안한 PCR은 한국인의 A, B, O, cis-AB allele들을 검출하는 ABO 유전형 검사로 간편하고, 정확한 방법이다. Background : Genotyping of ABO gene could be more informative and valuable than serological typing in some situations such as the resolution for ABO discrepancy between the cell typing and serum typing and determination of A and B subgroups. We developed a simple allele-specific polymerase chain reaction (AS-PCR) method without the use of any restriction enzymes to detect the A, B, O, and cis-AB alleles for Koreans. Methods : An AS-PCR was designed with amplification refractory mutation system (ARMS) at nt (nucleotide) 261 (exon 6) and at nt 526, 803 (exon 7) of ABO gene to detect specific nucleotide sequence differences between the ABO alleles. We tested for ABO genotyping 60 DNA samples previously tested by PCR-RFLP and stored at -70℃. These samples had been obtained from blood donors recruited at the Gwangju-Chonnam Red Cross Blood Center between July 2002 and February 2003. Results : With our new PCR method, the genotypes of the 60 samples were found to be A/O (n=10), A/A (n=5), B/O (n=10), B/B (n=5), O/O (n=10), cis-AB/A (n=5), cis-AB/B (n=5), and cis- AB/O (n=10), which were the same results obtained previously with PCR-RFLP. Conclusions : Our AS-PCR is a simple and accurate method for the detection of A, B, O, and cis- AB alleles for Koreans

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          급성백혈병에서 CD56 발현에 따른 아형, 핵형 및 면역표현형의 특성

          조덕,김종필,신명근,김수현,이제중,정익규,김형주,기승정,신종희,서순팔,양동욱 대한진단검사의학회 2003 Annals of Laboratory Medicine Vol.23 No.5

          배경 : CD56 항원은 NK 세포의 면역표지자로 널리 알려져 있으나, 급성백혈병을 포함하여 NK 세포 이외의 여러 조직에서도발현된다. 급성백혈병에도 CD56은 발현되는데 이에 따른 임상적의는 아형에 따라 의미가 달라서, t(15;17)을 동반한 급성전골수구성백혈병, t(8;21)을동반하는 AML, 그리고 일부 ALL에서발현된 경우는 불량한 예후를 보인다고 보고되었다. 이에 저자들은 급성 백혈병 262명의 CD56의 발현 유무에 따른 형태학적, 면역학적 및 세포유전학적인 특징들을 분석하고자 하였다.방법 : 1999년 1월부터 2003년 5월까지 전남대병원 진단검사의학과에 CD56이 포함된 면역표현형 검사가 의뢰된 AML 153예,ALL 109예를 대상으로 FAB 분류에 의한 형태학적 특성과 면역표현형 및 세포유전학적인 검사 결과를 후향적으로 분석하였다.결과 : CD56 발현은 AML 163예 중 47예(28.8%)였으며, ALL은 109예 중 4예(3.7%)였다. ALL에서는 CD56발현 유무에 따라통계적으로 유의한 차이를 보인 혈액학적 항목들은 없었고, AML에서는 AML-M2, t(8;21) 그리고 CD34 및 HLA-DR(+)에서높은 발현율, AML-M3, t(15;17)에서는 낮은 발현율을 보였다.

        • KCI등재후보
        • KCI등재후보

          대량 검체에서 ABO 유전형 분석시 Real-time PCR법의 적용

          조덕,송혜림,원은정,신동준,신민호,권소영,조남선,신명근,양동욱,권순석 대한수혈학회 2011 大韓輸血學會誌 Vol.22 No.2

          Background: For large-scale population screening, the method of ABO genotyping needs to be simple, accurate and cost-effective. The real-time PCR method has been introduced and it is suitable for dealing with large numbers of specimens. In this study, we examined the ABO genotyping of 1,700 residents of Jeollanam-do for an epidemiologic study by applying the real-time PCR method. Methods: Genomic DNA was extracted from the peripheral blood samples of 1,700 residents of Jeollanam-do between July 2004 and January 2006 and these samples were stored at −70oC. The ABO genotype in all the samples was determined by four-color real-time PCR using displacing probes and three cases that had an atypical real time PCR pattern were confirmed by direct sequencing and PCR-based cloning of exons 6&7 of the ABO gene. Results: The genotyping results of 1,700 samples included O/O (25.6%), A/A (9.1%), A/O (29.1%), B/B (4.5%),B/O (19.8%) and A/B (11.9%), and the allele frequencies of O, A and B were 50.1%, 29.5% and 20.4%,respectively. The frequency of the O allele was lower in the residents of Jeollanam-do than that previously reported for the residents of Kangwon-do (P=0.014), while the frequency of the A allele was higher in the residents of Jeollanam-do than that previously reported for the residents of Kangwon-do (P=0.003). The three cases with atypical results were revealed to be B101/O24, Bvar(296C>T)/O01 and B101/Ovar(801G>T). It takes 6 days to perform ABO genotyping on 1,700 samples by a calculation per test. Conclusion: ABO genotyping by real-time PCR using displacing probes can be useful for mass screening for ABO genotyping. In Korea, the frequency of the ABO allele was significantly different among different regions.

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