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임정택 ( Jeongtaek Im ),전경미 ( Kyongmi Chon ),백민경 ( Min Kyoung Paik ),박경훈 ( Kyung-hun Park ) 한국환경농학회 2016 한국환경농학회 학술대회집 Vol.2016 No.-
최근 농약사용이 꿀벌에 미치는 영향에 대한 연구가 활발해지고 있으며 OECD에서는 꿀벌 유충 독성시험법 및 semi-field에 대한 시험법 등 꿀벌 안전성을 확인하기 위한 다양한 시험법을 구축하고 있다. 국내에서도 농약등록단계의 꿀벌 유충 독성시험법 도입의 필요성 및 타당성을 검토 중에 있으며 시험조건 확립에 대한 연구도 같이 진행하여 유충 단일노출 독성시험법에 대한 연구결과가 발표되기도 하였다. 본 연구에서는 최근 OECD 가이드라인에서 개정된 꿀벌 유충 반복노출 독성시험법에 대해 구축하고자 하였다. 본 시험법의 음성대조군은 증류수와 acetone을 사용하였으며 양성대조물질로는 dimethoate과 fenoxycarb를 사용하였다. 식이에 포함된 dimethoate의 양은 0.054 ㎍/㎕ diet, fenoxycarb의 양은 0.36ng/㎕ diet가 되게 하였다. 각 시험은 48 well plate에 3봉군에서 가져온 유충 1령을 최소 12마리씩 3반복으로 36마리 이상이 되게 하여 이충하였다. 시험 첫날 (D1)에 well plate에 이충용기(grafting cell)를 넣고 유충먹이 A를 20㎕, 시험3일차(D3)에 유충먹이 B에 시험용액을 혼합하여 20㎕ 공급하였고 시험 4-6일차에는 유충먹이 C에 시험용액을 혼합하여 30, 40, 50㎕ 씩 공급하였다. 시험기간 동안 plate를 34~35℃ 상태의 항온인큐베이터에 설치된 밀폐형 desiccator cabinet에 넣어 시험하였다. 유충기간동안(D1-D8) K2SO4 포화용액을 사용하여 95%±5% relative humidity (RH)를 유지하였으며, 용단계(pupation, D8-D15)에서는 NaCl 포화용액을 이용하여 80%±5% RH로 우화단계(emergence, D15-D22)에서는 50% 상대습도를 유지하였다. 우화단계에서는 자당용액을 공급할 수 있는 우화박스에 plate를 옮겨 관찰하였다. D4-D8에서 유충치사율과 D22에서 우화율을 측정하여 음성대조군과 양성대조군이 시험법 기준에 적합한지 확인하였다. OECD guideline에 따르면 음성대조군의 유충 누적치사율은 15% 이하, 우화율은 70% 이상이 되어야 하며 양성대조군 dimethoate의 유충 누적치사율은 50% 이상, fenoxycarb의 우화율은 20% 이하가 되어야 한다.
Mancozeb와 Pendimethalin에 의한 CHL Cell의 소핵생성과 세포사멸 여부 규명
문지홍 ( Ji-hong Moon ),전경미 ( Kyongmi Chon ),백민경 ( Min-kyoung Paik ),박경훈 ( Kyung-hun Park ) 한국환경농학회 2018 한국환경농학회 학술대회집 Vol.2018 No.-
Mancozeb is a widely used broad-spectrum fungicide known to be genotoxic and induces tumors in rodents at various sites. Pendimethalin is a member of family dinitroanaline of herbicides. Pendimethalin are well known to be more or less toxic to all living organisms. In this study, we investigated whether mancozeb and pendimethalin induce micronucleus and apoptosis in CHL (Chinese hamster lung) cells through flow-cytometry analysis for high throughput. We identified mancozeb (20, 40, 80 ug/ml) and pendimethalin (5, 10, 20 ug/ml) mediated micronuclei formation and apoptosis in a dose dependent manner. We evaluated an increase of micronuclei formation and apoptosis by flow-cytometry analysis and microscopy analysis. We identified that MMC (mitomycin) induced micronuclei formation as positive control and negative control (DW) has no effect on CHL cells. We demonstrated that mancozeb and pendimethalin may induce micronuclei formation and apoptosis in CHL cells. We also suggest that flow-cytometry analysis could be efficient high-throughput method for quantifying the formation of micronuclei.
경피를 통한 Deltamethrin의 반복 노출과 흰쥐의 뇨중 3-PBA 배설량과의 상관성 연구
박지현 ( Jihyun Park ),김아름누리 ( Areumnuri Kim ),전경미 ( Kyongmi Chon ),박경훈 ( Kyung-hun Park ),문병철 ( Byeong-chul Moon ),백민경 ( Min Kyoung Paik ) 한국환경농학회 2016 한국환경농학회 학술대회집 Vol.2016 No.-
3-PBA는 대부분의 pyrethroid계 농약에서 공통적으로 대사되기 때문에 pyrethroid계 농약의 생물학적 모니터링 지표로 많이 사용되고 있다. 본 실험에서는 랫드에 deltamethrin을 반복적으로 노출하여 뇨중 대사체인 3-PBA 배설량을 확인하고, deltamethrin과 뇨중 3-PBA의 상관관계를 확인하고자 하였다. Deltamethrin의 노출농도는 실제 농작업자가 농업현장에서 농약의 조제 및 살포과정에서 노출되는 실제 노출수준으로 시험하기 위하여 deltamethrin 1% 유제사용에 따른 KoPOEM 산출량을 저농도로 하여 중농도와 고농도를 설정하였다. 실험은 8주령의 Spraque-Dawley 수컷 흰쥐에 농작업자의 주농약노출경로인 피부노출로 deltamethrin을 처리하였다. 반복노출조건은 deltamethrin 1% 유제의 안전사용지침에 근거하여 1주일 간격으로 3회 노출하였으며, 반복노출에 따른 뇨중 3-PBA 분석을 위해 deltamethrin 노출직후와 최종 노출 1주일후 뇨시료를 수거하였다. 뇨중 3-PBA 분석을 위해 HCl가 수분해를 거쳐 N-tert.-butyldimethylsilyl-N-methyltrifluoroacetamid (MTBSTFA)를 이용한 유도체화 과정을 거친 후 GC/MS로 분석하였다. 시험결과, deltamethrin의 반복노출시 처리농도 증가에 따라 뇨중 3-PBA 배설량은 높은 상관관계를 보이며 증가하는 것으로 나타났다(R²=0.99). 또한 deltamethrin의 반복노출 횟수에 따라 뇨중 3-PBA 배설량은 증가하나 최종 노출 1주일후의 뇨에서는 유의적으로 감소하였다. 본 연구결과는 농약에 반복적으로 노출되는 농작업자의 만성적인 농약노출에 따른 배설량 추이를 살펴보기 위한 자료로 활용될 것이다.