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        Caeoma makinoi에 의한 매실나무 꽃눈녹병의 발생 보고

        이승열 ( Seung-yeol Lee ),이연희 ( Yeon-hee Lee ),박수진 ( Su-jin Park ),이한동 ( Han-dong Lee ),이재진 ( Jae-jin Lee ),강인규 ( In-kyu Kang ),이향범 ( Hyang Burm Lee ),정희영 ( Hee-young Jung ) 한국균학회 2016 韓國菌學會誌 Vol.44 No.4

        Abnormal chloranthy was observed on Prunus mume trees grown in an orchard in Uiseong, Gyeongbuk province, Korea in 2015. Flower buds showing chloranthy were covered with numerous orange-colored sori, which were confirmed to contain spermogonia and aeciospores by stereo microscopy and light microscopy. When observed using scanning electron microscope, the aeciospores were globose, ellipsoid, or ovoid, and measured 22.8~35.6 × 19.8~36.8 μm, with a verrucae wall ornamentation. To construct a phylogeny, the large and small subunit regions of rDNA were sequenced and compared with those of allied species by the maximum likelihood method. The isolated fungus species showed high similarities with Caeoma makinoi (Teleomorph: Blastospora smilacis), which was previously isolated from P. mume in Japan. Therefore, we initially report this fungal agent parasitic on P. mume as C. makinoi in Korea and name the disease it causes as “flower bud chloranthy disease”.

      • KCI등재

        항 Pseudomonas tolaasii 및 Pseudomonas agarici 항체의 면역측정법을 위한 평가와 그 이용

        전낙,이향범,손동화,유승헌,Jeon, Nak-Beom,Lee, Hyang-Burm,Shon, Dong-Hwa,Yu, Seung Hun 한국식물병리학회 2003 식물병연구 Vol.9 No.2

        느타리버섯에 발생하여 갈색부패병을 일으키는 P. tolaasii 및 P.agarici 를 면역화학적 방법으로 신속하게 검출하기 위한 항체를 생산하였고 면역확산법과 ELISA 로 본 항체의 특이성을 조사하였다. $\alpha$-P tolaasii 항체는 P. tolaasii와 반응하여 선명한 침강선을 형성하지 않아 P. tolaasii 에 대하여만 특이적으로 반응하는 항체임을 알 수 있었다. 한편 $\alpha$-P. agarici 항체는 P.agarici뿐만 아니라 다른 세균에 대해서도 침강선을 형성하지 않는 특징을 나타내었다. 비경합 간접 ELISA의 표준곡선으로부터 P.agarici의 검출에 대하여 최고 발색치의 50% 갑을 나타내는 균의 밀도는 $2{\times}10^4$ cfu/ml로 나타났으며, 검출한계농도는 $2{\times}10^3$ cfu/ml 이었다.${\alpha}$-P. agarici 항체는 P. tolaasii의 특이적인 검출에도 효과를 나타냈다. ${\alpha}$-P. tolaasii, ${\alpha}$-P. agarici 항체를 이용하여 확립한 ELISA법은 직접 균체나 버섯 자실체내 P. tolaasii 와 P. agarici의 신속한 검출을 가능하게 하였고, P. tolaasii 와 P. agarici에 오염된 시료를 간단하게 진단하는데 아주 유용하게 사용될 수 있을 것으로 판단되었다. To produce antibodies against Pseudomonas tolaasii and P. agarici, lyophilized P. tolaasii and P. agarici ($5{\times}10^7$ cfu/ml) and Freund, s adjuvant were immunized into rabbits 4 times. The specificity and sensitivity of the antibodies were evaluated by immunodiffusion test and indirect enzyme-linked immunosorbent assay (id ELISA). The ${\alpha}$-P. tolaasii antibody was very specific only against P. tolaasii, while ${\alpha}$-P. agarici antibody was not specific and showed a high cross reactivity toward P. tolaasii with detection limit concentration of $2{\times}10^3$ cfu/ml. However, the cross reactivities of ${\alpha}$-P. agarici antibody toward the related species including P. reactans were very low. Our results showed that ${\alpha}$-P. tolaasii and ${\alpha}$-P. agarici antibodies against P. tolaasii and P. agarici, respectively, might be useful for rapid and simple detection of the causal agents of bacterial brown and yellow blotches in cultivated oyster mushrooms.

      • KCI등재
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        고추 탄저병균(炭疽病菌)의 종자전염(種子傳染)에 관(關)한 연구(硏究)

        유승헌,박종성,이향범,김홍기,Yu, Seung Hun,Park, Jong Seong,Lee, Hyang Burm,Kim, Hong Gi 충남대학교 농업과학연구소 1987 Korean Journal of Agricultural Science Vol.14 No.1

        고추 종자에서 Colletotrichum acutatum, C. coccodes, C.dematium 및 C. gloeosporioides 등 4종의 탄저병균(炭疽病菌)이 검출(檢出)되었다. 그중 C.dematium과 C.gloeosporioides가 높은 비율(比率)로 검출(檢出)되었으며, 감염율(感染率)이 높은 종자시료(種子試料)는 각각(各各) 최고 84% 및 28%의 감염율(感染率)을 나타내었다. 반면에 C.acutatum과 C.coccodes는 각각 1개의 종자 시료(試料)에서 1% 및 2%의 낮은 비율(比率)로 검출(檢出)되었다. 표준습지법(標準濕紙法)이 냉동습지법(冷凍濕紙法)이나 한천배지배양법(培地培養法)에 비하여 종자상의 탄저병균(炭疽病菌) 검출(檢出)에 효과적(效果的)이었다. C.dematium과 C. gloeosporioides의 종자내 감염부위(感染部位)를 조사(調査)하였던 바, 종피(種皮)뿐 아니라 종자내 깊숙이 배유(胚乳)와 자엽(子葉)에 까지 감염(感染)되어 있음이 확인되었으나 종피(種皮) 감염율(感染率)이 높았다. C.dematium과 C.gloeosporioides 감염종자(感染種子)를 한천배지와 살균토양에 옮겨 발아율과 유묘생육상황(幼苗生育狀況)을 조사한 결과, 감염종자(感染種子)는 종자부패(種子腐敗), 모잘록, 유묘고사(幼苗枯死) 및 자엽(子葉)과 하배축(下胚軸)의 변색(變色)을 초래하였다. 접종실험(接種實驗) 결과 C.acutatum은 고추의 적과(赤果)에 병원성(病原性)이 있었고 C.coccodes는 고추 적과(赤果)에 강한 병원성(病原性)이, 고추 잎에 약한 병원성(病原性)이 있었다. C.dematium은 고추 잎과 청과(靑果)에 강한 병원성(病原性)이 있었고, C.gloeosporioides 는 고추 잎과 청과(靑果) 및 적과(赤果)에 병원성이 있었다. 이들 4종의 종자전염성(種子傳染性) 탄저병균(炭疽病菌)의 고추 이외의 다른 작물(作物)에 대한 병원성도 조사하였다. Colletotrichum acutatum, C. coccodes, C. dematium and C. gloeosporioides were detected in seed samples of red pepper (Capsicum annuum). C. dematium and C. gloeosporioides were the predominant species, maximum seed infection of the species in some samples were 84% and 28%, respectively. C. acutatum and C. coccodes were recorded only in low percentages of 1-2. The blotter method proved more suitable for detecting Colletotricum spp. than the deep freezing blotter or agar plate methods. Plating of seed components showed that C. dematium and C. gloeosporioides were recovered more frequently from seed coat, and decreasing amounts of infection were observed in the endosperm and cotyledon. Seed-borne C. dematium and C. gloeosporioides caused seed rot, damping-off, seedling blight and brown discoloration of cotyledon and hypocotyl when infected seeds were sown in agar of test tube or in soil. Inoculation experiments showed that C. acutatum was pathogenic to red fruit of red pepper and C. coccodes was highly pathogenic to red fruit and weakly pathogenic to leaf of the plant. C. dematium was highly pathogenic to leaf and green fruit and C. gloeosporioides was pathogenic to not only leaf but also green and red fruits. Host range of the four seed-borne species of Colletotrichum was also investigated.

      • KCI등재후보

        단보 : 국내 야생화들로부터 국내 미기록 효모, Rhodosporidium fluviale, Rhodosporidium paludigenum과 Candida sp. 80-J-3, Kluyveromyces thermotolerans의 특성

        현세희 ( Se Hee Hyun ),이향범 ( Hyang Burm Lee ),이종수 ( Jong Soo Lee ) 한국균학회 2013 韓國菌學會誌 Vol.41 No.3

        충남 금산군과 전남 완도군, 제주도 송악산 등지에서 서식하고 있는 야생화들로부터 Rhodosporidium fluviale 201-C-1과 Kluyveromyces thermotolerans 150-JE-2(1), Rodos-poridium paldigenum과 ㅊ무양ㅁ sp. 80-J-3등의 국내 미기록 효모들을 분리, 선발하여 이들의 미생물학적 특성들을 조사하였다. Rhodosporidium fluviale 201-C-1은 내염성의 무포자 효모로 의균사를 형성하였고 urease 활성을 갖고 있었다. Kluyveromyces thermotolerans 150-JE-2(1)는 내당성과 내염성을 가진 무포자효모로서 30℃, pH 4.0~6.0에서 잘 생육하였다. Candida sp. 80-J-3과 Rhodosporidium palu-digenum 86-J-1 균주들은 모두 무성생식을 ㅎ는 무포자 효모들이었고 YPD배지, Vitamin-free 배지와 5% NaCI을 함유한 YPD 배지 등에서 잘 생육하였다. 또한 Candida sp. 80-J-3 균주의 urease 활성은 음성이었으나 Rhodosporidium paludigenum 86-J-1 균주는 urease 활성이 양성이면서 pH 7.0~8.0에서 잘 생육하였다. Rhodosporidium fluviale 201-C-1 and Kluyveromyces thermotolerans 150-JE-2(1) were isolated from wild flowers in Geumsan-gun, Chungcheongnam-do and Wando-gun, Jeollanam-do, respectively. Rhodosporidium Paludigenum 86-J-1 and Candida sp. 80-J-3 were also isolated from flowers in Jeju island, Korea. Characteristics for these yeasts were not reported before. Therefore, morphological and physiological characteristics for these yeasts were investigated in this study. R. fluviale 201-C-1 was halophilic asporogenous yeast and formed Pseudomycelium. It also grew at 30°C and pH 4.0-6.0. K. thermotolerans 150-JE-2(1) was sugar-tolerant and halotolerant asporogenous yeast. It formed pseudomycelium and showed positive urease activity. Candida sp. 80-J-3 and R. Paludigenum 86-J-1 were asporogenous yeasts, and grew well in yeast extract-peptone dextrose(YPD) medium, potato-dextrose medium as well as vitamin-free medium and YPD medium containing 5% NaCI.

      • KCI등재

        적정 구성 배양 HCT-8 기반 대장암 스페로이드의 암 줄기세포능 및 항암제 내성 평가의 비교 평가 연구

        이승준(Seung Joon Lee),김형갑(Hyoung-Kab Kim),이향범(Hyang Burm Lee),문유석(Yuseok Moon) 한국생명과학회 2016 생명과학회지 Vol.26 No.11

        암은 비균질적으로 구성된 세포집합체로 간질세포 및 세포 외 기질로 구성된 미세환경과 상호작용에 의해 발병, 전이, 심화되는 복잡한 질병이다. 하지만, 기존의 2차원 배양 세포 기반 플랫폼이 3차원적 생체 환경과 암의 비균질성을 대표하기 힘든 한계를 극복하기 위해 스페로이드 배양 세포를 비롯한 다양한 플랫폼 개발이 활발해지고 있다. 본 연구에서는 특히 감염, 염증 및 식이적 환경성 영향력에 민감한 HCT-8 대장암 세포주를 기반으로하여 3차원 스페로이드 배양법을 보다 효과적인 방법으로 개선하고, 대장암 스페로이드 세포를 기반으로 암의 비균질적인 특질과 항암내성 연구의 간단하고 개선된 플랫폼을 제시고자 하였다. 3차원 배양법 최적화를 위해 물리적 배양환경 조성과 배양배지 구성에 따른 스페로이드 형태형성을 비교 분석하고 암 줄기세포군의 증가 양상을 확인한 결과, 필수요소로 구성된 제한 배지와 균일한 형태의 비부착성 표면 배양접시에서 배양된 스페로이드가 균일한 형태의 구형을 형성하고 암 줄기세포군이 증가함을 확인하였다. 대장암 스페로이드 세포를 기반으로 대장암 치료제인 5-Fluorouracil (5-FU)에 대한 화학적 감응성 변화를 측정한 결과, 암 줄기세포가 5-FU에 대한 화학적 감수성 저해의 원인이 되며, 최적배양 조건에서 암 줄기세포의 약제 내성의 표현이 증대되었다. 이는 암줄기세포의 항암제 내성에 대한 잠재적 위험성을 내포하는 것으로, 이 방법론은 감염, 염증 및 식이적 요인과 연관된 대장암 스페로이드 세포 기반 항암제 약물반응을 검증하기 위해 효과적이면서 간소한 시험법으로 활용될 수 있을 것이다. Cancer is a complex disease heterogeneously composed of various types of cells including cancer stem-like cells responsible for relapse and chemoresistance in the tumor microenvironment. The conventional two-dimensional cell culture-based platform has critical limitations for representing the heterogeneity of cancer cells in the three-dimensional tumor niche in vivo. To overcome this insufficiency, three-dimensional cell culture methods in a scaffold-dependent or –free physical environment have been developed. In this study, we improved and simplified the HCT-8 colon cancer cell-based spheroid culture protocol and evaluated the relationship between cancer stemness and responses of chemosensitivity to 5- Fluorouracil (5-FU), a representative anticancer agent against colon cancer. Supplementation with defined growth factors in the medium and the culture dish of the regular surface with low attachment were required for the formation of constant-sized spheroids containing CD44<SUP>+</SUP> and CD133<SUP>+</SUP> colon cancer stem cells. The chemo-sensitivities of CD44<SUP>+</SUP> cancer stem cells in the spheroids were much lower than those of CD44<SUP>-</SUP> non-stem-like cancer cells, indicating that the chemoresistance to 5-FU is due to the stemness of colon cancer cells. Taken together, the inflammation and oncogenic gut environment-sensitive HCT-8 cell-based colon cancer spheroid culture and comparative evaluation using the simplified model would be an efficient and applicable way to estimate colon cancer stemness and pharmaceutical response to anticancer drugs in the realistic tumor niche.

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