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- 저자 : 이삼규 (검색결과 5 건)
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관절통의 정량화를 위한 행동검사법들이 알려져 왔으나, 동적인 정량화에 관한 연구는 많지 않아, 본 연구에서는 백서의 단일 슬관절염 모델에서 역동적이면서 편리한 방법으로 관절통의 정량화 가능성을 알아보고자 하였다. 먼저 백서의 출발역, 도착역(회귀역) 및 그 역간을 잇는 복도로 구성된 쥐장을 구성하고, 출발역에서는 빛과 천적의 소리를 이용하여 백서의 자연스런 이동을 유발하고 도착역 바닥엔 열선을 배치하여 순간 가온자극에 의해 회귀케 하여 왕복 보행을 유도하였다. 백서의 보행분석 결과를 토대로 복도의 바닥은 족저압 센서들을 배열하여 동적인 객관적 통증 측정기(Dynamic Objective Measurement System of Pain: DOMS-P)를 완성하였고, 얻어진 아날로그값을 디지털값으로 변환 후 그 결과를 압력측정 소프트웨어(Pressure Measurement System: PMS)로 처리하였다. 관절염 유발을 위하여 생후 8주의 수컷 백서 45마리가 사용되었으며, papain 주사로 좌측 슬관절염을 유발하였고, 유발 후 2주째 슬관절 단순방사선 검사, 골주사검사 및 조직검사로 관절염 발생을 확인한 후 보행하는 백서에서 각 다리의 족저압으로 체중부하량을 측정하였다. 다시 동일 슬관절염 부위에 triamcinolone 주사로 관절염 회복을 유도하고, 회복 유도 2주째 슬관절 단순방사선 검사, 골주사검사 및 조직검사로 관절염 회복을 확인한 후 보행하는 백서에서 각 다리의 족저압을 측정하였다. 정상 대조군 백서의 좌측 슬관절강내에도 동량의 생리식염수가 주사되었다. 정상 백서군, 관절염 유발된 백서군 및 관절염 회복된 백서군 간의 좌측 슬관절 하지에서의 체중부하는 총체중에 대한 좌측 하지에서의 체중부하비, 우측 하지에 대한 좌측 하지에서의 체중부하비로 비교하여 다음의 결과를 얻었다. 1) 좌측 슬관절염 유발군에서 총 체중에 대한 좌측 하지에서의 체중부하율은 15.69±3.23%으로, 정상 백서군의 26.42±4.34%의 값과 스테로이드 관절강내 주사로 슬관절염이 회복된 백서군에서의 25.09±5.65%의 값에 비해 유의한 저하를 보였다(p<0.01). 2) 일반적으로 정상 백서에서는 전족에 대한 후족의 체중부하비가 1보다 큰 값을 갖는데, 좌측 슬관절염 유발군에서 0.94±0.40로 1보다 작았으며, 이는 정상 백서군의 1.59±0.36의 값이나, 슬관절염 회복군의 1.68±0.46의 값에 비해 유의한 저하를 보였다(p<0.01). 3) 우측 후족에 대한 좌측 후족의 체중부하에 있어서도 좌측 슬관절염 유발군에서 0.66±0.21로서, 정상 백서군의 1.06±0.38의 값이나, 슬관절염 회복군의 0.86±0.20의 값에 비해 유의한 저하를 보였다(p<0.01). 슬관절염 유발군에서 정상 백서군과 슬관절염 회복군에 비해 좌측 하지의 체중탈부하가 유의하게 발생되었고 그 정도를 보행중인 백서에서 측정이 가능하다는 실험 결과로 보아 단일 관절염 백서 모델에서 DOMS-P를 이용한 동적인 관절통의 정량화가 가능하며, 이러한 방법은 관절통 치료약물들의 효과를 객관적으로 알기 위한 방법으로 이용될 수 있을 것으로 생각된다. In spite of various attempts to investigate the quantification of arthritic pain, the dynamic quantification of monoarticular arthritic pain has not been cleared yet. The object of this study is to develop a dynamic and convenient measurement device for quantifying monoarticular arthritic pain in Sprague-Dawley(SD)rats. A new model called "Dynamic Objective Measurement System of Pain(DOMS-P)" was developed on the basis of measurement of weight-load on each leg with the rats allowed to pass freely on the floor paved by the foot pressure sensors of force sensing resister. Using this device, the weight-load on each paw was analyzed before and after induction of arthritis by papain and cysteine, and after resolution of arthritis by triamcinolone. The induction and resolution of arthritis were confirmed by radiographic study, bone scan with ^(99m)Tc and histologic findings. The severity grad was made by bone scan. The weight-load ratio of the affected hind limb to total body weight and that of the affected hind limb to the unaffected were measured for comparison among control group, arthritis-induced group, the arthritis-resolved group. In the arthritis-induced group, the weight-unloading of the affected hind limb was observed significant on paw-pressure measurement by DOMS-P(p<0.01). After the intra-articular injection of triamcinolone into arthritis knee, the weight-loading on the affected limb was recovered to the level of normal controls on paw-pressure measurement by DOMS-P(p<0.01). The ^(99m)Tc uptake ratio of the affected to the unaffected was increased in the arthritis-induced group and was normalized in the arthritis-resolved group with intra-articular injection of triamcinolone(p<0.01). Finally, we came to the conclusion that the arthritis-induced and -resolution were well reflected on the weight-load measurement of mono-articular arthritis paw by the method of DOMS-P. These results prove that DOMS-P is an effective device for the decision of analgesic effect as well as for the quantification of arthritic pain.
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Retinoic acid에 의한 IgA 생산과 IgA- 분비 세포수의 변화
Retinoic Acid(RA)는 세포분화를 유도하는 기능이 있으면서 또한 면역조절기능이 있다고 알려져 있다. 본 연구에서는 RA가 항원 (ovalblimin, OVA)과 함께 비경구적으로 투여시 항원-특이 IgA 항체 생산과 IgA 분비 세포 수에 미치는 영향을 관찰하였다. 1) 항원 (OVA)을 alum과 함께 투여하여 생산되는 혈청내 IgA의 양은 항원의 구성 및 경로에 따라 큰 차이가 없었으나 OVA에 특이하게 반응하는 IgA의 양은 항원에 RA 첨가하여 피하로 투여시에 가장 높은 항체의 생산을 관찰하였고 그 정도는 경구투여시의 양보다 현저하였다. 2) 항원을 투여한 마우스의 비장세포를 적출 하여 ELISPO를 실시하여 IgA 분비세포수를 측정하였을 때, RA를 항원에 첨가하여 피하로 투여시에는 항원을 구강으로 투여하였을 때와 비슷하게 세포수가 증가하였다. 그러나 항원만을 피하로 투여하였을 때는 대조군과 차이가 없었다. 그리고 spot의 크기에서는 항원을 구강으로 투여하였을 때 가장 크며 RA에 의해서는 약간의 증가가 관찰되었다. 3) 항원을 투여한 마우스의 비장세포를 적출 하여 lipopolysaccharide로 자극하면서 배양 시에 생산되는 IgA의 양은 항원을 구강으로 투여한 경우와 항원에 RA를 첨가하여 피하로 투여한 마우스의 비장세포에서 많았으며 항원만을 피하로 투여한 경우에는 대조군과 큰 차이가 없었다. 4) 항원의 투여방법에 따라 TGF-β1의 발현을 RT-PCR방법에 의해 조사하였던 바 항원을 구강이나 피하로 투여시에는 TGF-β1의 발현이 대조군에 비해 현저히 증가되어 있으나 RA를 투여한 군에서는 대조군과 차이가 없었다. 이상의 실적으로 보아 RA는 IgA 분비 세포의 분화를 유도하나 TGF-β1의 발현을 오히려 감소시킴을 알 수 있었다. It is known that retinoic acid (RA) induces cell differentiation and has immune modulatory effects. In this study, the author observed the effects of RA on the antigen-specific IgA production and the number of IgA-secreting cells induced by subcutaneously administered ovalbumin (OVA). 1) Serum IgA level was not affected by the antigenic composition or route of administration. Antigen-specific IgA was produced most abundantly when OVA was administered subcutaneously with RA (RA group). The level of IgA was higher than in the group administered with OVA intragastrically (IG group). 2) The number of IgA secreting cells counted with ELISPOT assay was increased when OVA was administered subcutaneously with RA to the level stimulated by intragastric administration. The number of IgA secreting cells in the group received only subcutaneous administration of OVA (SC group) was similar to that in normal control group. The size of positive spot was largest in the intragastric group and slightly increased in RA treatment group. 3) When murine splenocytes were isolated and stimulated by lipopolysaccharide, IgA production in the supernatant was the most abundant in IG and RA group. There was on difference between SC and normal control groups. 4) The expression of TGF-β1 gene evaluated by RT-PCR was significantly increased in IG and SC groups. But the increase in the expression was inhibited by RA treatment. Above results indicate that RA appears to induce differentiation of IgA producing cells and inhibit expression of TGF-β1 gene stimulated by antigen.
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