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Penicillium sp. KJ81이 생산하는 Erythritol 4-Phosphate Dehydrogenase의 특성
윤나래,박상희,임재윤,Yun, Na-Rae,Park, Sang-Hee,Lim, Jai-Yun 한국미생물학회 2009 미생물학회지 Vol.45 No.2
Erythritol 생합성에 중요한 효소인 erythritol 4-phosphate dehydrogenase를 Penicillium sp. KJ81로부터 분리 정제하여 효소의 특성을 조사한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. Erythritol 4-phosphate dehydrogenase의 최적 생산 조건은 30% sucrose, 0.5% yeast extract, 0.5% $(NH_4)_2SO_4$, 0.1% $KH_2PO_4$ 그리고 0.05% $MgCl_2$ (pH 7.0) 배지에서 1 vvm aeration, 교반속도 200 rpm, $37^{\circ}C$로 Penicillium sp. KJ81을 배양한 결과 8일 배양 시 최대의 생산량을 보였다. Penicillium sp. KJ81주의 균체 추출액으로부터 ultrafiltration, 조제용 disc gel electrophoresis를 이용하여 erythritol 4-phosphate dehydrogenase를 분리 정제하였다. 최종 수율은 33%이었으며 정제배수는 39.5였다. 정제된 효소의 pI값은 4.6으로, erythrose 4-phosphate에 특이적으로 반응하였으며, Km값은 1.07mM이었다. Native-PAGE에서 single band를 보인 효소의 분자량은 약 1,500 kDa이었다. 효소활성의 최적 pH와 온도는 pH 7.0, $30^{\circ}C$였으며, 효소는 pH 4.0~9.0, 그리고 $30^{\circ}C$까지 안정하였다. 다양한 금속이온 중 $Cu^{2+}$, $Zn^{2+}$에 의하여 효소의 활성이 저해되었다. 다양한 아미노산 반응 잔기 변형시약 중 iodine과 NBS에 의해 효소의 활성이 저해되는 것을 확인하였다. In this study, the characterization of purified erythritol 4-phosphate dehydrogenase, key enzyme of erythritol biosynthesis, produced by Penicillium sp. KJ81 was investigated. Optimum production conditions of erythritol 4-phosphate dehydrogenase was 1 vvm areration, 200 rpm agitation, at $37^{\circ}C$ for 8 days in the medium containing 30% sucrose, 0.5% yeast extract, 0.5% $(NH_4)_2SO_4$, 0.1% $KH_2PO_4$, and 0.05%$MgCl_2$. Erythritol 4-phosphate dehydrogenase was purified through ultrafiltration and preparative gel electrophoresis from cell extract of Penicillium sp. KJ81. This enzyme was especially active on erythrose 4-phosphate with 1.07 mM of Km value. It gave a single band on native polyacrylamide gel electrophoresis and an isoelectric point of 4.6. The enzyme had an optimal activity at pH 7.0 and $30^{\circ}C$. It was stable between pH 4.0 and 9.0, and also below $30^{\circ}C$. The enzyme activity was completely inhibited by 1mM $Cu^{2+}$ and 1 mM $Zn^{2+}$, but was not significantly affected by other cations tested. This enzyme was inactivated by treatment of tyrosine specific reagent, iodine and tryptophan specific reagent, N-bromosuccinimide. The substrate of the enzyme, erythrose 4-phosphate showed protective effect on the inactivation of the enzyme by both reagents. These results suggest that tryptophan and tyrosine residues are probably located at or near active site of the enzyme.
윤나래(Yun, Na Rae),송정은(Song, Jung Eun) 건국대학교 글로컬문화전략연구소 2017 문화콘텐츠연구 Vol.0 No.10
본 연구는 한류 연구물에 나타나는 질적자료를 수집하여 한류에 대한 표현 방식과 연구 결과와 비교 분석하였다. 많은 질적자료를 처리하는 방법이 고도화됨에 따라 축척된 연구물에 대한 메타 분석에 대한 다양한 방법론이 등장하고 있으며 지난 10여 년간 축적된 한류 연구에도 적용할 필요성이 높아지고 있다. 따라서 메타분석을 통해서 한류 연구의 현황 파악 및 한류 연구 이슈를 탐색하는데 연구의 목적이 있다. 질적 메타 분석을 위해 2000년부터 2016년까지의 논문 중 연구방법론에 대한 출처가 분명한 질적연구물 28편을 대상으로 하여 근거이론에 의한 분석을 진행하였다. 분석 결과, 상위범주 3개(한류의 모습, 한류의 관계, 한류의 효과)와 하위범주 11개(특징, 경험, 현상, 선호, 공유, 정보획득, 평가, 영향, 희망, 전망)의 차원으로 분석되었다. 한류 수용자들의 표현은 단순한 ‘현상’보다 한류 현상에 대한 해석을 포함한 ‘특징’이나 ‘경험’으로서 언급하는 것으로 나타났다. 따라서 개별 연구 결과들에서는 한류의 현상에 대해 주목하고 있어 연구참여자의 실질적인 목소리와 다소 차이가 있다는 것을 확인할 수 있었다. This article collected the qualitative data of Korean Wave researches and analyzed them through grounding theory. As the method of processing a lot of qualitative data becomes more sophisticated, various methodologies are emerging for the meta-analysis of the accumulated research. In addition, it is increasingly necessary to apply it to the Korean Wave research that has accumulated over the past 10 years. Therefore, the purpose of the research is to understand the current status of Korean Wave research through meta - analysis and to explore what issues can be captured in Korean Wave research. It could contribute to enhancing the scalability of Korean Wave research by reviewing and reinterpreting how Korean wave is expressed in the view of Korean wave audience. For qualitative meta - analysis, 28 qualitative research articles from 2000 to 2016 were searched based on grounded theory. As a result of analysis, it is found that there are three categories of Main categories (the appearance of Korean Wave, the relationship of Korean Wave, the effect of Korean Wave) and 11 subcategories (characteristics, experience, phenomenon, preference, sharing, information acquisition, evaluation, influence, hope, view). The results of existing qualitative research papers focused on the phenomenon and expression of Korean Wave. But Korean Wave is expressed as a “feature” or “experience” that includes an interpretation of the Korean Wave phenomenon rather than a simple phenomenon.