배양계배의 골격근 세포의 분화와 증식에 대한 protein phosphatase-1과 2A의 영향

안병태,최명진 가톨릭대학교 자연과학연구소 1998 자연과학논문집 Vol.19 No.-

세포 단백질이 가역적 인산화는 세포 증식과 분화, 발생을 조절하는 신호 전달 경로에서 주요 기작이 되며, 이러한 단백질의 인산화 조절을 포함하는 효소에는 protein phosphatase(pp)와 protein kinase가 있는데, 특히, pp-1과 pp-2A의 특정 억제 물질인 okadaic acid(OA)를 배양 중인 골격근 세포에 시간별로 처리하여 융합지수를 구하였고, 근특이 단백질의 하나인 미오신의 합성정도를 살펴보았다. 그 결과, OA를 처리한 세포의 경우, 대조군에 비해 융합이 억제되었다. 그리고 미오신의 합성정도도 대조군에 비해 감소되었다. 특히, 배양 24, 36시간째에 처리한 세포에서 두드러진 억제를 보인 것을 볼 때, 골격근 세포분화에 있어서 pp-1과 pp-2A가 초기 분화를 유도하는 것을 알 수 있다. OA를 배양 중인 세포에 시간별로 처리하여 세포분열의 정도를 S기에 있는 세포의 DNA를 탐색하는 BrdU 표지 및 면역화학 염색을 이용하여 알아본 결과, OA를 처리한 세포의 경우, 대조군에 비해 BrdR 표지율이 높게 나왔다. 골격근 세포분화의 또 다른 조절자인 PKC의 역할을 알아보기 위해서 PKC의 활성 물질인 TPA와 억제 물질인 H-7을 배양 중인 세포에 처리하여 대조군과 비교하여 알아 본 결과, 높은 농도의 경우, 분화가 진행되는 동안에는 오히려 분화를 억제시켰으며, H-7을 처리한 세포의 경우는 초기 근원세포 분화를 억제시켰으나, 분화가 진행되는 도중에 처리하였을 경우에는 분화에 영향을 미치지 않았다. Reversible phosphorylation of protein is a major regulatory mechanism in signal transduction pathway that controls cell proliferation, differentiation, and development. Protein phosphatases and protein kinases are the enzymes involved in regulating cellular phosphorylation of proteins, and among them pp-1 and pp-2A are known to inhibit cell division, but activate cell differentiation. In order to investigate the effects of pp-1 and pp-2A on skeletal muscle cell differentiation and proliferation, OA which is a potent inhibitor of pp?1 and pp-2A was applied to the cells in culture, and fusion indices were calculated and myosin synthesis was measured. Compared with control, the fusion of cells treated with OA was suppressed, and myosin synthesis was also decreased by OA. The cells treated with OA were detected by BrdU staining. Compared with control, BrdU labeled rates were high in the cells treated with OA, especially at high concentrations. From these results, we could conclude that pp-1 and pp-2A inhibit DNA synthesis of muscle cell differentiation. To investigate the effects of PKC on the muscle cell differeniation, TPA which is a potent activator of PKC and H-7 which is a potent inhibitor of PKC were applied to the cells in culture. Differentiation of the cells treated with TPA occurred similarly to control. But when treated with high concentration of TPA and treated at a late stage of differentiation, cell fusion was suppressed. Fusion of the cells treated with H-7 during the early stage of differentiation was inhibited, but not during the late stage of differentiation, and H-7 had no effect on the terminal cell differentiation.

스마트폰 기반의 무인 영상 추적 시스템 연구

안병태 중소기업융합학회 2019 융합정보논문지 Vol.9 No.3

An unattended recording system based on smartphone based image image tracking is rapidly developing. Among the existing products, a system that automatically tracks and rotates the object to be photographed using an infrared signal is very expensive for general users. Therefore, this paper proposes a mobile unattended recording system that enables automatic recording by anyone who uses a smartphone. The system consists of a commercial mobile camera, a servomotor that moves the camera from side to side, a microcontroller to control the motor, and a commercial wireless Bluetooth Earset for video audio input. In this paper, we designed a system that enables unattended recording through image tracking using smartphone. 최근 스마트폰 기반의 영상 이미지 추적을 통한 무인 녹화 시스템은 급속히 발전하고 있다. 기존의 제품 중 적외선 신호를 이용하여 촬영 대상을 자동으로 추적 및 회전하여 녹화하는 시스템은 일반 사용자가 사용하기에는 매우 고가이다. 따라서 본 논문에서는 스마트폰을 사용하는 사용자라면 누구나 자동 녹화가 가능한 모바일용 무인 녹화 시스템을 제안한다. 본 시스템은 상용 Mobile 카메라, 좌우로 카메라를 움직이는 서보모터(Servo Motor), 모터를 제어하는 마이크로 컨트롤러 그리고 동영상 오디오 입력을 담당할 상용 무선 블루투스 이어셋(Wireless Bluetooth Earset)으로 구성된다. 본 논문에서는 스마트 폰을 이용하여 영상 추적을 통해 무인 녹화가 가능한 시스템을 설계하였다.

배양계배 신경세포와 근아세포의 분화에 미치는 neural cell adhesion molecule(N-CAM)의 영향

안병태,김성아 가톨릭대학교 자연과학연구소 1998 자연과학논문집 Vol.19 No.-

Neural cell adhesion molecule(N-CAM)은 세포표면 당단백질로 배발생과 신경세포분화 동안 발현된다. N-CAM은 칼슘비의존성이며 동일한 종류간에 결합을 형성한다. 본 연구에서는 anti-(N-CAM)Fab′을 처리하여 신경세포와 근아세포의 분화에 미치는 영향을 보았다. 신경세포와 근세포에 N-CAM이 분포하는 것을 확인하기 위해 immunoblot을 수행하였으며, 그 결과, 200kDa-120kDa의 밴드가 관찰되었다. Anti-(N-CAM)Fab′을 처리한 결과, 신경세포와 근아세포의 분화가 억제되었다. Neural cell adhesion molecules (N-CAM) are surface glycoproteins that act as ligands in the formation of cell-cell bonds. N-CAM is a calciumindependent molecule and N-CAM binding is homophilic. In this study, anti-(N-CAM)Fab’ were applied to spinal cord and myoblast culture to determine the effects of N-CAM in the neuroblast and myoblast differentiation. Immunoblot was employed in order to verify that N-CAM is present in neural and muscle cells. The results showed that N-CAM 200kDa-120kDa in nerve and muscle cell extracts and N-CAM in chick nerve and muscle is a glycoprotein binding with sialic acid. In chick muscle cells treated with anti-(N-CAM)Fab’, morphological differentiation was delayed and cell fusion was suppressed. These results showed that N-CAM affected early myoblast differentiation and that cell aggregation and neurite elongation in neuroblasts were suppressed by anti-(N-CAM)Fab’ compared with control. In coculture, differentiation rate was enhanced by the interaction of nerve and muscle cells. In this study anti-(N-CAM)Fab’ did not affect the differentiation of nerve and muscle cells, but suppressed the morphological differentiation, suggesting an important role in early embryogenesis.

토끼의 측뇌실에 투여된 oxotremorine의 혈압강하작용

안병태 聖心女子大學校 1981 論文集 Vol.12 No.2

콜린성 약물인 oxotremorine이 심혈관계에 대한 중추조절에 어떤 영향을 미치는가를 규명하고자 토끼의 측뇌실로 oxotremorine을 투여하여 혈압, 심박수 및 교감신경활동을 관찰하였다. 또한 atropine을 측뇌실로 투여하여 oxotremorine과의 상호작용을 관찰한 결과는 다음과 같다. 1. Oxotremorine을 측뇌실로 투여시 현저한 혈압강하 및 서맥이 일어났으며 그 작용은 oxotremorine 5㎍/㎏ 투여시 혈압은 평균 16.9%, 심박수는 평균 12.9% 감소하였다. 2. atropine (50㎍/㎏, i.c.v.) 전처치는 oxotremorine(5㎍/㎏, i.c.v.)의 혈압강하 및 서맥작용을 유의하게 차단하였다. 3. oxotremorine(5㎍/㎏, i. c. v.) 투여시 교감신경활성이 뚜렷하게 억제되었으며, 이 작용은 혈압강하 및 서맥현상과 거의 일치하여 일어났다. 4. 이상의 결과로 중추에서의 oxotremorine의 혈압강하기전의 연수의 vasopressor area에 존재하는 muscarine 수용체에 작용하여 교감신경활동을 억제시켜 일어난다고 사료된다. The aim of the present investigation was to clarify the mechanism of central hypotensive action of oxotremorine in anesthetized rabbits. The results were as follows: 1) The administration of oxotremorine(5㎍/㎏, i.c.v.) markedly decreased blood pressure and heart rate and sympathetic nerve activity. 2) Prior administration of atropine (50㎍/㎏, i.c.v.) blocked significantly the decrease in blood pressure, heart rate and sympathetic nerve activity induced by subsequent administration of oxotremorine(5㎍/㎏, i.c.v.). 3) The results indicate that the centrally produced hypotension by oxotremorine is due to the inhibitory activation on central muscarinic receptor in the vasopressor area of medulla oblongata, resulting in a decrease of sympathetic nerve activity.

해마의 구조와 행동 및 장기에 대한 작용

안병태 가톨릭대학교 자연과학연구소 1982 자연과학논문집 Vol.4 No.-

N-cadherin이 배양 계배 근아세포에서 발현되는 유전자에 미치는 영향

안병태,김영주 가톨릭대학교 자연과학연구소 2003 자연과학논문집 Vol.24 No.-

근아세포는 여러 단계의 근육형성 프로그램을 거쳐 다핵의 근관세포를 형성하며, 근특이 단백질의 합성 및 축적이 일어난다. 근특이 단백질이 합성은 유전자 조절 단백질인 Myo D, myogenin, Myf-5 그리고 MRF-4 등에 의해 조절되며, 이들 단백질이 동형접합체나 이형접합체를 형성함에 따라 DNA와 결합하여, 전사를 조절한다. 근아세포가 응집을 하기 위해서는 cell adhesion molecule이 필요하며, 이 과정에서 칼슘 의존적인 cell-cell adhesion molecule로서 생쥐와 닭의 뇌세포에서 발현되는 N-cadherin이 관여한다. N-cadherin은 골격근 세포나 그 밖의 많은 세포에서도 태아시기에 일시적으로 발현되며, 분화초기에 근아세포에서 발현되어 근세포간의 집합등에 관여한다. 본 연구는 N-cadherin이 근육에서 일시적으로 발현되는 것에 초점을 맞추고, anti-N-cadherin antibody(NCAD2)를 사용하여 N-cadherin을 억제함으로써 발생하는 근육분화의 형태적, 생화학적 변화를 분석하였다. 근아세포 성장에 NCAD2를 처리함에 따라 형태적 분화양상의 차이를 관찰하였고, 융합의 정도가 감소되어 나타났다. 이러한 분화에 작용하는 기작을 보기 위하여 7.5k의 cDNA chip을 사용하여 실험을 수행하였다. 이 실험을 통하여 NCAD2를 처리하였을 때 근세포 분화동안 발현되는 여러 유전자의 발현이 변화하는 것을 관찰하였다. 근세포분화과정에 관여하는 것으로 알려져 있는 Wnt 경로, TGF-beta 경로, ubiquitin경로가 작용하는 것으로 추정할 수 있었다. 이 중에서 근분화에 관여하는 유전자만을 선별하였고, 또한 calponin, integrin, ADAM15, ARNT-like 1 등이 세포-세포, 세포-기질간의 상호 관계에 관련된 유전자의 발현이 증폭됨을 알 수 있었다. 또한 NCAD2를 처리했을 때, 근세포 분화동안 발현되는 MyoD이 발현이 단백질 수준에서 억제됨을 관찰하였다. 이러한 결과들을 종합하여 세포 상호작용을 중재하는 N-cadherin이 근세포 분화에 요구되는 여러가지의 경로에 중요한 역할을 하는 것을 알 수 있었다.

배양계배 근아세포의 MyoD 발현에 대한 N-cadherin의 영향

안병태,진경실 가톨릭대학교 자연과학연구소 1999 자연과학논문집 Vol.20 No.-

근아세포는 여러 단계의 근육형성 프로그램을 거쳐 다핵의 근관세포를 형성하며, 근특이 단백질의 합성 및 축적이 일어난다. 근특이 단백질의 합성은 유전자 조절 단백직인 MyoD, myogenin, Myf-5, 그리고 MRF-4 등에 의하여 조절되며, 이들 단백질이 동형접합체나 이형접합체를 형성함에 따라 DNA와 결합하여, 전사를 조절한다. MyoD는 유전자의 발현 시기와 장소를 결정하는 단백질로, 근세포가 아닌 세포를 근세포로 전환시키는 능력이 있으며, 근세포 분화에 관여한다. 근아세포가 응집을 하기 위해서는 cell adhesion molecule 등이 필요하며, 이 과정에 칼슘의존적 cell-cell adhesion molecule로서 생쥐와 닭의 뇌세포에서 발현되는 N-cadherin이 관여한다. 신경세포내의 cadherin 발현양상에 따라 신경세포가 운동신경과 감각신경으로 분화되며, anti-cadherin antibody를 처리했을 때 팔, 다리의 연골형성이 억제된다. N-cadherin은 골격근세포나 그밖의 많은 세포에서도 태아시기에 일시적으로 발현되며, 분화 초기에 근아세포에서 발현되어 근세포 간의 접합 등에 관여한다. 또한, 세포의 접합 뿐아니라 융합, 이동, 배열 등에 관여한다고 보고된 바 있다. 본 연구는 N-cadherin이 근육에서 일시적으로 발현되는 것에 초점을 맞추고, anti-N-cadherin antibody(NCAD2)를 사용하여 N-cadherin을 억제함으로써 발생하는 근육 분화의 형태적, 생화학적 변화를 분석하였다. 근아세포 성장에 NCAD2를 처리함에 따라 형태적 분화양상의 차이가 관찰되었고, 융합의 정도가 감소되어 나타났다. 또한 NCAD2를 처리했을 때, 근세포 분화 동안 발현되는 MyoD의 발현이 억제됨을 관찰할 수 있었다. 이러한 결과들은 세포 상호작용을 중재하는 N-cadherin이 근세포 분화에 요구되는 신호전달에 중요 역할을 하는 것을 시사한다. N-cadherin is a Ca^(2+)-dependent cell-cell adhesion molecule. It was identified in brain cells of mouse and chicken. Its expression is transient in skeletal muscles and many other tissues. Myoblasts grown in the presence of anti-cadherin antibodies(NCAD-2) exhibited an altered morphology compared to control cultures, coupled with decreased myoblast fusion. Treatment with NCAD-2 suppressed MyoD expression in muscle cell differentiation. These results show that cadherin-mediated cell interaction plays a critical role in the signaling events required for differentiation of muscle progenitor cells.

日本語の接辭に關する硏究

安炳泰 대구보건대학 1984 대구보건대학 論文集 Vol.8 No.-

According to Hashimoto's grammar, a sentence is composed of clauses and a clause, words. Some of the words are composed of other word, base, and affixes. Aword is. divided into an independent and dependent word. A clause can be composed of one word or more than two words. The exemples are as follows : 1. one word clause : iku 2. two word clause : ika nai 3. three word clause : ika u keredomo 4. four word clause : ika re naka tta. tora se masu mai The above mentioned 'nai', 'u', 'ta', and 'mas' are dependent words(auxiliaries), while 'nai', 'masu', 'ta' and 'u' in 'ika nai' 'iki masu', "i tta.', and 'ika u' are not words (auxiliaries) but they should be considered to be affixes. (Hashimoto(1967), pp. 10,19). The result is that 'ikanai', a two word clause, becomes a one word clause and 'ikau keredomo', a three word clause, becomes a two word clause. This is a serious contradiction in Hashimoto's theory on clauses he asserts that 'nai', 'u', 'ta', and 'masu' which he defined first as auxiliaries are affixes. The aim of this thesis is to solve the contradiction like this Hashimoto's exemples on the constitution of clauses are as follows: 1. 'iku' a one word clause, also contitutes such clauses as 'iku Keredomo', 'ikuga', 'ikunowa'. 2. 'ikanai', 'ikimasu', 'itta', 'ikau', 'yamada', which are one clause, also constitute such clauses as 'ikanai keredomo', 'ikimasuga', 'ikanainowa', 'ikimasukeredomo' 'ikimasuga', 'ikimasunowa'. iku iku keredomo iku ga iku nowa ikanai ikanai keredomo ikanai ga ikanai nowa ikimasu ikimasu keredomo ikimasu ga ikimasu nowa itta itta keredomo itta ga itta nowa ikau ikau keredomo ikau ga ikau)nowa yamada yamada keredomo yamada ga yamada nowa (The word 'ikaunowa' is-not used) The second line, including 'keredomo', among the above exemples is taken to be viewed. He asserts that 'iku', 'i kanai', 'i kirnasu', 'itta', 'i kau' 'yamada', by the exclusion of 'keredomo' from every clause in the second line are all equal in rank, and the units such as 'i kanai', 'i kirnasu', 'itta', 'i kau', 'yamada', which are cordinate with 'iku', should not be considered to be clauses but words, it follows that if 'i kanai' is a word, 'nai'(auxiliary) will become a unit attached to a word, and so it is not a word(auxiliary) but a kind of affix. The contradiction of Hasnimoto's grammar exisists in this point. He has fallen in a self-contradictiom that 'ikanai' which he defines as a two word clause becomes a one word clause. The writer intends to establish the invariability of 'nai' as the auxiliary, indicating the affixal quality of the auxiliary.

배양 계배 근원세포 분화에 대한 신경추출물의 영향

안병태 가톨릭대학교 자연과학연구소 1988 자연과학논문집 Vol.10 No.-

신경세포의 근원세포 융합 촉진효과를 알아보기 위하여, 신경세포를 기른 Nerve conditioned 배양액(NC910)을 근원세포에 처리해 보면, 근세포 분화의 촉진효과가 없었으나, NC910을 처리할 때 Fe^(3+)을 20μM로 첨가하면 세포증식과 세포융합이 촉진되는 것을 보았다. 또한, 910배양액에 계배 뇌 추출물과 좌골신경 추출물을 처리하였을 때도 세포증식도와 세포융합지수가 함께 증가되는 것을 보았다. 이러한 세포증식 효과와 세포융합에 대한 촉진효과가 transferrin(Tf)에 의한 것인지 확인하기 위해, anti-Tf antiserum을 각각의 배양액에 같이 첨가해 보았다. 그 결과, 이러한 촉진효과가 억제되었으며, 계배 뇌 추출물과 좌골신경 추출물에서 Fe^(3+)을 제거해 보아도 역시 촉진효과가 억제됨을 보았다. 이와 같은 결과를 통해 근원세포의 세포증식과 세포융합에 미치는 영향은 Tf에 의한 것임을 알 수 있었다. 그러나, 계배 뇌 추출물과 좌골신경 추출물을 배양액에 처리해 주면 Tf에 의한 세포증식 효과보다 더 높은 수준으로 세포증식이 일어나는 것으로 보아 근원세포의 세포증식 효과는 전적으로 Tf에 의존하는 것만은 아님을 알 수 있었다. To study the neurotrophic effects on the myoblast fusion, myobasts were cultured in nerve conditioned 910 medium(NC910) in the presence and absence of 20μM Fe^(3+). Cell proliferation and fusion were stimulated by the addition of 20μM Fe^(3+), but not without it. Similar effects were observed when chick embryonic brain extract or adult chicken sciatic nerve extract were added to 910. To examine whether the effect on the stimulation of cell proliferation and fusion is mediated by transferrin, anti-transferrin antiserum was added to each medium. In this case, the stimulatory effect was inhibited. Such effect was also suppressed when removing Fe^(3+) from the chick embryonic brain extract or sciatic nerve extract. Thus transferrin appears to be responsible for the stumulation of proliferation and fusion of myoblasts. When the chick embryonic extract and sciatic nerve extract are added to the medium, such effect, however, is much stronger than when transferrin was added alone. Therefore, it cannot be excluded the possibility of the presence of certain myotrophic factors other than transferrin.

배양 골격근세포분화에 미치는 신경액성물질의 영향

안병태 가톨릭대학교 자연과학연구소 1995 자연과학논문집 Vol.16 No.-

근원세포 분화에 미치는 신경액성물질의 영향을 알아보기위하여 cover slip에 신경아세포를 배양하여 근원세포배양기에 넣어주고 근원세포의 세포증식도와 세포융합지수, 그리고 creatine kinase(CK)의 활성도를 측정 분석하였다. 그 결과, CK의 전체 활성도와 비활성도가 증가 하였으나 세포융합지수는 크게 영향 받지 않았다. 그러므로, 근세포분화에 대한 신경촉진효과는 신경에서 합성분비되는 신경액성인자에 의한 신경촉진인자인 것으로 보인다. 그리고, 근세포의 CK동위효소전환에 대한 신경의 영향을 규명하기 위하여 근원섬유의 M-line bound CK활성도를 측정하여 본 결과, 신경세포에 의해 크게 증가함을 보았다. 따라서, 신경은 BB형에서 MM형으로의 CK동위효소전환을 촉진하는 것으로 보인다. To study the influence by soluble factor secreted in nerve cells on the myoblast differentiation, the cover slip on which nerve cells were cultured was put into the myoblast culture and proliferation, fusion index, and creatine kinase(CK) activity of myoblasts were measured at various time. The total activity and specific activity of CK were increased, while the fusion index was not affected significantly. Hence, neurotrophic affects on myoblast differentiation appeared to be due to neurohumoral factor(s). In addition to identify the affect of nerve cells of the CK isozyme transition of muscle cell, M- line bound CK activity of myofibril was measured. This measurement showed that M- line bound CK activity was greatly increased by nerve cells. Thus, it is likely that nerve cells stimulate the CK isozyme transition from BB form to MM form.