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        넙치로부터 분리된 유산균에 미치는 키토산 분자량에 따른 효과와 항균효과

        안긴내 ( Gin Nae Ahn ),이원우 ( Won Woo Lee ),안창범 ( Chang Bum Ahn ),전유진 ( You Jin Jeon ) 한국키틴키토산학회 2014 한국키틴키토산학회지 Vol.19 No.4

        Chitosan and its oligosaccharides have shown antimicrobial effects against pathogenic bacteria inducing fish diseases. Lactic acid bacterium (LABs) known as probiotics play important roles in the regulation or maintenance of normal flora and pathogenic bacteria. In this study, we investigated the potential of chitosan oligosaccharides (COSs) as natural prebiotics by evaluating their capacities on the growth of both lactic acid bacterium (LAB) and Vibrio anguillarum (V. anguillarum, Listonella anguillarum). First of all, we prepared three COSs (COS1; molecular weight (MW) 1 KDa>, COS2; MW 1~5 KDa, COS3; MW 5~10 KDa) by enzymatic hydrolysis of chitosan and isolated lactobacillus brevis (L. brevis) BK4 from flounder fish intestine. Among the chitosan and its three MW fractions, the two lower MW fractions, COS1 and COS2 markedly decreased pH by increasing the production of organic acids, especially lactic acid in the BK4-cultured mediums. In contrast, the higher MW fraction, COS3 showed no significant difference in pH. Also, COS1 and COS2 significantly increased the growth of BK4 at all the concentrations according to the inoculation times, whereas COS3 and chitosan inhibited them. Furthermore, COS2 showed the strong antibacterial activities as markedly enhancing the inhibitory effect against the growth of V. anguillarum in co-cultured system of BK4 and V. anguillarum compared to that of pure-cultured system. In conclusion, the relatively lower COSs led to the growth of BK4 with the production of lactic acid and improved the anti-bacterial activity against V. anguillarum. This study suggests that the lower MW fractions of COSs can be used as a useful prebiotic candidate to improve fish diseases as the animal feed additives.

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        전통발효식품으로부터 분리된 유산균의 생육에 미치는 키토산의 분자량에 따른 영향

        안긴내 ( Gin Nae Ahn ),이원우 ( Wonwoo Lee ),전유진 ( You Jin Jeon ) 한국키틴키토산학회 2014 한국키틴키토산학회지 Vol.19 No.3

        한국 전통 식품인 김치와 젓갈, 탁주로부터 6종의 유산균을 분리하여 동정하였고, 분리된 유산균의 생육에 대한 chitosan 및 분자량별로 분리된 그것의 COSs의 효능을 검증하기 위해 유산균 배양액의 pH 변화 및 유기산 분석과 유산균의 성장을 확인하였다. 본 연구결과에서는 chitosan과 고분자량의 COS3가 분리된 대부분의 유산균에 대한 현저한 성장 저해 효과를 보였으나, 분자량이 낮은 COS1과 COS2는 모든 유산균의 성장을 저해시키지 않았고, 현저하게 촉진시킴으로서 유기산의 생성을 유도하여 pH를 저하시켰다는 것을 확인했다. 이 모든 결과를 미루어볼 때, 본 연구는 유산균의 성장을 저해하는 chitosan을 저분자화 시켜 제조한 COS1과 COS2가 장내 유용 세균으로 알려진 유산균의 성장을 촉진시켜 어류 양식 산업에 있어 유산균제제와 함께 첨가 시 장내 면역을 증강시키는 유용한 사료첨가제로서 사용될 수 있을 것으로 사료되며, 더 나아가 인간 장내의 대량으로 존재하는 유용균에 대한 prebiotics로서 작용될 수 있음을 제시한다. Chitosan and its oligosaccharides have shown antimicrobial effects against pathogenic bacteria inducing fish diseases. Lactic acid bacterium (LABs) known as probiotics play important roles in the regulation or maintenance of normal flora and pathogenic bacteria. In this study, we elucidated the potential of chitosan and its oligosaccharides as natural prebiotics inducing the growth of lactic acid bacterium (LABs). First of all, we prepared three chitosan oligosaccharides (COSs, COS1; molecular weight (MW)1 KDa>, COS2; MW 1~5 KDa, COS3; MW 5~10 KDa) by enzymatic hydrolysis of chitosan and isolated the 6 kinds of proteolytic LABs (BK1, BK2, BK14, BK18, BK19, and BK20) from Korean traditional foods such as Kimchi, fish fermented foods and rice wine. Among the chitosan and its three MW fractions, the two low MW fractions, COS1 and COS2 markedly decreased pH by increasing the production of organic acids, especially lactic acid and formic acid in the all LABs-cultured mediums. In contrast, the high MW fraction, COS3 significantly decreased pH with the increment of the lactic acid produced in the only BK19-cultured medium and did not affect to the others. Also, COS1 and COS2 significantly induced the growth ofLABs at all the concentrations, whereas COS3 and chitosan inhibited them. In particular, COS1 showed the highest growth effects for the 6 kinds of LABs from fish fermented foods (Jeotgal), compared to those of two other fractions and chitosan. Itwas better than them of LABs isolated from Kimchi (BK1 and BK2). Taken together, the low MW fractions of chitosan led to the growth of six LABs with the change of pH and the production of organic acids. This study suggests that the low MW fractions of COSs can be used as useful prebiotics to improve fish diseases as the animal feeds.

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        방사선을 조사한 면역 세포에 대한 패 다당류의 보호 효과

        이원우 ( Won Woo Lee ),안긴내 ( Gin Nae Ahn ),강나래 ( Na Lae Kang ),김은아 ( Eun A Kim ),지영흔 ( Young Heun Jee ),전유진 ( You Jin Jeon ) 한국키틴키토산학회 2015 한국키틴키토산학회지 Vol.20 No.4

        본 연구는 방사선이 조사된 마우스 면역 세포와 마우스의 면역 기능에 대한 패의 효소적 추출물로부터 제조된 다당류성분의 방사선 방호 효능을 확인하였다. 패로부터 효소적 추출 기법을 이용한 경우, 높은 수율과 탄수화물 함량을 나타내었고, 에탄올 침전법을 이용한 다당류 성분 분리시 주로 glucose, galactose와 mannose의 단당으로 이루어진 패 다당류 성분(IOP)를 얻을 수 있었고, 이것은 더 높아진 탄수화물함량을 보였다. 분리된 IOP는 마우스 면역 세포의 증식을 세포 독성 없이 유의적으로 유도하였고, 흥미롭게도 이러한 IOP의 면역 세포 증식 효능은 방사선 조사가 야기한 세포 생존율과 증식 감소 및 세포 내 ROS 생성 증가를 억제하는 데에도 영향을 끼쳤다. 뿐만 아니라, 방사선이 조사된 마우스로부터 얻어진 말초면역기관인 비장 조직의 축소, 수와 증식능의 감소가 IOP의 경구 투여에 의해 회복된다는 것을 확인할 수있었다. 게다가 IOP의 처리는 방사선 조사에 의해 야기된cytolytic T lymphocyte, monocytes와 granulocytes의 수적 감소를 회복시켰다. 이와 같이 실험을 종합하여 볼 때, IOP는 방사선 조사에 의해 야기되는 면역 세포의 수적 및 기능적 저하를 회복시킴으로서 방사선 방호 효능을 가진다는 것을 제시할 수 있고, 차후 천연 방사선 방호를 위한 소재로서 이용가치가 있다고 사료된다. In this study, we prepared a crude polysaccharide from a Celluclast enzymatic extract of Ishige okamurae (IOP) and evaluated its radio-protective effects in immune cells of gamma ray-irradiated mice. First, the extraction yield of IOP was approximately 14.5% and contained major contents of galactose (20.8%), glucose (18.1%), and mannose (14.8%). Also, IOP dose-dependently increased the proliferation of splenocytes without cytotoxicity. In addition, IOP significantly enhanced the proliferation of 2 Gyirradiated splenocytes whereas reduced the intracellular ROS production. In further study, IOP improved the ratio of spleen weight/body weight by increasing the number and proliferation of splenocytes, compared to only 2 Gy-irradiated mice. Especially, IOP increased the population of CD8 + cytolytic T cells, whereas reduced the population of Gr-1 granulocytes. Interestingly, IOP recovered the ratio of CD4 + helper T cells/CD8 + cytolytic T cells, compared to the only 2 Gy-irradiated mice. According to these results, we suggest that IOP protected mice as improving the peripheral immune system damaged by gamma ray irradiation in mice.

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        제주 자생 해양 녹조류와 갈조류 추출물로부터의 항고혈압 활성

        차선희(Seon?Heui Cha),안긴내(Gin?Nae Ahn),허수진(Soo?Jin Heo),김길남(Kil?Nam Kim),이기완(Ki?Wan Lee),송춘복(Choon Bok Song),김소미(Somi K. Cho),전유진(You?Jin Jeon) 한국식품영양과학회 2006 한국식품영양과학회지 Vol.35 No.3

        제주 연안에 서식하는 해양 녹조류와 갈조류의 항고혈압 활성을 알아보기 위해 해조류로부터 메탄올과 물을 이용하여 상온(20℃)과 70℃에서 각각 4가지 종류의 추출물을 제조하여 스크리닝하였다. 그 결과, 녹조류에서는 비교적 낮은 ACE 저해활성을 보였으나, 갈조류에서는 70ME 잇바디괭생이모자반, 말미역, 바위주름, 넓패, 톳, 다시마 및 70AE 감태에서 ACE 저해활성이 높게 나타났다. 또한 70AE 감태의 가수분해물은 2.33~3.56 ㎍/mL의 IC50값을 보여 매우 높은 ACE 저해활성을 확인할 수 있었다. 이는 해조류의 ACE 저해활성이 수용성 추출물뿐만 아니라 메탄올 추출물에서도 나타나는 것은 해조류 유래 fucoxanthin, phlorotannin 및 polyphenol계 화합물 등에 의한 영향도 있을 것으로 사료된다. This study was conducted to screen in vitro angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitory activities of methanol (MeOH) and aqueous extracts which were prepared by four different extractions-80% methanol extracts (ME) at 20℃ and 70℃, respectively and aqueous extracts (AE) at both temperatures with the residue of the MEs-of ten marine green algae and nineteen brown algae collected along Jeju coast of Korea. Most marine brown algae extracts showed higher capacities than those of marine green algae in ACE inhibitory activity. Particularly, 70℃ MeOH extract (70ME) of Hizikia fusiforme showed the strongest inhibition activity (about 87%) among all the extracts. Also, 70 MEs of Enteromorpha linza, Ishige sinicola, Laminaria ochotensis, Petrospongium rugosum, Sagrassum horneri, Undaria pinnatifida and 20℃ MeOH extracts (20ME) of Myagropsis myagroides, Petrospongium rugosum, 20℃ aqueous extracts (20AE) of Codium contractum, Enteromorpha compressa, and 70℃ aqueous extracts (70AE) of Ecklonia cava, Petrospongium rugosum showed moderate ACE inhibitory activities more than 50% and the other extracts exhibited weak activities. On the other hand, E. cava had the best ACE inhibitory activity among 70AEs. This indicates that 70AE of E. cava contains potential anti?ACE macromolecular. We tried to proteolytic digest 70AE of E. cava to induce production of anti?ACE peptides from E. cava 70AE. The enzymes used are five proteases including Kojizyme, Flavourzyme, Neutrase, Alcalase, and Protamex, which are food grade?commercial enzymes from Novo Co. Flavourzyme?digest of E. cava 70AE showed the highest inhibitory activity about 90%. And the five different enzymatic digests of the E. cava 70AE ranged from 2.33 to 3.56 ㎍/mL, respectively in IC50 values of anti?ACE activity.

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        감태(Ecklonia cava) 줄기 및 잎의 효소적 추출물과 메탄올 추출물에 의한 항산화 활성비교

        이승홍(Seung-Hong Lee),김길남(Kil-Nam Kim),차선희(Seon-Heui Cha),안긴내(Gin-Nae Ahn),전유진(You-Jin Jeon) 한국식품영양과학회 2006 한국식품영양과학회지 Vol.35 No.9

        본 연구에서는 제주 연안에 서식하는 갈조류 중 감태의 줄기와 잎의 항산화활성을 비교하기 위하여 감태 줄기와 잎으로부터 효소적 가수분해와 메탄올을 이용하여 각각의 추출물을 제조한 후 이들로부터 활성산소종의 소거활성 및 세포의 산화적 손상 억제활성을 포함하는 항산화활성에 대한 차이를 비교 검토하였다. 여기에서 효소적 가수분해를 이용하여 제조된 감태의 효소적 추출물은 메탄올 추출물에 비하여 폴리페놀 함량은 낮았으나, 수율은 약 30% 이상 높게 나타났다. 감태는 줄기와 잎의 모든 부분에서 항산화활성이 우수하게 나타났으며, 두 부위 간의 유의적인 차이는 없었으나, 대체로 잎의 추출물이 줄기의 추출물보다 약간 우수한 항산화효과를 나타내었다. 이러한 결과는 감태의 잎 뿐만 아니라 줄기 또한 마찬가지로 우수한 생리활성 재료임을 확인할 수 있었다. 그리고 메탄올 추출물에 비해 효소적 추출물은 hydroxyl radical 소거활성을 제외한 전반적인 항산화 효과 분석에 있어서 더 유용한 경향을 보였다. 이와 같은 결과는 여러 가지 효소들이 복합되어진 효소가 세포벽에 있는 섬유질이나 당단백질 혹은 알긴산 고분자물질 등을 분해 시키는 작용을 하여 활성물질들이 원활히 추출될 수 있도록 유도해 주는 작용을 하였기 때문이라고 사료된다. 그리고 높은 수율을 바탕으로 한 수용성의 추출물이기 때문에 그들이 가지고 있는 생리활성물질을 식품산업에 쉽게 응용시킬 수 있으며, 유기용매와 같은 화학약품을 사용하였을 때에 발생할 수도 있는 안전성에 대한 문제도 해결할 수 있을 것이다. 이상의 결과로 감태는 잎 뿐만 아니라 줄기도 잠재적 의약품 소재 및 기능성식품 소재로서의 가능성이 충분하다고 판단된다. In this study, antioxidant activities of enzymatic and methanolic extracts from E. cava stem and leave were evaluated by measuring the scavenging activities on 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), hydroxyl radical, hydrogen peroxide and the inhibitory effects on DNA damage induced by oxidative stress of cells. Enzymatic extracts were prepared by enzymatic hydrolysis of both stem and leave using food grade five different carbohydrases (Viscozyme, Celluclast, AMG, Termamyl, Ultraflo) and five proteases (Protamex, Kojizyme, Neutrase, Flavourzyme, Alcalase). The enzymatic extracts were lower than methanolic extracts in polyphenol contents, but higher in extraction yield by approximately 30%. The enzymatic extracts were superior to methanolic extracts in DPPH and H₂O₂ scavenging activities and DNA damage protective effect. There were no significant antioxidant activity difference between stem and leave, but the extracts of leave were relatively better than those of stem. In this study it is suggested that E. cava stem as well as its leave would be a good raw materials for antioxidants compound extraction and enzymatic hydrolysis would be a good strategy to prepare antioxidant extracts from seaweeds.

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