시판용 요구르트와 Lactobacillus acidophilus 요구르트의 생화학적 활성의 비교

류재기 ( Jae Ki Ryu ),이형선 ( Hyeong Seon Lee ),구본경 ( Bon Kyung Koo ),김현경 ( Hyun Kyung Kim ) 대한임상검사과학회 2015 대한임상검사과학회지(KJCLS) Vol.47 No.2

Lactic acid-producing bacteria such as Lactobacillus spp. function to ferment carbohydrates and produce ATP. Such Lactobacillus spp. are used for the production of commercial yogurts. Lactobacillus spp. are beneficial to the intestinal tract, and Lactobacillus acidophilus-containing yogurts have received considerable attention because of their preventive effects against early-stage cancer of the large intestine. In this study, lactic acid-producing bacteria were cultured from three different groups: commercial solid yogurt (for eating), commercial liquid yogurt (for drinking), and Lactobacillus acidophilus-containing yogurt. We first determined the optimum culture conditions for Lactobacillus spp. and then analyzed turbidity and pH in order to compare the growth abilities and lactic acid-production capacities among the groups. Finally, high-performance liquid chromatography was used to measure the lactic acid content in the culture supernatants, and the antibacterial activities against Staphylococcus aureus and Escherichia coli were compared among the three groups. The optimum culture conditions for Lactobacillus spp. were MRS medium at 25oC, for 24 h. The highest turbidity was found in L. acidophilus-containing yogurt, followed by liquid yogurt and solid yogurt. Similarly, the highest lactic acid production ability was found in L. acidophilus-containing yogurt, followed by liquid yogurt and solid yogurt. Culture supernatants from the three groups did not show any antibacterial activity towards S. aureus; however, supernatants derived from L. acidophilus-containing yogurt resulted in a 1.8 mm inhibitory zone against E. coli in a paper disk diffusion test. These results revealed the high level of lactic acid-production capacity and antibacterial activity in L. acidophilus-containing yogurt.

희소방선균의 seaR 단백질 발현을 통한 기능 분석

류재기,권필승,이형선,Ryu, Jae Ki,Kwon, Pil-Seung,Lee, Hyeong Seon 한국미생물학회 2015 미생물학회지 Vol.51 No.1

방선균이 생산하는 이차대사산물은 자기조절인자(${\gamma}$-butyrolactone autoregulator)라고 불리는 저분자의 신호전달물질과 이에 특이적으로 결합하는 autoregulator receptor protein의 상호작용에 의해 조절되는 것으로 알려져 있다. 그러므로 non-host에 autoregulator receptor 혹은 pleiotropic regulator의 발현은 이차대사산물 혹은 새로운 대사화합물의 효율적인 생산을 유도할 것으로 기대된다. 희소방선균 Saccharopolyspora erythreae으로부터 receptor (seaR) 유전자의 기능을 연구하기 위해 다른 속의 균주인 Streptomyces coelicolor A3(2)로 seaR 유전자를 삽입하여 형질전환하였다. S. coelicolor A3(2)의 형질전환은 oriT, attP, $ermEp^*$과 seaR gene 단편을 가지고 있는 ${\Phi}C31$ 유래의 integration vector인 pEV615 (6.6 kb)를 이용하여 Escherichia coli ET12567/pUZ8002를 DNA 공여체로 이용한 접합전달법을 사용하여 확립하였다. seaR 유전자의 삽입 유무는 PCR방법으로 확인하였고, seaR 유전자의 전사 발현은 RT-PCR방법으로 확인하였다. S. coelicolor A3(2)의 경우 표현형 microarray 실험을 통하여 seaR 유전자의 발현에 따른 표현형의 변화를 확인하였다. 특히, 표현형 microarray 실험에 나타난 tetracycline 항생제 기질에 대하여 wild type이 transformant에 비해 빠르게 성장하는 것은 항균제 감수성 검사와 일치하였다. 이는 tetracycline 생합성 유전자 및 내성 유전자의 발현 억제에 따른 변화라고 예상할 수 있으며 이를 위하여 tetracycline 생합성 관련 유전자 및 내성 유전자의 발현 패턴 분석등과 같은 분자 수준에서의 연구가 필요할 것으로 생각된다. Secondary metabolism in actinomycetes has been known to be controlled by a small molecule, ${\gamma}$-butyrolactone autoregulator, the binding of which to each corresponding receptor leads to the regulation of the transcriptional expression of the secondary metabolites. We expected that expression of an autoregulator receptor or a pleiotropic regulator in a non-host was to be gained insight of effective production of new metabolic materials. In order to study the function of the receptor protein (seaR), which is isolated from Saccharopolyspora erythraea, we introduced the seaR gene to Streptomyces coelicolor A3(2) as host strains. An effective transformation procedure for S. coelicolor A3(2) was established based on transconjugation by Escherichia coli ET12567/pUZ8002 with a ${\varphi}C31$-derived integration vector, pSET152, which contained int, oriT, attP and $ermEp^*$ (erythromycin promotor). Therefore, the pEV615 was introduced into S. coelicolor A3(2) by conjugation and integrated at the attB locus in the chromosome of the recipients by the ${\varphi}C31$ integrase (int) function. Exconjugant of S. coelicolor A3(2) containing the seaR gene was confirmed by PCR and transcriptional expression of the seaR gene in the transformant was analyzed by RT-PCR. In case of S. coelicolor A3(2), a phenotype microarray was used to analyze the phenotype of transformant compared with wild type by seaR expression. After that, in order to confirm the accuracy of the results obtained from the phenotype microarray, an antimicrobial susceptibility test was carried out. This test indicated that sensitivity of the transformant was higher than wild type in tetracycline case. These results indicated that some biosynthesis genes or resistance genes for tetracycline biosynthesis in transformant might be repressed by seaR expression. Therefore, subsequent experiments, analysis of transcriptional pattern of genes for tetracycline production or resistance, are needed to confirm whether biosynthesis genes or resistance genes for tetracycline are repressed or not.

희소방선균 SeaR 유전자가 Streptomyces virginiae의 virginiamycins 생산에 미치는 영향

류재기,김현경,김병원,김동찬,이형선,Ryu, Jae-Ki,Kim, Hyun-Kyung,Kim, Byung-Won,Kim, Dong-Chan,Lee, Hyeong-Seon 한국미생물학회 2015 미생물학회지 Vol.51 No.3

본 연구는 희소방선균 Saccharopolyspora erythreae receptor gene (SeaR)의 기능을 연구하기 위해 다른 속의 균주인 Streptomyces virginiae에 SeaR 유전자를 도입하였다. S. virginiae의 형질전환은 oriT, attP, $ermEp^{\ast}$과 SeaR 유전자 단편을 가지고 있는 ${\varphi}C31$ 유래의 integration vector인 pEV615 (6.6 kb)를 이용하여 Escherichia coli ET12567/pUZ8002를 DNA 공여체(donor)로 이용한 접합전달법(conjugal transfer)을 사용하여 확립하였다. SeaR 유전자의 삽입 유무는 PCR방법으로 확인하였고, SeaR 유전자의 전사 발현은 RT-PCR방법으로 확인하였다. S. virginiae의 경우, virginiamycins 생산은 wild type (S. virginiae)와 transformants (C1, C3) 모두 최초생산시기가 14시간으로 같았다. $VB-C_6$ 첨가시기에 따른 항생물질 유도능 확인결과 본 배양 4시간에 $VB-C_6$ 첨가 시 wild type과 transformants (C1, C3) 모두 $VB-C_6$에 의한 virginiamycins 생성이 유도되지 않았다. 본배양 6시간, 8시간에 $VB-C_6$ 첨가하였을 시 $VB-C_6$에 의한 virginiamycins 생성이 유도되는 것을 확인하였다. 이 결과는 $VB-C_6$에 의한 유도의 경우 S. virginiae 내의 BarA에 의해 VMs 생산시기가 2-4시간 단축되었다고 사료되나, transformants C1, C3의 경우 $VB-C_6$ 첨가 시 virginiamycins 생산이 억제되는 것은 SeaR이 virginiamycins 생합성 유전자에 결합하여 억제자로 기능 한다고 추정 되었다. 이러한 결과로 인하여 외부에서 도입된 SeaR gene이 virginiamycins 생산에 영향을 주는 것으로 확인되었다. In order to study the effect of the receptor protein (SeaR), which is isolated from Saccharopolyspora erythraea, we introduced the SeaR gene to Streptomyces virginiae as host strains. An effective transformation procedure for S. virginiae was established based on transconjugation by Escherichia coli ET12567/pUZ8002 with a ${\varphi}C31$-derived integration vector, pSET152, which contained int, oriT, attP, and $ermEp^{\ast}$ (erythromycin promotor). Therefore, the pEV615 was introduced into S. virginiae by conjugation and integrated at the attB locus in the chromosome of the recipients by the ${\varphi}C31$ integrase (int) function. Transformants of S. virginiae containing the SeaR gene were confirmed by PCR and transcriptional expression of the SeaR gene in the transformants was analyzed by RT-PCR, respectively. And, we examined the production time of virginiamycins in the culture media of both the transformants and the wild type. The production time of virginiamycins in the wild type and transformants was the same. When 100 ng/ml of synthetic $VB-C_6$ was added to the state of 6 or 8 hour cultivation of wild type and transformants, respectively, the virginiamycins production was induced, meaning that the virginiamycins production in the wild type was detected 2 h early than transformants. From these results, SeaR expression was also affected to virginiamycins production in transformants derived from S. virginiae. In this study, we showed that the SeaR protein worked as a repressor in transformants.

선택적 폐열회수를 이용한 에너지 절감형 섬유염색 공정기술 개발

류승한(Ryu Seung-Han),이상헌(Lee Sang-Hun),조석진(Jo Seog-Jin),류호생(Ryu Ho-Saeng),성재기(Sung Jae-Ki),배천곤(Bae Chun-Gon) 한국열환경공학회 2012 한국열환경공학회 학술대회지 Vol.2012 No.-

A great deal of energy is necessary with emission of wastewater in dyeing and finishing process, but heat recovery from wastewater is not introduced since its technology is not developed yet. In order to obtain the method utilizing hot water produced by heat source, that is, dyeing wastewater is was investigated the characteristics of dyeing and finishing process and energy basic unit. Energy basic unit of polyester/cotton(T/C), polyester/rayon(T/R) and polyester dyeing process are higher than that of the other process. The average quantity of wastewater for each dyeing company is 650㎥/day, the average temperature of wastewater is about 35~45℃. Because the SS solutiuon of wastewater in polyester dyeing process is lower than that of the other process, the effect of corrosion in heat recovery system is low.

환기조절 및 약제적기살포에 의한 비닐하우스재배 오이에 발생하는 노균병 방제

김용기(Yong-Ki Kim),류재당(Jae-Dang Ryu),류재기(Jae-Gee Ryu),이상엽(Sang Yeob Lee),심홍식(Hong-Sik Shim) 한국농약과학회 2003 농약과학회지 Vol.7 No.3

Changes in the Blood Components Caused by Water Intake

김현경,김수환,류재기,Kim, Hyun-Kyung,Kim, Soo-Hwan,Ryu, Jae-Ki Korean Society for Clinical Laboratory Science 2017 대한임상검사과학회지(KJCLS) Vol.49 No.3

물은 생체에 필수적인 성분이고 많은 생리학적 과정에 관련되어 있음에도 불구하고 물을 꾸준히 충분하게 섭취하는 것이 혈액 성분에 어떤 영향을 미치는지에 대해서는 잘 알려져 있지 않다. 따라서 이 연구에서는 13명의 정상 성인에게 물을 섭취하게 한 후에 혈액학적, 고감도 C 반응성 단백질(hs-CRP), 면역글로불린 G (IgG)의 변화를 측정하였다. 4명의 대조군은 물을 자유롭게 마시게 하였고 9명의 실험군은 시판되는 생수를 매일 2L씩 마시게 하였다. 2주 후에 혈액을 채취하여 검사한 결과, 혈구 세포 수, 적혈구 용적률, 혈색소 수치는 증가했지만 유의성은 없었다(p>0.05). 그러나 평균 혈색소량(MCH)과 평균 혈색소 농도(MCHC)는 각각 의미 있게 증가하였고(p<0.05, p<0.01), 평균 혈소판 용적(MPV)은 의미 있게 감소하였다(p<0.05). 심혈관 질환의 표지자로 쓰이는 면역학적인 검사항목인 hs-CRP는 물 섭취 후에 감소하는 것으로 나타났으나 유의한 차이는 없었다(p>0.05). 그러나 IgG의 농도는 물 섭취 전에 비해 상당히 유의성 있게 증가하는 결과를 나타냈다(p<0.05). 결론적으로, 꾸준히 충분하게 물을 섭취하면 혈색소 수치가 증가하여 빈혈이 완화될 수 있고 혈소판 활성과 hs-CRP가 감소하여 심혈관 질환의 위험을 줄일 수 있다. 또한 체액성 면역 성분이 증가하여 면역 기능이 향샹될 수 있다.

사과저장병의 발생 및 방제

김용기(Yong-Ki Kim),김령희(Ryung-Hee Kim),류재당(Jae-Dang Ryu),류재기(Jae-Gee Ryu),이상엽(Sang-Yup Lee),최용철(Yong-Chul Choi) 한국농약과학회 1998 농약과학회지 Vol.2 No.2

겨우살이 lectin의 흰쥐 간세포 독성에 미치는 영향

장철수 ( Choul Soo Chang ),류재기 ( Jae Ki Ryu ),김태호 ( Tae Ho Kim ) 대한임상검사과학회 2007 대한임상검사과학회지(KJCLS) Vol.39 No.3

In the present study, the author investigated to the cytotoxocity in cultured rat hepatocytes of Viscum album lectin. The cytotoxcity effect in Viscum album lectin on the activity of LDH was also investigated. Viscum album lectin significantly increased LDH leakage into medium of hepatocytes treated or untreated with CCl4 (p<0.001). However, Viscum album lectin significantly increased LDH leakage from CCl4-induced hepatocyte (p<0.001). There was a significant increase in LDH levels relative to the control group. Histological observation basically supported the result obtained from LDH assay. The livers of rats challenged with CCl4 produced a marked increased cytoplasmic vacuoles and inflammatory cells in number, while the number of necrotic cells and swollen hepatocytes did not change significnatly. Rats administered DMSO alone did not alter the normal hepatic architecture. Histological observation of liver section in rat treated 72 hrs with either Viscum album lectin CCl4-induced liver damage showed number of cytoplasmic vaculoe and necrotic cell. The number of inflammatory cell increased markedly. This results suggest to the conclusion that Viscum album lectin has a effect of hepatotoxicity activator.

겨우살이 Lectin이 흰쥐의 혈청지질 및 간조직에 미치는 영향

장철수(Chul-Soo Jang),류재기(Jae-Ki Ryu) 한국콘텐츠학회 2012 한국콘텐츠학회논문지 Vol.12 No.9

본 연구에서 국내산 겨우살이 lectin이 흰쥐 간의 지방형성에 미치는 영향을 알아보기 위해 혈청 내 지질함량을 측정하였고, 이를 확인하고자 간조직의 지방형성 변화를 조사하였다. 렉틴의 분리는 sephadex G-150로 여과 및 sepharose 4B affinity chromatography 로 정제하였다. CCl₄를 복강 내에 투여시 72시간 경과 후 혈청 총cholesterol 및 triglyceride는 정상군 및 olive oil 투여군에 비해 유의하게 증가하였으며, lectin과 CCl₄를 동시 투여 하였을 때는 유의한 감소를 나타내였다. 흰쥐 간의 조직학적 관찰은 CCl₄투여군은 정상군 및 olive oil 투여군에 비해 지방변화 및 간세포 내에 많은 대소의 cytoplasmic vacuole가 보였으나, CCl₄와 lectin을 동시 투여시는 CCl₄ 투여군에 비해 cytoplasmic vacuole은 현저히 감소하였고, 이에 비례하여 혈청 cholesterol 및 triglyceride 측정치가 현저히 감소하는 결과를 나타내었다. 이상의 결과를 볼때 흰쥐에서 lectin이 혈청 지질을 감소시키거나 또는 조직학적 관찰에서 간조직의 지질형성을 억제시키는 효과가 있는 것으로 확인되었다. This study was carried out to investigate effect of serum lipid and liver tissue in lectin from Viscum album on rats. The lectin was purified by sepharose 4B affinity chromatography and gel filtration using sephadex G-150 with plant material from Viscum album. After 72 h of CCl₄ injection, there was a significant increase in serum total cholesterol and triglycerige levels relative to the control group. However, treatment of both Viscum album and purified lectin were significantly decreased lipid parameters against the CCl₄-induced. Histological observation of the liver section of rats challenged with CCl₄ produced a marked increase of cytoplasmic vacuoles in number, while rats administered olive oil alone did not alter the normal hepatic architecture. Histological observation of the liver section in rats treated 72 h with either Viscum album purified lectin or CCl₄-induced liver lipogenesis showed decreased numbers of cytoplasmic vaculoes and necrotic cells. These results suggest that Viscum album lectin has a significantly decreased lipid in serum or histological observation of the liver section decreased in lipogenesis in rats.

농산물우수관리제도(GAP system) 적용을 위한 깻잎의 수확 후 관리시설(APC)에 대한 미생물학적 안전성 평가

김경열(Kyeongyeol Kim),남민지(Minji Nam),이효원(Hyowon Lee),심원보(Won-Bo Shim),윤요한(Yohan Yoon),김세리(Se-Ri Kim),김두호(Doo-Ho Kim),류재기(Jae-Gee Ryu),홍무기(Moo-Ki Hong),유오종(Oh-Jong You),정덕화(Duck-Hwa Chung) 한국식품과학회 2009 한국식품과학회지 Vol.41 No.4

깻잎을 생산하는 APC 시설을 대상으로 GAP system을 도입하기 위해서 각 공정별 용수 및 세척수, 작업자 및 작업장 환경, 각 공정별 깻잎 그리고 공중낙하균을 대상으로 미생물학적 위해 분석을 실시하였다. E. coli, E. coli O157 그리고 L. monocytogenes를 제외한 위생지표세균(일반세균과 대장균군)과 병원성 미생물(B. cereus와 S. aureus)이 세척수, 작업자 장갑 및 작업복 그리고 포장대 등 대부분의 항목에서 비교적 높은 수준으로 검출되었다. 특히 직접적인 교차오염의 위험이 있는 세척수와 작업자 장갑의 경우, 일반세균수는 각각 0.91-3.36과 3.31-4.29 log CFU/(mL, 100 ㎠), 대장균군은 0.00-1.86과 1.16-2.06 log CFU/(mL, 100 ㎠)의 비교적 높은 수준으로 검출되었다. 또한 입고된 원재료에서 포장공정에 이르기까지 깻잎에서 일반세균과 대장균군이 각각 4.82-5.93과 2.82-3.49 log CFU/leaf 수준으로 분리되어 유의적인 세척효과는 없는 것으로 나타나(p≥0.05) 식중독 사고를 방지하기 위해 더욱 향상된 세척공정이 절실히 요구된다. 이와 같이 현재 APC 시설은 미생물학적 안전성을 확보하기보다는 선별 및 저장의 기능에만 초점을 맞춰 운영되기 때문에 위생적인 개념이 포함된 새로운 개념의 관리체계가 필요한 실정이다. 따라서 신선하고 안전성이 확보된 깻잎을 생산·공급하기 위해 사전예방적 안전체제인 HACCP system을 기초로 한 GAP system을 제시함으로써 미생물학적 위해요소 관리가 도입된 새로운 개념의 농식품의 안전관리제도를 제시하였다. This study identified risk factors of cross-contamination of foodborne pathogens and established a good agricultural practice (GAP) system for an agricultural products processing center (APC) for perilla leaves. All samples were collected before and after a standard work shift at the APC, while perilla leaves were also collected after each step in the APC. In addition, the workers and their surroundings were sampled by swabbing. The total plate count (TPC) and coliform count in the water samples increased significantly (p<0.05) to 3.36 and 1.73 log CFU/mL after work, respectively. However, no Escherichia coli and Listeria monocytogenes were detected. The bacterial populations of the workers and their surroundings did not differ significantly (p≥0.05) before and after work. However, Staphylococcus aureus (<1.66 log CFU) was detected at a high rate (13-50%) in the basket, packing table, gloves and cloth. Although perilla leaves passed through the washing steps, the TPC and coliform bacterial populations on the final products were higher (p≥0.05) than those of unwashed perilla leaves, which indicates that the washing system was not functioning properly. Accordingly, a GAP system with a better washing system should be employed at this facility.