바다가 보이는 응접실 : 금탑산업훈장은 국가경제 발전에 기여하라는 채찍으로 알고 맡은 바 역할에 최선 다할 터

김찬길 한국해사문제연구소 2002 (月刊)海洋韓國 Vol.346 No.-

CHO-K1 세포에 있어 Bleomycin에 의한 DNA사 절단과 복제 억제에 미치는 열처리의 영향 ( Sensitization Effects of Hyperthermia on Bleomycin-induced DNA Strand Breaks and Replication Inhibition in CHO-K1 Cells in Vitro )

김찬길,김현숙,박상대 한국환경성돌연변이발암원학회 1995 한국환경성돌연변이·발암원학회지 Vol.15 No.2

Phospholipase C γ1의 Src homology 3 (SH3)-domains에 결합하는 단백질의 특성규명

안수정,박태규,모효정,김찬길 건국대학교 자연과학연구소 1998 建國自然科學硏究誌 Vol.9 No.1

본 연구는 세포내 신호전달과정에서 중요한 구성요소인 Src Homology 3(SH3) domain 에 특이하게 결합하는 단백질을 분리하여, 그 특성을 규명함으로써 PLC γ1에 의한 신호전달과정을 규명하고자 하였다. SH3-domain 은 신호전달과정에 관련된 많은 단백질에서 발견되며 다수의 프롤린잔기를 인지함으로써 단백질간의 신호 전달을 매개하는 것으로 사료된다. 본 연구에서는 쥐 뇌의 추출물에서 PLC γ1의 SH3-domain에 특이하게 결합하는 110-kDa 와 100-kDa의 단백질을 순수 분리하여 펩티드 서열을 분석한 결과, 둘 다 시냅스소포 흡수과정에 필수적인 'dynamin' 단백질임을 확인하였다. Dynamin 이 PLC γ1의 SH3-domain 에 특이적으로 결합하는 것으로 보아 PLC γ1은 dynamin과 더블어 시냅스소포 흡수과정에 중요한 작용을 하는 것으로 사료된다. Src homology 3 (SH3) domains are found in a variety of proteins that are involved in signal transduction or represent components of the cytoskeleton. These domains are thought to serve as modules that mediate specific protein-protein interactions that include proline-rich sequences on the target protein. We have identified proteins of 110- and 100-kDa in rat brain extract that bind specifically to the SH3 domain of phospholipase C γ1(PLC γ1), a primary substrate of receptor tyrosine kinases, and characterized the both bands as the microtubule-activated GTPase dynamin. These results suggest that PLC γ1 might be involved in synaptic vesicle endocytosis by interacting with dynamin.

Symposia / S7-4 : Involvement of PLCγ 1 and Its Binding Proteins in the Process of Synaptic Vesicle Trafficking

김찬길(Chan Gil Kim),(Seung Jin Han),(Jong Ran Lee),(Seung Hwan Hong),(Tae Kyu Park) 한국생화학분자생물학회 (구 한국생화학회) 1999 생화학분자생물학회 춘계학술발표논문집 Vol.- No.-

Cloning and Characterization of Nkx-2.5: A Murine Homelogue of Drosophila NK4

Lee, Kwang-Ho,Kim, Chan-Gil,Park, Tae-Kyu 建國大學校 自然科學硏究所 1995 建國自然科學硏究誌 Vol.6 No.-

조절 유전자들은 초기 배 발생과 분화를 조절하는 데 중요한 역할을 수행한다. 최근 골격근(skeletal muscle) 세포의 분화기작에 대해서는 많은 연구가 진행되어 왔으나, 척추동물의 배 발생 중 가장 초기에 형성되는 심장의 발생에 관해서는 알려진 연구가 거의 없다. 척추동물에 있어서 호미오박스(homeobox) 염기배열을 갖는 많은 유전자들은 생쥐 배에서 광범위하게 발현된다. 그러나 호미오박스 유전자가 초기 배의 최첨단 앞 부분에서 발현되지 않았다. 우리는 이 실험에서 Nkx-2.5라는 생쥐 homeobox cDNA를 클론닝했다. Nkx-2.5 homeodomain의 염기서열은 Hox class gene으로부터 유래되었으며 이 유전자는 초파리 심장을 형성하는 데 중요한 역할을 하는 초파리 Msh2(NK4)와 연관이 있다. Nkx-2.5에 생리학적 기능은 아직까지 밝혀지지 않았으며, 이것의 발현은 중배엽(mesoderm) 발생의 연구에 중요한 표시자로 이용되어질 것으로 예상되며 심장 myogenesis의 기작을 밝히는 데 중요한 역할을 할 것으로 사료된다. Concerted activation of regulatory genes plays a fundamental role in temporal and spacial patterns of embryonic development and differentiation. Although significant progress has been made in molecular understanding of skeletalmuscle differentiation, no information is available concerning the genes involved in development of the heart, the first organ to form in vertebrate embryos. Many vertebrate homeobox-containing genes have been shown to be expressed in broad regions of the mouse embryo, but no expression of a homeobox gene has been found in the most anterior region of the early embryo, the heart primordium. We report here the cloning and characterization of a murine homeobox cDNA, Nkx-2.5. Nkx-2.5 homeodomain sequence is divergent from those of the Hox class genes but is related to that of Drosophila Msh2(NK4), which plays a key role in Drosophila heart formation. Although physiological function of Nkx-2.5 is yet to be determined, its expression will be a valuable marker in the analysis of mesoderm development and an early entry point for dissection of the molecular basis of myogenesis in the heart.

Murine Nkx-1.2 와 상호작용하는 유전자의 클로닝

고한석,김찬길,박택규 건국대학교 자연과학연구소 1999 建國自然科學硏究誌 Vol.10 No.2

호메오 단백질은 DNA에 결합하여 전사를 조절함으로써 생명체의 형태형성에 있어 마스터의 역할을 한다. 본 연구에서 생쥐 호메오 단백질의 전사조절기작을 연구하기 위하여, 초파리의 형태형성에 중요한 역할을 하는 NK-1 유전자에 대한 생쥐의 상동유전자인 Nkx-1.2 유전자를 분리하여 그 염기서열을 밝혔다. Nkx-1.2 유전자는 Sax-1으로도 알려져 있으며 중추신경계의 형성에 중요한 역할을 하는 것으로 밝혀졌다. 이러한 Nkx-1.2와 상호작용하는 단백질을 암호화하는 유전자를 클로닝하기 위하여 Yeast two-hybrid 실험법을 이용하여 생쥐의 cDNA library로부터 5개의 서로 다른 유전자를 클로닝하여 #4, #7, #30, #41, #45 라 명명하였다. 이들 유전자의 염기서열을 분석한 결과 기존에 밝혀지지 않은 새로운 유전자임을 확인하였다. Nkx-1.2 의 카르복시말단을 부분적으로 제거한 재조합체와 클로닝된 유전자의 상호작용을 β-galactosidase 활성도로 조사한 결과, Nkx-1.2 전체 유전자를 bait로 사용한 실험군이 가장 높은 활성을 나타내었다. 또한 #45 클론을 탐침으로 사용하여 Northern blot 을 수행한 결과, #45 유전자는 대부분의 조직에서 발현하였으며, 그 크기가 약 4.5kb임을 확인하였다. 이러한 결과는 Nkx-1.2 가 여러 단백질과 상호작용하는 전사조절자로서의 역할을 하는 것으로 사료된다. Homeodomain transcription factors behave as master regulators of morphogenesis by controlling the expression of target genes. A fundamental problem is how homeodomain proteins achieve functional sepcificity in vivo in light of the facts that homeodomains bind in vitro to DNA sequences that ar remarkably similar, and that homeodomain transcription factors can act either as transcriptional activators or repressors. In order to study this problem we initiated experiments using the yeast two-hybrid system to identify genes encoding proteins that interact with the NK-homeodomain proteins and to evaluate their contribution to the functional specificity of the NK-homeodomain proteins. From the screening of mouse embryonic match-marker cDNA libraries using Nkx-1.2 as bait we discovered novel gene clones, numbered as 4, 7, 30, 41, and 45. Nucleotide sequence analysis revealed that these clones originated from different unknown genes. In order to see which region of the Nkx-1.2 protein could interact with these gene product, various GAL4 : Nkx-1.2 bait constructs containing different parts of the coding region of the Nkx-1.2 homeobox gene were generated. Domain analysis showed that full Nkx-1.2 sequence had the strongest β-gal activity. Multiple-tissue northern blot analysis revealed that #45 gene clone expressed ubiquitously and its mRNA size was 4.5Kb. These results suggest that the Nkx-1.2 functions as a protein-binding interface and thereby regulate the DNA-binding specificity of homeodomain transcription factors.

Phosphatidylcholine 의 분해에 의한 HeLa 세포와 Gelatin 기질과의 상호작용의 유도

강신성,김찬길,이영섭,전장수,하만준,Jacobson, Bruce S . 경북대학교 유전공학연구소 1995 遺傳工學硏究所報 Vol.10 No.1

HeLa cells, a transformed human epithelial cell line, attach to various substrata but subsequent spreading is specific to collagen or gelatin. The spreading is initiated by the activation of phospholipase A₂ (PLA₂) which produces arachidonic acid (AA) as a consequence of cell surface collagen receptor clustering. This study examines the mechanism of PLA₂ activation and which phospholipids are hydrolyzed by PLA₂ to release AA in response to HeLa cell adhesion to a gelatin substratum. The levels of phosphatidylcholine decreases, among various phospholipids, during attachment and spreading of HeLa cells. Lysophosphatidylcholine is the only lysophospholipids formed during HeLa cell adhesion indicating that clustered collagen receptors activate PLA₂ to hydrolyze posphatidylcholine to AA and lysophosphatidylcholine. Among various molecular entities which are known to regulate PLA₂ activation, we have previously shown that PLA₂ activation is not mediated by either changes in Ca^(2+) levels, alkalinization of cytoplasmic pH, or activation of protein kinase C. It is also likely that PLA₂ activation is not mediated by either pertussis or cholera toxinsensitive G proteins as those toxins do not affect both AA release and cell spreading.

p115, transcytotic fusion protein, binds to Src homology domains of Phospholipase C-r1

Shin, Yu Jung,Lee, Jung Bin,Kim, Chan Gil 建國大學校 自然科學硏究所 2002 建國自然科學硏究誌 Vol.13 No.2

세포 내에서 PLCγ1의 또 다른 기능을 찾기 위하여 PLCγ1의 SH223에 결합하는 단백질을 규명하고자 하였다. 먼저 PLCγ1의 SH223에 결합한 단백질에 대한 항체를 생산한 후, 이를 사용하여 면역스크린방법으로 결합단백질을 암호화하는 유전자를 선별하였다. 선별한 유전자를 확인한 결과, 소낭의 이동에 관여하는 P115단백질을 암호화하는 유전자임을 확인하였다. 이후 p115에 대한 항체를 만들어 PLCγ1과의 결합성에 관한 실험을 수행한 결과, p115는 PLCγ1의 C-terminal SH2와 SH3부위에 특이적으로 결합함을 밝혔다. 이러한 결과로 보아 PLCγ1은 소낭의 이동과저에서 중요한 역할을 할 것으로 사료된다. In order to gain further insight into the function of PLCγ1, we tried to identify the binding proteins that can interact with the SH223 domain of PLCγ1. Innunoscreening was performed with the purified antisera that are specific to SH223-binding proteins. Several immunoreactive clones were identified as the putative binding proteins and one of them was identified as p115. p115 has been reported to be required for transcytotic fusion and subsequent binding of the vesicles to the target membrane. The interaction between PLCγ1 and p115 were specific to carboxyl-terminal SH2 domain and SH3 domain of PLCγ1, and also confirmed by biochemical approaches such as that the SH2 and SH3 domains of PLCγ1 is involved in the process of the vesicle transport via interaction with other vesicle-associated proteins such as p115.

자외선과 MMS 를 처리한 절제회복 결함 및 숙련 포유동물 세포의 후복제 회복

박상대,이치건,김찬길,최수영 한국유전학회 1984 Genes & Genomics Vol.6 No.2

Post-replication repair was determined in CHO-Kl, HF and XP20S cells treated with UV-light and MMS by "pulse chase" experiments. All these cell lines showed normal growing patterns of nascent DNA in spite of the presence of damaged sites on the template DNA strands, even in the excision repair defective cells. These results suggest that post-replication repair may not be affected by damages caused by UV-light and MMS.

Intelligent Geen SMPS기반 플러그인형 소비전력정보 PLC통신모듈 개발

최영길(Young-Kil CHOI),김찬길(Chan KIM),전의석,조경숙 대한전기학회 2008 대한전기학회 학술대회 논문집 Vol.2008 No.7(초록집)