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지숙,국중기,박주철,김흥중,장현선,김종관,김병옥,Ji, Suk,Kook, Jung-Ki,Park, Joo-Cheol,Kim, Heung-Joong,Jang, Hyun-Seon,Kim, Chong-Kwan,Kim, Byung-Ock The Korean Academy of Periodontoloy 2006 Journal of Periodontal & Implant Science Vol.36 No.2
치주질환의 진행이 나이에 의해 영향을 받는다는 사실은 알려져 있으나 노화에 따른 치주조직 세포의 기능적인 변화에 관한 사실은 많이 알려져 있지 않다. 노화에 따른 세포의 노화가 치주질환의 진행에 어떠한 여향을 끼치는가를 아는 것은 중요하다. 염증 상태에서 nitric oxide (NO)는 조직 파괴에 관여하는 인자로 작용하여 치주질환의 진행에 관여하는 것으로 알려져 있다. 따라서 이 연구는 사람의 치은에서 배양된 치은섬유아세포를 이용하여 세포의 노화에 따른 NO와 이의 합성효소인 inducible nitric oxide synthase (iNOS)의 발현을 알아봄으로써 세포의 노화가 치주질환의 진행에 끼치는 영향에 대해 알아보고자 하였다. 10세의 환자와 55세의 환자에서 각각 채취한 치은에서 배양된 세포와 10세의 환자에서 채취한 세포를 계속적인 계대배양을 통해 얻은 실험실 상 노화된 세포를 포함하여 총 3 종류의 치은섬유세포를 실험에 이용하였다. Hot phenol-water extraction을 통해 추출된 Porphyromonas, gingivalis ATCC 33277 lipopolysaccharide (LPS)와 재조합 $IFN-{\gamma}$ 를 세포에 적용시켜 Griess assay를 통해 조건화된 배지에서 NO를 측정하였다. 20세와 55세의 환자에서 채취된 치은 조직과 총 3 종류의 배양된 세포에 NOS-II 항체를 적용시켜 iNOS 단백질 발현을 관찰하였다. Total RNA를 추출하여 RT-PCR를 통해 iNOS mRNA의 발현을 분석하였다. 치은섬유아세포에서 NO는 자발적으로 발생되었고, 이러한 발현은 젊은 세포보다 노화된 세포에서 강하였다. P, gingivalis LPS와 제조합 $IFN-{\gamma}$는 치은섬유아세포에서 NO의 발현을 증가시켰고, 이러한 발현은 젊은 세포보다 노화된 세포에서 강하였다. 면역조직화학 염색에서 iNOS 단백질은 젊은 사람과 노화된 사람의 치은 조직 모두에서 치은섬유아세포와 상피의 기저층 세포와 염증세포에서 발현되었으나 노화에 따른 발현의 차이를 구별할 수는 없었다. 세포의 면역염색에서 iNOS 단백질은 노화된 세포에서 강하게 발현되었고 이러한 발현은 LPS와 $IFN-{\gamma}$ 에 의해 강화되었다. LPS와 $INF-{\gamma}$ 의 조건이 주어지지 않은 상태에서 iNOS mRNA는 젊은 세포에서보다 노화된 세포에서 강하게 발현되었다. 이러한 결과를 통해 세포의 노화가 NO와 iNOS 발현을 증가시킴으로서 치주질환의 진행에 영향을 끼칠 수 있음을 시사하였다.
Er:YAG 레이저 조사가 S. mutans의 성장 및 산 생성능에 미치는 영향
김희진,국중기,이상호,이난영,Kim, Hee-Jin,Kook, Joong-Ki,Lee, Sang-Ho,Lee, Nan-Young 대한소아치과학회 2003 大韓小兒齒科學會誌 Vol.30 No.4
치아우식증은 산에 의해 법랑질이 탈회되는 현상으로 소아 및 청소년기에 가장 흔히 발생하는 구강질환 중의 하나로서, 치아우식증의 원인요소 중 다른 인자들보다 객관적으로 조사할 수 있는 구강내 세균에 대한 연구가 활발히 이루어져 왔다. 이 연구는 구강내의 치태라는 고체상태의 조건과 유사한 상태로 Er:YAG 레이저가 구강내 산 생성세균인 S. mutans의 증식에 미치는 영향 및 레이저의 조사시간에 따른 차이를 평가하고자 하였다. Er:YAG 레이저의 구강내 산 생성 세균인 S. mutans에 대한 증식억제효과를 평가하기 위하여 S. mutans pellet에 Er:YAG 레이저를 비접촉식 방법으로, 50mJ, 10Hz, 그리고 조사시간을 1초, 3초, 5초, 7초, 9초로 달리하여 조사하고 이때의 세균의 성장률과 산 생성능을 0, 2, 4, 8, 12, 24, 36, 48시간 동안 측정한 결과 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 레이저를 조사한 군이 레이저를 조사하지 않은 대조군에 비해 세균의 성장률이 감소되었다(P<0.01). 2. 레이저를 조사한 후 12시간까지 1, 3, 5초 조사군에 비해 7, 9초 조사군에서 세균의 성장율이 유의하게 감소되었으나(P<0.05), 24시간 후부터는 서로 유의할만한 차이를 보이지 않았다. 3. 레이저를 조사한 시간이 증가함에 따라 세균의 산 생성능력이 회복되는 시간이 길어짐이 관찰되었고 24시간 후에는 대조군과 차이를 보이지 않음으로써 일정 시간 이후에는 점차적으로 산 생성능력이 회복됨을 알 수 있었다. The purpose of this study was to investigate the inhibitory effect of Er:YAG laser against the intraoral acid producing bacterium of S. mutans. Bacterial pellet containing S. mutans KCTC 3065 was irradiated by Er:YAG laser having a $650\;{\mu}m$ diameter beam by non-contact mode. Irradiated parameters were 50mJ, 10Hz and exposure time were 1s, 3s, 5s, 7s, 9s respectively. We obtained the following results of relative growth rate and acid-producing ability of S. mutans by culturing for 48hrs. 1. The growth rate of S. mutans was decreased in the group of laser irradiation compared to the control group(P<0.01). 2. The growth rate at laser irradiation group of 7s, 9s irradiation time was decreased significantly compared to the laser irradiation group of 1s, 3s, 5s irradiation time, until 12 hours(P<0.05). After 24 hours, all groups of laser irradiation were not found to be statistically different in each other. 3. The acid-producing ability of S. mutans was inhibited for a certain duration by irradiation of laser. In summary, the growth rate and acid producing ability of S. mutans decreased according to laser irradiation. This effect was directly related to the amount of irradiation time. These results suggested that Er:YAG laser had an growth inhibition effect on S. mutans.
Cefixime의 치주병원성 세균 6종에 대한 항균 효과
장현선,박문규,국중기,김화숙,김병옥,Jang, Hyun-Seon,Park, Mun-Gyu,Kook, Joong-Ki,Kim, Hwa-Sook,Kim, Byung-Ock 대한치주과학회 2005 Journal of Periodontal & Implant Science Vol.35 No.2
The aim of this study was to determine the minimal inhibitory concentration(MIC) of cefixime, which is a 3rd generation of cefalosporin, against 6 species of putative periodontopathogens; Fusobacterium nucleatum, Actinobacillus actinomycetemcomitans, Prevotella intermedia, Prevotella nigrescens, Tannerella forsythia and Porphyromonas gingivalis. The efficacy of cefixime was examined by comparing it with that of several antibiotics(amoxicillin, $Augmentin^{(R)}$ ciprofloxacin, metronidazole, and tetracycline), which were used as the control. The MIC was measured using a microdilution method. The MIC of cefixime against the putative periodotopathogens, as a single use regimen, was relatively lower than that of the other antibiotics. The MIC of cefixime/metronidazole against P. intermedia ChDC KB14, P. nigrescens ChDC KB50, F. nucleatum ChDC PV-F37, F. nucleatum ChDC F130, and F. nucleatum ChDC F175, as a simultaneous regimen, was lower than that of the other antibiotics. The concentration of cefixime in the crevicular fluid of volunteers who received 250mg every 12 hours for 3 days was $9{\mu}g/ml$ after 9 hours. In conclusion, cefixime showed good antimicrobial activity in a single treatment or as a combined therapy with amoxicillin, $Augmentin^{(R)}$ or metronidazole against 6 periodontopathogens.
The Effect of Chlorhexidine on the formation of bone nodules by Periodontal ligament Cells in Vitro
최희준,지숙,국중기,장현선,박주철,김흥중,김종관,김병옥,Choi, Hui-Jun,Ji, Suk,Kook, Joong-Ki,Jang, Hyun-Seon,Park, Joo-Cheol,Kim, Heung-Joong,Kim, Chong-Gwan,Kim, Byung-Ock The Korean Academy of Periodontoloy 2006 Journal of Periodontal & Implant Science Vol.36 No.2
사람치주인대섬유모세포(human periodontal ligament fibroblast, PDLF)의 기능 손상과 클로르헥시딘(Chlorhexidine, CHX)의 세포독성에 관한 분자적인 기전은 최근까지도 불명확하다. 이 연구의 목적은 PDLF에 의한 골결절 형성에 있어서 CHX의 효과를 평가하고, 치주수술후에 치주병원균의 최소억제농도(minimal inhibitory concentration, MIC)를 평가하고자 하였다. CHX의 세포독성을 평가하기 위해서 MTT assay법을 실시하였다. CHX은 0.12%에서 0.00012%까지, 즉 10-1000배로 희석시킨 후 30, 60, 120초 동안 PDLF에 적용되었고, 석회화된 결절은 alizarin red 용엑에 염색되었다. 치주병원균에 대한 CHX의 MIC가 평가되었다. 이 연구 결과, 세포생존율 검사에서는, 단지 0.12% CHX 에 노출되었던 세포들만 세포 증식 소견을 다소 나타내었다. 모든 CHX 농도(0.12%-0.00012%)에서 PDLF에 의한 골결절 형성은 의미있는 감소를 나타내었다. 또한 치주병원균에 대한 CHX의 MIC는 0.0012%로 나타났다. PDLF의 골결절 형성에 영향을 주는 농도(0.00012%)는 세포독성을 나타내는 농도(0.12%)보다 더 낮은 농도를 보였고, 치주병원균의 최소억제에 필요한 농도는 0.0012%로 나타났다. 이런한 결과들은 통상적으로 상용되는CHX이 PDLF에 의한 골결절 형성에 있어서 영향을 미칠 수 있음을 시사하였다.
치주질환이 없는 청년의 치은연상 및 치은연하 치면세균막에 존재하는 치주질환 관련 4종 세균의 분포 비교
장현선,김지연,국중기,유소영,김화숙,김수관,김병옥,Jang, Hyun-Seon,Kim, Ji-Yeon,Kook, Joong-Ki,Yoo, So-Young,Kim, Hwa-Sook,Kim, Su-Gwan,Kim, Byung-Ock 대한치주과학회 2003 Journal of Periodontal & Implant Science Vol.33 No.2
The purpose of this study was to investigate and compare the frequence of 4 periodontal pathogens in the supra- and subgingival plaque in periodontally healthy subjects. Twenty adult individuals aged 22 to 28 years (mean age 23.65 years) participated in this study. All subjects had no pocket sites more than 3 mm deep, and the sites selected for sampling were all negative for bleeding. After drying and isolation of the sites with cotton rolls, supragingival plaque was sampled using sterile periodontal curette. Each plaque sample was placed in individual tubes containing 500 ml of 1X PBS. After removal of the supragingival sample and any remaining supragingival plaque, subgingival plaque samples were taken from the same sites using sterile curette and placed in similar individual tubes. Identification of 4 putative periodontal pathogens from the samples was performed by polymerase chain reaction based on 16S rDNA. Chi-square test was employed to identify significant explanatory variables for the presence of the 4 periodontal pathogens. The data show that Actinobacillus actinmycetemcomitans, Porphyromonanas gingivalis, Bacteroides forsythus, and Fusobacterium nucleatum occurred in 16.9%, 14.4%, 52.5%, and 80.6%, respectively. No significant differences were noted in the periodontal pathogens between supra- and subgingival plaques according to the kind of teeth. However, the incisors were at higher risk for harboring F. nucleatum (p <0.05). Conclusion: These results reveal that anaerobic periodontal pathogens can be detected in supragingival plaques. Supragingival plaque may function as a reservoir of peri-odotopathogens.
Cefuroxime axetil의 치주병원성 세균에 대한 최소억제농도와 치은열구액 농도에 관한 실험적 연구
장현선,김재덕,국중기,김화숙,유소영,김미광,김병옥,Jang, Hyun-Seon,Kim, Jae-Duk,Kook, Joong-Ki,Kim, Hwa-Sook,You, So-Young,Kim, Mi-Kwang,Kim, Byung-Ock 대한치주과학회 2003 Journal of Periodontal & Implant Science Vol.33 No.3
The purpose of this study was to determine the minimal inhibitory concentration (MIC) of cefuroxime axetil, semisynthetic cefalosporin, for some putative periodotopathogens; F. nucleatum, A. actinomycetemcomitans P. intermedia and P. gingivalis. To investigate the efficacy of cefuroxime axetil, several antibiotics, amoxicillin, metronidazole, and ciprofoxacine, were used as control. The MIC was measured by Murray' s method. The MIC of cefuroxime axetil against some putative microbes, as a single use regimen, was relatively high in comparison with that of the other antibiotics used in this study. The MIC of cefuroxime axetil/metronidazole against some putative microbes, as a simultaneous regimen, was similar to that of the other antibiotics used in this study. The manimal level of cefuroxime concentration in gingival fluid was 9${\mu}$/ml at 36hr after the first dose. In conclusion, within the limited experiment, metronidazole/ cefuroxime axetil therapy of periodontitis may provide a therapeutic benefits in reducing the periodontopathogens.