흰쥐에서 Glomerular Basement Membrane Heparan Sulfate Proteoglycan(GBM HSPG)의 클론

고철우,Kasinath, B . S . 대한신장학회 1996 Kidney Research and Clinical Practice Vol.15 No.3

Although full length cDNA sequences of murine and human basement membrane HSPG are known, rat basement membrane HSPG has not been cloned. Oligonucleotide primers were synthesized from the published sequences of domainI of mouse and human basement membrane HSPG, perlecan, where the homology is 9996. The primers were employed in RT-PCR using polyARNA from rat glomerular epithelial cells (GEC) in culture to obtain a 497-bp product, rat perlecan domain-I (RPD-I). RPD-I was sequenced by dideoxy chain termination method using either the M-13 primers or the perlecan domain-I specific primers. The deduced amino acid sequence of the rat product showed 85 % and 88 % homology to the published sequences of domain-I of mouse and human perlecan, respectively. In RPD-I, the three sites for heparan sulfate glycosaminoglycan attachment with the consensus sequence SGD and the sequence NFT for N-linked oligosaccharide attachment are fully conserved, similar to mouse and human species. By northem analysis, employing total and polyA'RNA of rat GEC, RPD-I detected a single large (-12 kb) transcript, similar in size to rat glomerular perlecan reported previously. Our data demonstrate that GBM HSPG synthesized by rat GEC shares similarity with murine and human perlecan basement membrane HSPG.

Cyclic AMP가 흰쥐 사구체 상피세포의 Heparan Sulfate Proteoglycan 유전자 조절에 미치는 영향

고철우,구자훈,박용훈 경북대학교 의학연구소 2000 경북대학교병원의학연구소논문집 Vol.4 No.1

Glomerualr membrane heparan sulfate proteoglycan(GBM HSPG)은 사구체 상피세포에서 생성되는 사구체 기저막 구성물질로서 사구체 기저막이 음전하를 띄게 함으로서 소위 전하장벽'을 이루어 사구체 기저막의 투과성을 안정되게 유지하는 역할을 하며, 사구체 기저막에서의 GBM HSPG의 소실은 단백뇨의 발생과 밀접한 관계가 있음은 이미 잘 알려져 있다. cAMP는 각종 유전자를 조절하는 중간 매개체로서 세포 특이적으로 작용하는 것으로 알려져 있으나, 아직까지 cAMP가 사구체 상피세포에서 GBM HSPG 유전자의 조절에 어떠한 영향을 미치는지 알려져 있지 않다. 이에 cAMP가 사구체 상피세포의 GBM HSPG 유전자 발현에 미치는 영향을 알아보아 사구채내에서 cAMP가 중가되어 있는 각종 신질환에서 단백뇨의 발생기전 규명에 도움을 주고자 본 연구를 시행하였다. 흰쥐의 사구채 상피세포를 배양하여 1mM 농도의 cAMP를 가한 후 1시간, 6시간, 24시간 및 48시간에 RNase protection assay법으로 GBM HSPG mRNA 발현의 변화를 살펴보고, 아울러 cAMP 첨가 후 12시간, 24시간 및 48시간에 면역침전법을 이용하여 GBM HSPG 생성을 정량적으로 측정하였다. 1mM cAMP 투여 후 GBM HSPG mRNA 발현의 변화를 살펴보면 투여 후 1시간, 6시간, 24시간 및 48시간에 각각 43%, 32%, 47% 및 47%의 감소가 관찰되었고, GBM HSPG의 생성은 12시간, 24시간 및 48시간 후에 각각 51%, 70% 및 68%의 감소가 있었다. 결론적으로 cAMP는 사구체 상피세포의 GBM HSPG myNA의 발현을 억제하였고, GBM HSPG의 생성을 감소시킴을 알 수 있었다. 따라서 사구체내에서 cAMP가 증가되어 있으면서 단백뇨를 동반하는 각종 신질환에서 단백뇨의 발생은 cAMP에 의한 사구체 상피세포의 GBM HSPG 유전자 억제와 밀접한 관계가 있을 것으로 생각된다. It is well known that the glomerular basement membrane heparan sulfate proteoglycan(GBM HSPG) synthesized by glomerular epithelial cell(GEC) has an important role in the permeability of glomerular basement membrane and cyclic AMP(CAMP) is involved in regulation of a wide variety of genes maybe including GBM HSPG gene. The direct effect of cAMP on GBM HSPG gene expression and metabolism was not evaluated as yet. Proteinuria represents an impairment of permselectivity function of glomerular basement membrane regulated by GBM HSPG and could be associated with increased glomerular level of CAMP in nephrotic syndrome of diverse causes. RPD-I(rat GBM HSPG core protein domain-I) detected a >9.5kb transcript of GBM HSPG in RNA of rat GEC. Employing a riboprobe synthesized from RPD-I in RNase protection assay, we examined whether cAMP regulated perlecan expression in the GEC. At 1, 6, 24 and 48 hrs of incubation, 1 mM cAMP caused 43%, 32%, 47% and 40% reduction in mRNA expression of perlecan, respectively. Immuno-precipitation showed a corresponding reduction of 51%, 70% and 68% in the synthesis of 35SO4 labeled GBM HSPG by the GEC following 12, 24 and 48 hrs of incubation with cAMP. Our results show that decrease in GBM HSPG gene expression and synthesis by cAMP may be of relevance to proteinuric states characterized by activation of these mediators.

신증후군 환아에서의 혈청 25 - Hydroxyvitamin D 의 변화

고철우,구자훈 대한신장학회 1991 학술대회및초록집 Vol.10 No.2

TNF-α가 토리 상피세포의 투과성에 미치는 영향

고철우,이경희,조민현,조동규,이재태,조희중 대한해부학회 2003 Anatomy & Cell Biology Vol.36 No.5

일반연제 발표 : 흰쥐 혈청 알부민이 사구체상피세포의 Agrin mRNA 발현에 미치는 영향

고철우,조민현,이지혜,김정미,서혜은,구자훈,정기영 대한신장학회 2004 춘계학술대회 초록집 Vol.24 No.1

왜소증 환아에서 Daily Growth Hormone Therapy의 효과

고철우 慶北大學校 醫科大學 1995 慶北醫大誌 Vol.36 No.2

Prospective study was conducted to evaluate the effect of daily growth hormone therapy in children with central growth hormone deficiency. Study population consisted of 16 chilren with idiopathic or secondary grwoth hormone deficiency aged 4 to 15 yrs-old. 0.7 unit per ㎏ of recombinant human growth hormone have been injected daily just before sleep for 1 year, and body measurement along with bone age and serum IGF-Ⅰ was followed up at 3 months interval. And following results were obtained: Annual height velocity (㎝/yr) was significantly increased to 10.4±3.2 during 3 months after injection from 3.1±0.9 before injection, and height velocities during 6, 9 and 12 months were 9.5±3.0, 8.8±1.3 and 8.7±1.1, respectively. And this increment is higher than that by twice weekly injection of growth hormone. It can be said that the effect of growth hormone therapy in children with central growth hormone therapy was excellent and the height increment by daily injection may be higher than that by twice weekly injection, so that daily injection method is recommanded.

만성 사구체 신염-Iga 신병증의 최근진전

고철우,Go, Cheol-U 한국학교보건협회 2006 학교보건 Vol.26 No.-

IgA 신병증은 원발성 사구체 신염의 가장 흔한 원인이다. 이 질환은 동양계와 백인에서 호발하며 흑인에서는 드문 것으로 알려져 있다.

미세변화 신증후군 환아에서 혈중 세포면역지표와 가용성 인터루킨-2 수용체의 변화

고철우,최병호,구자훈 경북대학교 의학연구소 1999 경북대학교병원의학연구소논문집 Vol.3 No.1

미세변화 신증후군에서 세포면역지표의 변화를 분석하여 이 질환의 발병기전의 규명에 도움을 주고자 본 연구를 시행하였다. 대상 환아는 1995년 1월부터 1995년 12월 사이에 경북대학교병원 소아과에서 경피적 신생검상 미세변화신증후군으로 확진되었고, 최근 3개월간 면역억제제를 사용하지 않은 환아 19예 (연령: 2-15세)로 하였고, 대조군으로는 정상 소아 10예로 하였다. 대상환아들로 부터 재발과 관해후 1개월에 말초혈액중 T-helper와 T-suppressor 비율을 측정하고, 혈청 가용성 IL-2 수용체 (sIL-2 R)를 측정하여서 다음의 결과를 얻었다. 1.미세변화 신증후군 환아에서 재발과 관해에 따른 sIL-2 R의 유의한 변화는 없었다. 2.말초혈액의 T-suppressor는 재발 및 관해시에 정상 대조군에 비하여 유의하게 증가되었으며 (p<0.01), 특히 재발시에 이의 증가가 뚜렷하였다. 3.재발시 T-suppressor의 증가는 cyclophosphamide의 사용여부와 무관하였고, 혈청 알부민과 콜레스테롤 치와도 유의한 상관관계가 없었다. 결론적으로 미세변화 신 증후군의 발병은 T-suppressor의 증가와 관련이 있는 것 같으며, 이는 면역억제제투여나 신증후군 자체에 의한 이차적인 변화는 아닌 것으로 생각된다.

각종 신질환환아에서의 면역 지표의 변화에 관하여

고철우,구자훈,안두홍,김재식 慶北大學校 醫科大學 1989 慶北醫大誌 Vol.30 No.2

A prospective study was conducted to see the changes of immunologic indices and its significance in various renal diseases. Study population consist of 129 children; MCNS 42, MsPGN 10, MGN 4, FSGS 3, MPGN 2, RGH 32, HSP nephritis 28, and PIGN 8 cases. The following result was obtained. Total T cell (%) was increased druing relapse period of MCNS, MGN and MPGN compared to control, and changes of T cell susets was most marked in MCNS, showing decreased T_4 and T_8 resulting in low T_4/T_8 ratio during relapse period compared to remmision period. Serum immunoglobuling showed decreased IgG in MCNS, MsPGN, MGN and elevated IgM showed significant elevation during both relapse and remmision period compared to control group. In both IgA nephropathy and HSP nephritis, total T cell and T_4/T_8 ratio was increased during hematuric phase compared to control group, and in IgA nephropathy, T_4 cell was increased during hematuric phase compared to non-hematuric phase. Serum immunoglobulin showed increased IgA abd IgE in IgA nephropathy, and increased IgA and no significant change of IgE in HSP nephritis during hematuric phase. In summary, it can be concluded that both cellular and humoral immune mechanism play a significant role in the pathogenesis of primary renal diseases.

소아에서 혈뇨를 동반한 원발성 고칼슘뇨증 ( Ⅱ )

고철우,구자훈 대한신장학회 1991 학술대회및초록집 Vol.10 No.2