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- 저자 : 閔應基 (검색결과 77 건)
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체외수정 배양액에서 제대혈청에 대한 Human Serum Albumin의 대체효과
민응기,김기철,박소현,황도영,정경순,김충현 대한산부인과학회 1994 Obstetrics & Gynecology Science Vol.37 No.9
배양액 첨가제로서 제대혈청의 대체물로 HSA의 유용성을 점검하고자 제대혈청과 HSA이 포함된 배양액을 이용하여 체외수정을 시행한 후 수정율과 난할양상에 미치는 각 첨가제의 영향을 알아보았다. 1. 평균수정율(FCS: 67.4%; HSA: 65.5%)과 비정상 수정율(FCS: 4.8%; HSA:2.9%)은 통계적으로 유의한 차이를 나타내지 못하였다. 2. 4세포 이상으로 발달한 배아의 비율(FCS: 85.5%; HSA:90.3%)과 grade 1 embryo의 비율(FCS: 51.3%; HSA: 45.8%)은 유의한 차이를 나타내지 못하였다. 3. 평균 embryo score는 FCS군과 HSA군에서 각각 11.9와 12.7로 유의한 차이가 없었다. 이와같은 결과로 제대혈청과 HSA이 수정과 난할에 미치는 영향은 동일한 것으로 사료되며, 배양액 첨가제로서 HSA의 대체사용이 가능하리라 판단된다. Average fertilization rate(67.4%), abnormal fertilization rate(4.8%) and proportion of grade 1 embryo(51.3%) of FCS group were slightly higher than those of HSA group(65.5%, 2.9 and 45.8%, respectively), but proportion of over 2 cell (FCS: 85.5%, HSA: 90.3%) and average embryo score(FCS: 11.9, HSA: 12.7) were vice versa. Any of these differences were not significant. To evaluatt the usefulness of human serum albumin as a supplement ofr the culture medium of in vitro fertilization , the effects of fetal cord serum(FCS group) or human serum albumin (HSA group) on the fertilization rate and embryo quality were studied. It is concluded that HSA was useful as a supplement for the culture medium of IVF.
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송이의 세포외 분비 $\beta$-Glucosidase 효소의 특성
민응기,한영환 한국생물공학회 2000 KSBB Journal Vol.15 No.1
Cellulose 분해에 관련된 $\beta$-Glucosidase 효소 활성의 특성 파악을 위하여 송이균사(Tricholoma matsutake DGUM 26001)의 액체 배양시 세포외로 분비되는 $\beta$-Glucosidase 효소를 부분정제하여 그 특성을 조사하였다. 효소 활성에 미치는 적정 온도는 55-$70^{\circ}C$이었고 최적 온도는 $65^{\circ}C$이었다. 적정 효소활성에 영향을 주는 적정 pH는 3.0-5.0 범위였으며 최적 pH는 4.0이었다. Salicin을 기질로 최적 조건하에서 $\beta$-Glucosidase 효소의 비활성도는 18.7 unit/mg protein이었다. 열안정성은 $60^{\circ}C$이하의 온도에 60분간 열처리시 약 90%이상의 효소활성을 유지하였다. $Fe^{++}$이온은 효소활성을 촉진하였으나, $Hg^{++}$ 및 $Cu^{++}$이온은 효소활성을 매우 억제하였다. Salicin에 대한 효소활성을 100으로 하였을 때, cellobiose는 48.6%의 상대적 효소활성을 나타내었으며, cellobiose에 대한 Km값 및 Vmax값은 각각 0.12mM과 0.02umol/min었다. In order to determine the characteristics of $\beta$-glucosidase associated with cellulose degradation, the enzyme produced extracellularly by the mycelia of Tricholoma matsutake DGUM 26001 in culture broth was partially purified. The enzyme activity was maintained in the range of temperatures trom 55 to $70^{\circ}C$ and its optimum temperature was $65^{\circ}C$. The $\beta$-glucosidase enzyme showed relatively high activity in the range of pH 3.0-5.0 and its optimum pH was 4.0. Under the optimal conditions, the specific activity of $\beta$-glucosidase for salicin as a substrate was 18.7 unit/mg protein. After thermal treatment of the enzyme at $55^{\circ}C$ for 60 min, more than 90% of the enzyme activity was still sustained. Iron($Fe^{++}$) stimulated enzyme activity, whereas mercury($Hg^{++}$) and copper($Cu^{++}$) inhibited. Compared to salicin as a substrate, the relative activity for cellobiose was observed to be 48.6%. The apparent $K_m$ and $V_{max}$ of the enzyme with cellobiose were 0.12 mM and 0.02 umol/min, respectively.
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처치 전후 정자에서 정자자동분석기를 이용한 운동성 양상에 관한 연구
민응기,김기철,박소현,황도영,정경순,김충현 대한산부인과학회 1994 Obstetrics & Gynecology Science Vol.37 No.8
1992년 6월부터 9월까지 함춘여성크리닉에서 체외 수정시술에 참여한 부부중 정액검사 소견상 정상인 불임부부 35예를 대상으로 정자 처리 전후의 운동성을 조사하여 수정률과의 관련성을 알아보았다. 1. Swim-up 처리후 정자의 농도 및 운동성의 변화는 다음과 같다. 1) 정자의 농도는 처리전(77.4*10^6/ml)에 비해 다소 감소하는 경향을 보였으나 통계적 유의성은 없었다. 2) %motility에서는 신선정자(55.0%)에 비해 처리후(81.0%) 유의하게 증가하였으며(p$lt;0.05), motile density는 증가하는 양상을 보였으나 통계적 유의성은 없었다. 3) Motility index에서는 처리 전, 후 각각 11.0, 34.7um/sec로 통계학적으로 유의한 차이가 있었다(p$lt;0.05). 2. 정자 처리후 운동성 매개변수의 변화는 다음과 같다. VCL, VSL, AHL 및 BCF는 신성정자에 비해 유의하게 증가하였으나(p$lt;0.005), LIN과 STR에서는 변화가 없었다. 3. 수정률에 따라 20, 40, 60, 80% 미만 및 80% 이상군으로 나누었을때 수정률이 증가함에 따라 %motility 증가폭과 LIN과 STR의 감소폭이 증가하는 양상을 보였으나, 통계학적으로 유의한 상관관계는 없었다. To investigate the relationship between sperm movement characteristics and in vitro fertilization (IVF) outcome, motility parameters of sperm and fertilization rate were evaluated in 35 normozoospermic patients undergone IFV-ET program at Hamchoon womens clinic. After swim-up preparation following percoll washing, the concentration of spermatozoa was slightly decreased but % motility and motility index were increased significantly(P$lt;0.05). Cuvilinear velocity(VCL), linear velocity(VSL), amplitude of lateral head idsplacment(ALH) and beat/cross frequency(BCF) among the motility parameters were increased (P$lt;0.005). As the fertilization rate was increased, increments of % motility and decrements of linearity(LIN) and straightness(STR) were increased. Therefore, it is suggested that the increment of % motility and the decrement of LIN and STR have relation to fertilization rate.
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민응기,김기철,박소현,정경순,윤은숙,김충현 대한산부인과학회 1993 Obstetrics & Gynecology Science Vol.36 No.7
Manual freezer 와 15%glycerol를 포함하는 동결보존액을 사용하여 액체질소 증기를 이용한 인간정자의 동결법의 유용성을 평가하기 위하여 1992년 6월부터 9월까지 함춘여성크리닉에 내원하여 정액검사를 실시한 환자중 정상기준에 속하는 38명의 환자와 6명의 공영자의 정액을 재료로 동결과 융해과정 전·후의 운동성과 여러 운동성 parameter를 측정하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. Protocol Ⅰ을 이용한 동결보존 결과는 동결전정자나 protocol Ⅱ를 이용했을 때보다 운동성 정자 의 비율,밀도,색인 및 운동성 parameter 가운데는 VCL,VSL,LIN이 유의하게 증가하였다. 2. 15% glycerol을 포함하는 동결보존액을 사용하여 동결보존하였을때는 7.5% glycerol을 포함하는 보존액을 사용한 결과에 비하여 운동성 정자의 비율,밀도,색인 및 여러운동성 paramerer가 유의하 게 증가하였다. 따라서 manual freezer와 15% glycerol을 포함하는 동결보존액을 사용한 protocol Ⅰ을 함춘영성 크리닉의 인간정자의 동결보존 방법으로 사용하고 있다. This study was undertaken to evaluate liquid nitrogen vapor freezing method using manual freezer in the cryopreservation of human spermatozoa. Motility and several motility parameters were used as the criteria of prefreeze and postthaw spermatozoa. The semen of 38 healthy patients and donors whose results of semen analysis were normal were included in this study. The results were as follows: 1. Percent motile sperms, motile density and motility index were increased significantly in Protocol I in comparison with raw semen and protocol II. 2. VCL, VSL and LIN among several motitlity parameters were increased significantly in Protocol I in comparison with raw semen and Protocol II. 3. Percent motile sperms, motile density and motile index were increased significantly in cryopreservation medium containing 15% glycerol in comparison with medium containing 7.5% glycerol. 4. Sperm motitlity parameters were increased significantly in cryopreservation medium containing 7.5% glycerol. Therefore, manual freezer and cryopreservation medium containing 15% glycerol are used as a usual cryopreservation protocol in Hamchoon Women's Clinic.
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