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        Agrobacterium에 의한 더덕의 형질전환과 식물체 재분화

        최필선,김윤성,유장렬,소웅영 한국식물생명공학회 1994 식물생명공학회지 Vol.21 No.5

        CaMV35S promoter-$\beta$-glucuronidase (GUS) 유전자와 선발 표지로서 neomycin phosphotransferase 유전자를 가진 pBI121 binary 벡터를 도입한 Agrobacterium turmfaciens LAB4404와 더덕 유식물체의 자엽 절편을 1 mg/L BA가 첨가된 MS 배지에서 48시간 동안 공동배양한 후 1 mg/L BA, 250 mg/L carbenicillin 100 mg/L kanamycin sulfate을 첨가한 고체배지에 옮겨 명조건에서 배양하였다. 배양 2주 후 절편의 절단면 부근으로부터 수많은 부정아가 형성되기 시작하였다. 이들 부정아의 GUS 활성을 조사한 결과 15%가 양성반응을 나타내었다. 배양 6주 후 절편이 형성한 수많은 부정아로부터 56.7% 빈도로 shoot이 발달하였다. 이들 shoot은 기본배지에 옮겨서 4주 경과되었을 때 대부분 발근하였으며, 재분화된 개체는 토양에 이식하였다. Southem 분석결과 GUS양성을 보인 재분화 개체의 게놈 DNA에 GUS 유전자가 삽입되었음이 확인되었다. To obtain transformed plants, we cocultured cotyledonary explants of Codonopsis lanceolata with Agrobacterium tumefaciens LBA4404, a disamed strain harboring a binary vector pBI121 carrying the CaMV35S promoter-$\beta$-glucuronidase (GUS) gene fusion used as a reporter gene and NOS promoter-neomycin phosphotransferase gene as a positive selection marker in MS liquid medium with 1mg/L BA. After 48 h of culture, explants were transferred onto MS solid medium with Img/L BA, 250mg/L carbenicillin, and 100mg/L kanamycin sulfate and cultured in the dark. Numerous adventitious buds formed on the cut edges of the explants after 2 weeks of culture. When subjected to GUS histochemical assay buds showed a positive response at a frequency of 15%. Explants formed adventitious shoot at a frequency of 56.7%, after 6 weeks of culture. Upon transfer onto the basal medium, most of the shoots were rooted and subsequently the regenerants were transplanted to potting soil. Southern blot analysis confirmed that the GUS gene was incorporated into the genomic DNA of the GUS-positive regenerants.

      • 아가미 혈종과 지느러미 표피탈락 현상을 이용한 어류 폐사원인 연구

        최필선,최성수,이길철,윤준헌,박광식 환경독성보건학회 1996 환경독성보건학회지 Vol.11 No.3

        Histopathological changes of gills and caudal fins isolated from fishes, Cyprinus carpio, Carassius auratus, and Hernibarbus labeo, which were killed by oxygen deficiency or toxic chemicals, were studied. The toxic chemicals were HCl, NaOH, chloroform, benzene, heavy metals(Cu, Cr, Zn, Pb, Hg), and o-dichlorobenzene. The exposure level was enough to kill the fishes within 30 minutes. Oxygen deficient water was prepared by aeration of nitrogen gas and the oxygen concentration was less than l ppm. Cryocutting was used for the rapid preparation of tissue slides and the tissues were stained by hematoxylin/eosin. In the fishes killed by hazardous chemicals, congestion and/or hyperplasia of secondary lamella and erosion of fin were found as the major histopathological changes. Whereas, these characteristics were not observed in gills or caudal fins of fishes killed by oxygen deficiency. These different bioindications appeared in the fishes killed by toxic substances or natural causes, can be used for the rapid identification of the causes of fish kills.

      • KCI등재

        더덕의 체세포배발생에서 전형층분화와 자엽수의 관계

        최필선,소웅영,조덕이,유장렬,Choi Pil-Son,Soh Woong-Young,Cho Duck-Yee,Liu Jang-Ryol 한국식물생명공학회 2005 식물생명공학회지 Vol.32 No.2

        Embryogenic callus was obtained from cotyledonary explants of Codonopsis lanceloata on Murashige & Skoog's medium supplemented with 1 mg/L 2,4-D. Suspension cultures of the embryogenic calli were grown on a shaker at 100 strokes/min, and then the calli were subcultured for 2 weeks in 2,4-D-free medium to produce somatic embryo. In somatic embryos at the globular stage, cotyledon initials began to differentiate themselves in the near distal end of the procambial strand. Dicotyledons, tricotyledon, tetracotyledon and fused cotyledon were differentiated from the distal ends of two, three, four and circular procambial strands, respectively. Nearly circular procambial strand in lower hypocotyls were independently differentiated into two, three, four procambial tissues at cotyledonary node and cotyledons to form somatic embryos with dicotyledon, tricotyledon, tetracotyledon. If the distal subepidermal cells of globular embryo exclusively became cotyledon initials, the torpedo or cotyledonary embryo was characterized by somatic embryos with fused cotyledon. 더덕 자엽절편을 1 mg/L 2,4-D가 첨가된 MS기본배지에 배양하여 배발생캘러스를 얻었고, 호르몬이 첨가되지 않은 MS액체배지에서 구형기의 체세포배를 얻었다. 구형기에서 초기 심장형기로 발달할 때 자엽의 시원세포는 전형성층조직으로부터 분화되기 시작 하였으며, 하배축에서 관찰되는 원통형 전형성층대는 2개의 자엽을 형성할 경우 2개의 전형성층대가, 3개의 자엽은 3개의 전형성층대가, 4개의 자엽은 4개의 전형층대가 각각 독립적으로 분화되어 자엽절과 자엽부위까지 연결되어 있었다. 만약 구형기 체세포배에서 자엽시원세포가 원통형으로 분화될 경우 합생자엽을 갖는 체세포배가 형성되었다.

      • KCI등재후보
      • KCI등재

        새로운 다변량 분포함수를 이용한 GARCH 모형 추정

        최필선 한국재무학회 2005 財務硏究 Vol.18 No.2

        금융자산 수익률의 시계열이 보이는 전형적인 특성 중의 하나는 그 확률분포가 대개 정규분포에 비해 꼬리가 두껍고, 다소간 좌우 비대칭성을 보인다는 점이다. 이러한 비정규성 때문에 GARCH 모형을 이용하여 금융 시계열을 추정할 때 정규분포 대신 Student-t나 GED 분포 등 정규분포에 비해 유연성이 높은 분포함수를 이용할 필요성이 꾸준히 제기되어 왔다. 그러나 이러한 논의는 대부분 단일변량 GARCH 모형에 국한되며, 다변량 GARCH 모형에서는 여전히 정규분포가 주로 이용되고 있다. 본 논문은 금융 시계열의 비정규성을 다변량 차원에서 잘 포착하기 위해 유연성이 매우 높은 새로운 다변량 분포함수를 GARCH 모형에 도입하는 것을 목적으로 한다. 이 분포함수의 유연성을 예시적으로 보여주기 위해 우리나라 종합주가지수와 원/달러 환율을 대상으로 2변량-조건부상관관계-GARCH 모형에 이 분포함수를 적용하여 추정하고, 이를 정규분포 모형 및 Student-t 모형의 결과와 비교한다. Major empirical regularities in the distribution of time series of financial asset return data are their skewness and excess kurtosis. To capture the non-normality in estimating financial time series using GARCH models, many researchers have introduced more flexible parametric distributions than the normal distribution such as Student-t and GED. While considerable attempts have been made in modeling conditional distribution in univariate GARCH models, there has been little work on the multivariate conditional distribution function in multivariate GARCH models. Most academic studies in multivariate GARCH models have relied on multivariate normal distribution. The purpose of this paper is to introduce into the multivariate GARCH models a flexible multivariate parametric distribution in order to capture the non-normality of financial time series in a multivariate dimension. For an illustrative purpose, we apply the new bivariate distribution function to modeling time varying dependence of returns on KOSPI and won/dollar exchange rate, and compare the results with those of normal and Student-t models.

      • KCI등재

        대두 재조합순계주에서 고빈도 체세포배발생능 계통 조사

        최필선,다가오 고마쓰다,김민훈,최규명,최동욱,유장렬,Choi, Pil-Son,Takao Komatsuda,Kim, Min-Hoon,Choi, Kyu-Myeong,Choi, Dong-Woog,Liu, Jang-Ryol 한국식물생명공학회 2002 식물생명공학회지 Vol.29 No.2

        대두 85개 재조합순계주의 미숙배로부터 얻은 자엽절편을 MS salt, B5비타민, 40 mg$^{-1}$ 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) 및 30 g$^{-1}$ sucrose로 조성된 체세포배유도배지 (SIM, somatic induce medium)에 치상하여 5주간 배양하였다. 10%이하의 체세포배형성빈도는 36계통에서, 11~49%의 형성빈도는 37계통에서, 50~80%의 형성빈도는 9계통에서 그리고 90% 이상의 형성빈도는 3계통에서 각각 관찰되었다. 90% 이상의 체세포배형성빈도와 자엽당 6.36개의 체세포배를 형성하는 계통으로는 KM1010, KM1032 및 KM1064이었으며, 3계통에서 얻은 일차배를 동일배지상에서 계대배양하면서 2차배 증식방법으로 1년 이상 증식 유지하였다. 체세포배를 성숙배지와 식물체전환배지 (Komatsuda 1992)에 옮겼을 때 약 25% 정도가 정상식물체로 생육하였다. Cotyledonary explants from immature zygotic embryos of each 85 recombinant inbred lines (RILs) were cultured on medium containing MS salts, B5 vitamins, 40 mg$^{-1}$ 2,4-dichlorophenoxyacetic acid and 30 g$^{-1}$ sucrose. Frequency of somatic embryo formation on cotyledonary explants showed in thirty-six lines(<10%), in thirty-seven lines (11~49%), in nine lines (50~89%), and in three lines(>90%), respectively, The highest frequency (up to 90%) and number (6.36 per cotyledon) of somatic embryos were obtained from lines of KM1010, KM1032 and KM1064. Primary somatic embryos produced from three lines produced numerous secondary somatic embryos on the surfaces, which were subcultured for over one year. Upon transfer to maturation and conversion medium (Komatsuda, 1992), somatic embryos converted to plantlets at a frequency of approximately 25%.

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