부산지역에서 유행한 계절인플루엔자바이러스의 유전자 특성 및 계통분석(’06~’08 절기)

Yon-Koung Park(박연경),Nam-Ho Kim(김남호),Seung-Hwa Choi(최성화),Mi-Oak Lee(이미옥),Sang-Kee Min(민상기),Seong-Joon Kim(김성준),Kyung-Soon Cho(조경순),Young-Nan Na(나영란) 한국생명과학회 2010 생명과학회지 Vol.20 No.3

2006년 10월부터 2008년 6월까지 총 인플루엔자 의사 환자 1,822건의 인후도찰물 및 비인후도찰물에서 277건의 인플루엔자바이러스를 분리했다. 절기별로는 2006~2007 절기의 1,154검체 중 52건(4.5%), 2007~2008절기의 668검체 중 210건(31.4%)에서 인플루엔자바이러스를 분리하였다. 인플루엔자바이러스 A/H1N1의 HA 유전자의 경우, 2008~2009 절기의 백신주인 A/Brisbane/59/2007과는 96.7%~97.7%, A/Solomon Islands/3/2006 96.5%~97.3%, A/New Caledonia/20/99와는 95.6%~96.6%의 유사성을 나타냈으며, NA 유전자의 경우, A/Brisbane/59/2007과는 97.8%~98.5%, A/Solomon Islands/3/2006과는 96.7%~97.6%, A/New Caledonia/20/99와는 96.8%~97.7%의 유사성을 보여 2008~2009절기의 백신주인 A/Brisbane/59/07과 가장 유사성이 컸다. 인플루엔자바이러스 A/H3N2의 분리주 중 1주를 제외한 모든 분리주가 HA 유전자에서 2008~2009 절기 백신주인 A/Brisbane/10/2007과는 98.4%~99.7%의 유사성을 보였고, A/Wisconsin/67/2005와는 96.5%~97.5%의 유사성을 보였으며, NA 유전자에서는 A/Brisbane/10/2007과는 98.9%~99.4%, A/Wisconsin/67/2005와는 98.0%~98.6%, A/California/7/2004와는 98.3%~98.9%의 유사성을 보였다. 인플루엔자바이러스 B의 HA 유전자의 경우는 2주를 제외하고는 2008~2009 절기의 백신주인 B/Florida/4/2006과는 96.5%~99.7%의 유사성을 보였으며, B/Malaysia/2506/2004와는 86.7%~87.7%의 유사성을 보여 B/Florida/4/2006과의 유사성이 크게 나타났다. NA 유전자의 경우는 reassortant분리주가 96.7%와 97.3%의 유사성을 나타내는 것을 제외하고는 B/Florida/4/2006에 98.9%~100%의 유사성을 나타냈으며, 분리주 유행시기의 백신주인 B/Malaysia/2506/2004와는 94.5%~96.7%의 유사성을 나타내어 2008~2009 절기의 백신주와 더 큰 유사성을 보였다. HA 유전자에서는 conserverd receptor binding site는 아미노산의 치환 없이 모든 분리주에서 잘 보존되어 있었으며, N-linked glycosylation site도 인플루엔자바이러스 A/H1 1주, A/H3 1주를 제외하고는 모두 같은 수의 N-linked glycosylation sites를 가졌으며, 인플루엔자바이러스 B의 경우는 2008~2009 절기의 백신주보다 1개가 많은 4개의 N-linked glycosylation sites를 가지고 있었다. Antigenic sites의 경우는 인플루엔자바이러스 A/H1의 Sb의 3개의 아미노산에서 백신주들과 다른 아미노산을 가지고 있으며, A/H3에서는 A, B, E 부위에서는 아미노산의 변화가 나타났고, C, D 부위에서는 변화가 없었다. 인플루엔자바이러스 B의 4개의 분리주에서는 150 loop와 160 loop에서 B/Florida/4/2006과 비교하여 1개의 아미노산에서 치환이 나타났으며, 190 helix에서 모든 분리주가 B/Florida/4/2006과 비교하여 1개의 아미노산에서 치환이 나타났다. To monitor newly emerged influenza virus variants and to investigate the prevalence pattern, our laboratory performed isolation of the viruses from surveillance sentinel hospitals. In the present study, we analysed influenza A/H1N1, A/H3N2, B viruses isolated in Busan during the 2006/07 and 2007/08 seasons by sequence analysis of the hemagglutinin (HA1 subunit) and neuraminidase (NA) genes. The isolates studied here were selected by the stratified random sample method from a total of 277 isolates, in which 15 were A/H1N1, 16 were A/H3N2 and 29 were B. Based on the phylogenetic tree, the HA1 gene showed that A/H1N1 isolates had a 96.7% to 97.7% homology with the A/Brisbane/59/2007, A/H3N2 isolates had a 98.4% to 99.7% homology with the A/Brisbane/10/2007, and B isolates had a 96.5% to 99.7% homology with the B/Florida/4/2006(Yamagata lineage), which are all the vaccine strains for the Northern Hemisphere in 2008~2009 season. In the case of the NA gene, A/H1N1 isolates had 97.8% to 98.5% homologies, A/H3N2 isolates had 98.9% to 99.4% homologies, and B isolates had 98.9% to 100% homologies with each vaccine strain in the 2008~2009 season, respectively. Characterization of the hemagglutinin gene revealed that amino acids at the receptor-binding site and N-linked glycosylation site were highly conserved. These results provide useful information for the control of influenza viruses in Busan and for a better understanding of vaccine strain selection.

질소산화물 저감용 SCR 시스템에서 Propeller형과 Line형 Mixer의 유동혼합 특성에 관한 수치해석적 연구

김태경 ( Tae Koung Kim ),성연모 ( Yon Mo Sung ),현승엽 ( Seung Yeob Hyun ),최경민 ( Gyung Min Choi ),김덕줄 ( Duck Jool Kim ) 한국액체미립화학회 2011 한국액체미립화학회 학술강연회 논문집 Vol.2011 No.-

Study on the Actual Conditions of Non-Confident Metals for Sea foods in Busan

Sung-ah Park,Yon-koung Park,Yung-ran Na,Hyeon-jin Kim,Jung-mi Kang 한국분석과학회 2018 학술대회논문집 Vol.2018 No.5

부산지역에서 분리된 엔테로바이러스의 유행양상 분석 및 유전자형 연구

Nam-Ho Kim(김남호),Sang-kee Min(민상기),Eun-hee Park(박은희),Yon-Koung Park(박연경),Sun-Mok Kwan(권순목),Seong-Hyeon Jin(진성현) 한국생명과학회 2010 생명과학회지 Vol.20 No.6

부산지역에서 2007년부터 2009년까지 3년 동안 임상적으로 HEV 의심 환자 검체 총 2,743건(대변 1,503건, 뇌척수액 1,213건, 인후도찰물 27건)의 검체 중 240건(8.7%)에서 HEV가 검출되었다. 연도별로는 2007년에는 HEV 감염의심 환자 검체 1,001건에서 86건(8.6%)에서 HEV가 분리되었고, 2008년의 경우 979건 중 85건(8.7%), 2009년 763건 중 69건(9.0%)이 분리되었다. 본 연구에 사용된 검체 2,743건 중 1,315건이 6월부터 9월까지 4개월간 의뢰되어 전체 의뢰건수의 48.0%를 차지하였다. HEV는 5월부터 분리율이 증가하기 시작해서 6월(15.5%), 7월(15.8%), 8월(15.3%)에 높게 나타나 HEV 분리가 하절기에 집중되어 나타난 것을 확인할 수 있었다. 검사건수 별 양성률은 남자 9.5%, 여자 8.7%로 성별에 따른 분리율의 차이를 찾기는 어려웠으며, 대부분 10세 이하의 연령에서 바이러스가 분리되었다. 분리된 HEV 분리주들에 대하여 VP1 region sequencing을 통하여 HEV의 유전형을 확인하여 HEV-A와 HEV-B 두 종류의 유전자형이 부산지역에서 유행하였음을 확인하였다. HEV-A의 부산지역 분리주 31주를 이용하여 상동성 비교분석을 실시한 결과 분리주 31주 사이에 21.8~100%의 상동성을 보였으며, HEV-B의 부산지역 분리주 41주를 이용하여 상동성 비교분석을 실시한 결과 분리주 41주 사이에 56.0~100%의 상동성 보여 최근 3년간 부산지역에 분리된 HEV 혈청형들 사이에 상동성의 차이를 보이는 결과를 확인 할 수 있었으며, 이를 볼 때 부산지역에서 유행하는 HEV 내에 상당한 정도의 유전자 변이를 추정해 볼 수 있었다. Human enteroviruses (HEV) are considered one of the major infectious causes of central nervous system infections such as aseptic encephalomeningitis in pediatrics. This study was focused on providing information related to genetic characteristics and diversities of HEV which prevailed between 2007 and 2009 in Busan, Korea. A total of 2,743 specimens were collected from children and screened for isolation of HEV by cell culture and RT-PCR. Among the specimins, 240 isolates were grouped into 21 different HEV serotypes using VP1 RT-PCR. The major etiological agents were CV-A6 and CV-B2 in 2007, E-6 and E-30 in 2008 and CV-B1 in 2009. The occurrence of HEV infections was the most frequent in the summer (May to August, 188 cases, 78.3%). Most of the isolates were identified from specimens from children under 10 years old, with the highest occurrence in the 2 to 4 year old range (15.2%). However, there were no significant differences between male and female children for the isolates. For analyzing genetic characterization, VP1 gene was amplified by RT-PCR and sequenced. The phylogenetic tree was established by Clustal W method using DNASTAR software. Using the sequence analysis of the VP1 region, it was classified into 2 groups; HEV-A and HEV-B. The HEV-A group contained 6 serotypes and sequences of 31 isolates were compared within each serotype. The HEV-B group contained 10 serotypes and the sequences of 41 isolates were compared within each serotype. Homology analysis of the VP1 region showed that the identity scores of HEV-A and B isolates were different. In conclusion, genetic divergences were observed among the isolates from children between 2007 and 2009 in Busan.

부산지역 설사환자에서 분리한 MRSA 균주의 다양성 분석

최성화(Seong Hwa Choi),박은희(Eun Hee Park),박연경(Yon Koung Park),김정아(Joung A Kim),김남호(Nam Ho Kim),이영숙(Young Suk Lee),빈재훈(Jae Hun Bin),박호국(Ho Kuk Park) 한국생명과학회 2008 생명과학회지 Vol.18 No.8

부산 지역 5개 2차 종합병원 설사환자 변에서 유래한 메치실린 내성 황색포도상구균(MRSA)에 대한 연구 결과, 분리된 황색포도상구균 142주 중 총 49주(34.5%)가 MRSA인 것으로 확인되었으며, 황색포도상구균 중 MRSA 분리율이 '04, '05, '06년에 걸쳐 각각 30.0%, 32.7%, 46.7%인 것으로 나타나, 지속적으로 증가하고 있음을 알 수 있었다. MRSA 균주의 항균제 내성 양상은 75.5%가 10종 이상의 항균제에 내성을 나타내었으며, 특히 11종 항균제에 대한 다제 내성균이 가장 많은 것으로 확인되었다. MRSA주의 장독소 유전자 시험을 실시한 결과 51%가 장독소 유전자를 가지고 있지 않았고, 30.6%가 독소유전자 A를 가지고 있었으며 그 밖에 C (8.3%), B (4.1%) 순이었다. MRSA 총 49주에 대해 PFGE를 수행하여 dendrogram을 작성한 결과, 크게 7개의 그룹으로 구분되었으며, 부산지역전체에 뚜렷하게 동일한 균주의 유행은 확인 할 수 없었으나, 종합병원 내에 소규모의 MRSA 유행은 있을 것으로 사료 되었다. We investigated the molecular epidemiological characteristic of methicillin resistant Staphylococcus aureus (MRSA) strains isolated from stool samples in Busan from 2004 to 2006. Among 142 isolates of S. aureus, 49 isolates (34.5%) were confirmed as MRSA. With the antimicrobial susceptibility tests, 37 isolates (75.5%) showed multiple resistance to more than 10 antibiotics, but all isolates were sensitive to vancomycin. All of MRSA had enterotoxin A in 30.6%, B 4.1%, C 8.3%, D, C/G, A 2.0% and None 51%. PFGE of SmaⅠ-digested chromosomal DNA was performed on 49 sporadic MRSA isolates. Restriction fragment patterns consisted of 8 to 14 fragments ranged in size from 48.5 to 630.5 kbp. We could divided the isolates into 7 groups (Ⅰ~Ⅶ) by analyzing PFGE patterns. Group I subdivided as 2 subgroups and 17 (34.7%) strains belong to the group Ⅰ. Dendrogram of PFGE patterns showed that MRSA strains in Busan were heterogeneous but we could find out minor homogeneity in hospital.

Study of the Detection of Enteric Viruses and Bacteria in Spring-water and Groundwater in Busan ('10~'11)

Seoung-Hwa Choi,Jae-Eun Jeong,Na-Na Yun,Nam-Ho Kim,Yon-Koung Park,Eun-Young Jung 대한미생물학회 2013 Journal of Bacteriology and Virology Vol.43 No.2

부산지역에서 분리된 norovirus 유전자형 연구

Nam-Ho Kim(김남호),Eun-hee Park(박은희),Yon-Koung Park(박연경),Sang-kee Min(민상기),Seong-Hyeon Jin(진성현),So-Hyun Park(박소현) 한국생명과학회 2011 생명과학회지 Vol.21 No.6

2008년부터 2010년까지 최근 3년 동안 부산지역에서 산발적으로 발생한 급성 위장관염 환자를 대상으로 유전자를 검사한 결과 4,101건 중 426건(10.4%)에서 노로바이러스를 확인하였다. 연도별 검출현황은 2008년에 14.7%(222/1,506), 2009년에 6.9%(95/1,384), 2010년에 9.0%(109/1,211)로 나타났다. 월별 분석 결과는 2008년에는 3월에 35.7%(50/140)로 가장 높은 검출율을 보였고, 2009년 역시 3월에 21.9%(23/105)로 높게 나타났으며, 2010년에는 1월에 23.8%(29/122)로 높은 검출율을 보여 겨울절기에 노로바이러스가 유행하는 것을 알 수 있었다. 반면 매해 7-8월 여름절기에는 노로바이러스가 거의 분리되지 않았다. 연령별 로는 1세 영아군과 13-19세 중등학생군에서 각각 20.9%로 가장 높은 검출율을 나타내었으며, 2-6세 소아군에서 17.5%, 20-29세군에서 13.4%, 7-12세 초등학생군에서 12.7%, 30-39세군에서 9.1%, 0세 신생아군에서 8.7%, 50-59세군에서 7.2%, 60-69세군과 70세이상군에서 각각 6.7%, 40-49세 4.5%로 확인되었다. 노로바이러스 양성 검체 340건에서 유전자형을 분석한 결과 GI군 7종류, GII군 13종류로 총 20종류가 검출되어 다양한 유전자형의 노로바이러스들이 유행함을 알 수 있었다. 연구결과 부산지역에서는 GI군이 21.8%(76/348), GII군이 78.2%(272/348)로 GII군이 우세하여 유행하였고, 유전자형 총 20종 중 GII.4형이 49.1%로 가장 많이 검출되었다. Norovirus (NoV) causes major acute non-bacterial gastroenteritis in humans. NoV genus is a member of the family Caliciviridae, which is transmitted by contaminated food and water or from human to human. Many genotypes of genogroups Ⅰ and Ⅱ have been reported because of their high genetic diversity. To obtain molecular epidemiological information on gastroenteritis sporadic cases in Busan, Korea, we analyzed the nucleotide sequences of NoV strains detected during 2008~2010. We performed one step RT-PCR amplifying the open reading frame (ORF) 2 (capsid region) followed by semi-nested PCR. Fecal samples were collected from 4,071 acute gastroenteritis, and genotypes of the 421 positive samples were determined by sequence analysis. Based on partial sequence of capsid region, 7 NoV were categorized into genogroup Ⅰ and 13 into genogroup Ⅱ. Prevalent genotypes among gastroenteritis patients within Busan were GII.4, GI.6, GII.5 in 2008~2010. The results of this study will contribute to the currently available epidemiological data and improve public health and hygiene via development of diagnostic methods and sustainable surveillance.

설사 환자에서 분리된 Staphylococcus aureus의 특성

박은희,민상기,이주현,박연경,정구영,빈재훈,Park Eun Hee,Min Sang Gi,Lee Ju Hyeoun,Park Yon Koung,Jeong Gu Young,Bin Jae Hun 한국생명과학회 2005 생명과학회지 Vol.15 No.4

부산광역시 관내 병원에 내원한 설사환자 704명의 분변으로부터 64건의 황색포도상구균을 분리하였다. 황색포도상구균의 평균 분리율은 $9.1\%$였으며, 5월에 가장 높은 16건$(16.8\%)$이 분리되었으나 계절에 상관없이 꾸준히 분리되었다. 분리된 황색포도상구균 64균주 중 $45.3\%$인 29균주의 황색포도상구균이 장독소를 생산하였으며, 장독소 유형별로 A형이 24균주$(37.5\%)$, B형이 3균주$(4.7\%)$, C형이 2균주$(3.1\%)$순이었다. 또한 15종의 항생제에 대한 내성율은 penicillin과 ampicillin에 대하여 각각 $95.4\%$와 $93.8\%$로 매우 높은 내성율을 나타내었으나, chloramphenicol과 vancomycin에 대하여는 $100\%$ 감수성이었다. Oxacillin에 내성을 나타내는 MRSA은 $31.3\%$였으며, vancomycin에 내성을 나타내는 VRSA은 $0\%$였다. 성별과 연령에 따른 MRSA의 분리율은 남자가 $35.7\%$ (15균주/42균주), 여자는 $26.3\%$(5균주/19균주)로 남자가 더 높았으며, 연령별로는 9세 이하 5명(남자 4명, 여자 1명), 20대 1명(남자 1명), 30대 2명(남자 2명), 50대 4명(남자 3명, 여자 1명), 60세 이상 8명(남자 5명, 여자 3명)이었다. 10대와 40대에서는 MRSA가 분리되지 않았다. 공시 항생제에 대한 내성양상은 분리된 64주 중 61주의 균이 최소 2종류 이상의 약제에 대하여, 최고 12종류의 약제에 대하여 내성을 나타내는 다양한 다제내성형을 나타내었다. The major causative bacteria of food poisoning were Salmonella spp. $(35.6\%)$, Staphylococcus aureus $(11.3\%)$ and Vibrio parahaemolyticus $(3.2\%)$ in our country. In this study we attempted isolation of S. aureus from stools of patients with diarrhea. Sixty-four strains $(9.1\%)$ were isolated from 704 the stools of patients with diarrhea. The enterotoxin was detected from 29 isolates $(45.3\%)$: 24 isolates $(37.5\%)$, 3 isolates $(4.7\%)$ and 2 isolates $(3.1\%)$ were A, B and C type, respectively. In the antibiotic susceptibility, 63 isolates $(98.4\%)$ were resistant to penicillin, 60 isolates $(93.8\%)$ to ampicillin, 35 isolates $(54.7\%)$ to erythromycin, 32 isolates $(50.0\%)$ to gentamycin, 22 isolates $(34.4\%)$ to tetracycline and 20 isolates $(31.3\%)$ to oxacillin. All of S. aureus isolates were susceptible to chloramphenicol and vancomycin, 20 isolates $(31.3\%)$ were methicillin-resistance S. aureus (MRSA). MRSA isolation rate was higher in male $(35.7\%)$ than female $(26.3\%)$. With the exception of two isolates which were resistant only to penicillin, sixty-one isolates were multiple antibiotic resistance.

부산지역 유흥업소 종사여성으로부터 분리된 HPV16형의 발암유전자(E6/E7) 돌연변이 유형 분석

민상기(Sang-Kee Min),김성순(Sung Soon Kim),최병선(Byeong-Sun Choi),장대호(Dai-Ho Jang),이미옥(Mee-Ok Lee),최성화(Seung-Hwa Choi),김남호(Nam-Ho Kim),박연경(Yon-Koung Park),정영아(Yeong-A Jeong),김성준(Seong-Joon Kim),빈재훈(Jae-Hun Bi 한국생명과학회 2009 생명과학회지 Vol.19 No.6

HPV-16형의 염기배열 변이는 지역적, 인종적으로 특징적인 차이가 있으며 특히 HPV-16형 E6/E7 유전자의 특정 염기서열변이는 자궁경부암 및 자궁상피내 신생종양물의 발생을 일으키는 고위험 요인으로 알려져 있다. 본 연구는 2007년 부산지역 유흥업소 종사여성으로 분리된 HPV-16형 19건을 대상으로 E6/E7 유전자 영역(nt 34-880)을 표적으로 지역적 염기서열 변이를 조사하였다. nucleotide 수준에서 HPV16형 E6 유전자는 T178G (n=11), T178A (n=1), T350G (n=4), A442C (n=2), A104T, A111G, C116T, G145T, T183G, C335T, G522C 등 11종의 변이주가 발견되었고, E7 유전자는 A647G (n=12), A645C, A777C, G663A, T732C, T760C, A775T, T789C, T795G 등 9종의 변이주가 발견되었다. 아미노산 수준에서는 HPV-16형 E6 단백질의 경우 D25E (n=12), L83V (n=4), E113D (n=2), M1L, Q3R, P5S, Q14H, D25N, I27R, H78Y, C140S 등 11종의 변이주를, HPV16형 E7 단백질의 경우 N29S (n=12), L28F, T72S 등 3종의 변이주를 관찰할 수 있었다. 본 연구 결과, 부산지역의 HPV-16형 E6/E7 우점 돌연변이주는 E6 D25E (75%), E7 N29S (78%)로 각각 나타났다. 앞으로 자궁경부암 환자 및 일반여성을 포함한 더 많은 모집단을 대상으로 HPV-16형 E6/E7의 intratypic variants를 비교 조사하여 실제 HPV-16형 E6/E7 어떤 변이주가 자궁경부암 유발 위험성과의 관련성은 더 많이 연구되어져야 할 것으로 사료된다. Recent studies have reported that the distribution of HPV-16 sequence variation differs geographically, and more specifically that HPV-16 E6/E7 intratypic variants might carry a high risk for development of ICC (invasive cervical cancer) and CIN (cervical intraepithelial neoplasia) in a given population. To investigate the genetic diversities of HPV-16 E6/E7 oncogene by region, we collected nineteen HPV-16 isolates from sexually high-risk women in Busan, and analyzed the HPV-16 E6/E7 coding regions (nt 34 to 880) with HPV-16 E6/E7 specific PCR amplification. At the nucleotide level, eleven variants of the E6 genes and nine variants of the E7 genes were identified as follows: E6 T178G (n=11), E6 T178A (n=1), E6 T350G (n=3), E6 A442C (n=2), E6 A104T, E6 A111G, E6 C116T, E6 G145T, E6 T183G, E6 C335T, E6 G522C and E7 A647G (n=12), E7 A645C, E7 A777C, E7 G663A, E7 T732C, E7 T760C, E7 A775T, E7 T789C and E7 T795G, respectively. At the amino acid level, the isolated HPV-16 E6 and E7 genes showed eleven E6 variants: E6 D25E (n=12), E6 L83V (n=4), E6 E113D (n=2), E6 M1L, E6 Q3R, E6 P5S, E6 Q14H, E6 D25N, E6 I27R, E6 H78Y, E6 C140S and three E7 variants: N29S (n=12), L28F, T72S. HPV16 E6 L83V, the dominant variant in the Caucasian population, showed relatively low frequencies in our study population. We elucidated that the dominant HPV-16 E6/E7 variants were HPV-16 E6 D25E (63.2%) and HPV-16 E7 N29S (63.2%), which were phylogenetically included in Asian lineage. Further study is needed to evaluate the risk of cervical cancer related HPV-16 E6/E7 intratypic variants in the Korean population.

부산지역에서 분리한 레지오넬라균에 대한 PFGE를 이용한 molecular typing

박은희,김미희,김정아,한난숙,이주현,민상기,박연경,진성현,정구영,빈재훈,Park Eun-Hee,Kim Mi-Hee,Kim Joung-A,Han Nan-Sook,Lee Ju Hyeoun,Min Sang Gi,Park Yon Koung,Jin Seong Hyun,Jeong Gu Young,Bin Jae Hun 한국생명과학회 2005 생명과학회지 Vol.15 No.2

2001년부터 2003년까지 부산지역의 냉각탑수에서 분리한 L. pneumophila (serogroup 1) 39균주에 대해 제한효소 SfiI 처리한 경우 PFGE 양상은 dice coefficient $<65\%$의 유사성을 가진 band를 Awl로 10개의 pulsotype으로 나누었고, 가장 많았던 유형은 E pulsotype으로 39주중 18주로 $46.2\%$를 나타내었으며, 그 외 A pulsotype $17.9\%$, C pulsotype $15.4\%$, F pulsotype $7.7\%$ 및 B, D, G, H, I, J pulsotype이 각각 $2.6\%$로 유전적 양상이 다양하였다. 제한효소 NotI 처리한 경우 PFGE 양상은 dice coefficient $<60\%$의 유사성을 가진 band를 $a\~h$로 8개의 pulsotype으로 나누었고, 가장 많았던 유형은 f pulsotype이 $38.5\%$였으며 그 외 d pulsotype $20.5\%$, e pulsotype $17.9\%$, a pulsotype $10.3\%$, h pulsotype $7.7\%$ 및 b, c, g pulsotype이 각각 $2.6\%$를 차지하였다. 본 연구를 통하여 부산지역에서 분리되는 레지오넬라균에 대한 유전자 유형분석 결과를 데이터베이스화하여, 레지오넬라증의 집단 발생 또는 산발적인 질병 발생이 있을 경우 분자학적 측면에서 사람과 환경에서 분리된 균으로부터 감염원과 감염경로를 규명하는 역학적인 도구로써 이용 가능할 것으로 사료되었다. In this study, we did the molecular typing of 39 environmental Legionella pneumophila serogroup 1 isolates collected from 2001-2003 in Busan using the pulsed-filed gel electrophoresis (PFGE). PFGE of SfiI fragments were divided into 10 pulsotypes $(A\~J)$, corresponding to $<65\%$ similarity and a subtype within each pulsotype was characterized by $>84\%$ similarity. The major cluster was pulsotype E $(46.2\%)$, which included 18 isolates and was divided into 4 subtypes $(E1\~E4)$. PFGE of NotI fragments were divided into 8 pulsotypes $(a\~h)$, corresponding to $<60\%$ similarity and a subtype within each pulsotype was characterized by $100\%$ similarity. The major cluster was pulsotype f $(38.5\%)$, which included 15 isolates. The ATCC type strain L. pneumophila serogroup 1 was identified as a different molecular pulsotype compare to the Busan isolates. It is possible that L. pneumophila serogroup 1 isolated in Busan with specific DNA pattern is comparable with those isolation in other cities in Korea.