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- 저자 : Sa-Youl (검색결과 107 건)
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사람중성구 Cathepsin G의 분리와 Anti-Human Cathepsin G Antibody의 in vivo 합성 및 분리
배성준,김사열,강구일 고신대학교 의학부 1989 高神大學校 醫學部 論文集 Vol.5 No.1
Human neurtrophil cathepsin G was purified by two step procedure involving ultrogel AcA54 gel filtration and CM-Sephadex ion exchange chromatography. Highly purified human neutrophil cathepsin G was injected to rabbit for in vivo synthesis of anti-human cathepsin G antibodies. For purificaion of Ab, precipitation by ammonium sulfate, DEAD-cellulose ion exchange chromatography and CNBr-activated sepharose 4B affinity chromatography was applied Purified Antibodies detected by immumoprecipitation showed specificity against human neutrophil cathepsin G but not human neutrophil elastsae.
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사람 cytidine deaminase 유전자의 발현조절
이영선,정해숙,김사열 안동대학교 기초과학연구소 1998 基礎科學 硏究論文集 Vol.9 No.1
Cytidine deaminase(CDD)는 cytidine 또는 cytidine 유사 화합물을 탈 아미노화하는 효소로서, 백혈구, 간, 태반 등의 정상적인 조직과 각종의 암세포에서 발현된다. 암환자 또는 암세포에 cytidine 유사 화합물을 투여하면, CDD의 활성이 증가된다. Cytidine 유사화합물인 ARA-C 또는 5-AZA-CdR를 대장암 세포주인 Colo 201세포에 투여하였을 때, CDD 전사체의 발현이 증가되는 것이 관찰되었다. 그러므로 CDD 활성의 증가는 전사량의 증가에 의한 것으로 추정되었다. CDD 유전자의 전사 조절 부위를 연구하기 위해서 CDD 유전자의 genomic DNA를 클로닝하여 분석하였다. 프로모터 부위에 CAT 유전자를 연결한 후, deletion 분석방법으로 발현조절 부위를 조사하였다. 프로모터 부위 중, CDD 전사체 발현 조절부위는 167~-7로 나타났다. 167~-7는 cytidine 유사화합물에 의한 전사체발현 증가에도 관계하는 조절부위로 나타났다. 이 부위에서는 TEIID, Sp1, NF-1 또는 c-Fos/c-Jun 등의 전사조절 단백질이 결합할 수 있는 염기서열부위들이 발견되었다. Cytidine deaminase (CDD) is the enzyme which deaminase cytidine or deoxycytidine to undine or deoxyuridine. Cytidine analogues, such as ARA-C or 5-AZA-CdR, which was used as antitumor drugs, also can be used as substrate of CDD. Treatment with cytidine analogues as antitumor agents needed to decrease the level of CDD activity since the level of CDD was increased after treatment and the deamination of cytidine analogues by CDD resulted in a significant loss of antitumor activity. To study the regulation of CDD activity, the regulatory region for trancription of human CDD gene was cloned and analysed. The positive regulatory region of the CDD promoter was -162 to -7. This region of promoter was also responsible for the enhanced transcription by cytidine analogues. TATA, CAAT or GC box were not found in the CDD promoter, but the elements for TFIID, Sp1 or c-Fos/c-Jun and PuF were found in the positive regulatory region. Further study of this region may identify the inducing transcriptional factor(s).
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INHIBITION OF HUMAN NEUTROPHIL ELASTASE BY DIFFERENT CLASSES OF ANTIBIOTICS
Sa-Youl Ghim,강구일 고신대학교(의대) 고신대학교 의과대학 학술지 1988 고신대학교 의과대학 학술지 Vol.4 No.1
사람의 혈액에 있는 호중구 엘라스테이즈에 관한 연구의 진척은, 약물로 사용가능한 생체내 혹은 사용가능한 생체내 혹은 인공합성의 저해제 개발을 동반해 오고있다. 정제된 호중구 엘라스테이즈에 12종의 항생제를 처리하였더니 20mM 미만의 IC₅₀을 보인 것은 oxytetracycline, cefamandole, gentamicin, amikacin, cloxacillin, methicillin, chloramphenicol 등이었고, 10mM 농도에서 50% 이상의 저해율을 나타낸 것은 methicillin, cefamandole, oxytetracycline 등이었다. 그 결과는 세포벽 합성이나 단백질 합성을 저해하는 일반적 항생제의 약리학적 기전과는 다른 차원에서 항생제가 숙주의 조직을 보호할 수 있는 가능성을 보여준 모델이 존재한다는 것을 in vitro 실험에서 확인할 수 있었다.
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RAPID PURIFICATION AND MOLECULAR CHARACTERIZATION OF HUMAN NEUTROPHIL ELASTASE
Ghim, Sa-Youl,Bae, Sung Jun,Kang, Kooil 고신대학교 의학부 1989 高神大學校 醫學部 論文集 Vol.5 No.1
Elastase에 의해 야기되는 질병의 예방 및 치료 응용을 위하여는, 먼저 이 효소가 고순도로 분리되고 그 근본적인 성질의 해명이 이루어져야 한다. 고순도의 elastase를 얻기위해, 사람의 전혈로부터 Hypaque-Ficoll step gradient에 의해 순수한 neutrophil을 얻은 다음 이것을 extract로 만들어 액체크로마토그래피를 실시하였다. Ultrogel AcA54 gel filtration을 거친 후 CM-sephadex 이온교환 크로마토그래피를 적용하였는데, 이때 유출 완충액 속에 0.1% Brij 35를 첨가하여 elastase의 순도를 더욱 높일 수 있었다. 이 정제된 elastase는 SDS-PAGE를 통해 MW 28,000, 29,000, 30,000의 서로 다른 3개 의 밴드로 확인되었으며, 그간 수많은 연구자들간에 elastase의 분자량에 대해 심한 견해 차이를 보여온 것은 그 분자적 성질이나 분자량이 유사한 cathepsin G가 혼재하거나 elastase분자내 혹은 분자간 S-S결합의 차이에 의함을 알 수 있었다.
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Ghim, Sa-Youl Korean Society of Life Science 2001 Journal of Life Science Vol.11 No.2
The pyrR gene of the pyrimidine biosynthesis (pyr) operon of the thermophile Bacillus caldolyticus, encoding a uracil phosphoribosyltransferase (UPRTase), turned to rely as a pyr operon regulator. It has been proposed that PyrR mediates transcriptional termination-antitermination at three intercistronic regions of the par operon (S.-Y Ghim and J. Neuhard, J. Bacteriol.,176, 3698-3707, 1994). In this research, a plasmid carrying the pyrR region of B. caldolyticus could restore a pyrimidine regulation in a pyrR mutant of B. subtilis. Expression of pyrR was found to increase 6-7 fold during pyrimidine starvation. Additionally, a highly conserved nucleotide sequence which may constitute the binding site for a PyrR protein (PyrR-binding loop) in transcript was staggested. Alternative antiterminator and terminator structures involving three conserved motifs in front of the pyrR, pyrP and pyrB genes, respectively, are proposed to account for the observed regulation pattern.
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Methicillin, Cefamandole, Oxytetracycline에 의한 사람 호중구 Elastase의 변화
김사열(Sa-Youl Ghim),정혜영(Hye Young Jeong),배성준(Sung Jun Bae),강구일(Koo Il Kang) 대한약리학회 1989 대한약리학잡지 Vol.25 No.1
사람 혈액속의 elastase와 관련된 질병에 대한 연구는 다양한 저해제의 개발을 동반해 왔으며, 최근 항생제도 그 관심대상이 되고 있다. 두 단계의 액체 크로마토그래피를 거쳐 얻은 고순도의 elastase에 12종의 항생제를 처리하였다. 세포벽합성 저해제로 알려져 있는 penicillin계와 cephalosporin계 항생제를 각각 3종씩 처리한 결과, methicillin과 cefamandole은 10mM 농도에서 elastase 활성을 50% 이상 저해하였지만, 나머지는 거의 10% 미만이었다. 단백질합성 저해제 중 oxytetracycline의 elastase에 대한 저해효과는 10mM 농도에서 95% 이상으로 매우 탁월하였으며 (IC<sub>50</sub>=0.3mM), gentamicin도 50% 이상 저해하였으나, 다른 aminoglycoside나 chloramphenicol은 역시 10%미만이었다. 실험해 본 항생제 가운데, oxytetracycline, cefamandole, methicillin, gentamicin 등은 elastase에 대한 강력한 저해제였으며, 그 작용기전은 항생제의 알려진 약리학적 기전과는 다른 차원의 모델임이 분명하였다. Human neutrophil elastase (HNE, EC 3, 4 21, 11), a major causative factor in the induction of pulmonary emphysema, were purified by two steps of liquid chromatography. Purified elastases were cross-reacted with antibody to human neutrophil elastases. Methicillin and cefamandole, which are known as inhibitors of cell wall synthesis of microorganisms, could inhibit the activity of human neutrophil elastase up to 50% with 10mM of both agents and IC<sub>50</sub> of methicillin was 9.8 mM. Gentamicin, one of the aminoglycosides, also inhibits human neutrophil elastases up to 60% of original activity with 10 mM of this agent and IC<sub>50</sub> was 9.0 mM. We could demonstrate similar effects in oxytetracycline. 10 mM of oxytetracycline inhibited 95% of human neutrophil elastase and IC<sub>50</sub> was 0.3 mM. Overall, oxytetracycline, cefamandole and methicillin are strong inhibitors of human neutrophil elastase, and they could be a drug of cholice for the diseases which were known as pathogenesis related to elastase. We also suggest that the mechanism of action of these antibitics are different from the mechanism of antimicrobial effects like inhibition of both cell wall synthesis and protein synthesis.
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INHIBITION OF HUMAN NEUTROPHIL ELASTASE BY DIFFERENT CLASSES OF ANTIBIOTICS
Ghim, Sa-Youl,Kang, Kooil 고신대학교 의학부 1988 高神大學校 醫學部 論文集 Vol.4 No.1
사람의 혈액에 있는 호중구 엘라스테이즈에 관한 연구의 진척은, 약물로 사용가능한 생체내 혹은 인공합성의 저해제 개발을 동반해 오고 있다. 정제된 호중구 엘라스테이즈에 12종의 항생제를 처리하였더니 20mM 미만의 lC_(50)을 보인 것은 oxytetracycline, cefamandole, gentamicin, amikacin, cloxacillin, methicillin, chloramphenicol 등이었고, 10mM 농도에서 50% 이상의 저해율을 나타낸 것은 methicillin, cefamandole, oxytetracycline 등이었다. 그 결과는 세포벽 합성이나 단백질 합성을 저해하는 일반적 항생제의 약리학적 기전과는 다른 차원에서 항생제가 숙주의 조직을 보호할 수 있는 가능성을 보여준 모델이 존재한다는 것을 in vitro 실험에서 확인할 수 있었다.
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