대장암에서 체외 감시림프절 생검의 의의

박원철(Won Cheol Park),이정균(Jeong Kyun Lee),한원철(Won Cheol Han) 대한외과학회 2005 Annals of Surgical Treatment and Research(ASRT) Vol.68 No.1

증식성 근막염의 세침흡인 세포학적 소견 - 1 예 보고-

조향정,한원철,박원철,윤기중,Jo, Hyang-Jeong,Han, Won-Cheol,Park, Won-Cheol,Yun, Ki-Jung 대한세포병리학회 2002 대한세포병리학회지 Vol.13 No.1

Fine needle aspiration cytology (FNAC) is an easy convenient non-invasive method in the diagnosis of superficial palpable masses. The cytologic findings by FNAC of reactive and neoplastic lesions in various organs including breast, lymph node, thyroid, salivary gland, etc., have been described, but, those of soft tissue lesions including proliferative fasciitis are relatively rare to find. We recently experienced a case of FNAC of proliferative fasciitis in the left back of a 72-year-old male. The FNAC smears were scant in cellularity and contained large cells with abundant basophilic cytoplasm, one to two nuclei lying at the periphery, and prominent nucleoli that resemble ganglion cells.

한국인 궤양성 대장염 환자의 말초혈액에서 CCL20 유전자의 발현 및 sulphasalazine과 glucocorticoid에 의한 조절작용

최석채(Suck Chei Choi),나용호(Yong Ho Nah),정연태(Yeun Tai Chung),한원철(Won Cheol Han),이명수(Myeung Su Lee),전창덕(Chang-Duk Jun) 대한해부학회 2004 Anatomy & Cell Biology Vol.37 No.6

염증성 장 질환 (inflammatory bowel disease; IBD)은 만성적인 염증으로 궤양성 대장염 (ulcerative colitis)과 크론씨 병(Crohn,s disease)으로 분류되어진다. 최근 혈액의 단핵구 세포와 장 상피세포에서 발현되어지는 Nod2 유전자가 크론씨 병의 원인 유전자로 알려지면서 혈액의 단핵구 세포가 염증성 장 질환에 중요한 역할을 수행할 수 있을 것으로 재조명되었다. 본 연구는 Nod2 유전자처럼 단핵구 세포와 장 상피세포에서 공통으로 발현하며, 인체에서 선천성 면역능과 후천성 면역능을 연결하는 것으로 알려진 CCL20 유전자가 한국인에서 발병율이 높은 궤양성 대장염에서 어떻게 발현이 조절되는지 알아본 것이다. CCL20 유전자는 정상인에 비하여 대부분의 궤양성 대장염 환자의 혈액 단핵구 세포 및 장 상피조직에서 발현이 증가되어져 있었다. 본 연구에 참여한 환자의 disease activity index (DAI)와 CCL20 유전자 발현의 상관관계를 구한 결과 흥미롭게도 CCL20가 높게 발현된 환자들은 대다수 이전에 약물치료를 받지 않은 것으로 나타났다. 이러한 결과는 CCL20 유전자가 초기 궤양성 대장염의 발병에 관여하고 있으며 항-염증제 치료에 반응을 하는 유전자라는 것을 암시하는 결과이다. 이를 증명하기 위하여 이전에 항-염증치료를 받지 않은 궤양성 대장염 환자에 대하여 3개월 간 5-amino salicylic acid (5-ASA)와 glucocorticoid 유도체인 dexamethasone (DEX)으로 약물치료를 수행하였다. 이 결과 CCL20 유전자의 발현이 이들 약물치료를 받은 환자에서 급격히 감소하였음을 알 수 있었다. 이를 세포수준에서 확인하기 위하여 THP-1 단구세포와 HT-29 장 상피세포에 TNF-α 또는 IL-1β로 CCL20를 유도한 다음 5-ASA와 DEX를 처리한 결과 환자에서와 같은 효과를 검정할 수 있었다. 이러한 결과는 CCL20가 궤양성 대장염 환자에서 혈액 및 장 조직의 면역학적 병리작용에 중요하게 관여하고 있으며 궤양성 대장염의 진단 및 예후 판정에 도움을 줄 수 있음을 시사한다. Discovery of Nod2 has brought to light the significance of mononuclear cells as well as epithelial cells in inflammatory bowel disease (IBD) pathogenesis. Similarly, CCL20 is expressed in both mononuclear cells and epithelial cells and is likely to link innate and acquired immunity. We therefore asked whether CCL20 expression is altered in the peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from patients with ulcerative colitis (UC), a major type of IBD in Korea, and is correlated with the disease activity. The expression levels of CCL20 mRNA were significantly high in the PBMCs from the patients with UC. CCL20 protein expression was also up-regulated in the mucosal epithelium in UC but not in normal controls. Interestingly, however, disease activity index (DAI) revealed that untreated UC groups express higher expression levels of CCL20 mRNA than treated UC groups, implying that CCL20 may be a potential target for the anti-inflammatory treatments. In an agreement with this, three months follow up study revealed that the UC patients who were treated with 5-amino salicylic acid (5-ASA) and glucocorticoid showed dramatic decrease in their CCL20 mRNA levels as compared to untreated ones. Moreover, TNF-α- or IL-1β-induced CCL20 secretion in human epithelial HT-29 cells was significantly diminished by the treatment with 5-ASA and/or dexamethasone, suggesting that CCL20 may be one of the central targets of the anti-inflammatory drugs. Collectively, these results suggest that CCL20 expression in UC may be associated with altered immune and inflammatory responses in the blood as well as the intestinal mucosa and further implied a potential for CCL20 as an important diagnostic marker for UC.

사람 장 상피세포에서 철분 킬레이트제에 의한 IL-8 생성 시 Protein Kinase Cδ의 역할

손영우(Young-Woo Sohn),최은영(Eun-Young Choi),한원철(Won-Cheol Han),윤기중(Ki-jung Yun),오재민(Jae-Min Oh),전창덕(Chang-Duk Jun) 대한해부학회 2005 Anatomy & Cell Biology Vol.38 No.1

이전 연구에서 우리는 세균의 철분 킬레이트제 성분인 데프록사민(deferoxamine, DFO)이 염증신호로서 작용을 하여 사람 장 상피세포에서 IL-8 케모카인 생성을 유도하고, 이는 ERK1/2 및 p38 MAPK 인산화 효소의 활성으로 매개되고, NF-κB에 비의존적임을 보고하였다. 본 연구에서는 novel protein kinase C (PKC) 이성질체인 PKCδ가 철분 결핍에 의한 IL-8 생성에 필요하다는 것을 발견하였다. PKCδ 저해제인 rottlerin을 세포에 처리하면 데프록사민이 유도한 IL-8 생성이 저해된 반면, conventional PKC 이성질체의 저해제인 Gö6976은 저해효과를 유의하게 보이지 않았다. 상피세포의 PKCδ는 데프록사민에 의해 빠르고 강하게 인산화되었다. PKCδ를 과발현시켰을 때 데프록사민에 의한 인산화가 강하게 일어난 반면, PKCδ의 인산화 효소 불활성형 돌연변이 DNA를 도입하였을 때 PKCδ의 인산화가 억제되었다. 특이적인 siRNA를 사용하여 세포내재성 PKCδ 단백질의 수준을 감소시켰을 때도 데프록사민에 의한 IL-8 생성이 유의하게 저해되었다. 이러한 결과들을 통해, 사람 장상피세포에서 철분 결핍으로 유도한 IL-8 생성을 조절하는 데 있어 PKCδ가 중요한 역할을 하는 것을 알 수 있었다. Our previous study demonstrated that a bacterial siderophore, deferoxamine (DFO), could trigger inflammatory signals in human intestinal epithelial cells as a single stimulus, leading to IL-8 production via ERK1/2 and p38 phosphorylation and NF-κB-independent mechanism. In the present study, we proved that a novel protein kinase C (PKC) isoform, PKCδ, is necessary for DFO-induced IL-8 production. Pretreatment of HT-29 cells with rottlerin showed remarkable inhibition of DFO-induced IL-8 production. In contrast, a conventional PKC inhibitor Gö6976 did not show significant inhibition of DFO-induced IL-8 production. DFO induced strong phosphorylation of PKCδ in the epithelial cells. Overexpression of PKCδ resulted in enhanced PKCδ phosphorylation, while transfection with dominant-negative PKCδ vector failed DFO-induced phosphorylation. In addition, transfection of HT-29 cells with siRNA targeting endogenous PKCδ, which suppressed PKCδ expression, attenuated DFO-induced IL-8 production. These results demonstrate that PKCδ plays an important role in regulating iron chelator-induced IL-8 production in human intestinal epithelial cells.

결핵성 육아종에서 Thioredoxin peroxidase-2 의 발현

박근호,유형륜,정영진,윤기중,한원철,유대열,문형배 圓光大學校 醫科學硏究所 1999 圓光醫科學 Vol.15 No.2

Background: Thioredoxin peroxidase(TPX) is a kind of recently discovered antioxidant enzyme which react as rapid hydrogen ion donor for the removal of hydroperoxide. The action and distribution of the TPX was poorly understood in the human diseases. This experiments were designed for the study about the distribution of the TPX in the chronic granulomatous inflammation and about the correlation between the expression of TPX and the site of inflammation, histological activities of tuberculous inflammation or existence of mycobacterium in the inflammatory foci. Methods: The immunohistochemical stains were performed for the localization of the TPX-2 in the epithelioid cells, giant cells and lymphocytes in the chronic granulomatous inflammation. The tissue sections were obtained from the paraffin blocks of the 54 cases of tuberculosis (lung 21 cases, lymph node 12 cases, bone and soft tissue 12 cases, kidney 9 cases; active 33 cases, inactive 21 cases by the histologic classification; presence of mycobacterium 15 cases, no mycobacterium 39 cases by PCR reaction). Results: The expression of TPX-2 was 16.7% in the giant cells, 27.8% in the epithelioid cells and 100% in the lymphocytes of tuberculous inflammations. The expression of TPX-2 in the giant cells and epithelioid cells of the tuberculosis were 28.6% and 57.1% of the pulmonary tuberculosis; 33.3% in each cells of the renal tuberculosis; 0% in each cells of the lymph node or bone and soft tissue tuberculosis. The expression of TPX-2 in the giant cells and epithelioid cells were 9.1% in each cells of the active tuberculosis and were 28.6% and 57.1% in each cells of the inactive tuberculosis by histologic classification. The expression of TPX-2 in the giant cells and epithelioid cells was 40% in each cells of tuberculosis which mycobacteria were detected and the expression of TPX-2 was 7.7% and 23.1% in each cells which mycobacteria were not detected by PCR reaction in the paraffin embedded tissue. Conclusions: The above results were summarized that the TPX-2 in the giant cells and epithelioid cells were more frequently expressed in the inactive tuberculosis than in the active tuberculosis. These results suggest that the TPX-2 is a kind of regulating or suppressing factors in the activity of the tuberculosis.

HBx형질전환 생쥐에서 발생한 간세포암종에서 H-ras 및 c-myc의 발현에 관한 연구

문형배,소병준,김학철,윤기중,한원철,조향정,유대열,정영진 圓光大學校 醫科學硏究所 2002 圓光醫科學 Vol.17 No.2

<연구목적> HBx형질전환 생쥐에서 발생한 간세포암종의 발암과정에 종양유전자(H-rgs, c-myc)의 발현 정도를 조사하고자 하였다. <연구방법> 정상생쥐 12마리(4-18개월) 및 HBx 형질전환 생쥐 44마리(4-18개월)를 대상으로 포르말린에 고정하고 파라핀에 포매한 간 조직을 이용하여 면역조직화학적염색을 실시하였다. 실험군은 정상 부위, 이형성 부위 및 종양 부위로 구분하였으며, 종양 부위는 소결절성병변 부위와 간세 포암종 부위로 구분하였고, 이형성병변 부위는 이형성병변만 발견되는 부위, 소결절성병변과 동반된 이형성병변 부위 및 간세포암종과 동반된 이형성병변 부위로 구분하였다. <연구결과> H-rgs의 발현은 정상 간조직에 비하여 이형성병변 부위(P<0.05) 및 종양 부위(P<0.01)에서 증가하였으며, 소결절성병변 부위과 간세포암종 부위 사이에서는 간세포암종 부위에서 증가된 경향이었으나 통계학적으로 유의한 차이가 없었으며, 각 이형성병변 부위 사이에서도 유의한 차이는 없었다. c-myc의 발현은 정상 간조직 및 이형성병변 부위에 비해 종양 부위에서 증가하였으며(P<0.001), 소결절성병변 부위와 간세포암종 부위에서는 비슷하였고, 각 이형성병변부위 사이에서도 비슷하였다. <결론> HBx형질전환 생쥐에서 발생하는 간세포암종의 발생에 H-rgs는 이형성 변화를 일으키는 시기에 관여하며, c-myc은 이형성병변에서 암으로 이행하는 시기에 관여할 것으로 생각한다. Background: This experiment was designed for the expression of H-ras and c-myc in hepatocarcinogenesis of the HBx transgenic mice. Methods: Immunohistochemical stains in the paraffin embedded tissue of the liver were used for the detection of H-ras and c-myc in the 12 normal mice and 44 HBx transgenic mice of the 4-18 month old. Results: Expression of the H-ras was significantly increased in the dysplastic area (P<0.05) and tumor area (P<0.01) than in the normal liver. But there were no differences of H-ras expression between areas of microscopically identified hepatocellular carcinoma (MI-HCC) and grossly identified hepatocellular carcinoma (GI-HCC) and dysplastic areas among the only dysplastic areas, dysplastic areas with MI-HCC and GI-HCC. Expression of the c-myc was significantly increased in the tumor area (P<0.001) than in the normal liver and dysplastic area. But there were no differences of c-myc expression between areas of MI-HCC and GI-HCC, and dysplastic areas among only dysplastic areas, dysplastic areas with MI-HCC and GI-HCC. Conclusions: Our study suggests that H-ras is related to the dysplastic change and c-myc is related to the neoplastic change in the hepatocarcinogenesis of the HBx transgenic mice.

Brenner 종양 1예

양만용,김삼봉,신무철,김흥곤,한원철,문형배 圓光大學校 醫科學硏究所 1994 圓光醫科學 Vol.10 No.1-2

Brenner tumor is a relatively rare tumor of the ovary. The two most controversial areas in the Brenner tumor have been its histogenesis and its possession or lack of endocrine function. We have experienced a case of Brenner tumor. A brief review of the literatures and a discussion concerning Brenner tumor are presented.

난소에 발생한 원발성 이행상피암종 1례

문형배,조향정,윤기중,한원철,김병륜,김흥곤 대한부인종양 콜포스코피학회 2001 Journal of Gynecologic Oncology Vol.12 No.4

흰쥐에서 일측 고환염전 유발 후 iNOS 발현에 대한 연구

서일영,박경원,임정식,한원철 大韓泌尿器科學會 2001 Korean Journal of Urology Vol.42 No.3

Pathologic and Immunohistochemical Studies on the Hepatocellular Carcinoma in the HBx Transgenic Mice

Moon, Hyung-Bae,Yu, Dae-Yeul,Lee, Kyung-KWang,Han, Yong-Mahn,Yun, Ki-Jung,Han, Won-Cheol,Kim, Bo-Yong,Chung. Yung-Jin,Shin, Dae-Kyun 圓光大學校 醫科學硏究所 1998 圓光醫科學 Vol.14 No.2

B형 간염바이러스(HBV) 감염은 만성간염, 간경화증, 및 간암의 발생과 밀접한 관계를 가지고 있으며, HBV에 존재하는 x항원(HBx)은 HBV 유전자의 발현이나 HBV 증식에 관여할 뿐 아니라 간세포암의 발생에 중요한 역할을 한다고 알려져 있다. 한편 분자생물학적으로 클론된 유전인자들을 포유동물의 germline에 이식하여 이식된 유전인자가 다음세대로 유전되게 하여 인체 질환을 실험동물에 유발시키는 형질전환동물 기법이 개발된 후, 인체질환의 연구에 형질전환동물이 많이 이용되고 있다. 이에 따라 HBx와 간암의 발생관계를 연구하기 위하여 HBx 형질전환 마우스를 개발한 결과 간세포암이 발생하여 이들에 대한 병리학적 및 면역조직화학적 연구를 시행한 결과는 다음과 같다. 1. 4개월부터 HBx 형질전환 마우스 모든 예에서 간세포의 공포성 변화 및 다양한 크기의 핵을 가진 변형세포 군집(Altered foci)이 관찰되었으며, 6개월부터는 육안적으로 종양은 발견되지 않지만 조직학적으로 간세포암의 특성을 보인 소결절성 병변(small nodular lesions)이 75%의 동물에서 관찰되었으며, 11개월부터 육안으로 확인 가능한 간세포암이 60%의 실험동물에서 관찰되었다. 2. 소결절성 병변 및 간세포암의 조직학적 특징은 다양한 형태 및 과염성 핵을 가지고, 핵과 세포질의 비는 감소하였으며, 간혹 비정상적인 핵분열이 관찰되었지만, 종양주위의 섬유화는 관찰되지 않았고, 이들 병변에서 증식세포핵항원 (Proliferating cell nuclear antigen)은 현저히 증가하였다. 3. HBx 단백에 대한 면역조직화학 염색 결과 변형세포군집, 작은 결절성 병변 및 간세포암 모두에서 HBx 양성소견을 나타냈으며 이의 분포양상은 비특이적이었다. 4. 유식세포분석기를 이용한 DNA ploidy 검사에서 변형세포군집 및 소결절성 병변에서는 DNA 2배수성 또는 4배수성이 관찰되었으며, 간세포암 3예 중 2예에서는 비배수성을 나타냈다. 이상의 결과로서 HBx 형질전환마우스에서 간세포암의 발생이 확인되었으며, HBV 감염에 의해 간암이 발생되는 과정에서 HBx 단백이 중요한 역할을 함을 알 수 있었고, HBx 형질전환 마우스는 간암의 연구에 중요하게 이용될 수 있을 것으로 사료되었다. Chronic infection with hepatitis B virus (HBV) is associated with a high incidence of liver disease, including chronic hepatitis, liver cirrhosis and HCC (HCC). The hepatitis B virus-encoded X antigen (HBx) stimulates virus gene expression and replication, which may be important for the establishment and maintenance of the chronic carrier state. The HBx protein, acting as a transcriptional transactivator of viral genes, may alter host gene expression and lead to the development of HCC. It has been reported by Kim et al in 1991 that HBx transgenic mice can have HCC. However Lee et al could not find HCC in their transgenic mouse system using the HBx gene. To confirm whether HBx could cause HCC in transgenic mice and present a useful model system for defining the molecular events for the transformation of HCC. We recently have generated transgenic mice by introducing HBx gene of the HBV into the mice. This study was carried out to examine the histopathologic and immunohistochemical characteristics of the liver in newly developed HBx transgenic mice. The incidence of HCC after 11 months was 60% (3/5). HCC were identified by gross examination and that indicates pleomorphic or hyperchromatic nuclei and partially infiltrative growing without surrounding fibrosis and that have DNA aneuploidy by flow cytometry in two of three cases of HCC. The incidence of small nodular lesions after 6 months was 75%(6/8) in the HBx transgenic mice, but small nodular lesions were not identified by gross examination and had same histological characteristics to HCC. Altered foci which revealed vacuolar changes in the cytoplasm of hepatocytes were found in all HBx transgenic mice from 4 months. DNA diploidy or tetraploidy were found in the tissue of the altered foci and small nodular lesions. The proliferation cell nuclear antigen (PCNA) markedly increased in small nodular lesions and HCCs in the transgenic mice. The HBx protein was expressed in the cytoplasm of all lesions including altered foci, small nodular lesions and HCC. These result indicated HCC can develop in the HBx transgenic mice and suggested that HBx protein can make the hepatocytes more susceptible to secondary events in hepatocarcinogenesis after HBV infection in human beings.