진피 메탄올 추출물의 활성산소종 생성을 통한 인체 백혈병 세포의 apoptosis 유발

김가희(Ga Hee Kim),이문희(Moon Hee Lee),한민호(Min Ho Han),박철(Cheol Park),홍수현(Su Hyun Hong),최영현(Yung Hyun Choi) 한국생명과학회 2013 생명과학회지 Vol.23 No.8

진피(Citri Pericarpium)의 항암작용 기전 해석을 위하여 U937 백혈병 세포의 apoptosis 유발에 미치는 메탄올추출물(EMCP)의 영향을 조사하였으며, apoptosis 조절에 중요한 몇 가지 유전자들의 발현 및 활성 변화, ROS의 생성 변화를 조사하였다. EMCP 처리에 의한 U937 세포의 증식 억제는 apoptosis 유도와 연관성이 있음을 DAPI 염색을 통한 apoptotic body 출현의 증가 및 Flow cytometry 분석에 의한 Sub-G1기 세포 빈도의 증가로 확인하였다. EMCP 처리에 의한 apoptosis 유도에서 Bax 발현 증가, caspases의 활성 및 PARP의 단편화 등이 동반되었으며, ROS 생성의 증가와 연관성이 있었다. 산화적 손상에 대해 세포나 조직을 보호하는 역할을 하는 것으로 알려진 세포 내 항산화 효소인 HO-1의 발현이 EMCP의 처리에 의해 증가되었으나 ROS 생성 억제제인 NAC의 전처리에 의해 감소된 HO-1의 발현은 전사인자인 Nrf2의 핵으로의 이동 억제와 관련되어 있었다. 이상의 결과에서 EMCP 처리에 의한 U937 세포의 apoptosis 유발에는 ROS 생성의 증가와 pNrf2에 의해 조절되는 HO-1의 발현 증가가 중요한 기전으로 작용한다는 것을 알 수 있었다. 이러한 자료는 진피의 항암기전 해석을 이해하는데 중요한 기초자료로서 활용될 수 있을 것으로 생각된다. Citri Pericarpium is one of the most commonly used traditional herbal medicines in Korea, China, and Japan. Its extracts have many properties including the treatment of indigestion and inflammatory respiratory syndromes such as bronchitis and asthma. However, the underlying molecular mechanisms of anti-cancer activity and molecular targets are not fully understood. In this work, we investigated the anti-proliferative activity of Citri Pericapium (EMCP) methanol extract on reactive oxygen species (ROS) production and the association of these effects with apoptotic cell death using U937 human leukemia cells in vitro. EMCP treatment decreased cell proliferation in a dose-dependent manner following an increase of the sub-G1 phase, the down-regulation of Bax proteins, the activation of caspases, the degradation of poly (ADP-ribose) polymerase proteins (PARP), and the induction of ROS generation. However, the quenching of ROS generation by N-acetyl-L-cysteine administration, a scavenger of ROS, reversed the EMCP-induced apoptosis effects. In addition, heme oxygenase-1 expression also recovered by inhibiting the nuclear translocation of phosphorylated NF-E2-related factor 2. Taken together, our data indicate that ROS are involved as key mediators in the early molecular events in the EMCP-induced apoptotic pathway.

신경계 : 일반연재 ; 이중초음파검사상 빗장밑혈류빼앗김증후군(Subclavian Steal Syndrome)이 관찰된 환자에서의 스텐트 삽입 후 추적

한민호 ( Min Ho Han ),최정혜 ( Jung-hye Choi ),고운경 ( Oonkyung Kho ) 대한임상병리사협회 2011 임상생리검사학회 발표자료집 Vol.2011 No.-

The subclavian steal syndrome is a kind of obstructive artery disease that results from the stenosis or occlusion of the subclavian artery proximal to the origin of the vertebral artery. The resulting symptoms are vertebrobasilar insufficiency symptoms due to retrograde blood flow from the contralateral vertebral and basilar artery into the low-pressure ipsilateral upper extremity vessels. so the patients usually undergo dizziness or arm ischemic symptoms. We report a patient with the subclavian steal syndrome who found the vertebral artery Doppler waveform change also 12 mmHg interarm systolic blood pressure difference. A stenotic lesion of subclavian artery had been effectively treated by stenting. The finding of follow up is that the vertebral artery Doppler waveform change had disappeared and 12 mmHg interarm systolic blood pressure difference had decreased to 5 mmHg after treatment.

비대칭 멀티 코어 모바일 단말의 CPU 발열량 저감을 위한 실시간 스케줄링 기법

한민호(Min-Ho Han),고영배(Young-Bae Ko),임성화(Sung-Hwa Lim) 한국통신학회 2022 한국통신학회 학술대회논문집 Vol.2022 No.6

엣지 컴퓨팅에서 Straggler 문제 해결을 위한 Neurosurgeon기법

한민호(Han Min Ho),고영배(Ko Young Bae) 한국통신학회 2020 한국통신학회 학술대회논문집 Vol.2020 No.2

RAW 246.7 대식세포 모델에서 고삼, 감초, 백선피 에탄올 추출물 및 추출복합물의 항염증 효능 비교

한민호(Min Ho Han),이문희(Moon Hee Lee),홍수현(Su Hyun Hong),최영현(Yung Hyun Choi),문주성(Ju Sung Moon),송명규(Myung Kyu Song),김민주(Min Ju Kim),신수진(Su Jin Shin),황혜진(Hye Jin Hwang) 한국생명과학회 2014 생명과학회지 Vol.24 No.3

고삼, 감초 및 백선피는 염증성 질환 치료를 위한 목적으로 오랜 동안 사용되어 온 한약제이다. 본 연구에서는 이들 한약제의 에탄올 추출물과 각 한약제 추출물의 복합물에 대한 항염증 효능을 LPS에 의하여 활성화되는 RAW 264.7 대식세포 모델을 사용하여 평가하였다. 이를 위하여 고삼 추출물(EESF), 감초 추출물(EEGU), 백선피추출물(EEDD) 및 추출복합물(MHMIXs)을 준비하였으며, 항염증 효능 평가를 위한 인자로서 대표적인 염증 매개인자로서 NO와 PGE2를, 염증성 cytokine 중에서는 IL-1β와 TNF-α를 선정하였다. 본 연구의 결과에 의하면, 각 한약제 단독 추출물 및 추출복합물은 LPS로 활성화된 RAW 264.7 대식세포에서 NO와 PGE2 및 염증성 cytokine의 생성을 모두 억제하였으며, 이러한 생성 억제는 해당 단백질의 발현 억제를 통해 이루어졌다. 비록 각각의 단일 추출물과 추출복합물이 항염증 효과가 우수하다고 평가되지만, 세포 독성과 다양한 염증성 매개인자 및 cytokine의 억제 효과를 전체적으로 고려할 경우 EESF, EEGU 및 EEDD가 3:1:1로 혼합된 MHMIX-1이 항염증 관련 약품 및 소재 개발에 보다 효과임을 제안하며, 이는 과도하게 활성화된 대식세포에 의한 염증성 질환 조절에 매우 유용하게 사용될 수 있을 것으로 추정된다. Sophora flavescens, Glycyrrhiza uralensis and Dictamnus dasycarpus have been widely used in folk medicine for several inflammatory disorders in Korea and China. In this study, we compared the anti-inflammatory effects of the ethanol extracts of S. flavescens (EESF), G. uralensis (EEGU) and D. dasycarpus (EEDS), and their mixtures (medicinal herber mixtures, MHMIXs) on production of inflammatory mediators and cytokines in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW 264.7 murine macrophages. Our data indicated that treatment with EESF, EEGU and EEDD significantly inhibited the excessive production of pro-inflammatory mediators such as nitric oxide (NO) and prostaglandin E2 (PGE2) in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. The ethanol extracts and MHMIXs also attenuated the production of pro-inflammatory cytokines, including interleukin-1β (IL-1β) and tumor necrosis factor-α (TNF-α) by suppressing their protein expression, respectively. Interestingly, MHMIX-1, which basic ingredients are EESF, EEGU and EEDS in the proportion 3:1:1, more safely and effectively inhibits the LPS-induced inflammatory status in LPS-stimulated RAW 264.7 macrophages compared to ethanol extracts of each medicinal herb and other MHMIXs without causing any cytotoxic effects. Our study provides scientific evidence to support that a berbal mixture, MHMIX-1 may be useful in the treatment of inflammatory diseases by inhibiting inflammatory regulator responses in activated macrophages.

MPLS를 이용한 CE 라우터 기반 VPN의 설계 및 구현

한민호(Min-Ho Han),이영석(Young-Seok Lee),전우직(Woo-Jik Chun),최훈(Hoon Choi) 한국정보과학회 2000 한국정보과학회 학술발표논문집 Vol.27 No.2Ⅲ

VPN이란 공중망에서 물리적인 구성과 무관하게 논리적으로 폐쇄된 사용자 집단을 구성하여 각종 통신 서비스를 제공하는 기술이다. 이러한 VPN을 구성하기 위한 다양한 기술들이 제시되었고, 그 중에서 MPLS를 이용한 방식이 다른 기술에서는 제공하기 어려운 QoS, 보안, 관리 유지 등을 제공하는데 많은 장점을 가지고 있다. 본 논문에서는 기존에 제안된 MPLS를 이용한 Network 기반, 즉 PE 라우터 기반 VPN의 단점을 보안하기 위해 제안된 MPLS를 사용하는 CE 라우터 기반 VPN의 설계 및 구현에 대해 기술하고자 한다.

인체 방광암세포에서 histone deacetylase 억제제인 sodium butyrate이 TRAIL에 의한 apoptosis 유도에 미치는 영향

한민호(Min-Ho Han),최영현(Yung Hyun Choi) 한국생명과학회 2016 생명과학회지 Vol.26 No.4

TRAIL은 정상세포에서는 세포독성을 나타내지 않는 반면, 암세포에서는 사멸을 유도하므로 항암제로 각광받고 있지만 많은 암세포에서 TRAIL에 저항성을 가지고 있는 것으로 알려져 있으므로 이를 극복해야하는 큰 어려움이 남아있다. 본 연구에서는 TRAIL에 저항성을 가지는 인간 방광암 세포주인 5637 세포를 이용하여 histone deacetylase 억제제인 sodium butyrate (SB)와 TRAIL을 혼합처리하였을 경우 유발되는 세포사멸 효과와 이와 관련된 분자생물학적 메카니즘을 연구하였다. 세포독성이 없는 조건의 TRAIL과 SB를 혼합처리 하였을 경우 SB 단독처리군 보다 세포사멸이 현저하게 증가하는 것으로 확인되었다. TRAIL과 SB의 혼합처리는 caspases (caspase-3, -8 and -9)의 활성화 및 PARP의 단편화를 유발하였다. 하지만 caspase 억제제에 의하여 TRAIL과 SB의 혼합처리에 의하여 유발되는 apoptosis가 현저하게 억제되는 것으로 나타났다. 또한 TRAIL과 SB의 혼합처리는 세포표면에 존재하는 DR5의 발현 증가 및 c-FLIP의 발현 감소를 유발하였으며, pro-apoptotic protein인 Bax와 세포질cytochrome c의 발현 증가 및 anti- apoptotic protein인 Bcl-xL의 발현감소와 함께 tBid의 형성을 유발하였다. 이는 SB와 TRAIL의 혼합처리가 안전하고 선택적으로 TRAIL에 저항성을 가지는 방광암 세포에서 치료하는데 효과적인 전략임을 제시하는 결과이다. The tumour necrosis factor (TNF)-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL) is considered a promising anticancer agent due to its unique ability to induce cancer cell death having only negligible effects on normal cells. However, many cancer cells tend to be resistant to TRAIL. In this study, we investigated the effects and molecular mechanisms of sodium butyrate (SB), a histone deacetylase inhibitor, in sensitizing TRAIL-induced apoptosis in 5637 human bladder cancer cells. Our results indicated that co-treatment with SB and TRAIL significantly increased the apoptosis induction, compared with treatment with either agent alone. Co-treatment with SB and TRAIL effectively increased the cell-surface expression of death receptor (DR) 5, but not DR4, which was associated with the inhibition of cellular Fas-associated death domain (FADD)-like interleukin-1β-converting enzyme (FLICE) inhibitory protein (c-FLIP). Furthermore, the activation of caspases (caspase-3, -8 and -9) and degradation of poly(ADPribose) were markedly increased in 5637 cells co-treated with SB and TRAIL; however, the synergistic effect was perfectly attenuated by caspase inhibitors. We also found that combined treatment with SB and TRAIL effectively induced the expression of pro-apoptotic Bax, cytosolic cytochrome c and cleave Bid to truncated Bid (tBid), along with down-regulation of anti-apoptotic Bcl-xL expression. These results collectively suggest that a combined regimen of SB plus TRAIL may offer an effective therapeutic strategy for safely and selectively treating TRAIL-resistant bladder cancer cells.

ICR 마우스를 이용한 오미자 종자 정유의 단회경구투여 독성시험

한민호(Min Ho Han),김주완(Joo Wan Kim),김기영(Ki Young Kim),김성구(Sung Goo Kim),유경진(Gyeng Jin Yu),조용복(Yong Bok Cho),황혜진(Hye Jin Hwang),김병우(Byung Woo Kim),김철민(Cheol Min Kim),최영현(Yung Hyun Choi) 한국생명과학회 2014 생명과학회지 Vol.24 No.2

오미자(Schizandra chinensis Baillon., Schisandrae Semen)의 열매는 한국을 포함한 아시아 지역에서 오랫동안 전통 의약제로 광범위하게 사용되어 왔다. 식물에서 분리된 정유(essential oils)는 다양한 약리효능을 지니고 있지만, 오미자 열매에서 추출한 정유의 약리학적 기전은 밝혀진 바 없다. 본 연구에서는 오미자 종자의 정유 (Schisandrae Semen essential oil, SSeo)에 대한 안정성을 확보하기 위하여 단회경구투여 독성시험을 ICR 마우스를 대상으로 실시하였다. SSeo은 ICR mice에 5,000 mg/kg 농도로 경구 투여하였으며, 14일 후 희생시켰다. SSeo 투여 후 치사율, 임상 증상, 체중 및 부검 소견 상의 유의적인 변화는 관찰되지 않았다. 또한 각 장기의 무게, 혈액학적 및 혈청학적 임상 화학적 지표에도 총 bilirubin량을 제외한 유의적인 변화는 관찰할 수 없었다. 따라서 SSeo 단회 투여에 따른 치사량은 5,000 mg/kg 이상일 것으로 추정되어 급성 독성 측면에서 유해성이 없다는 의미를 지니며, 경구투여에 따른 어떤 부작용도 나타내지 않았음을 의미한다. Essential oils extracted or purified from various plants have shown various beneficial effects. Seed parts of Schizandra chinensis Baillon (Schisandrae Semen) have been used as a traditional medicine for thousands of years in parts of Asia, including Korea, China, and Japan. However, the pharmacological mechanisms of essential oils purified from S. fructus (S. chinensis Baillon) remain largely unresolved. The aim of this study was to investigate the safety of Schisandrae Semen essential oil (SSeo) by a single-dose toxicity study in mice. SSeo was orally administered at a dose of 5,000 mg/kg in ICR mice. All animals were sacrificed after 14 days of treatment. After a single administration, mortality, clinical signs, body weight changes, and gross pathological findings were observed for 14 days. We also measured parameters of organ weight, clinical chemistry, and hematology. No toxicological change related to the test substance or mortality was observed after administration of a single oral dose of SSeo. There were no adverse effects on clinical signs, body weight, or organ weight and no gross pathological findings in any treatment group. The clinical chemistry and hematological parameters were within the normal ranges except total bilirubin. Therefore, the approximate lethal dose for oral administration of SSeo in mice was considered to be over 5,000 mg/kg. The results on the single-dose toxicity of SSeo indicate that it is not possible to reach oral dose levels related to death or dose levels with any harmful side effects.

Sanguinarine에 의한 Hep3B 인체 간암세포의 apoptosis 유도에 관한 연구

한민호(Min Ho Han),최성현(Sung Hyun Choi),홍수현(Su Hyun Hong),박동일(Dong Il Park),최영현(Yung Hyun Choi) 한국생명과학회 2017 생명과학회지 Vol.27 No.11

Sanguinarine은 다양한 목적으로 사용되고 있는 Sanguinaria canadensis L.의 뿌리에서 유래된 benzophenanthridine alkaloid 계열 물질중의 하나이다. 그동안 sanguinarine의 다양한 약리학적인 효능이 알려져 왔고, 항암활성에 대한 연구도 여러 암세포들을 대상으로 수행되어 왔다. 그러나 sanguinarine에 의한 암세포의 apoptosis 유도에 대한 현상은 여전히 많은 부분에서 연구의 대상으로 남아 있다. 본 연구는 Hep3B 인체 간암세포를 대상으로 sanguinarine의 항암활성에 대한 추가적인 자료를 제시하기 위하여 수행되었다. 본 논문의 결과에 의하면, sanguinarine은 처리 농도 의존적으로 Hep3B 세포의 증식을 억제하였으며, 이는 apoptosis 유도와 연관성이 있었다. Sanguinarine은 두 가지 apoptosis 경로인 extrinsic 및 intrinsic 경로의 개시 initiator caspase인 caspase-8 및 caspase-9 뿐만 아니라 대표적인 effector caspase인 caspase-3의 활성을 증가시켰고, caspase-3의 기질인 PARP의 분절을 유발하였다. 아울러 sanguinarine은 DR-related 유전자들의 발현을 부분적으로 증가시켰으며, Bcl-2 family에 속하는 pro-apoptotic Bax의 발현을 증가시킨 반면, anti-apoptotic Bcl-2의 발현은 억제시켰다. 또한 sanguinarine은 Bid의 truncation을 촉진하였고, MMP의 소실에 따른 cytochrome c를 미토콘드리아에서 세포질로의 이동을 증가시켰다. 그리고 sanguinarine에 의한 apoptosis 유도 및 세포 증식율 억제 현상이 caspase의 활성을 인위적으로 억제하였을 경우, 모두 사라졌다. 따라서 sanguinarine에 의하여 유도하는 Hep3B 세포의 apoptosis 유발에는 caspase 의존적으로 extrinsic 및 intrinsic 경로가 모두 관여하고 있음을 알 수 있었다. Sanguinarine is a benzophenanthridine alkaloid derived from the roots of Sanguinaria canadensis L., which is used for the purpose of treating various diseases. Although studies of anticancer activities have been performed using various cancer cell lines, the phenomenon of inducing apoptosis in cancer cells by using sanguinarine requires more research. Therefore, this study investigated the anti-cancer activities and related mechanisms of sanguinarine used with Hep3B human hepatocellular carcinoma cells in terms of the regulation of apoptosis. Sanguinarine inhibited the proliferation of Hep3B cells in a concentration-dependent manner, which was associated with the induction of apoptosis. Sanguinarine also increased the activity of caspase-3, which is a typical effector caspase, and the activities of caspase-8 and caspase-9, which are key when initiating extrinsic and intrinsic apoptosis pathways, respectively. In addition, sanguinarine increased the expression of death receptor-related genes and pro-apoptotic BAX, which belongs to the Bcl-2 family, while suppressing the expression of anti-apoptotic Bcl-2. Sanguinarine promoted the truncation of Bid and enhanced the release of cytochrome c from the mitochondria to the cytoplasm due to a loss of mitochondrial membrane potential. Furthermore, the reduction of a survival rate that was induced by sanguinarine and the induction of apoptosis disappeared with the inhibition of artificial caspase activity. Therefore, the results of the study indicated that sanguinarine-induced apoptosis in Hep3B cells involves both extrinsic and intrinsic pathways; such apoptosis is a caspase-dependent phenomenon.

흑마늘 투여와 운동이 고강도 운동 후 TBARS, HSP 70 및 COX-2 발현에 미치는 영향

Yeong-Ho Baek(백영호),Sang-Ho Lee(이상호),Min Ho Han(한민호),Yung-Hyun Choi(최영현),Seung-Hyun Kim(김승현),Yi Sub Kwak(곽이섭) 한국생명과학회 2012 생명과학회지 Vol.22 No.6

실험동물은 생후 4주령 Sprague Dawley계 수컷 흰쥐 24마리로 흑마늘운동군(6마리), 운동군(6마리), 흑마늘군(6마리), 대조군(6마리)으로 총 24마리로 구분하여 운동은 총 4주간 트레드밀로 실시하였으며, 시료 채취 하기 바로 직전에 고강도 운동을 실시하였다. 흑마늘 섭취는 흑마늘진액을 구강 투여시켰으며, 연구결과 다음과 같다. 4주간의 흑마늘 투여와 유산소운동 후 고강도 운동을 실시하였을 때 TBARS 농도는 흑마늘운동군이 흑마늘군, 운동군과 대조군에 비해 유의하게 낮았다. 흑마늘군과 운동군은 대조군에 비해 유의하게 낮았다. HSP 70 발현은 흑마늘섭취군이 다른군에 비해 상대적으로 낮게 나타났다. COX-2 발현은 모든군에서 비슷한 발현을 보이고 있으며 규칙적인 운동과 흑마늘 섭취는 산화적 스트레스를 줄일 수 있을 것으로 기대된다. The purpose of this study was to investigate the effects of black garlic supplementation and exercise on TBARS, HSP 70, and COX-2 expression after high-intensity exercise in rats. Twenty-four male Sprague-Dawley rats (4 weeks) were used in this study. Experimental groups were a control group (A, n=6), black garlic supplementation group (B, n=6), exercise group (C, n=6), and black garlic supplementation with exercise group (D, n=6). High-intensity exercise was performed by treadmill running (every 10 min speed increased gradually; 15~24 m/min, 0° grade) and 2.86 g/㎏ black garlic for 4 weeks. The findings of this study were as follows: TBARS levels were significantly lower in the D group compared to the other group and B and C groups were significantly lower in TBARS levels than in the A group. HSP 70 expression was lower in the B group compared to the other groups. COX-2 expression has showed a similar expression in all groups. Therefore, it is considered that black garlic intake and exercise may reduce oxidative stress.