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- 저자 : 최국선(Gug-Seoun Choi) (검색결과 13 건)
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윤주연,최국선,김수,최승국,Yoon, Ju-Yeon,Choi, Gug-Seoun,Kim, Su,Choi, Seung-Kook 한국식물병리학회 2017 식물병연구 Vol.23 No.1
무(Raphanus sativus L.) 육종 계통들에 대한 순무모자이크 바이러스(Turnip mosaic virus, TuMV) 저항성을 평가하기 위하여, 20개 무 육종계통들의 잎에 순무모자이크바이러스 BR 병원성을 가지는 국내 분리 계통을 즙액 접종하였다. 순무모자이크바이러스를 접종한 무 개체들은 $22^{\circ}C{\pm}3^{\circ}C$에서 재배하였으며 4주 동안 바이러스 병징 발현을 육안으로 조사하여 저항성을 평가하였다. 순무모자이크바이러스 감염에 의해서 무 육종계통들의 다른 병징 발현에 의해 분석한 결과, 16개 무 계통은 약한 모자이크, 모틀링에서 심한 모자이크 전신 병징을 보였으며 감수성으로 판별되었다. 이러한 결과는 순무모자이크바이러스 외피단백질 유전자에 대한 특이적 역전사중합효소연쇄반응에 의하여 확인되어, 순무모자이크바이러스가 병징을 발현시킨 원인이었다. 이와는 다르게 4개 무 육종계통들에서는 모자이크 등 전신 감염 병징이 발현되지 않았으며, 동일한 무 육종 계통들의 개체들에서 8주 동안 병징이 관찰되지 않았다. 역전사중합효소연쇄반응으로 조사한 결과 4개 무 육종 계통들의 상엽들에서 순무모자이크바이러스가 검출되지 않았다. 이런 결과는 4개 무 육종계통들이 순무모자이크바이러스에 대한 강한 저항성을 가지고 있음을 예시해준다. Leaves of twenties radish (Raphanus sativus L.) inbred lines were mechanically inoculated with Turnip mosaic virus (TuMV) strain HY to evaluate TuMV resistance of the radish inbred lines. The inoculated radish plants were incubated at $22^{\circ}C{\pm}3^{\circ}C$ and resistance assessment was examined using symptom development for 4 weeks. Based on the reactions of differential radish inbred lines, 16 radish lines were produced mild mosaic, mottling, mosaic and severe mosaic symptoms by TuMV infection. These results were confirmed by RT-PCR analysis of TuMV coat protein gene, suggesting that TuMV is responsible for the disease symptoms. Four resistant radish lines did not induce systemic mosaic symptoms on upper leaves and chlorosis in stem tissues for 4 weeks, showing they were symptomless by 8 weeks. Further examination of TuMV infection in the 4 radish lines showed no TuMV infection in all systemic leaves. These results suggest that the 4 radish lines are highly resistant to TuMV.
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연구보문 : 자연과학 ; 고추바이러스들의 동시 검출을 위한 새로운 즙액 추출 용액의 개발
윤주연 ( Ju Yeon Yoon ),최국선 ( Gug Seoun Choi ),조인숙 ( In Sook Cho ),최승국 ( Seung Kook Choi ) 한국국제농업개발학회 2014 韓國國際農業開發學會誌 Vol.26 No.1
바이러스 입자를 감지하는 역전사 핵산 연쇄 증폭법 (VC/RT-PCR)은 감염된 식물종들로부터 핵산 추출 없이 식물바이러스들을 검출 할 수 있다. 본 연구는 VC/RT-PCR 분석법을 이용하여 고추를 감염시키는 바이러스들을 효과적으로 진단하기 위하여 새로운 즙액 추출 완충액들이 제작하였다. 토마토반점위조바이러스 (Tomato spotted wilt virus; TSWV), 고추약한모틀바이러스 (Pepper mild mottle virus; PMMoV) 및 고추모틀바이러스 (Pepper mottle virus; PepMoV) 진단을 위한 가장 최적화된 추출 완충액은 0.5% sodium sulfate를 포함하는 1.0M Tris (pH 8.0) buffer였다. 고추 바이러스들은 담배 즙액 추출 후 7일까지 검출이 되었으며, 마쇄 직후와 검출 감도는 유의한 차이가 없었다. 반면에, 3가지 고추 바이러스들은 고추 즙액 추출 후 2일까지만 바이러스들이 검출되었으며, 검출 감도는 크게 감소하였다. 국내 고추 재배 농가들에서 수집한 고추 시료들에서 TSWV, PMMoV, PepMoV의 단독 감염 및 PMMoV와 PepMoV의 중복 감염을 선발된 최적 즙액 완충액과 VC/RT-PCR의 조합을 이용하여 동시 진단이 가능하였다. Virion-captured reverse transcription polymerase chain reaction (VC/RT-PCR) is able to detect plant viruses without extraction of total nucleic acids from infected plant species. Novel extraction buffers were developed and optimized for the efficient diagnosis of pepper-infecting viruses using VC/ RT-PCR analysis. The most optimal extraction buffer to detect Tomato spotted wilt virus (TSWV), Pepper mild mottle virus (PMMoV), and Pepper mottle virus (PepMoV) was 1M Tris (pH8.0) buffer containing 0.5% sodium sulfate. The three viruses in the optimal buffer could be detected from tobacco (Nicotiana rustica) until 7 post-extraction, showing no significant difference in detection sensitivity of viruses. Meanwhile, the three pepper-infecting viruses in the optimized buffer could be detected from pepper plants until 2 post-extraction, showing significant decrease in detection sensitivity. Single infection of TSWV, PMMoV, or PepMoV and mixed infection of PMMoV and PepMoV were simultaneously detected from pepper plants collected from domestic farms using the combination of the optimal buffer and VC/RTPCR.
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토마토덤불위축바이러스 현장진단용 급속 면역 금 나노입자 막대 키트 개발
윤주연 ( Ju Yeon Yoon ),최국선 ( Gug Seoun Choi ),조인숙 ( In Sook Cho ),최승국 ( Seung Kook Choi ) 한국국제농업개발학회 2014 韓國國際農業開發學會誌 Vol.26 No.2
A rapid, user-friendly and simple immune-chromatographic dipstick kit named ‘rapid immuno-gold strip’ (RIGS) kit was developed in a novel single strip format to detect on-site detection of Tomato bushy stunt virus (TBSV). Immunoglobulin G (IgG) from polyclonal antisera raised in rabbits against TBSV was purified through protein-A affinity chromatography and then the purified TBSV-IgG was conjugated to colloidal gold nano-particles which served as a test line on nitrocellulose membrane. Protein A that non-specifically binds to TBSV antibody was used as a control line on the same strip. The diagnosis process with the RIGS-TBSV involves simply grinding the suspect plant sample in a bag that contains the extraction buffer and inserting the strip the bag. Results can be seen in 5-10 minutes. The flow of the complexes of gold particles coated with TBSV-IgG and a crude sap from TBSV infected tomato plants resulted in intensive color formed on the test lines proportional to the concentrations of TBSV. The RIGS-TBSV kit did not show any cross-reactions against Tomato spotted wilt virus and Tomato yellow leaf curl virus that are major causal viruses. These results indicate that the RIGS-TBSV kit is highly sensitive and is not required for laboratory training and experience prior to testing. The RIGS-TBSV kit is suitable for on-site determination of suspect TBSV-infected plants as well as for laboratory diagnosis.
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연구보문 : 자연과학 ; 오이모자이크바이러스 현장진단용 급속면역금나노입자 막대 키트 개발
윤주연 ( Ju Yeon Yoon ),최국선 ( Gug Seoun Choi ),조인숙 ( In Sook Cho ),최승국 ( Seung Kook Choi ) 한국국제농업개발학회 2014 韓國國際農業開發學會誌 Vol.26 No.1
‘급속면역금나노입자막대 (RIGS) 키트’라 명명된 빠르며 사용자 편의 및 간단한 면역흡착막대 방식의 키트가 오이모자이크바이러스 (CMV)의 현장진단을 하기 위하여 개발되었다. 토끼의 CMV항혈청에서 정제된 면역글로블린G (IgG)는 단백질 A 크로마토그래피법으로 정제되었으며 이후 금나노입자와 결합하여 니트로셀룰로스막에서 진단선 표시하도록 고안되었다. CMV항체와 비특이적으로 결합하는 단백질A를 같은 진단막대에서 대조선으로 이용되었다. RIGS-CMV 키트를 이용한 진단은 의심 식물 시료를 완충액이 들어간 플라스틱 봉지에 넣은 후 착즙 후 진단막대기를 넣으면 된다. 결과는 5-10분 후 알 수 있다. CMV가 감염된 고추, 오이 및 멜론의 즙액에 RIGS 막대기를 넣고 진단한 결과 CMV 농도에 비례하여 진단선이 형성됨이 관찰되었으며, 이들 키트들은 CMV와 연관 되지 않은 다른 고추바이러스들에서 비특이적 반응이 형성되지 않았다. 이런 결과들은 RIGS-CMV 키트가 매우 민감하며, 진단에 별 다른 실험실 기술이나 경험이 필요하지 않는 다는 것을 의미한다. 그러므로, RIGS-CMV 키트는 CMV 감염이 의심되는 식물체들의 현장 진단 뿐만 아니라 실험실에서의 CMV 진단에 효과적이다. A rapid, user-friendly and simple immune-chromatographic dipstick kit named ‘rapid immune-gold strip’ (RIGS) kit was developed in a novel single strip format to detect on-site detection of Cucumber mosaic virus (CMV). Immunoglobulin G (IgG) from polyclonal antisera raised in rabbits against CMV was purified through protein-A affinity chromatography and then the purified CMV-IgG was conjugated to colloidal gold nano-particles which served as a test line on nitrocellulose membrane. Protein A that non-specifically binds to CMV antibody was used as a control line on the same strip. The diagnosis process with the RIGS-CMV involves simply grinding the suspect plant sample in a bag that contains the extraction buffer and inserting the strip the bag. Results can be seen in 5-10 minutes. The flow of the complexes of gold particles coated with CMV-IgG and a crude sap from CMV infected pepper, cucumber and melon plants resulted in intensive color formed on the test lines proportional to the concentrations of CMV. The RIGS-CMV kit did not show any cross-reactions against other pepper infecting viruses unrelated to CMV. These results indicate that the RIGS-CMV kit is highly sensitive and is not required for laboratory training and experience prior to testing. The RIGS-CMV kit is suitable for on-site determination of suspect CMV-infected plants as well as for laboratory diagnosis.
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치즈 유청의 오이모자이크바이러스와 고추모틀바이러스 감염 억제 효과
정봉남(Bong Nam Chung),권선정(Sun Jung Kwon),최국선(Gug Seoun Choi),윤주연(Ju Yeon Yoon),조인숙(In Sook Cho) 한국식물병리학회 2020 식물병연구 Vol.26 No.2
치즈 제조공정에서 나오는 부산물인 유청이 진딧물에 의 해 전염되는 오이모자이크바이러스(cucumber mosaic virus, CMV)와 고추모틀바이러스(pepper mottle virus, PepMoV)의 감염 억제효과가 있는지를 고추 ‘청양’ 품종을 대상으로 조사 하였다. 온실에서 유청 원액 및 원액을 물로 2–20배로 희석하 여 고추 ‘청양’ 품종에 분무한 후 복숭아혹진딧물을 이용하여 CMV-Vch를 접종한 결과, 원액을 처리한 실험 구의 감염률이 6.6%로, 대조로 물을 처리한 실험 구의 감염률 23.3%에 비해 저하되었다. 노지에서 재배하는 고추 ‘청양’ 품종에 CMV는 인 위적으로 접종하지 않고 자연 감염되도록 둔 상태에서 정식일 부터6월말일까지1주일간격으로유청원액을분무처리한결 과, 6월5일 이전에 자연적으로 CMV에 감염된 식물체의 비율이 무처리와 살충제 처리에 비해 각각 18.9%와 16.7% 감소하였다. 유청의 식물 바이러스 감염억제에 대한 작용 기작을 알기 위하 여 온실에서 PepMoV-kr에 감염된 식물체 즙액과 유청을 1:1로 혼합하여 고추에 인공접종하여 시간경과에 따른 외피단백질 농도변화를웨스턴블로팅방법으로분석한결과,접종6일후 대조에 비하여 적었으나, 접종 9일 후에는 대조와 동일하게 증 가하였다. 본 연구 결과는 유청이 고추에 발생하는 서로 다른 속에 속하는 두 종류의 바이러스인 CMV와 PepMoV에 의한 감 염 억제에 효과가 있다는 것을 보여주었다. Evaluations were made for the effects of cheese whey treatment on infection of pepper plants by cucumber mosaic virus-Vch (CMV-Vch) and pepper mottle virus-Kr (PepMoV-Kr). In a greenhouse, pepper plants sprayed with whey, prior to inoculation by CMV-Vch using aphids, showed a viral infection rate significantly lower (6.6%) than for the control (23.3%). In an open field experiment, in which CMV infection relied on natural transmis- sion by aphids, pepper plants were sprayed with undiluted whey once a week, starting on the transplanting date (May 2) to the end of June. On June 5, these whey-sprayed plants showed a CMV infection rate reduced by 18.9% and 16.7%, compared to untreated and pesticide-treated plants, respectively. In the greenhouse, pepper plants inoculated with PepMoV-Kr mixed with whey showed a viral infection rate decreased by 60% compared to the control. The accumulated amount of PepMoV-Kr coat protein was less than that for the virus- only control at 6 days post inoculation (dpi), but increased up to a similar level as the control at 9 dpi. This study showed that cheese whey is effective in reducing infection of both CMV and PepMoV in pepper plants.
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