생체 내 Pig-a 유전자 돌연변이시험에 대한 세 시험실의 전수가능성 평가

정영신 ( Young-shin Chung ),박범수 ( Bumsoo Pak ),한세희 ( Sehee Han ),이지연 ( Jiyeon Lee ),김지영 ( Jiyoung Kim ),백승민 ( Seng-min Back ),박초롱 ( Cho-rong Park ),김수환 ( Su-hwan Kim ),이종권 ( Jong-kwon Lee ) 한국동물실험대체법학회 2017 동물실험대체법학회지 Vol.11 No.1

In order to establish a pig-a gene mutation assay as a regulatory test for evaluating in vivo genotoxicity in Korea, the transferability study as a stage II validation was performed using the test substance, N-ethyl-N-nitrosourea (ENU) across three laboratories. The lead laboratory (KIT) standardized the protocol using Rat MutaFlow® Kit and transferred the methodology to two participating laboratories (Hoseo University and Biotoxtech Co. Ltd.). Sprague Dawley rats were treated with vehicle or three dose levels of ENU (10, 20, 40mg/kg) by oral gavages on the 3 consecutive days. On the day 15 after the first treatment, bloods were collected and analyzed to estimate the percentage of reticulocytes (%RETs), mutant type of RETs and erythrocytes (RBC) using flowcytometer. In results, the exposure of ENU induced the dose-dependent increases in the mutant frequencies of RBCCD59- and RETCD59-, while %RETs were not affected. Data comparisons among three participating laboratories indicated the good transferability with the high correlation coefficients (0.97-0.99) between the lead and participating laboratories. In conclusion, the pig-a gene mutation assay may be the effective test for the estimation of in vivo gene mutation and the validation studies may be needed using more test substances in Korea.

Acriflavine과 Guanosine 복합체(AG60)의 유전독성시험

정영신(Young-Shin Chung),홍은경(Eun-Kyung Hong),김상건(Sang Geon Kim),안의태(E-Tay Ahn),이경영(Kyung-Yung Lee),강종구(Jong-Koo Kang) 한국환경성돌연변이발암원학회 2002 한국환경성돌연변이·발암원학회지 Vol.22 No.2

AG60, the complex of acriflavine and guanosine, has been shown to possess the synergistic antitumorigenic activity in the previous paper (J. Pharm. Pharmacol. 1997, 49:216). In this study, we have investigated the genotoxic properties of AG60 using in vitro and in vivo system such as Ames bacterial reversion test, chromosomal aberration assay and micronucleus assay. In Ames reverse mutation test, AG60 treatment at the dose range up to 250 μg/plate caused the dose-independent random induction of the mutagenic colony formation in S. typhimurium TA98, TA100, TA1537, and E. coli WP2uvrA, while any mutagenic effect of AG60 wasn't observed in S. typhimurium TA1535. Any significant chromosomal aberration wasn't observed in chinese hamster lung (CHL) fibroblast cells incubated with PBS or AG60 at the concentrations of 2.5, 5, 10 μg/ml for 24<br/> hours without but even with S9 metabolic activation system for 6 hours. In vivo ICR mice, the intramuscular injection of AG60 at the doses of 7.15, 14.3, and 28.6 mg/kg did not induce the frequency of micronucleus formation. However, mitomycin C, as one of the positive controls at the dose of 2 mg/kg caused the 8.4% induction<br/> in the frequency of micronucleus and 24% increase in the chromosomal aberration.

Sprague-Dawley(SD) 랫드에 있어서 지모와 황백피의 혼합추출물의 단회 경구투여 독성연구

정영신(Young-Shin Chung),임광현(Kwang-Hyeon Lim),강부현(Boo-Hyon Kang),김성준(Sung-Joon Kim),오승준(Seung-Joon Oh),김광명(Kwang-Myung Kim),이석종(Seok-Jong Lee),최선아(Sun a Choi),홍은경(Eun-Kyung Hong) 한국실험동물학회 2002 Laboratory Animal Research Vol.18 No.4

두릅나무 추출물의 유전독성평가

정영신(Young-Shin Chung),이석종(Seok-Jong Lee),최선아(Sun a Choi),이장하(Jang-ha Lee),류재천(Jae-Chun Ryu),홍은경(Eun-Kyung Hong) 한국환경성돌연변이발암원학회 2002 한국환경성돌연변이·발암원학회지 Vol.22 No.4

In order to investigate the safety of Aralia elata extract causing the reduction in the blood glucose level and oxidative stress in diabetes animals, these genotoxicity studies in bacterial and mammalian cell assay system such as Ames bacterial reverse mutation test and chromosomal aberration assay were performed. As results, in Ames bacterial reversion assay the extract in the range of 5,000~625 ug/plate did not induce mutagenicity in Salmonella typhimurium TA 98, TA 100, TA 1535 and TA 1537 strains with and without metabolic activation of S-9 mixture. For chromosomal aberration assay, IC50 (50% inhibition concentration of cell growth) of the extract were determined; 792 ㎍/ml without and 524 ㎍g/ml with S-9 mixture in Chinese hamster lung (CHL) fibroblast cell culture. Any significant chromosomal aberration was not observed in CHL cells treated with the extract at the concentrations of 792, 396 and 198 ㎍/ml or 524, 262 and 131 ㎍/ml in the absence or presence of S-9 metabolic activation, respectively. From these results, Aralia elata extract did not induce any harmful effects on the gene in bacteria and mammalian cell system used in these experiments.

소닉 브랜딩에 대한 신경 반응: fMRI 연구

성영신 ( Young Shin Sung ),최민조 ( Min Jo Choi ),정선주 ( Sun Joo Chung ),김채연 ( Chai Youn Kim ) 한국감성과학회 2011 감성과학 Vol.14 No.1

소닉 브랜딩은 소리를 활용하여 브랜드 가치를 창조하고 관리하는 것을 의미한다. 소닉 브랜딩의 다양한 방법 중에서도, 브랜드 정체성의 청각적 요소인 소닉 로고는 보통 비주얼 로고와 함께 쓰이며, 가장 널리 사용되는 소닉 브랜딩의 형태이다. 소닉 브랜딩이 중요한 마케팅 도구로 활용되고 있음에도 불구하고, 이에 대한 학문적 연구는 거의 수행된 바 없다. 본 연구에서는 기능적 자기 공명영상 기법을 사용하여 소닉 브랜딩에 대한 신경 반응을 알아보고자 한다. 15명의 오른손잡이 참가자의 뇌 반응이 3T MRI 장비를 통해 스캔되었고, 청각 자극 없이 여러 장의 브랜드 로고 사진(광고에서 소닉 로고와 함께 제시되었던 비주얼 로고 사진 20장과 광고에서 소닉 요소가 없었던 비주얼 로고 사진 20장)이 제시되었다. 연구 결과, 소닉 요소가 없었던 비주얼 로고에 비해 소닉-비주얼 로고가 청각 심상과 관련된 뇌 영역(예를 들어, 상측두이랑)의 활성화 증가와 연합되는 것으로 나타났다. 또한, 소닉-비주얼 로고에 대한 브랜드 친숙도, 광고 친숙도가 높을수록, 이러한 영역의 활성화 정도가 증가한다는 것을 알 수 있었다. Sonic branding is defined as creation and management of brand value by using sounds. Among various methods of sonic branding, sonic logo, i.e., brand`s acoustic identification element, is the most widely used form and usually combined with visual logo. Although sonic branding has become an increasingly important tool for marketers, little academic research has been done on this topic. The current study investigates neural responses to sonic branding using functional Magnetic Resonance Imaging (fMRI). Brain activity of 15 right-handed participants was monitored with 3T MRI machine, while they viewed sequentially presented pictures of brand logos (20 visual logos usually accompanied by sonic logos and 20 visual logos unaccompanied by sonic logos) without sound. Results showed that brain areas known to be associated with auditory imagery (including superior temporal gyrus, STG), showed greater activation for the visual logos usually accompanied by sonic logos compared to visual logos unaccompanied by sonic logos, although actual sound was not presented during scanning. The degree of familiarity participants have with the brand and its advertisements was correlated positively with signal strength in these areas.

인공피부모델 KeraSkinTM을 이용한 유전독성 평가

이수현 ( Su-hyon Lee ),정행선 ( Haeng-sun Jung ),김설영 ( Seol-yeong Kim ),김혜수 ( Hye Soo Kim ),임경민 ( Kyung-min Lim ),정영신 ( Young-shin Chung ),최태부 ( Tae-boo Choe ) 대한화장품학회 2016 대한화장품학회지 Vol.42 No.3

소핵시험은 세포분열 단계 중 간기 세포의 세포질 내 소핵 유무를 조사함으로써 유전독성을 평가하는 시험법이다. 최근 화장품 안전성 평가에 동물실험을 금지하거나 최소화하려는 노력이 확산되고 있어 유전독성 평가에 있어서도 기존의 동물실험이 아닌 새로운 in vitro 시험법이 요구되고 있다. 본 연구에서는 3차원 배양인공피부모델인 KeraSkin^TM을 이용하여 도포 처치된 물질의 유전독성을 평가하였다. 2종의 유전독성물질인 mitomycin C (MMC)와 methyl methanesulfonate (MMS)는 농도 의존적으로 세포독성과 소핵 형성이 유도된 반면, 대조물질인 4-nitrophenol (4-NP)와 trichloroethylene (TCE)에서는 농도 의존적으로 세포독성은 관찰되었으나 소핵은 형성되지 않았다. 따라서 인공피부모델을 이용한 소핵시험이 화장품과 같은 피부적용물질의 in vitro 유전독성 평가에 유용할 것으로 사료된다. Micronucleus test is genotoxicity assay for detection of micronuclei in the cytoplasm of interphase cells. The reduction and replacement of in vivo toxicity testing on animals require the development of in vitro models to predict the genotoxicity or other tests for cosmetic products. In this study, we evaluated a genotoxicity assay for topically applied chemicals using a three-dimensional human reconstructed skin model, KeraSkinTM. Two genotoxins, mitomycin C (MMC) and methyl methanesulfonate (MMS), induced significant dose-related increases in cytotoxicity and micronuclei induction in the skin model. In contrast, two non-genotoxins, 4-nitrophenol (4-NP) and trichloroethylene (TCE), induced cytotoxicity but not micronucleus formation. In conclusion, micronucleus test using human skin model may be useful for predicting in vitro genotoxic potentials of cosmetic products.

청국장 에탄올 추출물의 혈관내피세포 증식과 이동 촉진효과

황재성,성대일,이환명,정영신,김한복,Hwang, Jae Sung,Sung, Dae Il,Lee, Whan Myung,Chung, Young Shin,Kim, Han Bok 한국미생물학회 2014 미생물학회지 Vol.50 No.3

청국장은 대두발효식품으로 대두 단백질이 발효 중 분해되면서 다양한 생리활성물질이 만들어진다. 혈관내피세포는 혈관의 기능은 물론 신생혈관 생성을 주도하는 세포이다. 뇌졸중이나 심근경색, 뇌경색 등의 혈관관련 질병들은 신생혈관 생성을 촉진하는 치료법이 필요하다. Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF)는 새로운 혈관 형성을 촉진하는 역할을 한다. 본 연구에서는 청국장 에탄올추출물(CEE)이 HUVEC (혈관 내피세포) 증식에 미치는 영향을 조사하여 보았다. 청국장 추출물(100, $1000{\mu}g/ml$)을 HUVEC에 처리했을 때, VEGF (10 ng/ml)를 처리한 대조군과 같은 정도로 세포를 증식시켰다. 열처리한 청국장추출물을 혈관 내피세포에 처리해도 세포 증식효과는 마찬가지였다. 청국장이 세포 증식뿐 아니라 HUVEC이동에도 영향을 주는지 sprout 분석법으로 확인하였다. 청국장 추출물($100{\mu}g/ml$)을 처리했을 때, VEGF (10 ng/ml)와 비슷할 정도로 HUVEC 이동이 일어났다. 청국장 추출물에서 HUVEC 증식과 이동에 영향을 미치는 특정 peptide의 분리가 필요할 것이다. In the fermented soybean product known as "chungkookjang", diverse bioactive compounds are produced when the soybean proteins are degraded during fermentation. Vascular endothelial cells (EC) are crucial in vein function and the formation of new vessels. A treatment to stimulate formation of new blood vessels is needed in cerebrovascular diseases that lead to ischaemic stroke and heart attack, as well as for diabetic ulcers. VEGF (Vascular Endothelial Growth Factor) simulates EC formation. The effect of Chungkookjang ethanol extract (CEE) on the proliferation of EC was studied. CEE (100, $1000{\mu}g/ml$) and boiled CEE were as effective as VEGF (10 ng/ml) for the proliferation of human umbilical vascular endothelial cells (HUVEC). The effect of CEE on the migration of HUVEC was investigated using sprout analysis. CEE ($100{\mu}g/ml$) was as effective as VEGF (10 ng/ml) for the migration of HUVEC. Isolation of specific peptides influencing the growth and migration of EC is needed.

초임계이산화탄소를 이용한 탈카페인녹차 열수추출물의 포유동물 세포주를 이용한 염색체이상시험

구윤창,이현순,박병규,김은진,이선주,김경헌,김영석,정영신,이광원,Koo, Yun-Chang,Lee, Hyun-Sun,Park, Byung-Gyu,Kim, Eun-Jin,Lee, Sun-Joo,Kim, Kyoung-Hoen,Kim, Young-Suk,Chung, Young-Shin,Lee, Kwang-Won 한국환경성돌연변이발암원학회 2006 한국환경성돌연변이·발암원학회지 Vol.26 No.4

There are $10{\sim}30%$ polyphenol and $2{\sim}4%$ caffeine in green tea. Caffeine is a kind of alkaloid containing nitrogen which cause stimulation, impatience, headache, insomnia, low birth weight infant. Because of these negative effect, decaffeined beverage came out and decaffeined coffee already have a big market since 1970s. Having proving the physiologic functions of green tea, high consumption of coffee is shifting to green tea. Because of the carcinogenic effect of the organic solvents, decaffeine processing with supercritical carbon dioxide has industrialized and have an advantage in environment-friendly and minimized flavor loss. Decaffeined green tea using supercritical carbon dioxide is considered to be safe but there are not enough study. We investigated the chromosome aberration test with mammalian cell line, CHL. When the cells were treated with 5000, 2000, 1000 ${\mu}g/ml$ and compared with the negative controls, there were no significant(P>0.05) increased chromosome aberration. Same results was observed when adding S9 mixture or not. As a result, water extract of decaffeined green tea using supercritical carbon dioxide does not induce chromosome aberration.

Ehrlich 고형암에 대한 AG60의 항암효과에 관한 연구

이경영(Kyung-Yung Lee),윤보림(Bo-Im Yoo),윤준상(Jun-Sang Yoon),정영신(Young-Shin Chung),한영복(Young-Bok Han) 대한외과학회 1998 Annals of Surgical Treatment and Research Vol.54 No.6

작두콩(Canavalia gladiata (Jacq.) DC) 및 작두콩깍지의 추출물에 관한 기능성 평가

백지윤 ( Ji-yun Baek ),김나형 ( Na-hyung Kim ),허종욱 ( Jong-wook Heo ),정영신 ( Young-shin Chung ),백승화 ( Seung-hwa Baek ) 한국환경농학회 2023 한국환경농학회 학술대회집 Vol.2023 No.0

본 연구는 작두콩(도두, MDC302)과 작두콩깍지(MDC303)의 물 추출물(MDC302W, MDC303W)과 에탄올 추출물(MDC302E, MDC303E)의 항산화 및 항염증 효과에 대한 것이다. 항산화 효과는 DPPH과 SOD activity 측정을 통하여 확인하였고, 항염증 효과는 족부 부종 실험동물 모델과 Raw 264.7 세포주를 이용하여 PGE₂ 및 NO의 생성을 통해 확인하였다. 작두콩과 작두콩깍지의 SOD 활성은 작두콩 물 및 에탄올 추출물보다 작두콩깍지 물 및 에탄올 추출물에서 더 높았고 물 추출물(MDC303W)보다 에탄올 추출물(MDC303E)에서 활성이 더 높게 나타났다. 가장 활성이 높은 추출물은 MDC303E였고, 비타민 C(IC₅₀ 0.022)보다 높은 항산화력(IC₅₀ 0.003)을 보였다. DPPH 역시 작두콩 추출물보다 작두콩깍지 추출물에서 보다 높은 항산화력을 보였다. MDC302W 및 MDC302E 추출물들을 각각 단회 투여했을 때, 흰쥐 족부에서의 부종억제 효과는 관찰되지 않았다. 그러나, MDC303W의 경우 200 mg/kg과 400 mg/kg의 농도에서는 유의성 있게 부종이 억제됨을 관찰할 수 있었다. 400 mg/kg의 농도에서는, 4시간 경과 후 부종 억제율은 61%로 나타났다. MDC303E의 경우 200 mg/kg와 400 mg/kg의 농도에서 4시간 경과 후 부종억제율은 각각 47%와 45%로 유의적인 결과를 보였다. Raw 264.7 세포주에서 MDC303W로 독성을 평가하였을 때 50% 세포 성장 억제농도(IC₅₀)는 3355.02 ㎍/㎖였다. LPS로 염증을 유발시켜 PGE₂ 생성을 촉진시키고 세포 성장을 억제하지 않는 최고농도인 2,000 ㎍/㎖까지 MDC303W 추출물을 농도별로 처리하였을 때, PGE₂ 생성 억제는 250~500 ㎍/㎖ 범위에서는 LPS 처리군보다 감소되었으나 그 외의 농도에서는 정상 수준으로 회복되지는 않았다. LPS에 의해 활성화된 Raw 264.7 세포는 nitrite를 분비하게 된다. MDC303W를 2,000 ㎍/㎖까지 농도별로 처리한 결과, 농도 의존적으로 NO 생성 활성을 저해함을 확인하였다.