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        토끼에서 NO합성억제제 투여에 의한 자간전증의 유발과 고용량의 L-arginine투여에 의한 역전실험

        이형근(Hyung Gun Lee),이종건(Jong Kun Lee),유영옥(Young Ok Lew),정대영(Dae Young Chung),박동춘(Dong Choon Park),김재훈(Jae Hoon Kim),신종철(Jong Chul Shin),김대훈(Dae Hoon Kim),김수평(Soo Pyung Kim) 대한산부인과학회 1999 Obstetrics & Gynecology Science Vol.42 No.12

        연구배경: 자궁태반 허혈증이 임신성 고혈압의 발병기전이라는 가설하에 실험동물에서 대동맥 또는 자궁동맥을 부분결찰 하는 방법으로 태반허혈증을 일으켜 임신성고혈압을 유발하는 실험이 과거에 널리 행해졌으나, 최근에는 혈관내피 기능장애설을 근거로 하여 혈관 내피세포 에서 Nitric Oxide(NO)합성을 저해하는 NO합성억제제를 이용하여 동물에서 임신성고혈압을 발병시켜 실험모델로 만들려는 시도가 있다. 연구목적: 토끼에서 arginine유사체인 L-nitro-arginine methyl ester(L-NAME)을 이용하여 NO합성을 억제함으로써 자간전증 증후군의 실험동물 모델을 만들 수 있는지를 알아보고 다시 고용량의 arginine투여가 이 증후군을 역전시킬수 있는지를 알아보기 위하여 실험에 착수하였다. 방법 및 재료: 재태기간 22 일부터 임신중인 토끼 10마리에 L-NAME 400mg을 7일동안 매일 피하주사하였다(실험 제 1군). 다른군 10마리 에서는 L-NAME 투여 30분 후에 체중 kg당 100mg의 L-arginine은 정맥주사 하였다(실험 제2군). 동일한 재태일의 토끼에 같은 용적의 생리식염수를 피하주사하여 대조군으로 하였다. 혈압측정은 대퇴동맥을 혈관절개하여 22 번 혈관침을 삽입 한 후 눈금혈압계에 도관을 연결하여 식염수로 0점을 맟춘후 동맥혈압을 측정하였다. 혈액 채취는 토끼의 귀정맥에서 하였고 뇨 채취는 넬라톤카테터를 이용하였다. 약물투여 7일후에 새끼를 분만 시켰고 분만 즉시 어미토끼의 폐, 간, 신장, 태반을 적출하여 포르말린액에 고정하였고 신장은 전자현미경고정액으로 고정하였다. 결과: 평균동맥압은 실험제1군에서 대조군에 비하여 유의있게 높았으나(P<0.05), 실험 제2군에서는 대조군에 비해서 의의있는 차이는 없었다. 단백뇨, BUN, 크레아티닌, 간효소치, LDH값, 혈소판수치는 실험제1군에서 대조군에 비하여 유의있게 높았으며(P<0.05), 실험 제2군에서는 대조군에 비해서 의의있는 차이를 보이지않았다. 반면, 뇨산값은 실험제1군과 실험제2군에서 모두 대조군에비하여 의의있는 차이를 보이지 않았다. 조직검사 소견에서는 광학현미경소견상, 실험군의 폐, 간, 신장, 태반에서는 특이한 소견을 보였으며, 신장의 전자현미경소견에서는 실험제1군에서도 사구체의 미세구조가 비교적 잘 보존되었다. 신장의 간질은 간질기질의 증식으로 넓어져 있었다. 그리고 경증의 족양돌기소실이 보였으며 근위뇨세관 세포질내 전자밀도수초모양의 구조물을 포함하고 있는 것이 관찰되었다. 결론: 장기간의 L-arginine유사체(L-NAME)의 투여는 임신토끼에서 자간전증과 유사한 임상양상과 장기의 조직병리소견을 유발하였으며 고용량의 L-arginine의 동시 투여는 이와 같은 변화를 역전시켰다. Objectives: To learn which inhibition of nitric oxide synthase with L-nitro arginine methylester(L-NAME) induces a preeclampsia-like syndrome in pregnant rabbits and high dose of L-arginine reverse the adverse changes induced by nitric oxide synthesis inhibition in pregnant rabbits. Material and Method: Twenty Newzealand rabbits with 22-days of gestation were injected subcutaneously with 400mg of L-NAME for 7days and 100mg/kg L-arginine was also given intravenously 10 of 20 L-NAME injected pregnant rabbits. They are compared with the control group in which same volume of saline was subcutaneously injected to 5 rabbits with same condition. They were anesthesized by ketamine 50 mg/kg and roupum 2 mg/kg intramuscularly. Cutdown of femoral artery was performed and 22 gauge angioneedle was inserted. On manometer,three way catheter was connected, zeroed with saline, and blood pressure was read. Blood samples were taken from the vein of ear and checked for count of blood cells and bood chemistry (BUN/Cr, GOT/GPT, LDH, Uric acid). Urine protein was measured with nelaton catheterized urine. We injected drugs for 7 days begining on 22 days after mating and performed cesarian section to deliver fetus. To observe their effects on organs, lung, liver, placenta and kidney were taken and fixed with formalin. The sliced kidney tissue in thickness of 1 mm, was fixed with glutaraldehyde for electron microscopy and stored at 4℃. Special staining was done for closed observation of pattern changes. For statistical analysis, mean±SEM was used. The control and experimental groups were compared by unpaired t-test and the differences were significant if probability level is less than 0.05(<0.05). Result: Mean blood pressure(MAP) in the experimental group I was significantly high compared to the control group(P<0.05). There was no significant differences in MAP between experimental group II and control group. Urine Protein, BUN, Cr, GOT/GPT, LDH, platelet count in the experimental group I was significantly high(P<0.05) compared to the control group. There was no significant difference between experimental group II and control group. In light microscopic examination, lung, liver, kidney, placenta showed specific finding in experimental group I. Misconstructive of glomerulus in the experimental kidney was well preserved under EM examination. Interstitium of kidney was widened by increase of mesangial matrix. Mild effacement of foot process and cytoplasm of proximal tubule containing electron dense myelin figure like structure were observed. Conclusion: Long term injection of L-arginine analogue produced preeclampsia like syndrome and pathologic changes of organ system in pregnant rabbits. Concurrent high dose of L-arginine reversed such chages.

      • KCI등재
      • 저수지 수위 변동성과 유해 남조의 동태학적 비교

        신재기 ( Shin Jae-ki ),이형근 ( Lee Hyung-kun ),박용은 ( Park Youngeun ),김영성 ( Kim Youngsung ) 한국물환경학회 2020 한국물환경학회·대한상하수도학회 공동 춘계학술발표회 Vol.2020 No.-

        본 연구는 2019년 6월-2020년 1월 동안에 대청호의 본류(방아실, 회남대교) 및 소옥천만(환평리, 추소리)에서 유해남조의 발생특성과 그 영향을 비교하기 위해 수행되었다. 주요 대상항목은 수문(수위, 방류량 중심), 수온, chlorophyll-a (CHLA) 및 식물플랑크톤 종조성, 현존량 등 이었고, 현장조사는 강우패턴을 고려하여 월 1-2회 하였다. 최근 대청호의 수위는 과거에 비해 연중 높게 유지하는 상태이었다. 그래서 지류하천의 상류(전이대)는 예전과 달리 하상 바닥을 드러내지 않는 지형적 특성을 보여 부착조류 생태계의 규모가 급감하였다. 실시간 연속적으로 측정된 일 수온은 8월 초에 최고값을 나타냈다. 그 시기 이후에 본류에서 CHLA는 높아지기 시작하였으나, 지류에서는 조사기간 내내 폭발적인 수준을 나타내어 시공간적으로 확연히 다른 양상과 차이를 보였다. 식물플랑크톤 종조성 변화에서도 다소 상이하였다. 본류와 소옥천만에서 CHLA의 범위는 각각 2.2-278.4 mg/㎥ 및 7.1-52,333.8 mg/㎥으로서 변동성이 매우 컸다. 연구기간동안 CHLA의 증가는 본류에서 1회(9월) 관찰되었는데 수위가 높아지는 시기이었으나, 지류는 매우 복잡하였다. 저수지의 수위가 연중 높게 유지될 경우, 하류(댐)의 수질은 상류(본류)의 영향이 보다 큰 것으로 파악되었고, 지류는 고립되는 형태로 볼 수 있었다. 그러나 평상시 발전방류 이외 홍수시 여수로 방류조건이 주어진다면 그 양상은 다를 것으로 예상되었다. 특히 효과적인 물관리 측면에서 유해 남조가 대발생하는 과영양화된 수역은 이러한 상황을 연중 예의 주시해야 함을 암시하였다.

      • KCI등재

        자궁경부 종양에서 p53, Proliferating Cell Nuclear Antigen(PCNA), c-myc 및 Epidermal Growth Factor Receptor(EGFR)의 발현

        한구택 ( Ku Taek Han ),이형근 ( Hyung Kun Lee ),유순원 ( Sun Won Yoo ),송영훈 ( Young Hun Song ),최원영 ( Won Young Choi ),유기성 ( Ki Sung Ryu ),나종구 ( Jong Gu Rha ),송승규 ( Seung Kyu Song ),이헌영 ( Hun Young Lee ),김수평 ( S 대한산부인과학회 1997 Obstetrics & Gynecology Science Vol.40 No.12

        Expression of four biologic markers known as p53, proliferating cell nuclear antigen(PCNA), c-myc, and epidermal growth factor receptor(EGFR), was studied immunohistochemically in 121 cases of cervical tissues, which included 15 cases of normal cervical tissues, 50 cases of squamous intraepithelial lesions(SIL), and 56 cases of invasive carcinomas. This study was designed to elucidate the roles of these factors in the genesis and progression of cervical neoplasia and to identify their association with clinical parameters such as cell type, tumor size, lymph node involvement, squamous cell carcinoma(SCC) antigen level, and prognosis. In additon, this study evaluates the differences of coexpression rates in normal cervical tissues, SILs, and invasive carcinomas. (1) The intensities of p53, c-myc, and EGFR expression and the rates of PCNA, c-myc, and EGFR expression in cervical SILs and invasive carcinomas were significantly higher than those in normal tissues (p<0.05 and p<0.01). But there were no significant differences between SILs and invasive carcinomas in both of intensities and rates of p53, PCNA, c-myc, and EGFR expression. (2) The intensities and rates of p53, PCNA, and c-myc expression in the invasive carcinomas did not correlate with clinical parameters including cell types, tumor sizes, lymph node involvements, see antigen, and prognosis. But only the intensity and rate of EGFR expression were significantly higher in cases with tumor size larger than 3 cm when it was compared with cases with tumor sizes smaller than 3 cm(p<0.01), in cases with lymph node involvement when it was compared with cases without lymph node involvement(p<0.05), and in cases with SCC antigen levels more than 2.5 ng/ml when it was compared with cases with SCC antigen levels less than 2.5 ng/ml(p<0.05). (3) C-myc immunoreactivity was significantly correlated with EGFR overexpression(p<0.01). (4) The rates of simultaneous expression of four factors were decreased significantly in normal tissues and significantly increased in invasive carcinomas(p<0.01). The coexpression rate of two factors or more was 6.7% in normal tissues, 62.7% in SILs, and 70.0% in invasive carcinomas and the simultaneous expression rate of three factors or more was none in normal tissues, 34.0% in SILs, and 47.5 % in invasive carcinomas. These results show that the immunohistochemical detection of p53, PCNA, c-myc, and EGFR expression will be useful in differentiating the normal tissues and cervical neoplasia. The results of simultaneous immunohistochemical detection of these four factor expression also suggest to contribute a better understanding of the genesis of cervical carcinoma and that coexpression of more factors indicate more aggressiveness in cervical neoplasia, and show that simultaneous detection of these factors can be used in the early detection of cervical neoplasia and to predict malignant transformation of cervical lesions.

      • DSI를 이용한 탈황 및 질소산화물 부분산화 반응에 관한 연구

        서정학(Jeong-Hak Seo),조항대(Hang-Dae Jo),최원길(Won-Gil Choi),이형근(Hyung-Kun Lee),박영성(Yeong-Seong Park) 대전대학교 환경문제연구소 2014 환경문제연구소 논문집 Vol.18 No.-

        The objective of this study is to investigate partial oxidation of NO with desulfurization in dry sorbent injection(DSI) process using dry sorbent and additives. The effect of the main operating variables directly related to desulfurization efficiency has been also tested. These variables are Ca/S ratio, temperature, inlet SO2 concentration and gas flow rate. The experiment was carried out for partial oxidation of NO with desulfurization in dry sorbent injection process using NaClO₂ and CaCl₂. The experimental results showed that partial oxidation of NO with desulfurization was increased in DSI process using little NaClO₂. It was also found that the injection of CaCl₂ was effective in increasing only SO₂ removal efficiency. Increase of SO₂ removal performance and promotion of partial oxidation of NO using the two additives at low temperature was confirmed.

      • KCI등재

        배양된 제대정맥내피세포에서 중증자간전증환자 혈청이 내피세포 생육 및 Endothelin-1합성에 미치는 영향

        김용욱(Yong Yook Kim),나욱렬(Wook Yull Na),이종건(Jong Kun Lee),이영(Young Lee),백은정(Eun Jeong Baik),나종구(Jong Gu Rha),김사진(Sa Jin Kim),이형근(Hyung Gun Lee),신종철(Jong Chul Shin),김수평(Soo Pyung Kim) 대한산부인과학회 2000 Obstetrics & Gynecology Science Vol.43 No.7

        목적 : 중증자간전증 환자의 혈청이 배양된 제대정맥 내피세포의 생육과 endothelin-1의 합성에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 연구방법 : 합병증이 없이 분만한 정상 임산부로 부터 제대정맥 혈관 내피세포를 얻어 정상임신부의 혈청 또는 중증 자간전증 환자의 혈청과 함께 생체외 배양을 하여, 비색 MTT법으로 제대정맥 혈관내피 세포의 생육에 대한검사, endothelin-1의 합성에 미치는 영향을 조사하였고, 동시에 정상임신부 및 자간전증 환자 혈장내의 endothelin-1의 농도를 측정하였다. 결과 : 1. 비색 MTT 측정에서 환자 또는 정상 산모의 혈청과 24시간 동안 배양시킨 배양액의 흡광도는 각각 0.0837±0.0129와 0.0718±0.0078로 두군간에 유의한 차이가 없었으며, 48시간 동안 배양시킨 실험에서 흡광도는 0.1268±0.0186과 0.1133±0.0103으로 두군간에 유의한 차이가 없었다. 2. 정상임신부의 혈청내 endothelin-1의 농도는 22.66±8.6 fmol/ml, 중증자간전증 환자의 혈청내 endothelin-1의 농도는 49.98±25.27 fmol/ml로 중증자간전증 환자에서 유의하게 높았다.(P<0.05) 3. 정상임신부의 형청을 가한 경우 endothelin-1의 함성량은 37.52±18.41 fmol/ml이며 중증자간전증 환자 혈청을 가한 경우는 97.58±53.64 fmol/ml 로 중증자간전증 환자의 혈청은 endothelin-1의 함성을 유의하게 증가시켰다.(P<0.05) 결론 : 자간전증 환자의 혈청은 혈관내피세포의 생육에는 별로 영향을 미치지 않았으며 선택적으로, 특이하게 내피세포기능중 Endothelin-1의 합성을 현저히 증가시켰다. Objectives: In order to assess the effects of sera from severe preeclamptic patients on endothelial cell viability in vitro and endothelin-1 synthesis in cultured human umbilical vein endothelial cells.Methods: The cultured human umbilical vein endothelial cells were incubated with media containing 10% sera from women with either preeclamptic patients or normal pregnancies for 24 hours or 48 hours. After then, their viability was measured by colorimetric MTT{3-(4,5-dimethylthiazol-2yl)2,5-diphenyl tetrazolium bromide} assay and their production of endothelin-1 was measured. We also measured the serum levels of endothelin-1 level in sera obtained from the normal and severe preeclamptic pregnancies. Results: The calorimetric MTT assay revealed that after 24 hours, the absorbances in the media treated with normal pregnancies and severe preeclampsia sera were 0.0718±0.0078 and 0.0837±0.0129, respectively and after 48 hours, they were 0.1133±0.0103 and 0.1268±0.0186, respectively. Serum obtained from severe preeclampsia did not affect endothelial cell viability. 2. The serum mean levels of endothelin-1 in normal and severe preeclamptic pregnancies were 22.66±8.6 fmol/ml and 48.98±25.27 fmol/ml. The mean level in preeclamptic sera was significantly higher than that of normal pregnant women. (P<0.05) 3. After 24 hours, the mean amount of endothelin-1 stimulated by normal pregnant and severe preeclamptic sera were 37.52±18.41 fmol/ml and 97.58±53.64 fmol/ml, respectively. The mean amount of endothelin-1 in preeclamptic sera-treated cells was significantly higher than that of normal pregnant sera-treated cells. (P<0.05). Conclusion: The sera from severe preeclamptic women do not affect cell viability but act selectively on specific activation of their function such as endothelin-1 production. And it is necessary that the identification and isolation of the putative serum factor(s) will be performed to resolve the pathogenesis in future.

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