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      • KCI등재후보

        염증성 통증자극이 흰쥐 척수신경절내 Zinc의 분포에 미치는 영향

        보예(Boye Lee),전 교(Gyo Jun),김이석(Yi Suk Kim),이법이(Beobyi Lee),영일(Young Il Lee),김대중(Dae Joong Kim),조승묵(Seung Mook Jo) 대한해부학회 2005 Anatomy & Cell Biology Vol.38 No.6

        본 연구는 흰쥐 발바닥에 Complete Freund’s Adjuvant (CFA)를 투여하는 염증모델에서 통증반응과 척수신경절내 zinc (Zn2±) 변화의 연관성을 autometallography (AMG) 조직화학법으로 확인하였다. 행동검사에서 CFA투여 후 1일에 이미 통증반응의 역치가 유의한 수준으로 감소되었으며, 3일 및 1주에 걸쳐 가장 예민한 통증반응을 보였으며, 이러한 경향은 3주까지 지속되었다. 대조군의 AMG 염색표본에서는 소수의 작은신경절세포에서 미약한 양성반응이 관찰되었으며, 큰신경절세포의 경우 AMG 염색에 양성반응을 보인 세포가 전혀 관찰되지 않았다. 척수신경절내 Zn2±변화를 보면 실험 1일군 이후에는 대부분의 작은신경절세포들이 강한 염색반응을 보였으며, 3일과 7일군에서 그 수가 최대였으며, 3주군에서는 오히려 그 수가 감소하였다. 반면 실험 3일군 이후에 큰 신경절세포가 AMG에 양성반응을 띠었으며, 척수신경절세포를 둘러싸는 위성세포에서도 AMG 염색성이 관찰되었다. 본 연구의 결과는 염증성 통증의 발달, 유지, 회복 등 복잡한 병리기전에 Zn2±가 관여되어 있음을 시사한다. This study was designed to investigate any correlation between the mechanism of pain development and changes of histochemically reactive zinc contents in the rat spinal ganglion following complete Freund’s Adjuvant(CFA) injection, as an inflammatory pain model. Male Sprague-Dawley rats (270~290 g) were used for this study. Surgeries were done under anesthesia using pentobarbital (30 mg/kg). we injected 200 μL of CFA subcutaneously in the dorsal aspect of one hind paw using a 30-gauge needle and an 1 mL syringe. Semmes-Weinstein monofilaments was used to test for mechanical hyperalgesia. Finally, zinc selenite autometallography (AMG) was done by Danscher’s method. The rat suffered from severe painful swelling of the hindpaw 1 day after a CFA inoculation. Changes in pain threshold were significantly changed on 1 day, and lasted during experiment period of 3 weeks after the CFA inoculation. In control group, ganglion cells vary in size from 15 to 100 μm. The smaller neurons are strongly stained with AMG, whereas the larger cells are not almostly stained. Each large ganglion cell is surrounded by perineuronal satellite cells, showing apparent AMG stainity. In experiment group, AMG-positive small ganglion cells increased on 1 day after CFA inoculation, and showed a peak in cell number at 3days group, and decreased gradually after 7 days. We found a small number of large-sized ganglion cells with AMG stainity 7 days and 3 weeks after CFA inoculation. Our results indicate that zinc may be involved in pain mechanism in the spinal ganglion level.

      • KCI등재후보

        척수신경 결찰에 따른 랫드 척수 회색질내 zinc의 감소와 통증의 연관성

        김성주(Sung Joo Kim),최영희(Young Hee Choi),유윤조(Yun Cho Yu),이법이(Beobyi Lee),조승묵(Seung Mook Jo) 대한해부학회 2004 Anatomy & Cell Biology Vol.37 No.4

        본 연구는 잘 알려진 통증모델을 대상으로 척수 회색질내 zinc 이온(Zn2±)의 변화량을 조직화학법(autometallography, AMG)으로 정량화함으로써 통증의 발달, 유지 및 회복과정에서 Zn2±와의 연관성이 있는지를 규명하고자 하였다. 10 주령된 Sprague-Dawley 계통의 랫드를 실험동물로 사용하였고, pentobarbital (50 mg/kg)로 마취상태에서 다섯 번째 허리쪽 척수신경(L5)을 결찰한 후 5일 및 10일 실험군으로 나누었다. 각 실험군의 동물은 통증모델 시술후 해당 시간에 이르러 selenium (20 mg/kg)을 복강내 주사하고 1시간 후에 관류고정시킴으로써 동물을 희생시켰다. 척수의 L4, 5, 6 분절을 구분하여 절취한 후, freezing microtome위에서 30 μm 두께의 횡단 척수절편을 작성하였다. 척수절편내 Zn2±을 동정하기 위해 Danscher(1981)의 AMG로 염색을 시행하였고, 광학현미경하에서 그 변화량을 측정하였다. 대조군에서 랫드 척수 회색질내 Zn2±의 분포는 등쪽 회색질내에 높은 농도로 분포하였으며, 이곳에서 층판구조를 보였다. 실험군에서는 척수신경을 결찰한 쪽에서 Zn2±가 유의한 수준으로 감소되었으며, 특히 통증전달과 관계가 깊은 등쪽 회색질의 표층 (Rexed’s laminae III, IV)에서의 감소가 뚜렸하였다. 본 연구의 결과는 통증과 척수 회색질내 Zn2±의 변화와 밀접한 관련이 있음을 시사하며, 향후 통증의 복잡한 병리기전을 이해하는데 중요한 단서를 제공하는 계기가 되었다. This study was designed to investigate any correlation between the mechanism of pain development and changes of histochemically-reactive zinc contents in the rat spinal cords following peripheal nerve ligation. Male Sprague-Dawley rats (270~290 g) were used for this study. We ligated a left-sided lumbar spinal nerve with silk under anesthesia using pentobarbital (50 mg/kg). Semmes-Weinstein monofilaments (Stoelting Company, Wood Dale, IL) was used to test for mechanical hyperalgesia. 30 μm-thick spinal cord cryosections were stained by autometallography (Danscher, 1981). The density of zinc was significantly decreased in zinc concentration in the dorsal horn of 4th, 5th and 6th lumbar segments at 5 and 10 days after the spinal nerve ligation. Here, zinc depletion was apparent in superficial gray matter, especially layer III-IV. In addition the nerve ligated rats showed lower pain threshold. This increased pain sensation might be related with lowered vesicular zinc level in the superficial gray matter in the spinal cord. The present findings offer a proposed link between zinc and pain. Our interpretation is that there may be an extension of fine primary afferent fibers into lamina III and possibly lamina IV following peripheral nerve ligation. If further work bears out this conclusion, this would provide a possible explanation for the chronic pain states that sometimes follow peripheral nerve damage.

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