인터루킨-4 신호전달에서 인터루킨-4 수용체 α사슬 상의 ID-1 부위의 기능

윤지희 ( Jee Hee Youn ),이경희 ( Kyung Hee Lee ),황우열 ( Woo Youl Hwang ),백두진 ( Doo Jin Paik ),정호삼 ( Ho Sam Chung ) 대한천식알레르기학회 2003 천식 및 알레르기 Vol.23 No.2

Background:Interleukin (IL)-4 is a pleiotropic cytokine that plays an important role in the pathogenesis of the allergic inflammation and asthma. Upon IL-4 receptor (IL-4R) engage-ment, a variety of signaling mediators, such as JAK kinases and STAT-6, are

왼온엉덩동맥에서의 짧은 허혈과 재관류 횟수에 따른 흰쥐 신장에서의 전염증성 사이토카인의 발현 변화

박현주(Hyun Joo Park),김원규(Wonkyu Kim),윤지희(Jee Hee Youn),백두진(Doo Jin Paik) 대한체질인류학회 2007 대한체질인류학회지 Vol.20 No.1

이 실험은 다리에서 짧은 허혈 횟수의 증가와 재관류 경과시간에 따라 멀리 위치한 신장에서 나타나는 NF-κB와 전염증성 사이토카인, 세포간부착분자의 발현 변화를 알아보기 위하여 실시하였다. 35주령의 Sprague-Dawley계 수컷 흰쥐를 사용하여 대조군과 허혈양상화군으로 나누었고, 허혈양상화 처치는 왼온엉덩동맥에서 5분 허혈과 5분 재관류를 3회, 6회, 10회 실시하였다. 재관류 직후와 3시간, 6시간, 24시간, 72시간 경과 후 왼쪽 신장을 적출하여 세포자멸사를 관찰하고, NF-κB, TNF-α, IL-1β, ICAM-1 단백질에 대한 면역조직 화학염색과 Western blot 분석을 하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 허혈양상화 처치군에서는 처치 횟수가 증가될수록, 재관류 24시간 경과 후 사망률이 높아졌다. NF-κB는 재관류 0시간부터 24시간까지는 허혈양상화를 10회 처치한 군에서 가장 높게 발현했으나, 72시간에서는 3회 처치군에서 가장 높게 발현하였다. TNF-α는 재관류 0시간과 6시간, 24시간, 72시간에서는 허혈양상화를 10회 처치한 군에서 가장 높게 발현했으나, 3시간에는 모든 처치군이 비슷한 면역반응을 보였다. IL-1β와 ICAM-1은 모든 재관류 시간에 허혈양상화를 10회 처치한 군에서 가장 높게 발현하였다. 바깥속질에서의 세포자멸사는 모든 재관류 시간에 허혈양상화를 10회 처치한 군에서 비율이 가장 크게 나타났다. 흰쥐 신장에서 허혈 및 재관류 손상에 관여되는 NF-κB와 TNF-α, IL-1β, ICAM-1의 발현은 왼온엉덩동맥에서 허혈양상화를 3회와 6회 처치시 감소되었으나, 10회 처치시에는 증가되어 허혈손상을 증가시키는 것으로 생각되었다. The purpose of this study is to investigate the changes in NF-κB and proinflammatory cytokines expression following courses of reperfusion after various cycles of ischemic preconditioning in the rat kidney. Thirty five weeks old Sprague Dawley rats were subjected to 3, 6 and 10 cycles of ischemic preconditioning that composed of 5 min ischemia and 5 min reperfusion at the left common iliac artery using rodent vascular clamp. The left kidney obtained after 0, 3, 6, 24 and 72 hours of reperfusion followed by each cycle. The expression patterns of NF-κB, TNF-α, IL-1β and ICAM-1 were detected by immunohistochemical staining and Western blotting methods. Apoptosis were detected by TUNEL assay. The results were as follows; In the ischemic preconditioning group, the mortality increased from 24 hours after reperfusion when cyclic episodes of short ischemia and reperfusion were increased. The highest level of NF-κB expression in outer medulla of the kidney from 0 hr to 24 hrs of reperfusion is detected after 10 cycles of ischemic preconditioning. The highest level of NF-κB expression at 72 hrs of reperfusion is revealed after 3 cycles of ischemic preconditioning. The highest level of TNF-α expression in outer medulla of the kidney at 0 hr and 6, 24, 72hrs of reperfusion is shown after 10 cycles of ischemic preconditioning. After 3 hrs of reperfusion, all ischemic preconditioning groups shows similar expression. The highest level of IL-1β and ICAM-1 expression in outer medulla of the kidney is observed at all of reperfusion times after 10 cycles of ischemic preconditioning. The highest level of apoptosis in rat kidney outer medulla at all of reperfusion times is shown after 10 cycles of ischemic preconditioning. In conclusion, 3 or 6 times of remote ischemic preconditioning in the common iliac artery could reduce the expression of NF-κB, TNF-α, IL-1β, and ICAM-1. However, more than 10 times of remote ischemic preconditioning increased ischemia-reperfusion injury, caused by increased expression of NF-κB, TNF-α, IL-1β, and ICAM-1.

흰쥐 폐 발생시 Laminin의 발현에 대한 연구

정호삼,박철홍,백두진,백태경,김원규,윤지희,서윤경,Chung, Ho-Sam,Park, Chul-Hong,Paik, Doo-Jin,Baik, Tae-Kyung,Kim, Won-Kyu,Youn, Jee-Hee,Suh, Yun-Kyung 한국현미경학회 2001 Applied microscopy Vol.31 No.1

Laminin은 세포외기질의 주요 구성 당단백질로 알려져 있고 특히 기저막에 다량 분포되어 있어 제 4형 아교질, heparan sulfate proteoglycan 및 entactin과 결속되어 있다. Laminin은 세포외기질에 함유되어 조직의 발생, 분화 및 성숙 등에 직접 및 간접적으로 관련되어 있으며, 특히 세포의 분열, 이동에 관여하고 조직내 기저막의 물질 투과성에 영향을 미쳐 상피의 분화 및 재형성과 관계있음이 많은 학자들에 의하여 보고되어 있다. 최근에는 laminin이 포유동물에서 태자기와 신생아기에서 폐의 발생과 분화에 주요한 역할을 함도 일부 보고되어 있다. 이에 저자는 폐의 발생과정에서 조직 혹은 세포내에서 laminin의 발현과 분포 변화를 면역조직화 학염색법과 면역도금법을 이용해서 추적하고자 하였다. 실험동물로는 발생 제 14일, 제 16일, 제 18일 및 제 20 일의 태자와 생후 1일, 3일 5일 및 7일의 신생 흰쥐를 사용하였으며, 각 실험동물의 폐조직을 절취하고 면역조직화학염색과 면역도금법으로 laminin의 면역활성의 변동을 조사하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 발생 제 14일, 제 16일, 제 18일 및 제 20일의 흰쥐 태자와 출생 제 1일의 신생 흰쥐 폐조직에서는 혈관, 기관지 및 폐포의 기저막과 폐포막에서 강한 laminin 면역활성이 지속되었고, 폐포가 형성된 출생 제3일 이후의 흰쥐 폐의 폐포막에서는 laminin 면역활성이 현저히 감소되었다. 2. 흰쥐 태자의 폐조직에서 laminin 면역금과립이 관찰되는 세포는 간엽세포, 혈관내피세포 및 섬유모세포였으나, 신생 흰쥐의 폐에서는 섬유모세포, 제 1형 및 제 2형 폐포세포에서 laminin 면역금과립이 관찰되었으며 금과립이 가장 많이 관찰되는 조직 부위는 공기혈관장벽을 이루는 기저 막이었다. 이상과 같은 실험결과는 태생기에서는 laminin이 주로 폐의 세포외기질에 분포되나 출생 후에는 주로 기저막에 분포되므로 패의 기능이 성숙됨에 따라 laminin의 분포상태에 변동이 일어나고, laminin을 생성하는 세포도 출생 전에는 간엽세포, 혈관내피세포 및 섬유모세포이나 출생 후에는 폐의 실질세포인 제 1형 폐포세포와 제 2형 폐포세포로 합성기능이 이전되는 것으로 생각되었다. Laminin, a kind of multidomain glycoproteins, is mainly localized in the basement membranes of various tissues. It is known that laminin plays an important part in mammalian lung morphogenesis. The authors have undertaken this study to investigate the changes in the distribution of laminin, and to find out cells which synthesize laminin during the organogenesis and differentiation of the lung. The fetal and neoantal rats (Sprague-Dawley strain) were used as experimental animals. The immunohisto-chemical methods were employed for detection of laminin within the developing lung tissue and the immunegold cytochemical methods were performed for detection of cells which synthesize laminin according to each stage of development. The results are as follows; 1. During fetal life, strong immunoreactivity for laminin is maintained in the basement membranes of the blood vessels and the bronchioles, the extracellular matrix of the mesenchyme, and basal lamina of the alveolar septum in the fetal rat lung. 2. After birth, laminin immunoreactivity at the alveolar septum is gradually reduced. 3. During fetal life, laminin is mainly detected within the cytoplasm of the mesenchymal cells, the endothelial cells of blood vessels and the fibroblasts in fetal rat lung. 4. According to the differentiation of type I and type II pneumocyte after birth, laminin is detected within cytoplasm of the type I pneumocytes, type II pneumocytes and fibroblasts. It is consequently suggested that laminin is largely expressed in the developing lung and laminin may be also synthesized by the type II pneumonocytes at early newborn stages.

흰쥐의 콩팥 발생과정에서 Laminin 및 Laminin β1 chain 분포에 대한 연구

정호삼(Ho-Sam Chung),서윤경(Youn-Kyung Seo),백두진(Doo-Jin Paik),김원규(Won-Kyu-Kim),윤지희(Jee-Hee Youn),김호중(Ho-Jung Kim),백태경(Tai-Kyoung Baik),노원재(Won-Jae Roh) 대한체질인류학회 2001 대한체질인류학회지 Vol.14 No.1

간추림 최근 콩팥의 사구체 기저막에서 laminin은 제4형 아교질, heparan sulfate, proteoglycan 등의 당단백과 함께 가시구조 (spike-like structure)를 형성하고 있음이 밝혀졌고, 않은 연구자는 신사구체막엽이 있을 때 laminin 의 분포, 합성 등에 변화가 있으며, 신사구체 기저막의 재형성과 신사구체 세포의 재생에 laminin 이 주요한 역할을 한다고 알려져 있다. 저자는 흰쥐 태자와 선생흰쥐에서 신사구체 기저막에서 laminin 과 laminin β1 chain 의 항성 및 분포를 발생시기에 따라 추적하고, 신독성으로 작용하는 adriamycin 투여 후 나타나는 변화를 관찰하고자 하였다. 온 실험에 사용한 실험동물은 Sprague-Dawley 계 흰쥐를 사용하였으며 임신후 제16일, 제18일, 제20일의 태자와 출생 1일 및 출생 l주의 신생 흰쥐군으로 나누에 각군에 각각 5마리를 배정하였다. Adriamycin 처리군은 처리 후 1일, 2일 및 1 주군으로 나누고, 각 군에 5 마리의 흰쥐 (체중 150gm 내외) 를 사용하였다. 각 실험군의 태자, 신생흰쥐 및 성숙 흰쥐를 희생하여 콩팥을 절취하여 동결 조직표본을 제작하였고, 일부 조직은 전자현미경 관찰을 위하여 통상적인 방법으로 초박절편을 제작하였다. 각 표본은 면역조직염색과 면역도금염색을 실시하여 광학 및 전자현미경으로 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 제16일, 18일 및 20일 태자의 콩팥단위의 기저악과 주위의 간엽조직에서 강한 laminin 면역반응이 관찰되고, 출생 제1일의 신사구체에서 강한 면역반응이 계속되었고 출생후 1 주 경과된 신생흰쥐의 신사구체내에는 약한 laminin 반응이 나타났다. 2. 제18일 대자의 미성숙 콩팥의 심표형 콩팥단위를 구성하는 세포 중에서 혈관내피세포, 혈판사이세포의 과립포철세망의 수조, 소포 및 막에서 면역반응급과립이 관찰되었다. 3. Laminin β1 chain 의 면역반응은 태생 제 16 일, 18 일 및 20 일 대자의 콩팥에서 미약하였으나 출생 제1일 신생 흰쥐의 모세혈관 주위와 혈관사이 조직에서 약한 반응융 보였다. 4. Adriamycin 투여후 24 시간군의 신사구체에서 중등도의 laminin 반응을 보였으며, 신사구체의 내피세포와 혈관사이세포의 세포질에 소량의 금과립이 관찰되었고, laminin β1 chain 반응은 24 시간에는 약한 반응을 보였고, 48 시간군에서는 미약한 반응으로 감소되었다. 이상파 강은 경과로 미루어 흰쥐 콩활의 발생에 따라 laminin 은 태생기 초기에 대부분 강한 반응을 나타내지만 출생 후에는 그 반응이 약화되었으며, adriamycin 투여후 나타나는 콩팥조직의 손상이 회복될 때 laminin 과 laminin β1 chain 의 발현이 증가되는 것으로 생각되었다.

Cyclophosphamide가 흰쥐 골수의 기질세포에서 Laminin-1의 발현에 미치는 영향

이창훈,정호삼,백두진,황세진,김원규,윤지희,김종관,Lee, Chang-Hun,Chung, Ho-Sam,Paik, Doo-Jin,Hwang, Se-Jin,Kim, Won-Kyu,Youn, Jee-Hee,Kim, Chong-Kwan 한국현미경학회 2002 Applied microscopy Vol.32 No.4

골수내 정상적인 혈구형성은 줄기세포와 주위의 미세환경 사이에 일어나는 상호작용에 의해서 좌우된다고 알려져 있다. 이때 미세환경은 성장요소, 기질세포 및 기질세포가 분비한 세포외기질의 복잡한 망상구조로 이루어져 있다. 골수의 세포외기질은 거대분자로 구성되어 있으며 이중 구성요소의 일부인 당단백이 혈구형성의 조절에 주요한 요소가 된다고 많은 학자들이 주장해 왔다. 골수의 기질을 이루고 있는 망상세포, 지방세포, 섬유모세포, 혈관내피세포 및 혈관주위세포 등이 분비하는 세포외기질에 여러종류의 laminin 동형체가 함유되어 있으며 여러 종류의 혈구형성에 주요한 역할을 한다는 연구보고가 있다. 저자는 골수내 종양을 치료하기 위해 빈번히 사용되는 cyclophosphamide가 골수에 미치는 영향을 규명하고자 실험동물의 혈구형성에 영향을 미치는 laminin-1의 발현의 변화를 골수의 기질세포에서 추적하고자 하였다. 건강한 SD계 흰쥐를 실험동물로 사용하여 cyclophosphamide를 체중 kg당 75 mg을 복강내로 1회 투여하고 3일, 1주, 3주 및 5주 후 희생하여 골수조직을 채취하여 면역조직염색법으로 염색하여 laminin-1의 골수내 분포의 변화를 관찰하였고, 일부 조직은 전자현미경표본을 제작하여 1차 항체(rabbit anti-laminin)로 반응시킨 후 직경 12 nm의 금과립이 섞인 제2차 항체(biotinylated goat anti-rabbit IgG)로 다시 반응시키고 uranyl acetate로 단일염색 후 전자현미경으로 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. Cyclophosphamide 투여 후 3일 경과군의 흰쥐 골수조직은 정맥동이 확장 되었고, 일부 조직이 괴사되었으며, 혈구형성세포가 감소되었다. 망상조직과 지방세포사이의 조직에서 laminin-1의 면역반응이 강하게 나타났다. 2. Cyclophosphamide 투여 후 1주, 2주 및 5주 투여군의 골수에서 laminin-1의 약한 면역반응이 기질조직에 계속되었고 혈구형성세포의 수는 증가되었다. 3. Laminin-1의 면역반응을 나타내는 금과립은 cyclophosphamide 투여 3일군의 골수 기질세포에서 가장 많은 수가 관찰되었고, 투여 1주, 3주 및 5주군에서는 금과립의 수량이 감소되었다. 이상과 같은 실험결과는 cyclophosphamide가 흰쥐에 투여되었을 때 골수의 혈구형성의 미세환경을 유지하는 기질세포의 laminin-1의 발현을 증가시키는 것으로 생각되었다. The purpose of the present study is to investigate whether stromal cells supporting specific microenvironment for hematopoiesis of bone marrow are affected by toxicants and therapeutic drugs such as antibiotics and anticancer drugs and whether laminin-1 is associated with such effects. SD rats were intraperitoneally injected with 75 mg/kg of cyclophosphamide which is widely used to treat infant's solid tumor, leukemia and myeloma and sacrificed after 3 days, 1 week, 3 weeks or 5 weeks of injection. The bone marrow extracted and paraffin-sectioned was analyzed using immunohistochemical staining. A part of tissues was subjected to electron microscopy following reaction with rabbit anti-laminin antibody, biotinylated goat anti-rabbit IgG conjugated with 12 nm gold particles, and staining with uranyl acetate. 1. The bone marrow tissue at day 3 post injection with cyclophosphamide displayed dilated venous sinus, partial necrotic death, and decreased number of hematopoietic cells. Laminin-1 was intensively stained in the reticular and adipose tissues. 2. Up to 5 weeks post injection, laminin-1 was stained at a low level in the stromal tissue of bone marrow and the number of hematopoietic cell was increased. 3. Deposition of the gold particle which represents laminin-1 expression was observed at the highest level in the stromal cells of bone marrow obtained 3 days after injection, and decreased after 1 to 5 weeks. These results suggest that stromal cells which play a role in supporting microenvironment for bone marrow hematopoiesis augment induction of laminin-1 expression and activation upon administration of cyclophosphamide.

Clonal cxpansion of type 2 collagen-reactive T Lymphocytes in the synovial fluid and blood of a patient with rheumatoid arthritis

박성환 ( Sung Hwan Park ),김성훈 ( Seung Hoon Kim ),조미라 ( Mi La Cho ),윤지희 ( Jee Hee Youn ),민도준 ( Do June Min ),서영일 ( Young Il Seo ),김완욱 ( Wan Uk Kim ),박원 ( Won Park ),조철수 ( Chul Soo Cho ),김호연 ( Ho Youn Kim 대한내과학회 1999 대한내과학회 추계학술대회 Vol.57 No.-

류마티스 관절염 환자의 혈중 아연 및 구리 농도와 질병 활성도와의 관계

이명수 ( Myeung Su Lee ),강효종 ( Hyo Jong Kang ),홍승재 ( Seung Jae Hong ),도주호 ( Ju Ho Do ),윤종현 ( Chong Hyeon Yoon ),김완욱 ( Wan Uk Kim ),민도준 ( Do June Min ),윤지희 ( Jee Hee Youn ),박성환 ( Sung Hwan Park ),조철수 ( Ch 대한류마티스학회 2003 대한류마티스학회지 Vol.10 No.4

Objective: To investigate the relationship between serum trace element levels with disease activity in Korean patients with rheumatoid arthritis (RA). Methods: The serum levels of zinc, copper and ceruloplasmin were measured by inductively coupled plasma atomic emission spectrometers in 80 patients with RA, 26 osteoarthritis (OA), and 30 healthy controls (HC). We also measured the levels of zinc and copper in the synovial fluid (SF) of patients with RA. We investigated the clinical parameters simultaneously obtained at sampling of serum and analyzed correlation between serum levels of trace elements and disease activity in RA. Results: In RA, the levels of serum zinc were significantly lower than that of HC, and the levels of serum copper and ceruloplasmin were significantly higher than those of HC. In active RA, the levels of serum zinc were more decreased, and the levels of serum copper and ceruloplasmin were more increased than those of inactive group of RA. The levels of both copper and ceruloplasmin showed positive correlation with the levels of serum ESR and CRP. On the other hand, the levels of serum zinc showed negative correlation with the levels of serum ESR and CRP. Conclusion: Serum zinc levels are significantly lower and serum copper levels significantly higher in patients with active RA and these trace elements were useful parameter of disease activity in RA.

흰쥐 입천장발생중 laminin의 발현에 관한 연구

김원규,황우열,윤지희,백두진,정호삼 대한췌담도연구회 2000 대한췌담도연구회지 Vol.5 No.3

Norepinephrine, Propranolol, Diltiazem 및 Isoproterenol이 흰쥐 심장에서 Apoptosis 발현에 미치는 영향

조원길,백두진,정호삼,김원규,윤지희,이창훈,백태경,이일수 한양대학교 의과대학 2001 한양의대 학술지 Vol.21 No.1

Background----Myocardial sympathetic activity is increased in heart failure. In recent years myocardial sympathetic hyperactivity has been shown to induce myocardial cell apoptosis and this effect is responsible for myocardial hypertrophy and chronic progression of heart failure, at least, in part. There is many mechanism suggested that cause myocardial cell apoptosis. We tested the hypothesis that norepinephrine(NE) stimulates apoptosis in adult rat ventricular myocytes in vivo. Methods and Results----NE alone (0.1 g/min/kg), NE+ propranolol (20 g/Kg), NE+ diltiazem (0.25 mg/kg) and isoproterenol (0.3 g/min/kg) were infused for 24 hours to adult rats. The infusion was proceeded through left saphenous vein. It was observed that obvious increase of apoptosis in NE infused group, and this increase is completely blocked in NE + propranolol group and NE + diltiazem group. Isoproterenol group's result is resemble to that of NE group. Conclusions----NE, acting via the β-adrenergic pathway, stimulates apoptosis in adult rat cardiac myocytes in vivo, and this effect requires calcium entry via voltage-dependent calcium channels. This effect was completely blocked by the β-adrenergic antagonist propranolol or voltage-dependent calcium channel blocders diltiazem. Thus We suggest that adult rat ventricular myocyte apoptosis induced by NE is caused by direct stimulation of β-adrenergic receptor, and this effect is mediated by voltage-dependant calcium channel and exert excessive intracellular calcium influx that cause myocyte apoptosis. NE-stimulated apoptosis of cardiac myocytes may contirbute to the progression of myocardial failure.