Pulsed-Field Gel Electrophoresis를 이용한 Salmonella enterica subspecies enterica bioserovar Pullorum의 분자유전학적 다양성에 관한 연구

우용구,이수화,이철현,이오수,김봉환,Woo, Yong-Ku,Lee, Su-Hwa,Yi, Chul-Hyun,Lee, O-Soo,Kim, Bong-Hwan 대한수의학회 2003 大韓獸醫學會誌 Vol.43 No.1

Pullorum disease due to Salmonella enterica subspecies enterica bioserovar Pullorum (S. pullorum) is reported to be an endemic disease in domestic poultry flocks. The pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) subtyping method was used to assess the extent of genetic diversity and clonality of most of salmonella serotypes and other diverse bacterial species from animals and environmental samples in worldwide. Nowadays, PFGE has already been evaluated as a gold standards for molecular subtyping of salmonella serotypes compared with other molecular analysis methods. PFGE of XbaI digested chromosomal DNA from 23 strains of S. pullorum gave 5 distinctive pulsotypes (from SXPI to SXPV) with 5% confidence range of Dice coefficients, indicating that PFGE is very discriminative and that multiple clones of S. pullorum have been existed and diffused all of domestic poultry flocks industries since 1995. Two dominant pulsogroups (SXA & SXB) appeared as a major clones in this country, because they had consistently been recovered from diverse sources including both chicken organs and raw feed materials between 1995 and 1998. In addition, the matching percentage of PFGE profiles (PFP) among strains from both chickens and feed ingredients provides indirect evidence of the possible transmission of pullorum disease from contaminated raw feed ingredients for chicken production. In calculating of discrimination index (DI) for PFGE method by Simpson's index, DI was appeared as 0.917. Therefore, this index suggested that the present PFGE would seem to be a desirable and confident molecular typing method for S. pullorum strains. To our knowledge for pullorum disease, this is the first study to compare S. pullorum strains from chicken organs and feed samples using the PFGE.

REP-PCR을 이용한 국내 사람과 동물유래 Staphylococcus aureus 분리주의 Molecular Typing

우용구,김신,Woo Yong-Ku,Kim Shin 한국미생물학회 2005 미생물학회지 Vol.41 No.1

국내산 한우, 흑염소, 돼지, 개, 닭 및 마우스 둥을 포함한 각종 동물과 사람환자에서 분리된 MRSA 균주를 포함하여 총 116주의 S. aureus 균주를 확보하여 이들 균주들의 유전학적 다양성을 분석하고자 시도하였다. 이를 위하여 쉽고, 편리하며 많이 활용되고 있는 PCR을 이용하여, 개별 분석기법에 따른 유전학적 특성을 파악하는 것은 물론 활용한 기법들 중에서 유전자수준에서 가장 효율적이며 뛰어난 감별능력을 지닌 기법을 선발하고자 하는데 궁극적인 목적을 두었다. 이를 위해서 통계학적 인 수치에 따라 객관적인 분석방법으로서 Simpson's index of diversity (SID)를 산출하여 성적상호간을 비교 및 평가하였다. 공시한 총 99 주에 대한 4M primer를 이용한 RAPD 성적에 근거하여 산출한 SID 값은 0.915의 양호한 간이 산출되었다. 같은 방법으로 충 98 주에 대한 RA primer를 이용한 RAPD성적을 토대로 산출한 SID 값은 0.874로 확인되었다. 한편 총 107주에 대한 ERIC-PCR을 수행한 종합분석 성적에서 공시균주들은 모두 10종의 유전형(genotype)으로 구분되었고, EM-type 는 14주가 포함되어 가장 대표적 인 유전형으로 분류되었으며, 이 그룹에는 사람유래의 6주가 포함되어 가장 지배적인 유전형으로 확인되었다. 또한 DNA profile에 근거한 덴드로그람을 작성하고 SID간을 산출하였던 바, SDI 0.929의 신뢰도 높은 성적을 산출하였다. 반면에 공시한 총 108주의 S. aureus균주에 대한 종합적인 REP-PCR 성적에서 모두20종의 유전형으로 세분되었고 RB-type은 17주로 가장 많은 균주가 포함되었다. 작성된 덴드로그람 성적에서 산출한 SID 값은 우리의 연구에서 수행한 PCR에 기초한 유전자 분석기법들 중에서는 가장 높은 0.930으로 확인되었다. 결론적으로 RAPD 기법 중에서는 4M primer를 활용한RAPD가 보다 효율적임을 확인할 수 있었고, REP-PCR과 ERIC-PCR의 양자의 성적은 거의 비슷하여 적용했던 PCR분석기법 중에서는 이들 분석기법이 가장 우수한 감별능력을 확보한 분석법으로 최종 선발할 수 있었다. To select the rapid and efficient molecular subtyping method for epidemiologic monitoring of Staphylococcus aureus (S. aureus) strains at clinical laboratory levels, a total 116 of S. aureus and MRSA (methicillin-resistant S. aureus) strains from diverse animal species [Korean cattle, goat, pig, dog, chicken, mouse] and also humans were analyzed. To evaluate the discriminatory ability (DA) of individual PCR methods, random amplified polymorphic of DNA [RAPD; 4M & RA primer], repetitive extragenic palindromic sequences PCR (REP-PCR), and enterobacterial repetitive intergenic consensus sequences PCR (ERIC-PCR) methods were conducted and then compared on their Simpson's index of diversity (SID) values based on the dendrogram patterns, which was produced by software program (BiolD2+ & GelCompar II). In first, RAPD using the 4M primer (SID 0.915) was expressed more higher SID value than that of RA primer (SID 0.874). 4M primer was expressed more powerful DA than RA. Both REP-PCR (SID 0.930) and ERIC-PCR (SID 0.929) methods showed much more higher DA than that of RAPD. According to the present results, both REP-PCR and ERIC-PCR among the tested analysis methods were found as the most reliable and discriminative molecular subtyping method, because they expressed the highest DA for the present S. aureus and MRSA strains.

Polymerase Chain Reaction을 활용한 국내 동물과 사람환자에서 분리한 Staphylococcus aureus 분리주의 분자역학적 특성분석

우용구,김신,Woo Yong-Ku,Kim Shin 한국미생물학회 2005 미생물학회지 Vol.41 No.1

국내 사육 하우 염소, 돼지, 개, 닭 및 마우스 등을 포함한 각종 동물과 사람환자에서 분리한 총 116주의 S. aureus 분리주에 대해서 5종의 PCR 기법을 적용하여 분자역학적 특성을 분석하였다. 먼저 종특이 유전자(SSG: aroA, coa, nuc 및 spa-gene)의 다양성을 PCR 기법으로 조사하였고, 또한 약제내성의 MRSA 균주의 분포양상과 내독소(Enterotoxin)산생유전자(SE)의 분포양상에 대해서도 조사하였다. 그리고 이 연궁선 수행한 5종의 PCR 기법 들이 생산한 개별성적을 객관적으로 비교하여, 가장 신뢰도 높고 효율적 PCR기법을 선발하였다. 먼저 PCR기법을 적용한 SSG의 분포양상 조사에서는 $nuc-gene\;(100\%)$, $spa-gene\;(91.4\%)$, $coa-gene\;(87.9\%)$, 및 $aroA-gene\;(26.7\%)$의 빈도로 조사되었다. 그리고 aroA와 coa-gene PCR 증폭산물에 대한 RsaI과 AluI 효소로 소화시킨 RELP 성적에서 coa-Bene PCR-RFLP에서는 모두 10 type의 con-type이 동정되었고, 그중 coa-3 type (809 bp)이 닭, 마우스, MRSA 및 사람유래 균주를 포함한 총 36주 $(33.0\%)$로서 가장 대표적인 genotype으로 결정되었다. 반면에 aroA-gene PCR-RELP에서는 단지 7 type의 genotype만이 산생되어 대조를 보였고, 17주 $(73.9\%)$가 대표적인 그룹으로 분류되었다. 한편 spa-gene PCR에서는 총 11 type의 spa-type이 확인되었고, 그중 spa-7 type (9 repeats; 263 bp)이 한우, 닭, 개, 염소, 마우스 및 MRSA 균주 등을 포함한 총 39주 $(34.8\%)$로서 가장 대표적인 genotype으로 결정되었다. 또한 총 116주에 대해 MRSA 균주의신속한 검출을 위해서 mecA-gene PCR을 적용하였던 바, 단지 사람유래의 14주 $(12.1\%)$에서만 양성의 증폭산물 (533 bp)이 검출되었고, 이들 증폭된 PCR산물의 유전학적 검증을 위해 HhaI으로 소화시켰던바 14주 모두 $(100\%)$가 알려진 2개의 DNA band (332 & 201 bp)로 양분되어 유전자수준에서 MRSA 양성균주로 검증되었다. 한편 내독소 산생유전자 (SE-gene)는 multiplex-PCR기법으로 조사하였으며 sea-gene $(63.7\%)$이 가장 지배적이었고, 이어서 seb-gene $(10.0\%)$ 및 sec-gene $(7.2\%)$의 순서였다. 특히 sea+sec의 2종의 SE genes를 보유한 균주도 11주로서 가장 많았으며 그 외에도 sea+seb (2주)및 seb+see (1주) genes를 보유한 균주도 함께 검출되었다. 최종적으로 5종의 PCR기법들이 생산한 성적들을 수치 (SID)로 변환하여 객관적으로 감별능력 (DA)을 비교하였던바, aroA-gene PCR-RFLP는 가장 저조한 DA [SID=0.462]을 나타내었고, 반면에 coa-gene PCR-RELP는 5종의 분석기법 중에서 가장 신뢰도 높은 DA [SID=0.894]을 발현하였다. 따라서 현재의 연구결과con-gene PCR-RELP기법이 사람을 포함한 다양한 동물종유래 S. aureus 균주들의 유전학적 분석목적에 가장 신뢰도 높고 감별능력이 뛰어난 분석기법으로 선발되었다. This study was conducted to analyze the molecular epidemiological properties and to select the most efficient and reliable PCR method on 116 of Staphylococcus aureus (S. aureus) isolates from Korean cattle, black goat, pig, dog, chicken, mouse and also human clinical cases from hospital. The distribution patterns of SSG [species specific genes; coagulase (coa), protein A (spa), nuclease (nuc) and aroA (RsaI) gene] were analyzed by PCR method. Among the SSGs, the nuc-gene was found in all strains $(100\%)$ tested and followed by coa-gene $(87.9\%)$, spa-gene $(91.4\%)$ and aroA-gene $(26.7\%)$, in order. The genetic subtyping by RFLP method was performed on the coa [AluI] and aroA-gene [RsaI] PCR products. The mecA-gene PCR and PCR-RFLP techniques were chosen to detect and verify of MRSA strains. Only the human strains $(12.1\%)$ were detected the positive mecA-gene products (533 bp), which were divided into two specific bands [201 & 332 bp] by HhaI enzyme digestion. On coa-gene and spa-gene typing, coa-gene was typed with ten kinds of genotype and coa-3 type were determined as the most predominant genotype, while spa-gene was divided into eleven kinds of genotype and also spa-7 type were selected the most prevalent genotype based on their genetic variations. On the aroA and coa-gene subtyping by PCR-RFLP, aroA-gene products were discriminated with only seven types of genotype, while coa-gene products were further divided into an eleven genotype, respectively. In comparison of SID values of five PCR based typing methods, the coa-PCR-RFLP (SID0.894) was evaluated the most efficient and reliable tools and followed by coa-PCR (SID0.883) and aroA-PCR-RFLP (SID0.462), in order. In conclusion, we could determined that the coa-PCR-RFLP method was the most suitable genetic analysis tool for S. aureus and MRSA strains from domestic animals and humans.

우리나라 도계장 수거계육의 미생물학적 위생실태 조사

우용구,Woo, Yong-Ku 한국미생물학회 2007 미생물학회지 Vol.43 No.3

제주도를 포함한 전국규모로 15개 시 도에 위치한 도계장에서 직접 수거한 도계육에 대하여 미생물 오염도 조사로서 총세균수, 대장균군수 및 포도상구균수에 대해서 조사를 하였다. 특히 주요 인수공통 병원성 세균들인 Salmonella 속균과 Campylobacter jejuni, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus, 그리고 E. coli O157:H7 균에 대해서도 함께 조사를 하였다. 그리고 도계장에서 보다 안전하고 위생적인 처리를 위해서 가장 흔히 사용되는 방법인 염소(20mg/L포함)를 첨가한 염소수로서 수세한 처리계육과 그렇지 않은 비처리 도계육 상호간에 대해서도 Salmonella 속균의 분리율과 기타 균종의 억제효과에 대해서도 비교조사를 수행하였다. 먼저 예비조사로서 강원지역을 비롯한 전국 6개 시 도의 도계장 유래 계육에 대해서 세균오염도의 비교조사에서는 포도상구균수, 대장균군수 및 총세균수의 순서로 오염도를 나타내었다. 이 성적은 시판계육의 미생물 오염도 수준보다는 $10{\sim}100$배 이상 낮은 오염도 성적이었다. 그리고 동일계육에 대한 Salmonella 속균의 분리율은 63.3%(19/30)였고, S. enteritidix (33.3%)가 가장 지배적인 혈청형이었으며, 동시에 S. typhimurium (3.3%), S. muenchen (30.0%)도 분리되었다. 하편, 염소수로 세척한 도계육은 총세균수와 대장균군수의 비교조사에서 비처리 계육보다도 약 100배정도로 균수의 억제효과를 보였다. 반면에 포도상구균수에서는 양자간에 뚜렷한 차이를 보이지 알았다. 또한 Salmonella 속균에 대한 억제효과의 비교조사에서도 20 ppm의 염소처리로서는 포도상구균과 마찬가지로 Salmonella 속균에 대해서도 뚜렷한 억제효과를 발휘하지 못한 것으로 확인되었다. 한편 보다 확대된 규모의 조사결과에서 제주도를 포함한 부산, 경남, 대구, 경북, 전남, 광주, 전북, 충남, 대전, 충북, 강원, 서울, 인천 및 경기지역을 포함하여 총 15개 시 도의 도계장 수거계육에서 Salmonella속균은 58.3%(67/115)에서 분리되었고, S. muenchen (57.3%)과 S. enteritidis (22.7%)가 대부분을 차지하였고, 인수공통병원균 중에서는 L. monocytogenes(43.5%), C. jejuni(37.4%), S. aureus(30.4%)의 순서로 분리되었으나, E. coli O157:H7은 국내 계육에서 전혀 분리되지 않았다. 결과적으로 도계육이 위생적이며 안전하게 시판되기 위해서는 최종적인 도계공정 이후 다양한 유통과정에서 발생될 수 있는교차 및 추가오염의 기회를 줄이기 위한 보다 철저한 위생관리 대책과 보완대책이 필요하다는 사실을 이 성적을 통하여 비로소 확인할 수 있었다. This study was conducted to survey the hygienic status of chicken meats on the microbial levels, which were collected from poultry processing plants located in the local provinces in nationwide including the JeJu island (n=15) in 1997. In particular, Salmonella spp., Campylobacter jejuni, and Listeria monocytogenes, which were retarded as one of the most important entero-pathogens relating to food home illness from poultry, were investigated on their isolation frequency including the other pathogens related on the food-borne illness. A total of 115 processed chickens were submitted on the present study. In general, the bacterial contamination frequency showed more or less lower $(10{\sim}100 cells)$ than those of sold on the retail and super markets and department stores because of lacking of cross-contamination incidences, depending on the total cells, Coliforms and Staphylococcal cells count. While, Salmonella species, Campylobacter jejuni, Listeria monocytogenes, and coagulase positive Staphylococcus aureus isolation frequency of chicken meats from slaughter houses were 58.3%, 37.4%, 43.5%, and 30.4%, in order. But the present microbial isolation data were a little lower levels than those of sold on the retail and super markets and famous department stores in Seoul and GyeongGi province at the same period. It seemed that the cross-contamination problems (including the human, environmental and instrumental factors) during the marketing stage (after the last processing procedure; rinsing step) had the major roles on the increasing of the microbial contamination frequency on the chicken meats after the slaughter houses.

Variation Patterns of the Blood Lipid Levels on the Sprague-Dawley-Rats Fed with Kochujang Extracts

우용구,김태효,고종호,Woo, Yong-Ku,Kim, Tae-Hyo,Koh, Jong-Ho The Korean Society of Food and Nutrition 2013 韓國食品營養學會誌 Vol.26 No.4

오늘날 현대인들의 식생활방식 중 과다한 열량의 영양소 섭취로 인하여 초래되는 비만의 유발 원인 중의 하나로 알려진 고지혈증(hyperlipidemia)에 대한 예방효과가 있는 것으로 알려진 전통방식으로 제조된 고추장의 생리활성 기능성 효과를 분석하고자 하였다. 이 연구에서는 실험동물로서 Sprague-Dawley(SD)-Rat에 대해서 고추장 추출물의 건강증진 효과에 대해서 실험동물을 사용하여 직접 확인하고 시도하였다. 실험군은 실험동물용 일반사료만을 먹인 음성대조군 그룹(N-group)과 일반사료와 고추장 추출물을 동시에 먹인 시험그룹(K-group) 그리고 양성대조군으로 고콜레스테롤 사료만을 먹인 그룹(H-group)으로 구분하여 5주간 사육하면서 건강증진효과의 발현에 대해서 분석하였다. 3그룹의 실험동물을 5주간의 사육 후 해부했을 때 H-group의 모든 동물(100%)에서 공통적으로 심한 지방간(fatty liver) 소견이 관찰되었으나, N-group이나 K-group의 어떠한 동물에서도 지방간 소견은 관찰되지 않았다. 한편, 실험동물의 혈장성분에 대한 혈액생화학적 성적의 비교에서는 고지혈증의 예방에 유익한 성분으로 알려진 HDL의 경우, 고추장 추출물 투여 그룹($25{\pm}8.43mg/d{\ell}$)은 H-group($22.6{\pm}4.16$) 보다 다소간 상승된 수치를 보였으나, 특히 고지혈증을 악화시키는 원인으로 알려진 LDL 경우에는 H-group ($55.8{\pm}44.8mg/d{\ell}$)이 고추장 추출물 투여 그룹($8.6{\pm}1.52mg/d{\ell}$)과 음성대조군인 N-group($9.8{\pm}2.39$)의 성적보다도 유의적으로 높은 수치를 나타냈다. 결과적으로 이 연구에서 SD-Rat에 투여했던 고추장 추출물은 실험동물에서 건강기능 개선효과의 하나인 저지방혈증 효과를 발현한 것으로 사료되었다. The present study was investigated to evaluate on the health improving effect of Kochujang (Fermented Korean hot pepper paste), which was famous as Korean traditional healthy food among foreigners as it was served together with Bibimbap. For comparison, observation was made on the experimental animals (Sprague-Dawley rat) as breeding during 5 weeks, which were divided three groups as into the control groups (N-group) fed with normal feed only and high cholesterol feed only (H-group) and the K-group with combined diet of normal feed and Kochujang extracts (Water soluble complex materials). The most outstanding result was found as the definite fatty liver lesions found from all (100%) of the rats of the H-group at the abdominal opening examination. On the other hand, there was any finding on fatty liver lesions in the N-group as well as the K-group. Therefore, it was more than enough to identify the hypolipidemic effect by visual finding only. Furthermore, from the results of blood plasma analysis from SD-rats fed with Kochujang extract (K-group), more prominent differential findings were found, the value of HDL-cholesterol, which was good for preventing the arteriosclerosis, was more or less higher than that of H-groups. But the level of LDL-cholesterol, which was one of the hazardous agents of hyperlipidemia and arteriosclerosis, was more significantly reduced to the level even lower than that of N-group, based on the statistical analysis, in especial. According to the present results, we could find that the unidentified Korean traditional Kochujang-derived complex components had expressed both the positive health improving effects and hypolipidemic effects on the SD-rat.

1996년도 서울${\cdot}$경기지역에서의 시판계육과 계란에 대한 미생물학적 위생실태

우용구,Woo Yong-Ku 한국미생물학회 2005 미생물학회지 Vol.41 No.1

1996년도에 서울${\cdot}$경기지역 소재의 재래시장과 백화점에서 판매되고 있던 계육과 계란을 구입하여 각종 미생물학적 위생실태를 조사하였다. 먼저 계육을 구입처에 따라 구분하고 총균수, 대장균군수와 포도상구군수를 산정하여 오염도를 비교하였으며, 또한 주요 인수공통 병원균들인 Salmonella 속균을 비롯하여 Campylobacter jejuni, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus 및 E. coli O157:H7에 대해서도 분리율을 조사하였다. 그리고 비교를 위해서 수입판매 되고 있는 미국과 중국산의 수입계육과 국내산 계육에 대해서도 전술한 바의 각종 미생물학적 위생실태를 비교조사 하였던 바 그 성적을 보고하고자 하였다. 먼저 미생물오염도비교조사에서 백화점의 시판계육은 총세균수와 대장균군수에 있어서 재래시장의 시판계육보다도 낮은 세균오염도를 보였지만, 포도상구균수에 있어서는 오히려 백화점의 시판계육에서 더욱 높은 오염도를 나타내었다. Salmonella 속균의 분리율 성적에서는 재래시장의 시판계육이 $76.5\%$의 분리율을 보였고, 백화점의 시판계육은 $60\%$의 균분리율을 나타내었으며, 국내 시판계육 전체적으로는 $68.8\%$의 Salmonella 분리율을 나타내었다. 한편 인수공통 병원균인 Listeria 속균의 분리율 성적은 재래시장의 시판계육이 $73.3\%$로서 백화점 시판계육의 $53.\%$ 보다도 더욱 높았고, 전체적으로는 $63.3\%$의 분리율 성적을 보였다. 반면에 Campylobacter 속균의 경우에는 백화점 시판계육이 $80\%$로서 재래시장의 시판계육의 $53.3\%$ 보다도 높은 분리율 성적을 보였으며, 전체적으로는 $64.0\%$의 분리율을 나타내어 Salmonella속균에 이어서 두 번째로 높은 균분리율을 보였다. 그러나 국내산 시판계육에서 E. coli O157:H7 균주는 전혀 분리되지 않았다. 국내 및 수입산(미국 & 중국) 닭부분육(닭다리, 닭날개 및 발골육)에 대한 각종 미생물의 오염도 조사에서 대장균군수의 경우 양자 간에 비슷한 수준이었으나, 총세균수와 포도상구균수에 있어서는 수입산 계육이 국내산 보다 $10\~100$ 배정도 낮은 오염도를 보였다. 닭날개(Wings)의 경우 국내산에서는 S.typhimurium $(33\%)$이 분리 되었으나, 미국산 닭날개에서는 Salmonella 속균이 전혀 분리되지 않아 대조적이었다. 하지만, 중국산의 닭부분육(혼합육)에서는 S. enteritidis와 L. monocytogenes도 함께 분리되었다. 그러나 부분육의 경우 국내산 및 수입산 모두에서 Campylobacter 속균과 E. coli O157:H7 균주는 전혀 분리되지 않았다. 서울${\cdot}$경기지역의 재래시장과 백화점에서 시판되고 있는 계란 총 446개에 대해서도 동일한 절차와 방법으로 조사하였던바, 재래시장에서 구입했던 계란의 난각부분(Egg-shell)에서만 가금티푸스(fowl Typhoid)의 병원체인 S. gallinarum이 1주$(0.2\%)$만이 분리되었고, 기타 세균으로서는 대장균군이 역시 난각에서 가장 높은 빈도로 분리되었고, 난황(Yolk)에서는 극히 낮은 수준의 세균오염도를 보였다. To determine the actual hygienic status of domestic chicken meats sold in public markets (conventional markets and department stores), microbial contamination levels (Total cells, Coliforms and Staphylococcal cells) and zoonotic pathogens (Salmonella species, Campylobacter species, Listeria species, and Staphylococcus aureus) isolation tests were conducted. Chicken meats and eggs tested were collected from the conventional markets (Si-Jang) and department-stores located in Seoul and Kyung-gi regions in 1996. In total cells and coliforms contamination tests, chicken meats sold in department stores were much lesser contamination status than those of Si-Jang, but staphylococcal cells level was much more higher than that of conventional markets. Salmonella isolation frequency was investigated as $68.8\%$, but Campylobacter jejuni and Listeria monocytogenes isolation frequency were appeared both $64.0\%\;and\;63.3\%$. In case of eggs sold in public markets, one of S. gallinarum strain $(0.7\%)$ was isolated only on the egg-shell part among the four-hundred and fourty-six. In comparison with foreign imported chicken meats, there were no big differences in microbial contamination status. On the other hand, both Salmonella and L. monocytogenes were isolated only in the chicken wings from Korea and China, but not from U.S.A. This data suggest that more hygienic control system in order to produce the safe and hygienic chicken meats and eggs is need in our country as soon as possible.

가금티푸스군의 인공감염에 대한 백색 및 갈색 산란계 계통간의 내병성 비교

우용구,김봉환,Woo, Yong-ku,Kim, Bong-hwan 대한수의학회 1998 大韓獸醫學會誌 Vol.38 No.4

This study was conducted to select resistant chicken-line between Brown and White layer lines against Salmonella gallinarum infection. The Brown and White layer chickens allocated into different age groups were inoculated with S gallinarum (WJO-126) either orally($1{\times}10^7cfu$) or intramusculaly($5{\times}10^6cfu$) and clinical observations were made for 2 weeks. All dead birds were necropsied and culture was made to recover the inoculated organinsm from liver, spleen, brain, bone marrow and cecal contents. Serum was isolated from all live birds after 2 weeks experiment and these birds were also necropsied and cultured to reisolate S gallinarum. The brown layers showed very high mortality to S gallinarum infection regardless of their ages and routes of inoculation, while white layers did not shown any mortality by the direct effects of S gallinarum. The mortality rate of 2 week old brown layers, in particular, were 82.6% (19/23) in peroral group and 86.9% in intramuscularly inoculated group, while those of white layer groups were only 0.0% in both groups. S gallinarum could be reisolated from all dead birds, especially, from liver and spleen. This result was inferred that the organism is highly invasive on the chicken. The intramuscularly challenged birds showed more seropositive-reactors(86.9%) than orally inoculated groups(61.9%). The overall results of present study suggested that white layers are much more resistant than brown layers against the experimental infection of S gallinarum and shown experimentally that resistance to S gallinarum is a characteristic of the White-line layers.

닭에서 분리한 Escherichia coli의 생물화학적 및 배양 특성

우용구,김기석,김봉환,Woo, Yong-ku,Kim, Ki-seuk,Kim, Bong-hwan 대한수의학회 1990 大韓獸醫學會誌 Vol.30 No.4

The present study was conducted to investigate the biochemical and cultural characteristics of Escherichia coli isolates from clinically affected chickens during the period from May 1988 to June 1989. A total of 82 E coli cultures were isolated from lesions of 75 chickens with colisepticemia. Biochemical properties of E coli isolates tested were in accordance with the general classification standard; all the isolates showed positive reaction in Catalase, Indol, and Methyl-Red tests, but negative reaction in Oxidase, Urease, $V{\ddot{o}ges$-Proskauer, Citrate utility, $H_2S$, Phenylalanine diaminase, and malonate tests. And the carbohydrate fermentation rates of them were shown to be variable. of the 82 isolates, 48(58.5%) cultures produced colicin to inhibit the indicator strain of E coli.

우리나라의 닭에서 분리한 Salmonella pullorum과 Salmonella gallinarum의 항원형

우용구,김봉환,Woo, Yong-ku,Kim, Bong-hwan 대한수의학회 1998 大韓獸醫學會誌 Vol.38 No.4

Antigenic types of 114 Salmonella pullorum and 152 Salmonella gallinarum field isolates were evaluated. All 3 antigenic types were identified among field isolates of S pullorum by factor-serum analysis but the majority of them were standard type(90.4%). Of the 114 S pullorum isolates, only eight(7.0%) were intermediate type and 3(2.6%) were variant type. Using the ammonium sulfate precipitation(ASP) test, one-hundred and three(90.4%) S pullorum isolates were standard type, while intermediate and variant types were 8.4% and 1.4%, respectively. One-hundred and fifty-two S gallinarum isolates were identified as standard type by ASP test and serological analysis. According to the random amplified polymorphisms of DNA(RAPD) patterns, most of S pullorum isolates were differentiated with 3 types in their fragment-patterns. No correlations were found between SDS-PAGE profiles and antigenic types of S pullorum isolates.

한국의 동물과 사람에서 분리한 Salmonella enteritidis의 phage types

우용구,박미선,우승룡,김봉환,김재학,Woo, Yong-ku,Park, Mi-sun,Woo, Seung-ryong,Kim, Bong-hwan,Kim, Jae-hak 대한수의학회 2000 大韓獸醫學會誌 Vol.40 No.3

The present study was conducted to investigate the phage types(PT) of Salmonella enteritidis(SE) isolated from animals and human patients in Korea during the period 1993-1999. SE were isolated from chickens including the layer and broiler, duck, rat, swine and human patients in nationwide scale. A total of 231 non-human and 14 human SE strains were phage typed and 80.4%(197/245) of SE isolates tested could discriminate as a ten SEPTs including the RDNC by the 10 standard phages, which were brought from the Central Public Health Laboratory in England. In analysing of phage types both animal and human SE isolates, SEPT 4(55.4%) was the most prevalent in domestic animals including the layer(39.3%) and broiler(64.5%), duck(55.5%), and swine(75.0%) since 1993. About 57% of the S enteritidis from human was SEPT 4. Along with SEPT 4, SEPT 1, SEPT 6a, SEPT 7 and SEPT 7a var, SEPT 9b, SEPT 15, SEPT 21b and SEPT 22 were also found from animal and human SE isolates. SEPT 4(40.0%) was isolated from frozen chicken meats imported from China along with SEPT 7 and 7a var strains in this study. In conclusion, SEPT 4 was the most predominant SEPT in our country regardless of animal or human hosts including the Che-Ju island and almost exclusively found in domestic poultry(layer and broiler). During the review period, SEPT 4 has already been spreading continually among the animal hosts since 1993.