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서수형,주경,오근호,Seo, Soo-Hyung,Joo, Kyoung,Auh, Keun-Ho 한국결정성장학회 1998 韓國結晶成長學會誌 Vol.8 No.3
형석$(CaF_2)$ 단결정 내부에 형성되는 다양한 결함에 대하여 현미경관찰, 성분분석 및 투과율분석을 하고 광투과에 미치는 영향을 고찰하였다. 내부 cavity의 종류로는 bubble과 결정면을 포함하는 공공형태의 negative crystals이 있으며, 특히 negative crystals이 결정에 고루 퍼져있는 경우, UV-Visible 파장영역에서 약 3%의 투과율 저하현상이 나타났다. 또한, 결정내부의 석출물은 주로 내부 cavite에 형성됨을 WDX 분석을 통하여 확인할 수 있었다. Violet colored 결정은 non-colored 결정에 비하여 전위밀도가 3배 정도 높았고, 성분분석 F이온이 적은 Ca와 F의 원자비가 나타내었다. 이러한 결과로 F이온의 부족으로 인하여 형성된 violet 색상이 발생되었음을 간접적으로 알 수 있었다. The internal defects in $(CaF_2)$ single crystal were characterized by the observation of optical microscopy, the element analysis and the transmittance analysis. In bubble and negative crystal which are composed to crystal plane of (100) and (111), the spread negative crystal in $(CaF_2)$ crystal gave an effect of low transmittance. The precipitates formed in bubble as internal cavities were analyzed by using WDX. Violet colored-crystal had higher a dislocation density than non-colored crystal, and the atomic ratio between Ca and F changed by poor F ion. In this result, we could determine indirectly that violet color was occurred by poor F ion.
Vacuum-Bridgman법에 의한 UV grade 형석$(CaF_2)$단결정 성장
서수형,주경,오근호,Seo, Soo-Hyung,Joo, Kyoung,Auh, Keun-Ho 한국결정성장학회 1998 한국결정성장학회지 Vol.8 No.3
대구경(직경 4inch이상) $CaF_2$ 단결정성장을 위하여 vacuum-Bridgman 장치를 구성하였으며, 성장속도 2mm/hr, 성장온도구배 $12^{\circ}C$/cm의 조건하에서 성장한 $CaF_2$ 단결정은 우수한 물성을 갖는 것으로 분석되었다. 우산형(umbrella shape)의 Mo thermal reflector를 사용한 경우에 polycrystalline으로의 성장을 제거할 수 있었다. 성장우선방위는 (111)면이었으며, 분말 XRD법에 의한 peak로부터 $5.460\AA$의 격자상수를 구하였다. 또한 XRD분석에 의하면 제2상은 형성되지 않았으며, EPD값은 $1.4{\times}10^4 \textrm{cm}^{-2}$이었다. 성장된 결정은 UV영역의 광학부품용도로 사용하기에 적합한 투과율 91%이상의 특성을 나타내었다. The vacuum-Bridgman equipment for large size diameter (4 inch more over) crystal growth was organized simply and the $CaF_2$ single crystal which was grown in the conditions of growth rate of 2mm/hr, freezing temperature gradient of $12^{\circ}C$/cm, have analyzed to keep excellent properties. Using Mo thermal reflector of umbrella shape, it could be eliminated the formation of polycrystalline. The preferential growth direction was (111) and the calculated lattice parameter was $5.460 \AA$ by XRD peaks. The secondary phases, also, was not formed by means of powder-XRD analysis. The value of EPD is $1.4{\times}10^4 \textrm{cm}^{-2}$ and the optical quality, which is the transmittance is 91% up in UV region, is suitable for optical components of UV applications.
고품질의 직경 6 inch 형석($CaF_2$)단결정 성장을 위한 poly-grain 및 내부 cavity제어
서수형,주경,오근호,Seo, Soo-Hyung,Joo, Kyoung,Auh, Keun-Ho 한국결정성장학회 1998 한국결정성장학회지 Vol.8 No.4
We suggested the new method of thermal screen in Bridgman-Stockbarger method to control the polygrain, the internal cavities and solid-liquid (SL) interface. $CaF_2$ single crystal of 6 inch was grown perfectly when we adopted to use a graphite pipe and a ceramic warmer in the conditions of growth rate 2 mm/hr, vertical temperature of $14^{\circ}C$ for freezing and temperature of $1324^{\circ}C$ at conical tip of crucible. The light scattering phenomena occurred by internal cavities were controlled as decreasing the freezing rate to 2 mm/hr and/or as adopting the rotation of melt (7 rpm). Bridgman-Stockbarger법에서 thermal screen의 역할을 하는 새로운 방법을 6inch 형석(CaF2) 단결정성장을 위하여 고안하였다. 본 방법으로 poly-grain으로의 성장과 내부 cavity, 그리고 solid-liquid(SL) interface를 제어할 수 있었다. Graphite pipe와 ceramic warmer를 사용하여 성장한 6inch의 CaF2 결정은 완전한 단결정으로 성장하였다. 이때의 조건은 2mm/hr의 성장속도, 성장구역에서의 $14^{\circ}C$/cm의 온도구배, 그리고 도가니의 conical tip에서 $1324^{\circ}C$의 온도를 나타내었다. 내부 cavity에 의해 발생되는 light scattering 현상은 성장속도를 감소시키거나 융액을 회전함으로써 제어할 수 있었다.
돼지 난소 과립막세포 배양액으로부터 발현된 GnSIF의 활성에 관한 연구
서수형(Soo Hyung Seo) 대한산부인과학회 1999 Obstetrics & Gynecology Science Vol.42 No.12
목적: 뇌하수체에서 분비되는 LH surge를 억제하는 물질의 존재에 대한 연구가 활발해 짐에 따라 돼지와 소의 난포액을 여러 차례 색층분석 하여 추출된 어떤 단백질이 배양된 쥐의 뇌하수체 전엽세포로부터 LH 분비를 억제한다는 사실이 밝혀졌고 곧 GnSIF (Gonadotropin Surge Inhibiting Factor) 또는 GnSAF (Gonadotropin Surge Attenuating Factor)로 명명되었다. 본 연구의 목적은 돼지의 난소 과립막세포에서 GnSIF를 생성하는 가를 알아보며 난포기의 각 시기에 따른 GnSIF 분비정도의 차이를 알아보기 위한 것이다. 연구방법 및 재료: 3군의 각기 다른 크기의 돼지 난포로부터 난포액을 천자 하여 얻어진 과립막세포를 Ham's F-12/DMEM 배양액을 담은 24칸 배양판에 3배수로 한 칸당 500,000개의 살아있는 세포를 넣어 24시간 배양하였다. 세포들이 착판 된 것을 확인한 후 세포를 EBSS (Earl's buffered saline solution)로 세척하여 2% FBS와 100ng/ml 농도의 FSH를 함유한 DMEM/F-12 배양액에 72시간 동안 배양한 후 각 군의 배양액을 수집하였다. 이 배양액들을 heparin-Sepharose로 색층분석 하여 inhibin과 follistatin의 활성을 제거한 후 쥐 뇌하수체 세포 생분석 (bioassay)을 이용하여 각 군의 GnSIF 활성을 측정하였다. 어린 암컷 Sprague-Dawley 쥐의 뇌하수체를 분리하여 20% FBS, collagenase, hyaluronidase 그리고 DNAse로 처리하여 세포를 분산시켜 24칸 배양판에 칸당 500,000개의 살아있는 세포의 농도로 M199 배양액에 72시간 배양하여 착판 시킨 후 세척한 뒤 10nM/ml 농도의 GnRH와 각 3군의 과립막세포 배양액을 첨가하여 4시간 배양 후 배양액을 수집하여 핵 면역 분석(RIA)을 통해 LH 농도를 측정하였다. 이때 GnSIF의 활성도는 GnRH에 의해 자극된 뇌하수체 세포로부터 분비되는 LH가 50% 억제되는 것을 1단위(unit)로 정의하였다. 결과: 난소 과립막세포 배양액은 GnRH에 의해 자극된 쥐의 뇌하수체 세포의 LH 분비를 대조군의 69%에서 억제하였고 (p<0.001, n=2), 이는 FSH로 과립막세포를 자극한 결과 dose dependent manner로 자극되었다. 직경 1-3mm 의 난포로부터 수집된 초기 난포기의 과립막세포의 배양액이 직경 6mm 이상의 난포로부터 수집된 후기 난포기의 과립막세포의 배양액보다 뇌하수체 세포의 LH 분비를 더욱 억제하였다. 결론: GnSIF 활성은 돼지 난소 과립막세포 배양액에 존재하며 황체화(lutenization)가 되기 이전의 초기 난포기의 과립막세포가 GnSIF 분비에 더욱 적극적이다. GnSIF는 inhibin 이나 follistatin과 더불어 뇌하수체의 성선자극호르몬의 분비를 조절하는 중요한 난소의 분비 물질임을 시사한다. Objectives: It has been identified a novel protein in porcine and bovine follicular fluid termed Gonadotropin Surge Inhibiting Factor (GnSIF) which inhibits GnRH-stimulated LH secretion by pituitary cells in culture. The purpose of this study was to investigate the production of GnSIF by porcine granulosa cell in vitro. Materials and Methods: Granulosa cells were aspirated from different size of porcine follicles (1-3mm, 3-5mm, >6mm in diameter) and cultured in 24-well plates in Ham's F-12/DMEM at 500,000 cells/well for 24h. After plating, cells were washed and incubated in triplicate for 72h in DMEM/F-12 containing 2% FBS in the presence of 100ng/ml FSH and the media were collected. Granulosa cell-conditioned media were chromatographed on heparin-Sepharose to remove inhibin and follistatin, and assayed for GnSIF activity using a rat pituitary cell bioassay. Briefly, dispersed pituitary cells from adult female Sprague-Dawley rats were plated (500,000 cells/well) for 72h, washed, and incubated with granulosa cell-conditioned media in the presence of 10nM GnRH for 4h. The media were collected and assayed for LH by RIA. GnSIF activity is defined as the suppression of GnRH-stimulated LH secretion. Results: Granulosa cell-conditioned media significantly inhibited GnRH-stimulated LH secretion by rat pituitary cells in vitro (69% of control, p<0.001, n=2 experiments). Preliminary data suggest that granulosa cells from small follicles (1-3mm) produce greater amounts of GnSIF than those obtained from larger follicles (>6mm). Conclusions: GnSIF activity is produced by porcine granulosa cells in vitro. Granulosa cell production of GnSIF, along with other gonadal proteins such as inhibin, follistatin, and activin may be an important component of the ovarian control of pituitary gonadotropin secretion.