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        Lipopolysaccharide로 유도된 RAW 264.7 세포와 마우스모델에 대한 진두발 에탄올 추출물의 항염증 효과

        배난영 ( Nan Young Bae ),김민지 ( Min Ji Kim ),김꽃봉우리 ( Koth Bong Woo Ri Kim ),박지혜 ( Ji Hye Park ),박선희 ( Sun Hee Park ),성낙윤 ( Nak Yun Sung ),변의홍 ( Eui Hong Byun ),안동현 ( Dong Hyun Ahn ) 한국미생물생명공학회(구 한국산업미생물학회) 2016 한국미생물·생명공학회지 Vol.44 No.3

        본 연구는 COHEE의 항염증 효과를 확인하기 위한 실험으로써 pro-inflammatory cytokine의 분비량 및 iNOS, COX-2, NF-κB와 MAPKs의 발현량을 관찰하였다. 먼저 MTT assay를 통해 COHEE가 세포 생존율에 있어 독성을 나타내지 않음을 확인한 후 동일한 농도로 추후실험을 진행하였다. COHEE에 의해 NO 분비량이 농도 의존적으로 감소하였으며 IL-6, TNF-α 및 IL-1β의 분비량 또한 유의적으로 감소하였다. 특히 100 μg/ml의 농도에서 LPS 단독처리구인 대조구에 비하여 IL-6, TNF-α 및 IL-1β의 분비량을 각각 66%, 43% 및 93% 억제시켰다. 이러한 결과가 전염증성 매개인자의 전사인자인 NF-κB와 MAPKs 경로에 의한 것인지 확인하기 위하여 발현량을 관찰한 결과, COHEE가 LPS 처리에 의해 현저히 증가한 단백질의 발현을 농도 의존적으로 유의성 있게 억제하였다. 또한 COHEE는 croton oil로 부종을 유발한 마우스모델에서 귀부종 억제효과를 나타내었고 250 mg/kg 농도에서 조직의 경피 및 진피 두께의 발달을 prednisolone 10 mg/kg 처리구와 유사한 정도까지 현저히 억제시키고 염증성 세포인 mast cell의 침윤 억제 효과도 확인하였다. 이를 통해 COHEE는 염증 반응의 전사인자인 NF-κB의 발현을 조절함으로써 iNOS와 COX-2의 발현을 억제하고 그에 따라 전염증성 매개인자인 NO, IL-6, TNF-α 및 IL-1β의 분비를 억제하여 항염증 활성을 가지는 것을 확인하였으며, 이 결과를 종합해볼 때, COHEE가 염증 치료제로써의 소재로 이용될 가치가 충분할 것으로 사료된다. This study aimed to investigate the anti-inflammatory effect of the ethanol extract from Chondrus ocellatus Holmes (COHEE) in RAW 264.7 cells and in a mouse ear edema model, by measuring the production of lipopolysaccharide-induced inflammatory response mediators. There were no cytotoxic effects on the proliferation of macrophages treated with COHEE compared with the control. COHEE inhibited the production of nitric oxide and pro-inflammatory cytokines [interleukin (IL)-6, tumor necrosis factor-α, and IL-1β]. The extract also reduced the expression of inducible nitric oxide synthase, cyclooxygenase 2, nuclear factor-κB p65, and phosphorylated mitogen-activated protein kinase in a dose dependent manner. In the croton-oil-induced ear edema model, COHEE decreased the formation of mouse ear edema at the highest dose compared with the control, and histological analysis revealed that the epidermal/dermal tissue thickness and mast cell numbers were reduced. Therefore, these results suggest that COHEE may be a promising topical anti-inflammatory therapeutic material through its action of modulating NF κB and the MAPK signaling pathway.

      • KCI등재

        LPS로 유도된 RAW 264.7 세포와 마우스 귀 조직에 대한 참도박 (Grateloupia elliptica Holmes) 에탄올 추출물의 항염증 효과

        배난영(Nan-Young Bae),김민지(Min-Ji Kim),김꽃봉우리(Koth-Bong-Woo-Ri Kim),안나경(Na-Kyung Ahn),최연욱(Yeon-Uk Choi),박지혜(Ji-Hye Park),박선희(Sun-Hee Park),안동현(Dong-Hyun Ahn) 한국식품영양과학회 2015 한국식품영양과학회지 Vol.44 No.8

        본 연구에서는 참도박 에탄올 추출물(GEHEE)의 항염증 효과를 알아보기 위해 lipopolysaccharide에 의해 활성화된 대식세포로부터 분비되는 염증매개인자들의 발현량과 마우스 모델을 이용한 귀 부종 및 조직학적 관찰 실험을 진행하였다. 그 결과 염증을 유발하는 대표적 물질인 NO 및 사이토카인[interleukin(IL)-6, IL-1β 및 tumor necrosis factor receptor-α]의 분비량이 GEHEE 농도 의존적으로 유의적 감소를 보였다. 또한 전사인자인 nuclear factor-κB의 활성과 인산화효소인 mitogen-activated protein kinases (p38, JNK 및 ERK)의 발현량이 억제됨을 확인함에 따라 염증작용 기전에서 이들의 활성 억제가 NO 및 사이토카인 분비량 조절에 영향을 미침을 확인하였다. 동물모델을 이용한 실험에서는 croton oil로 부종을 유발한 마우스 귀 조직에 GEHEE를 처리하였을 때 항염증제인 prednisolone 처리구와 유사한 수준으로 경피 및 진피의 두께가 감소한 것을 확인하였으며, 조직 내 침윤되는 mast cell의 수도 현저히 억제됨을 확인하였다. 따라서 본 연구 결과는 참도박 에탄올 추출물의 항염증 효능을 가진 기능성 소재로의 이용 가능성을 제시한다. This study investigated the anti-inflammatory effects of ethanol extract from Grateloupia elliptica Holmes (GEHEE) on the lipopolysaccharide-induced inflammatory response. Anti-inflammatory effects were detected by enzyme-linked immunosorbent assay, Western blotting, and immunohistochemistry. There were no cytotoxic effects on proliferation of macrophages treated with GEHEE compared to the control. GEHEE remarkably suppressed NO and pro-inflammatory cytokines (interleukin-6, tumor necrosis factor-α, and interleukin-1β) production and reduced expression of inducible nitric oxide synthase, cyclooxygenase-2, and nuclear factor-κB (NF-κB) proteins in a dose-dependent manner. GEHEE also significantly reduced activation of mitogen-activated protein kinases (MAPKs). The formation of edema in mouse ears was reduced at the highest dose compared to the control. GEHEE also reduced dermal thickness and mast cell numbers based on histological analysis. These results suggest that GEHEE exerts significant anti-inflammatory activity via inhibition of NF-κB and MAPKs activation and may be a potential anti-inflammatory therapeutic material.

      • KCI등재

        LPS로 유도된 RAW 264.7 세포와 마우스 귀 조직에 대한 주름까막살 에탄올 추출물의 항염증 효과

        배난영(Nan-Young Bae),김민지(Min-Ji Kim),김꽃봉우리(Koth-Bong Woo-Ri Kim),박선희(Sun-Hee Park),장미란(Mi-Ran Jang),안동현(Dong-Hyun Ahn) 한국식품영양과학회 2016 한국식품영양과학회지 Vol.45 No.8

        본 연구는 해조류 중에서도 홍조류인 주름까막살 에탄올 추출물(GCEE)의 항염증 효과를 확인하기 위한 실험으로 proinflammatory cytokines의 분비량 및 iNOS, COX-2, NF-κB와 MAPKs의 발현량을 관찰하고 마우스모델에서 항염증 효과를 확인하였다. GCEE가 세포 생존율에 있어 독성을 나타내지 않음을 MTT assay를 통해 확인한 후 같은 농도로 추후실험을 진행하였다. NO 분비량이 GCEE에 의해 농도의존적으로 감소하였으며 전염증성 매개물질인 사이토카인(IL-6, TNF-α 및 IL-1β)의 분비량 또한 유의적으로 감소하였다. 이러한 결과가 전염증성 매개인자의 전사인자인 NF-κB와 MAPKs 경로에 의한 것인지 확인하기 위하여 발현량을 관찰한 결과, GCEE가 LPS 처리로 현저히 증가한 염증 관련 효소인 iNOS와 COX-2의 단백질 발현을 농도 의존적으로 유의성 있게 억제하였고 전사인자인 NF-κB 및 MAPKs의 발현을 억제하였다. 또한, GCEE는 croton oil로 부종을 유발한 마우스모델에서 귀 부종 억제 효과를 나타내었고 250 mg/kg 농도에서 조직의 경피 및 진피 두께의 발달을 prednisolone 50 mg/kg 처리구와 유사한 정도까지 현저히 억제하고 염증성 세포인 mast cell의 침윤 억제 효과도 확인하였다. 이를 통해 주름까막살 에탄올 추출물은 염증반응의 전사인자인 NF-κB와 MAPKs의 발현을 조절함으로써 iNOS와 COX-2의 발현을 억제하고 그에 따라 전염증성 매개인자인 NO, IL-6, TNF-α 및 IL-1β의 분비를 억제하여 항염증 활성을 가지는 것을 확인하였으며, 이 결과를 종합해 볼 때 주름까막살 에탄올 추출물이 염증 치료제의 소재로 이용될 가치가 충분할 것으로 생각한다. The anti-inflammatory effects of ethanol extract from Grateloupia crispata (GCEE) were investigated in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated murine macrophages. Anti-inflammatory effects were detected by enzyme-linked immunosorbent assay, Western blotting, and immunohistochemistry. There was no cytotoxic effect on proliferation of macrophages treated with GCEE compared to the control. GCEE significantly inhibited production of pro-inflammatory cytokines [interleukin (IL)-6, tumor necrosis factor-α, and IL-1β] as well as nitric oxide in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. In addition, GCEE suppressed expression of inducible nitric oxide synthase, cyclooxygenase-2, and nuclear factor-κB in a dose-dependent manner. GCEE significantly reduced activation of mitogen-activated protein kinases. In the in vivo test, evaluation of anti-inflammatory activity of GCEE was performed using croton oil-induced ear edema in ICR mice. Oral administration of 10 mg/kg to 250 mg/kg of GCEE significantly reduced ear edema in a dose-dependent manner compared to croton oil-induced mice. Moreover, GCEE reduced ear thickness and the number of mast cells compared to croton oil-induced mice in the histological analysis. These data suggest that GCEE could be used as a potential source for anti-inflammatory agents.

      • KCI등재

        참모자반 물 추출물의 항아토피 효과

        정다현,안나경,최연욱,박지혜,배난영,박선희,김민지,김꽃봉우리,안동현,Jeong, Da-Hyun,Ahn, Na-Kyung,Choi, Yeon-Uk,Park, Ji-Hye,Bae, Nan-Young,Park, Sun-Hee,Kim, Min-Ji,Kim, Koth-Bong-Woo-Ri,Ahn, Dong-Hyun 한국미생물·생명공학회 2015 한국미생물·생명공학회지 Vol.43 No.2

        본 연구는 BALB/c mice의 등 쪽 부위에 반복적인 DNCB 도포를 통해 유발시킨 아토피 피부염에 있어서 참모자반 물 추출물의 효능에 대해 연구하였다. 참모자반 물 추출물을 2주 동안 지속적으로 처리하고 IL-4 및 IFN-γ cytokine의 분비량, 비장세포 증식능, 혈청 중 총 IgE 함량, 육안 평가 및 skin clinical severity score, 조직관찰을 실시하였다. 그 결과 참모자반 물 추출물을 지속적으로 도포함으로써 IL-4 cytokine과 총 IgE 함량이 현저히 감소하는 것을 확인할 수 있었으며 IFN-γ cytokine은 유의적으로 증가하는 것을 확인하였다. 비장세포 증식능에는 참모자반 물 추출물의 도포처리가 큰 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다. 육안평가 및 skin clinical severity score 결과, 참모자반 물 추출물을 2주간 지속적으로 도포 처리하였을 때, 그 증상이 눈에 띄게 완화되는 것을 확인할 수 있었으며 score 또한 DNCB 단독 처리군과 비교 시 유의적으로 감소하였다. 등 조직 관찰에서도 참모자반 물 추출물에 의해 DNCB로 유발된 아토피 동물 실험군의 경피 및 진피 조직 두께 및 진피에서의 mast cell의 침윤 정도가 감소되었음을 확인하였다. 이상 결과를 종합 해볼 때, 참모자반 물 추출물이 아토피 피부염 치료제로서 이용 가능성이 있을 것으로 사료된다. This study was intended to evaluate the anti-atopic effect of Sargassum fulvellum water extract (SFWE). Atopic dermatitis (AD) was induced in BALB/c mice by spreading 2,4-dinitrochlorobenzene (DNCB) to the dorsal skin area. The production of IL-4 and total IgE of the SFWE treated group was significantly less than the DNCB only group. On the other hand, the production of the IFN-γ of SFWE treated group was greater than that of the DNCB only group. In addition, SFWE alleviated the AD symptoms when compared to the DNCB only group and reduced the epidermal thickness and the number of mast cells in histological analysis. In conclusion, these results suggest that the application of SFWE has an anti-atopic activity through the modulation of IL-4 and IFN-γ cytokines, and the total IgE in DNCB-induced BALB/c mice. Therefore, SFWE can be utilized with atopic disease therapies.

      • KCI등재

        LPS로 유도된 RAW 264.7 세포에 대한 가락진두발 에탄올 추출물의 항염증 효과

        김민지(Min-Ji Kim),배난영(Nan-Yong Bae),김꽃봉우리(Koth-Bong-Woo-Ri Kim),박지혜(Ji-Hye Park),박선희(Sun-Hee Park),장미란(Mi-Ran Jang),안동현(Dong-Hyun Ahn) 한국식품영양과학회 2016 한국식품영양과학회지 Vol.45 No.2

        본 연구에서는 lipopolysaccharide(LPS)로 자극한 마우스 대식세포인 RAW 264.7 세포에서 가락진두발 에탄올 추출물(CNYEE)의 항염증 효과를 알아보기 위하여 nitric oxide(NO)와 pro-inflammatory cytokine의 분비량을 확인하였다. 그 결과 CNYEE 모든 농도에서 LPS만을 처리한 대조군과 비교하였을 때 유의성 있게 NO와 pro-inflammatory cytokine의 분비량을 저해하였으며, 특히 100 μg/mL 농도에서는 IL-6의 분비량을 70% 이상 억제하였고, TNF-α 및 IL-1β의 분비량은 50% 이상의 억제 효과를 나타내었다. CNYEE에 의한 염증매개물질의 분비 감소가 전사인자인 nuclear factor-κB(NF-κB)의 핵 내 전이 pathway를 저해함으로써 나타난 결과인지 확인하기 위하여 iNOS, COX-2 및 NF-κB p65의 단백질 발현량을 관찰한 결과, 비교적 낮은 농도인 50 μg/mL에서 40% 이상의 저해능을 보인 것으로 보아 NO와 cytokine의 분비 억제 결과가 NF-κB pathway를 저해함으로써 나타난 것임을 유추할 수 있었다. 또한 LPS에 의해 증가한 mitogen-activated protein kinases의 인산화를 확인한 결과, CNYEE 처리에 의해 농도 의존적으로 유의성 있게 저해되었다. 이러한 결과를 종합해볼 때 가락진두발 에탄올 추출물은 염증매개물질의 분비를 효과적으로 저해함으로써 추후 천연물로서 염증 치료제의 개발이 가능할 것으로 생각한다. The anti-inflammatory activity of ethanol extract from Chondrus nipponicus Yendo (CNYEE) was investigated by measuring production of a lipopolysaccharide-induced inflammatory response mediator. CNYEE had no cytotoxic effects on proliferation of macrophages compared to the control. CNYEE significantly inhibited (over 50%) NO production at 50 μg/mL, with inhibitory effects on expression levels of cytokines such as interleukin (IL)-6, tumor necrosis factor-α (TNF-α), and IL-1β. In particular, IL-6 inhibitory activity of CNYEE was higher than 70% at 100 μg/mL. CNYEE also reduced protein expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase-2 (COX-2), and nuclear factor (NF)-κB in a dose-dependent manner. CNYEE also significantly reduced phosphorylation of p38, extracellular signal-regulated kinase, and c-Jun N-terminal kinase. Therefore, these results suggest that CNYEE may have anti-inflammatory effects by modulating the NF-κB and mitogen-activated protein kinases signaling pathways and may be used as an anti-inflammatory therapeutic material.

      • KCI등재

        Lipopolysaccharide로 유도된 RAW 264.7 세포에 대한 참치심장 물 추출물의 항염증 효과

        김민지(Min-Ji Kim),배난영(Nan-Young Bae),김꽃봉우리(Koth-Bong-Woo-Ri Kim),박지혜(Ji-Hye Park),박선희(Sun-Hee Park),조영제(Young-Je Cho),안동현(Dong-Hyun Ahn) 한국생물공학회 2015 KSBB Journal Vol.30 No.6

        The anti-inflammatory effect of tuna heart water extract (THWE) was investigated using lipopolysaccharideinduced inflammatory response in this study. Anti-inflammatory effect was detected by the cell proliferation and the production levels of nitric oxide, pro-inflammatory cytokines such as interleukin-6 (IL-6), IL-1β, and tumor necrosis factoralpha. As a result, there were no cytotoxic effects on proliferation of macrophages treated with THWE compared to the control. The production of pro-inflammatory cytokines was remarkably suppressed compared with that of the LPS only group. These results suggest that THWE exerts the anti-inflammatory property by inhibiting production of inflammatory factors and may be a potential material for anti-inflammatory therapy.

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