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창자 가로절단-재문합 실험모델에서 창자신경계통의 형태계측학적 변화
오수연(Soo-Youn Oh),박웅채(Ung-Chae Park),김경래(Kyung-Rae Kim),왕준호(Jun-Ho Wang),이재동(Jae-Dong Lee),김순제(Soon-Je Kim),송우철(Wu-Chul Song),박승화(Seung-Hwa Park) 대한체질인류학회 2007 해부·생물인류학 (Anat Biol Anthropol) Vol.20 No.1
작은창자의 손상 후 시간경과에 따른 재생과정에서 근육층신경얼기와 제1형 카할사이질세포가 각각 어떻게 변화하는지를 살펴보고자 돌창자 가로절단-재문합 실험모델을 제작하여 형태계측학적 방법으로 비교분석 하였다. 형태계측학적 분석을 하기위해 Sprague Dawley계 성숙흰쥐의 돌창자를 가로절단한 후 재문합시킨 실험군과 가로절단을 하지 않고 개복 후 봉합수술만을 시행한 대조군에서 수술 후 3일, 7일, 15일, 30일군의 근육층신경얼기와 제1형 카할사이질세포의 변화를 영상분석기를 이용하여 계수하고 통계처리 하였다. 작은창자의 가로절단으로 인한 손상효과는 근육층신경얼기와 제1형 카할사이질세포에서 동시에 일어났으며 손상부위를 중심으로 앞쪽과 뒤쪽(구강쪽과 항문쪽) 양 방향으로 고르게 나타났다. 손상효과는 수술 후 3일군과 7일군에서 가장 심하게 나타나 근육층신경얼기의 경우 신경세포의 형태적 변성과 아울러 세포수가 약 40% 감소하였다. 제1형 카할사이질세포는 세포수가 20~37% 감소하였으며 대부분 세포의 세포질에는 많은 공포가 형성되어 있었다. 수술 후 15일 이후부터는 재생이 일어나기 시작하여 근육층신경얼기에서 신경세포의 감소정도는 20~25%로 줄어들었으며 세포의 염색정도나 형태가 정상으로 회복되는 양상을 보였다. 제1형 카할사이질세포 수의 감소정도도 13~20%로 줄어들었으며 세포질 내 공포가 형성된 세포의 수도 감소하였다. 수술 후 30일군에서 근육층신경얼기를 이루는 신경세포의 형태는 대조군과 유사하였으며 신경세포의 수는 수술 면을 기준으로 구강쪽과 항문쪽에서 각각 12.3%, 15.6% 씩 감소하여 (p<0.01) 정상으로의 완전한 회복은 이루어지지 않았다. 제1형 카할사이질세포 수는 구강쪽과 항문쪽에서 각각 7.5%, 4.2%씩 감소하였으나 유의한 차이는 없었으며(p>0.01) 세포 형태도 정상이었다. 이로서 작은창자의 가로절단으로 인한 손상효과는 근육층신경얼기에서 좀 더 심하게 나타나며 정상으로의 회복도 제1형 카할사이질세포에 비해 더디게 나타남을 알 수 있었다. This study was performed to investigate the morphometric changes of myenteric plexus and type 1 interstitial cells of Cajal (ICC-I) in regeneration process of small intestine transection. Sprague Dawley rats (200~250 g) were anesthetized with ether; then the full thickness of ileal wall were semitransected; and subsequent end-to-end anastomosis were performed by using 6-0 silk suture thread. Sham-operated rats, which only underwent the laparotomy, were used for control group. Experimental animals were sacrificed at 3 days, 7 days, 15 days, and 30 days after the operation. In each group myenteric plexus and ICC-Is were prepared by histochemical method (NADH-TR stain for myenteric plexus, ZIO stain for ICC-Is) and cell numbers were counted by image analyzer (Image plus pro-5.0, Media Cybermedics, USA). Degeneration of myenteric neurons and ICC-Is occurred simultaneously and it was similar in oral and anal to the site of transection. Degeneration effects were most prominent at 3 days and 7 days after intestinal transection. In myenteric plexus, many neurons had degenerated appearances and about 40% of them were lost. Most of ICC-Is had cytoplasmic vacuoles and 20~37% of the cells were lost. At 15 days after transection, there were no more degeneration in myenteric neurons (20~25% cell loss) and ICC-Is (20~13% cell loss). At 30 days after transection, numbers of myenteric neurons were not recovered as that of the control group. However numbers of ICC-Is were as similar as that of the control group. In conclusion, we confirmed that degeneration effects of intestinal transection are more severe in myenteric plexus than in ICC-Is, and recovery of cell loss occurs more slowly in myenteric plexus.
위축 위염과 장형화생에서의 마이크로어레이를 이용한 유전자 발현
김경래 ( Kyong Rae Kim ),오수연 ( Soo Youn Oh ),박웅채 ( Ung Chae Park ),왕준호 ( Joon Ho Wang ),이재동 ( Jae Dong Lee ),권혁중 ( Hyuk Jung Kweon ),김상윤 ( Sang Yoon Kim ),박승화 ( Seung Hwa Park ),최동국 ( Dong Kug Choi ),김찬길 대한소화기학회 2007 대한소화기학회지 Vol.49 No.4
목적: 장형화생을 동반한 위축 위염은 최근까지 위암발생의 중요한 요인으로 여겨져 왔다. 그러나 아직 장형화생과 위축 위염에 발현하는 주요 유전자에 관해서 거의 알려진 것이 없다. 이번 연구는 기존의 유전자 탐색에 사용되었던 어떤 방법보다도 많은 장점을 가지고 있는 올리고뉴클레오티드 마이크로어레이를 이용하여 전반적인 유전자 변화와 함께 위암과의 관련성을 알아보고자 하였다. 대상 및 방법: 장형화생을 동반한 위축 위염환자의 위점막과 정상 점막에서 올리고뉴클레오티드 마이크로어레이 기술을 이용하여 대량의 유전자 정보를 얻었으며, 유전자들의 확인을 위해 SAM (Significance Analysis of Microarrays) package 방법을 사용하였다. Global normalization, intensity dependent normalization 그리고 box plot normalization를 사용하여 결과를 분석하였다. 결과: FABP, REG, OR6C1, MEP1, SLC6A1, SI, Mucin 1, RAB23 등 8개 유전자는 정상점막에 비해 10배이상 과발현되었고, LOC44119유전자 하나만이 10배 이상 저발현되었다. 알려진 위암의 발암과정에 관여된 유전자로는 FN1, SRMS, TP53, TP53IMP2, TP53I3, FGFR4, TGFB1, TGFA 등 모두 8개에서 공통적으로 2배 이상의 발현 증감을 보였다. 결론: 저자들은 위암의 전단계병변인 장형화생을 동반한 위축 위염에서 암화와 관련한 유전자를 확인할 수 있었으며, 이번 연구 결과는 위암 진단 및 치료와 같은 임상적용을 위한 분자생물학적인 특성을 이해하는 데에 도움이 될 것이다. Background/Aims: The atrophic gastritis with intestinal metaplasia of gastric mucosa has been considered to be the major factor of carcinogenesis in the stomach. However, the key molecules are still poorly understood. To elucidate the molecular genetic basis, we report the results of our initial microarray data to analyze the genome pattern in patients with atrophic gastritis and intestinal metaplasia of the stomach. Methods: We used oligonucleotide microarray technique to evaluate the gene expression profiles in atrophic gastritis with intestinal metaplasia, in comparison with those of normal mucosa. For the identification of differentially expressed genes, Significance Analysis of Microarrays (SAM) package method was used. The results were analyzed using global normalization, intensity dependent normalization, and box plot normalization. Results: Eight genes including FABP, REG, OR6C1, MEP1, SLC6A1, SI, Mucin 1, and RAB23 in mucosa of atrophic gastritis and intestinal metaplasia were up-regulated by more than 10 times as compared with normal gastric mucosa. Only one gene, LOC44119 was down-regulated by more than 10 times of the expression as compared with normal gastric mucosa. In respect to the expression of known genes related to gastric carcinogenesis, 8 genes including FN1, SRMS, TP53, TP53IMP2, TP53I3, FGFR4, TGFB1, and TGFA showed up- and down-regulations more than 2 folds in expression pattern. Conclusions: We could identify a total genome pattern in patient with atrophic gastritis and intestinal metaplasia using oligonucleotide microarray. We believe that the current results will serve as a fundamental bioinformative basis for clinical applications in diagnosis and treatment of gastric cancer and precancerous lesion in the future. (Korean J Gastroenterol 2007;49:209-224)
인간 대장암 세포주에서 Capsaicin에 의한 세포고사에 관한 연구
김규열(Gyu Yeol Kim),양경민(Kyung Min Yang),표종옥(Jong Ok Pyo),성무경(Mu Kyng Sung),박웅채(Ung Chae Park),최대화(Dae Hwa Choi),남창우(Chang Woo Nam),나양원(Yang Won Nah),고병균(Byung Kyun Ko),박건춘(Kun Choon Park),임영철(Young Cheo 대한외과학회 2002 Annals of Surgical Treatment and Research(ASRT) Vol.62 No.2
유방 질환에서 에스트로젠 수용체에 대한 단일 클론 항체를 이용한 면역 조직 화학적 연구
박웅채,김세민 고려대학교 의과대학 1990 고려대 의대 잡지 Vol.27 No.1
Estrogen receptor has been a guideline marker for prognosis and therapy of breast cancer since it had been named by Toft in 1966. Since then Dextran Coated Charcoal method from cytosolic homogenates as a biochemical estrogen receptor assay has been used. But estrogen receptor by using this method, has been lost enthusiasm as a marker for prognosis and therapy of breast cancer because it has low specifity. The reason for that low yield has been speculated that there are estrogen receptor positive and negative cell simultaneously in the same tissue or unpurified other protein in the breast cancer tissue. To identify those estrogen receptor distribution in the tissue, Greene had proposed peroxidase antiperoxidase stain after reacting with monoclonal antibody. It has opened new field of oncology since it had been introduced in 1980. To define clinical role of this peroxidase antiperoxidase staining in the field of surgical and adjuvant therapy for breast cancer, we carried out a retrospective study during 3 years period by the immunohistochemical study using monoclonal antibody against ER - D 5. Material were obtained from Dept. of pathology. 60 cases consisting 31 malignant lesions and 29 benign lesions of paraffin block breast specimen were elected for this study. There were 24(40.0%) positive ER staining in 60 specimen. These 24 positive ER consisted of 11 malignant and 13 benign lesions. There were 11 positive ER out of 31 cancer lesions (35.5%) and 13 positive ER out of 29 benign lesions(44.8%). The positivity of ER was dominant in infiltrating ductal carcinoma (41.7 % ) and fibrocystic disease (66.6 % ), sclerosing adenosis (66.6 % ) and fibroadenoma (37.5%). the pevalence of estrogen receptor in infiltrating ductal carcinoma provides a clue to ductal origin of carcinoma. There were 1 positive stain in 6 stage Ⅰ , 7 in 14 stage Ⅱ, 3 in 8 stage Ⅲ, and no in 3 stage Ⅳ breast carcinoma according to TNM system. 2 out of 8 permenopausal carcinoma (25.0%) and 9 out of 23 postmenopausal carcinoma (39.1 %) also showed ER positivity. There were 13 cases (54. 2%) of 1 + staining, 8 cases (33.3%) of 2 + staining and 3 cases (12.5%) of 3 + staining in 24 positive ER breast masses. Tamoxifen treatment was instituted in 6 ER positive cancer patients and all patients were survived at the end of this study. But 4 out of 20 ER negative cancer patients were recurred at the end of this study. Based on this result, we suggest that the immunohistochemical stain of ER using monoclonal antibody may be a simple and useful method for the decision of adjuvant endocrine therapy in breast cancer.