담수환경에서 발굴된 Didymella 속 3종의 국내 최초 보고

문혜연 ( Hye Yeon Mun ),고재덕 ( Jaeduk Goh ),오유선 ( Yoosun Oh ),정애란 ( Ae-ran Jeong ),정남일 ( Namil Chung ) 한국균학회 2018 韓國菌學會誌 Vol.46 No.1

Three fungal isolates, NNIBRFG108, 1139, and 1480, were isolated from freshwater environments; NNIBRFG108 from plant litter in Samcheok, Gangwon and NNIBRFG1139 and 1480 from the soil in Jeju & Gimcheon, Gyeongbuk, Korea. Based on the morphological characteristics and phylogenetic analysis of internal tanscribed spacer (ITS), 28S rDNA region, and β-tubulin gene, NNIBRFG108, NNIBRFG1139, and NNIBRFG1480 isolates were confirmed as Didymella segeticola, D. ellipsoidea, and D. aeria, respectively. Neither species has previously been described in Korea.

강원 삼척 및 경북 영주의 담수지역에서 발굴된 수생균류 3종의 국내 최초 보고

문혜연 ( Hye Yeon Mun ),고재덕 ( Jaeduk Goh ),오유선 ( Yoosun Oh ),정남일 ( Namil Chung ) 한국균학회 2016 韓國菌學會誌 Vol.44 No.4

Three aquatic fungi were isolated from samples of freshwater-deposited plant litter and foam collected in Samcheok, Gangwon-do, and Yeongju, Gyeongsangbuk-do, Korea. Based on their morphological characteristics and a phylogenetic analysis of the internal transcribed spacer (ITS) rDNA region, the three isolates NNIBRFG329, NNIBRFG339, and NNIBRFG19 were confirmed as aquatic fungi: Articulospora tetracladia, Margaritispora aquatica, and Aquanectria penicillioides. These species were known as aquatic fungi but neither species has been previously reported in Korea.

UHPLC를 이용한 볏짚 사일리지와 동계사료작물의 오크라톡신과 제랄레논 분석법 최적화

함현희,문혜연,이경아,이수형,홍성기,이데레사,류재기,Ham, Hyeonheui,Mun, Hye Yeon,Lee, Kyung Ah,Lee, Soohyung,Hong, Sung Kee,Lee, Theresa,Ryu, Jae-Gee 한국초지조사료학회 2016 한국초지조사료학회지 Vol.36 No.4

조사료에서 오크라톡신 A (OTA) 및 제랄레논(ZEA)의 단성분 분석법을 최적화하기 위하여 곰팡이 독소에 오염되지 않은 볏짚 사일리지, 이탈리안 라이그라스, 청보리, 호밀을 대상으로 각 시료 별로 OTA는 50, 250, $5,000{\mu}g/kg$, ZEA는 300, 1,500, $3,000{\mu}g/kg$의 농도로 스파이킹하고 면역친화성 컬럼을 이용하여 독소를 정제한 후 UHPLC-FLD를 이용하여 분석하였다. 분석 결과 표준용액의 검량선은 OTA가 결정계수 0.9999, ZEA가 0.9995로 높은 직선성을 나타냈으며, 검출 및 정량한계는 OTA가 각각 $0.1{\mu}g/kg$, $0.3{\mu}g/kg$, ZEA는 각각 $5{\mu}g/kg$, $16.7{\mu}g/kg$을 나타냈다. 유효성 및 정밀성 검정결과 OTA는 볏짚이 회수율 84.23~95.33%, 상대표준편차 (RSD) 2.59~4.77%, 이탈리안 라이그라스는 회수율 79.02~95%, RSD 0.86~5.83%, 청보리는 회수율 74.93~97%, RSD 0.85~9.19%, 호밀은 회수율 77.99~96.67%, RSD 0.33~6.26%를 나타냈으며, ZEA는 볏짚이 회수율 109.6~114.22%, RSD 0.67~7.15%, 이탈리안 라이그라스는 회수율 98.01~109.44%, RSD 1.65~4.81%, 청보리는 회수율 98~113.53%, RSD 0.25~5.85%, 호밀은 회수율 90.44~108.56%, RSD 2.5~4.66%를 나타내어 유럽연합에서 제시한 기준을 만족하였다. 따라서 본 연구에서 제시한 분석법은 국내의 볏짚 등 조사료 4종에서 OTA와 ZEA의 분석에 활용할 수 있음을 시사하였다. The objective of this study was to optimize analytical methods for ochratoxin A (OTA) and zearalenone (ZEA) in rice straw silage and winter forage crops using ultra-high performance liquid chromatography (UHPLC). Samples free of mycotoxins were spiked with $50{\mu}g/kg$, $250{\mu}g/kg$, or $500{\mu}g/kg$ of OTA and $300{\mu}g/kg$, $1500{\mu}g/kg$, or $3000{\mu}g/kg$ of ZEA. OTA and ZEA were extracted by acetonitrile and cleaned-up using an immunoaffinity column. They were then subjected to analysis with UHPLC equipped with a fluorescence detector. The correlation coefficients of calibration curves showed high linearity ($R^2{\geq_-}0.9999$ for OTA and $R^2{\geq_-}0.9995$ for ZEA). The limit of detection and quantification were $0.1{\mu}g/kg$ and $0.3{\mu}g/kg$, respectively, for OTA and $5{\mu}g/kg$ and $16.7{\mu}g/kg$, respectively, for ZEA. The recovery and relative standard deviation (RSD) of OTA were as follows: rice straw = 84.23~95.33%, 2.59~4.77%; Italian ryegrass = 79.02~95%, 0.86~5.83%; barley = 74.93~97%, 0.85~9.19%; rye = 77.99~96.67%, 0.33~6.26%. The recovery and RSD of ZEA were: rice straw = 109.6~114.22%, 0.67~7.15%; Italian ryegrass = 98.01~109.44%, 1.65~4.81%; barley = 98~113.53%, 0.25~5.85%; rye = 90.44~108.56%, 2.5~4.66%. They both satisfied the standards of European Commission criteria (EC 401-2006) for quantitative analysis. These results showed that the optimized methods could be used for mycotoxin analysis of forages.

비스페놀A 분해세균 스핑고비움 A3 균주의 분해특성 및 분해 최적화 연구

강혜경(Hye Kyeong Kang),이미화(Mi Hwa Lee),진현미(Hyun Mi JIn),정지영(Ji Young Jung),한국일(Kook-Il),문혜연(Hye Yeon Mun),박상규(Sang Kyu Park),정상철(Sang Chul Jeong),이미화(Mi Hwa Lee) 대한환경공학회 2021 대한환경공학회 학술발표논문집 Vol.2021 No.11

항균활성 보유 Penicillium rubefaciens NNIBRFG5039의 최적배양 조건

황혜진 ( Hye Jin Hwang ),문혜연 ( Hye Yeon Mun ),황병수 ( Buyng Su Hwang ),남영호 ( Young Ho Nam ),정유진 ( Eu Jin Chung ) 한국균학회 2020 韓國菌學會誌 Vol.48 No.1

본 연구에서는 methicillin resistant Staphylococcus aureus subsp. aureus (MRSA) KCCM 40510 및 Bacillus cereus KCTC 3624 균주에 대한 항균활성을 보유한 균류Penicillium rubefaciens NNIBRFG5039를 경북 상주시 도남동 공기 중으로부터 분리‧동정하였고, 배양조건에 따른 균사체 생육 및 항균활성을 비교하였다. 그 결과, P. rubefaciens NNIBRFG5039는 PDB 배지, 배양 온도 30℃, 초기 pH 6.5로 배양하였을 때 항균활성이 가장 높게 나타나는 것을 확인하였다. 최적조건하에서 5L fermenter를 이용하여 배양시간에 따른 균사체 건조중량 및 항균활성을 비교한 결과, 배양 5일째에 생장 및 항균활성이 가장 높았다. P. rubefaciens NNIBRFG5039의 배양여액의 항균활성 스펙트럼을 조사한 결과, methicillin-resistant Staphylococcus aureus subsp. aureus CCARM 3089·3090·3091·3095와 KCCM 40510, Bacillus cereus KCTC 3624, B.subtilis KACC 10111, Filobasidium neoformans KCTC 7902, Enterococcus faecalis KCCM 11814에 대해서도 항균활성을 가지는 것을 확인하였다. 또한, P. rubefaciens NNIBRFG5039의 배양여액으로부터 항균활성 후보물질을 각종 크로마토그라피법으로 순수분리하고, NMR과 ESI-MS 등의 기기분석을 실시하여 구조를 (S)-6-hydroxymellein (1)으로 동정하였다. In screening for antimicrobial activity against methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) KCCM 40510 and Bacillus cereus KCTC 3624, NNIBRFG5039 was isolated from the air in Sangju-si, Gyeongsangbuk-do. Based on a high sequence similarity of the internal transcribed spacer (ITS) region, NNIBRFG5039 was determined to be closely related to Penicillium rubefaciens CBS 139145. The optimal media, initial pH, and temperature for mycelial growth and antimicrobial activity of P. rubefaciens NNIBRFG5039 were determined as follows: potato dextrose broth (PDB), pH 6.5, and 30°C, respectively. Under the optimal culture conditions, maximum mycelial growth (12.4 g L-1) and antibacterial activity (7.5 mm zone of inhibition against MRSA KCCM 40510, and 5.0 mm zone of inhibition against B. cereus KCTC 3624) were observed in a 5 L stirred-tank fermenter. We also isolated the antimicrobial compound from an ethyl acetate fraction, and its chemical structure was identified as (S)-6-hydroxymellein (1) by ESI-MS, 1H-NMR, and 13C-NMR. Consequently, the extract from P. rubefaciens NNIBRFG5039 may be used in functional materials for antimicrobial-related applications.

A Study On The Characterization Of Acid-Producing Fungi For Bioleaching Of Heavy Metals

Byung-Gon Ryu(류병곤),Hye Yeon Mun(문혜연),Wonsu Cheon(천원수),Min Jeong Seo(서민정),Jaeduk Goh(고재덕),Mi-Hwa Lee(이미화) 대한환경공학회 2021 대한환경공학회 학술발표논문집 Vol.2021 No.11

제주 수생식물에서 분리한 내생균류의 다양성

오유선(Yoosun Oh),문혜연(Hye Yeon Mun),고재덕(Jaeduk Goh),정남일(Namil Chung) 한국생명과학회 2017 생명과학회지 Vol.27 No.6

내생균류는 숙주식물 내에서 생물학적 그리고 비생물학적 스트레스로부터 저항성을 갖는데 도움을 준다. 수생식물은 수생환경에 서식하며 육상식물보다 수분스트레스에 더 많이 노출되어있다. 본 연구에서는 제주에 있는 남생이못, 수장동습지, 용수저수지, 강정천 4개의 습지에서 11개의 수생·수변식물을 채집하여 연구하였다. 전처리를 통해 식물 외생균을 제거하고 뿌리에서 내생균류를 분리하였다. 남생이못에서 126균주, 수장동습지에서 22균주, 용수저수지에서 44균주, 강정천에서 32균주가 분리되어 총 224개의 내생균류를 분리하였다. 분리된 균은 ITS를 이용해 동정한 후, 다양성 분석을 하였다. 남생이못에서 분리된 내생균류는 4개 문(Phylum), 7개 강(class), 12개 목(order), 19개 과(family), 30개 속(genus)로 구분되었다. 수장동습지에서 분리된 내생균류는 4개 문, 5개 강, 6개 목, 11개 과, 11개 속으로 구분되었으며, 용수저수지에서 분리된 내생균류는 4개 문, 5개 강, 7개 목, 12개 과, 13개 속으로 구분되었다. 강정천에서 분리된 내생균류는 1개 문, 2개 강, 5개 목, 7개 과, 9개 속으로 구분되었다. 4개의 습지에서 공통으로 분리된 속은 Alternaria속, Colletotrichum속, Fusarium속이었다. 향후 내생균류의 다양한 생태학적 분포와 다양성 규명에 대한 연구에 기초자료로 이용될 것이다. Endophytic fungi are present in host plants and contribute to resistance to biotic and abiotic stress. Aquatic plants are living in aquatic environment such as saltwater or freshwater and exposed more water stress than other land plants. In this study, we investigated 4 wetlands in Jeju and collected 11 aquatic plants. Exogenous microbes were removed by preprocessing of plants and endophytic fungal strains were isolated from the plants. We isolated 126 fungal strains from Namsaengi-pond, 22 fungal strains from Sujangdong-marsh, 44 fungal strains from Yongsu-reservoir and 32 fungal strains from Gangjeongcheon. The fungal strains were identified using internal transcribed spacer (ITS) region and analyzed the phylogeny and diversity. Endophytic fungi isolated from plants of Namsaengi-pond were classified to 30 genera, 19 families, 12 orders, 7 classes and 4 phyla. Endophytic fungi of Sujangdong-marsh were classified to 11 genera, 11 families, 6 orders, 5 classes and 4 phyla. Endophytic fungi of Yongsu-reservoir were classified to 13 genera, 12 families, 7 orders, 5 classes and 4 phyla. Endophytic fungi isolated from Gangjeongcheon were classified to 9 genera, 7 families, 5 orders, 2 classes and 1 phyla. Overall, they were divided 40 genera and Alternaria, Colletotrichum and Fusarium were isolated from 4 sites in common. By investigating the endophytic fungi in aquatic plants, it is for baseline data that determination of diversity and the ecological distribution of endophytic fungi.

경기도와 제주도 야생화들로부터 효모의 분리, 동정 및 항통풍성 Xanthine oxidase 저해물질의 생산

현세희 ( Hyun Se Hee ),문혜연 ( Hye Yeon Mun ),이향범 ( Hyang Burm Lee ),김하근 ( Ha Kun Kim ),이종수 ( Jong Soo Lee ) 한국미생물생명공학회(구 한국산업미생물학회) 2013 한국미생물·생명공학회지 Vol.41 No.4

국내 야생화들로부터 효모를 분리하여 이들을 고부가가치의 의약이나 건강 식품산업에 응용하기 위한 연구의 일환으로 경기도와 제주도 일부 지역의 야생화들을 채집하여 효모들을 분리, 동정하고 이들 가운데 항통풍성 xanthine oxidase 저해물질 생산 균주를 선발한 후 생산 조건을 검토 하였다. 서울 구로동과 일부 경기도 지역 야생화 31점에서 26종, 54균주의 효모들을 분리, 동정하였고 이들 중 Pseudozyma sp.가 13종으로 가장 많이 분리되었다. 제주도 송악산과 성산 일출봉 지역의 야생화 21점에서 모두 14종, 32균주의 효모들을 분리, 동정하였고, 이들 균 중에서 Sporobolomyces ruberrimus가 6종으로 가장 많이 분리되었다. 86효모 균주들을 YEPD 배지에서 2일간 배양하여 각각의 배양 상등액과 무세포 추출물을 제조한 후 이들의 항통풍성 Xanthine oxidase 저해활성을 측정한 결과, Pseudozyma hubeiensis 228-S-1의 무세포 추출물이 19.5%의 가장 높은 Xanthine oxidase 저해활성을 보였다. 또한 Pseudozyma hubeiensis 228-S-1을 YEPD 배지에 접종하여 30oC에서 36시간 배양하였을 때, 세포내 항통풍성 xanthine oxidase 저해물질을 가장 많이 생산하였다. Several yeasts were isolated from flowers found in Gyonggi-do Province and Jeju island in Korea. They were then identified by a comparison of their PCR-amplified D1/D2 regions of 26S rDNA, internal transcribed spacer 1 and 2 inclusive of 5.8S rDNA, using the BLAST database. A total of fifty four yeast strains were isolated from wild flowers in Gyonggi-do and the genus Pseudozyma was noted as being dominant. A total of thirty two strains were isolated from Songaksan and Seongsan-ilchulbong in Jeju island and Sporobolomyces ruberrimus was seen to be dominant. The anti-gout xanthine oxidase inhibitory activities of the culture broths and cell-free extracts from eighty six yeast strains were then determined. The cell-free extracts of Pseudozyma hubeiensis 228-S-1 exhibited the highest xanthine oxidase inhibitory activity of 19.6%. The XOD inhibitor was also maximally produced when Pseudozyma hubeiensis 228-S-1 was cultured at 30oC for 36h in YEPD medium.

제주지역 수생식물에서 발굴된 Sordariomycetes강 균류 3종의 국내 최초 보고

오유선 ( Yoosun Oh ),문혜연 ( Hye Yeon Mun ),고재덕 ( Jaeduk Goh ),정남일 ( Namil Chung ) 한국균학회 2018 韓國菌學會誌 Vol.46 No.2

Three endophytic fungal strains were isolated from aquatic plants collected in Jeju. The fungi were identified by sequencing and phylogenetically analyzing their internal transcribed spacer (ITS) regions. Consequently, the three strains NNIBRFG2982, NNIBRFG2984 and NNIBRFG 3040 were confirmed as the fungal species Acremonium tubakii, Colletotrichum cliviae and Cylindrocarpon pauciseptatum, respectively, all of which are new to Korea.

국내 기수역 환경의 균류 다양성

전유정 ( Yu Jeong Jeon ),고재덕 ( Jaeduk Goh ),문혜연 ( Hye Yeon Mun ) 한국균학회 2020 韓國菌學會誌 Vol.48 No.4

본 연구에서는 국내 기수 환경의 물과 토양에서 균류의 다양성을 확인하기 위해 을숙도, 금강하구둑, 순천만습지, 대호방조제, 신두리사구 및 부남방조제 총 6지점의 현장조사 및 시료를 채집하였다. 현장에서 여과한 담수시료와 담수퇴적물로부터 곰팡이를 순수분리하여 PDA배지에 접종한 후 25℃에서 배양하였다. 기수역 시료에서 순수분리된 균주는 총 173균주로 ITS 부분을 분석하여 속 수준으로 동정하였다. 분리 동정된 균주를 다양성 지수를 이용하여 분석하였다. 분리된 균류는 Pleosporales, Eurotiales, Capnodiales, Hypocreales, Polyporales, Saccharomycetales, Agaricales, Glomerellales, Mucorales, Dothideales, Russulales, Xylariales, Sordariales, Myrmecridiales, Tubeufiales, Onygenales, Cantharellales, Amphisphaeriales 목에 속하며Cladosporium속이 20%로 가장 우점하며, 그 다음은Penicillium (19%), Fusarium (5%)의 순서로 많이 분포하였다. Sarocladium kiliense NNIBRFG3280와Fusicolla merismoides NNIBRFG23708를 국내 기수환경에서 발굴하였으며, 이를 국내 미기록종으로 보고하고자 한다. We investigated the distribution and diversity of fungi in brackish water and soil from the Eulsukdo Island, Geumgang Estuary Bank, Suncheon Bay, Dae-ho Tide Embankment and coastal sand dune in Sinduri and Bu-nam Tide Embankment, Korea. Fungi were isolated from water samples by hand-pumped filtration, and soil samples were collected and diluted. The isolated fungi were incubated in potato dextrose agar at 25°C. A total of 173 fungal strains were isolated from brackish water and identified according to their respective internal transcribed spacer via phylogenetic analysis. The diversity of all fungal strains was analyzed according to diversity indices. The fungal strains belonged to any of 18 taxonomic orders: Pleosporales, Eurotiales, Capnodiales, Hypocreales, Polyporales, Saccharomycetales, Agaricales, Glomerellales, Mucorales, Dothideales, Russulales, Xylariales, Sordariales, Myrmecridiales, Tubeufiales, Onygenales, Cantharellales, and Amphisphaeriales. Cladosporium spp. (20%), Penicillium spp. (19%), and Fusarium sp. (5%) comprised majority of the identified strains. Two species from the fungal isolates were newly identified in Korea: Sarocladium kiliense NNIBRFG3280 and Fusicolla merismoides NNIBRFG23708.