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호흡기계암세포주에서 TNF-$\alpha$ 유전자의 이입이 항암제 감수성에 미치는 효과
모은경,이재호,이계영,유철규,김영환,한성구,심영수,최형석,Mo, Eun-Kyung,Lee, Jae-Ho,Lee, Kye-Young,Yoo, Chul-Gyu,Kim, Young-Whan,Han, Sung-Koo,Shim, Young-Soo,Choi, Hyung-Seok 대한결핵및호흡기학회 1995 Tuberculosis and Respiratory Diseases Vol.42 No.3
연구배경: 종양괴사인자(Tumor necrosis factor; TNF)는 다양한 생물학적인 작용을 가지며 종양 세포에 대한 세포 독성은 그 대표적인 기능중의 하나이다. TNF-$\alpha$는 생체외에서(in vitro) 몇몇 종양 세포주에 대하여 항암제, 특히 topoisomerase II targeted chemotherapeutic agent의 세포 독성 효과를 상승적으로 증가시키는 것이 알려져 있다. 최근 암세포에 대한 cytokine 유전자 요법에서 TNF는 중요한 대상으로 여겨지고 있으며, 유전자 이입에 의해 암조직이 TNF를 생성하게 될 경우 암 증식 억제 효과가 있음이 보고되고 있다. 연구자는 암세포에 TNF-$\alpha$ 유전자를 이입하여 자신이 TNF-$\alpha$를 생성하도록 형질을 변환시킨 암세포는 topoisomerase II 억제 항암제에 대한 김수성에 변화가 있을 것이라는 가설을 수립하였고 이를 검증하고자 본 연구를 수행하였다. 본 연구에서는 생체외로(in vitro) TNF-$\alpha$ 유전자를 이입하여 TNF-$\alpha$를 생성하는 암세포주에서 topoisomerase II targeted drug에 대한 항암제 감수성 효과가 모세포주에 비하여 증대될 수 있는지를 알아 보고자하였다. 방법: TNF-$\alpha$에 감수성을 보이는 것으로 알려진 인체 중피종 세포주인 NCI-H2058 세포주 및 생쥐의 섬유육종 세포주인 WEHI164 세포주와 인체 비소세포 폐암 세포주인 A549 세포주를 배양하여, 먼저 임상에서 흔히 폐암의 항암 화학 요법 치료에 널리 쓰이는 대표적인 topoisomerase II targeted chemotherapeutic drug인 etoposide(VP-16)와 doxorubicin(adriamycin)을 가하였을 때 관찰된 세포 독성을 MTT assay로 측정하고, 각 모세포주(parenta1 cell line)에 TNF-$\alpha$의 유전자를 이입시켜서 형절 변환한 세포주(transformed cell line)에 대하여 각각 동일한 항암제를 가하였을 때 관찰된 세포 독성의 정도를 같은 방법으로 측정하여, 그 결과를 비교 분석하였다. 또한 모세포주에 외부에서 TNF를 가하여 전처치한 후 동일한 항암제를 가하였을 때의 세포독성을 관찰하여 비교 분석하였다. 결과: H2058 세포주에서는 TNF-$\alpha$ 유전자를 이입한 세포주 topoisomerase II targeted drug을 가하였을 때, 항암제 감수성이 모세포주에 같은 항암제를 가하였을 때에 비하여 의미있게 증가함을 관찰할 수 있었으나(p<0.05), WEHI 세포주와 A549 세포주에 있어서는 TNF-$\alpha$ 유전자를 이입한 세포주에서 모세포주에 비하여 항암제 감수성이 증가하지는 않았다. 결론: TNF-$\alpha$ 유전자의 이입이 topoisomerase II targeted chemotherapeutic drug에 대한 항암제 감수성을 증가시키는 효과는 세포주에 따라 다양한 결과를 보이는 것을 알 수 있었으며, 적어도 선택된 특정 종류의 호흡기계 암세포에 있어서는 TNF-$\alpha$ 유전자의 이입으로 항암제 감수성(chemosensitivity)을 증가시킬 수 있을 것으로 사료된다. Background: Tumor necrosis factor(TNF) showed antitumor cytolytic effects on sensitive tumor cells in numerous in vivo and in vitro studies. But it could not be administered systemically to human because of severe systemic adverse effects at effective concentrations against tumor cells. Many studies showed that a high concentrations of TNF in the local milieu may evoke in vivo TNF-responsive mechanisms sufficient to suppress tumor growth. Recently developed technique of TNF gene transfer to tumor cells using retrovirus vector could be a good candidate for local TNF administration. TNF is also known to synergistically enhance in vitro cytotoxicity of chemotherapeutic drugs targeted to DNA topoisomerase II against TNF-sensitive tumor cell lines. In this study the in vitro chemosensitivity against DNA topoisomerase II targeted chemotherapeutic drugs was evaluated using some respiratory cancer cell lines to which TNF gene had been transferred. Method: NCI-H2058, a human mesothelioma cell line, A549, a human lung adenocarcinoma cell line and WEHI 164 cell line, a murine fibrosarcoma cell line were treated with etoposide and doxorubicin, which are typical topoisomerase II - targeted chemotherapeutic agents, at different concentration. The resultant cytotoxicity was measured by MIT assay. Then the cytotoxicity of the same chemotherapeutic agents was measured after TNF-$\alpha$ gene-transfer and the two results were compared. Results: The cytotoxicity was not increased significantly in WEHI164 cell line and A549 cell line but statistically significant increase was observed in H2058 cell line when TNF-$\alpha$ gene was transferred(p<0.05). Conclusion: These findings show that TNF-$\alpha$ gene transfer to respiratory cancer cell lines results in variable effects on chemosensitivity against topoisomerase II inhibitor among different cell lines in vitro and can be additively cytotoxic in certain selective tumor cell lines.
흉막삼출액에서 Adenosine Deaminase 의 진단적 가치에 관한 전향적 연구
모은경(Eun Kyung Mo),오연목(Yeon Mok Oh),정만표(Man Pyo Jung),이계영(Kye Young Lee),유철규(Chul Gyu Yoo),김영환(Young Whan Kim),한성구(Sung Koo Han),심영수(Young Soo Shim),김건열(Keun Youl Kim),한용철(Yong Chol Han) 대한내과학회 1995 대한내과학회지 Vol.48 No.5
N/A Objectives: Tuberculosis and malignancy are two major causes of lymphocyte dominant exudative pleural effusions. The differentiation between these two disease is often difficult by conventional diagnostic techniques. According to several retrospective study, the activity of adenosine deaminase(ADA) which is produced by activated T cells has been reported to be useful for this purpose. We performed the prospective study to evaluate the diagnositic value of ADA activity in pleural fluid. Methods: The ADA activity of pleural fluid and pleural fluid/serum ratio were evaluated in lymphocyte dominant exudative pleural effusion of uncertain etiology after conventional diagnostic work-up. Anti-tuberculous therapeutic trial was given only in cases with high pleural fluid ADA activity (more than 40IU/L). The response to treatment and the confirmative diagnosis obtained later were analyzed. Same evaluation was made also in confirmed tuberculous and non-tubercuous pleurisy for comparison. Results: Using the criteria of pleural fluid ADA activity more than 40IU/L, tuberculous pleurisy could be diagnosed with 95% of sensitivity and 81% of specificity. The positive predictive value was 84% and negative predictive value was 94%. The pleural fluid/serum ratio of ADA activity was superior than pleural fluid ADA activity in diagnosing tuberculosis. Using the criteria of 2.0 as the cut off value, the sensitivity was 94% and the specificity was 100%. The positive predictive value was 100% and negative predictive value was 92%. Conclusion: The activity of ADA in pleural fluid and pleural fluid/serum ratio would be useful guideline in differentiation of tuberculous from non-tuberculous pleural effusion.
모은경(Eun-Kyung Mo),김진희(Jin-Hee Kim),이근종(Kun-Jong Lee),성창근(Chang-Kun Sung),김미리(Mee Ree Kim) 한국식품영양과학회 1999 한국식품영양과학회지 Vol.28 No.4
62종의 식물성 천연물의 10% 열수추출액을 첨가하여 깍두기를 제조한 후 20℃에서 15일간 저장하면서 경시적으로 깍두기의 저장성(산도, pH, 경도, 유산균수, 색도 및 관능적 특성)을 측정하였다. 산도가 현저히 낮아 가식기간을 2배 이상 연장시킨 천연물은 27종이었으며, 저장 전 기간동안 깍두기 무의 경도가 대조군에 비해 높은 천연물로는 모과, 양고추냉이, 작약, 진피, 택사 및 홍화의 6종이었다. 가식기간이 2배 이상 연장된 모과, 양고추냉이, 작약, 진피의 4종은 a값이 대조군과 유사하였다. 길경, 모과, 산사, 양고추냉이, 죽엽 또는 진피 첨가 깍두기는 관능검사에 의한 ‘전체적인 수용도’ 점수가 높았다. 이상의 결과로부터 숙성 전기간 동안 대조군보다 깍두기의 산도가 낮고 깍두기 무의 경도가 대조군보다 높게 유지되어 가식기간을 연장시켜준 천연물 중에서 관능적 특성이 우수한 천연물로는 모과, 양고추냉이, 진피의 3종이었다. To investigate the effects of medicinal plants on the shelf-life of kakdugi, various kakdugies, added with hot water extract from 62 natural plants, were fermented at 20℃ for 15 days. In case of control without the addition, the shelf-life required to reach the acidity of 1%(as lactic acid) was 7 days. Morethan two-fold extension of shelf-life was observed with twenty seven extracts, of which six extracts maintained the hardness of kakdugi higher than that of control over the entire fermentation time. And the number of lactic acid bacteria in above kakdugies was not remarkably different from that of control, and the color(a value) of the liquid of kakdugi, added with Chaenomeles lagenaria, Moringa oleifera, Peaonia lactiflora or Citrus tangerina extract, was similar to that of control. In sensory test, the extracts from the above plants except Moringa oleifera were found to be acceptable. It is suggested that the addition of above three extracts may lead to extension of shelf-life of kakdugi, based on the acidity, hardness, color and sensory test.
한약재 및 채소류 물추출물 첨가에 의한 깍두기 숙성 적기의 연장 효과
김미리(Mee Ree Kim),모은경(Eun-Kyung Mo),김진희(Jin-Hee Kim),이근종(Kun-Jong Lee),성창근(Chang Keun Sung) 한국식품영양과학회 1999 한국식품영양과학회지 Vol.28 No.2
상온에서 깍두기의 숙성 적기를 연장시킬 수 있는 천연물을 알아보기 위해 한약재 68종과 채소류 37종 총 105가지의 식물성 천연물의 10% 열수추출물을 깍두기 제조시에 첨가(깍두기 무게의 20%)하여 20℃에서 저장하면서 숙성 적기에 도달하기까지 경시적으로 숙성도(산도, pH, 숙성적기에 도달하는 기간, 경도 및 관능검사)를 측정하였다. 숙성 적기의 산도를 0.6%(lactic acid)로 보았을 때, 대조군의 숙성 적기인 60시간에 대조군의 산도인 0.6%보다 50% 이하로 낮은 산도를 나타낸 천연물로는 한약재 42종, 채소류 6종으로 총 48종이었다. 이들을 첨가한 깍두기의 숙성 적기는 대조군의 숙성적기인 60시간보다 2배 이상 연장된 120시간 이상을 나타내었다. 또한 상기 48종 중에서 숙성 60시간의 깍두기 무의 경도가 대조군보다 30% 이상 높게 나타난 천연물로는 금은화, 모과, 목향, 방풍, 백모근, 산약, 죽엽, 차전자, 택사, 계피, 정향, 초피의 12종이었다. 이들 12종을 각각 첨가한 깍두기의 유산균수는 대조군에 비해 적게 나타나지는 않았다. 그러나, 택사, 계피, 정향 및 초피의 4종은 관능적 특성이 좋지 않았으므로 이들을 제외한 8종의 천연물은 깍두기의 숙성적기를 연장시킬 수 있는 물질로 사료되었다. To investigate the effect of natural plants on the prolongation of optimal fermentation time of kakdugi, various kakdugies, added with hot water extract from 105 kinds of natural plants(68 medicinal plants and 37 vegetables), were fermented at 20℃ until optimal fermentation time. In case of control without addition, the time required to reach the optimum acidity(0.6% lactic acid) was 60 hr. Among 105 kinds tested, 48 plant(42 medicinal plants and 6vegetables) extracts decreased the acidity after 60 hr fermentation to less than 50% of control. In addition, these extracts extended the optimal fermentation time(>120 hr) by more than 2-folds. Moreover, among the above 48 kinds, 12 sorts of extracts raised the hardness of kakdugi, by more than 30%, compared to control. And the number of lactic acid bacteria in kakdugi added with the above 12 kinds was not smaller than that of control. In sensory test, 8 kinds of medicinal plants(including Phyllostachys edulis) were found to be acceptable. Based on these results, it is suggested that kakdugi added with 8 kinds of medicinal plants was adequate in the prolongation of optimal fermentation time of kakdugi.