바이오촉매 및 생물전환을 이용한 광학활성 에폭사이드 제조

김희숙,이옥경,이은열,Kim, Hee-Sook,Lee, Ok-Kyung,Lee, Eun-Yeol 한국생명과학회 2005 생명과학회지 Vol.15 No.5

광학활성 에폭사이드는 광학활성 의약품, 기능성 식품 제조용 광학활성 중간체로 사용될 수 있다. 바이오촉매를 이용하여 광학활성 에폭사이드를 제조하는 방법으로는, mono-oxygenase나 peroxidase 등을 이용하여 알켄 기질의 이중결합을 비대칭 에폭시화반응을 통해 제조하는 방법이 있다. Kinetic resolution을 이용하는 방법으로는 epoxide hydrolase를 이용하여 특정 이성질체만을 diol로 가수분해하여 제거시켜 광학활성 에폭사이드를 얻는 방법 등이 있다. 다양한 생물전환 기술, directed evolution 및 site-specific muta-genesis 등을 이용한 광학활성 에폭사이드 제조용 바이오촉매개량 기술 등 효율적인 광학활성 에폭사이드 제조 시스템에 대한 연구 개발도 활발히 진행되고 있어 향후에 상업화가 가능할 것으로 기대된다. Chiral epoxides are important chiral synthons in organic synthesis for the production of chiral pharmaceuticals and functional food additives. Chiral epoxides can be synthesized by enantioselective introduction of oxygen to double bond of substrate by monooxygenase. Peroxidase also carry out asymmetric epoxidation of alkene in the presence of hydrogen peroxide. Kinetic resolution of racemic epoxides via enantioselective hydrolysis reaction by epoxide hydrolase (EH) is a very promising method since chiral epoxides with a high optical purity can be obtained from cheap and readily available racemic epoxides. In this review, various biocatalytic approaches for the production of chiral epoxides with several examples are presented and their commercial potential is discussed.

논문편 : 부모세대가 받은 훈육방법과 그들의 자녀 훈육방법과의 비교 - 서울시 일부 지역을 중심으로 -

김희숙,이정덕 ( Hee Sook Kim,Chung Duck Lee ) 대한가정학회 1988 Human Ecology Research(HER) Vol.26 No.3

분자공학 기반의 광학활성 에폭사이드 제조용 epoxide hydrolase 생촉매 개발

김희숙,이은열,Kim, Hee-Sook,Lee, Eun-Yeol 한국생명과학회 2006 생명과학회지 Vol.16 No.1

광학활성 에폭사이드는 다양한 반응성으로 인하여 고부가가치 광학활성 의약품 및 농약 합성용 중간체로 널리 이용되고 있다. 광학활성 에폭사이드는 에폭사이드 가수분해효소 (epoxide hydrolase, EH)를 이용하여 저가의 라세믹 기질에 대한 입체선택적 가수분해 반응을 통해 제조할 수 있으며, EH는 유도과정 없이 발현되고 보조인자가 필요 없으며 비교적 효소 안정성도 높아 상업적으로 유용한 효소이다. EH에 대한 생화학 및 분자생물학 관련 최근 연구 결과를 바탕으로 촉매 활성 증대 및 기질 선택성을 변경시킨 tailer-made형 EH 생촉매 개발이 가능할 것이며, 실규모의 비대칭 광학분할 생물공정 시스템 개발을 통해 EH에 의한 동력학적 가수분해반응을 이용한 광학활성 에폭사이드 생산기술의 상업화가 가능할 것으로 기대된다. Enantiopure epoxides are valuable intermediates for the asymmetric synthesis of enantiopure bioactive compounds. Microbial epoxide hydrolases (EHs) are versatile biocatalysts for the preparation of enantiopure epoxides by enantioselective hydrolysis of cheap and easily available racemic epoxide substrates. EHs are commercially potential biocatalysts due to their characteristics such as high enantioselectivity, cofactor-independent catalysis, and easy-to-prepare catalysts. In this paper, recent progresses In molecular engineering of EHs are reviewed to evaluate the commercial feasibility of EH-catalyzed hydrolytic kinetic resolution for the production of enantiopure epoxides.

중년 남성의 결혼만족도에 미치는 영향요인

김희숙 ( Kim Hee Sook ),하태희 ( Ha Tae Hi ) 경북대학교 간호과학연구소 2010 경북간호과학지 Vol.14 No.1

Purpose: The purpose of this study was to investigate the influencing factors of marital satisfaction in middle-aged men. Method: Data collection was carried out May 2 through July 30 2005. In order to get the data by self-questionnaire, 427 subjects were selected. The instruments for this study were Kim's husband and wife compatibility scale, Rosenberg's self-esteem scale, Olson, Sprenkle, and Russel's ENRICH inventory, and Frazier and Bowden's marital satisfaction scale. The dada was analyzed by mean, standard deviation, t-test, one-way ANOVA, Pearson's correlation coefficient, and Stepwise multiple regression using SPSS 12.0 program. Result: The main factors that affect marital satisfaction were husband and wife compatibility, communication, and self-esteem. These variables were account for 69.3% of marital satisfaction. Conclusion: It is necessary to develop a strategy to improve husband and wife compatibility and communication and increase self-esteem for marital satisfaction in middle-aged men Therefore, development of nursing program focus on gender role attitudes is needed.

4-(p-Nitrobenzyl)pyridine의 색깔반응을 이용한 미생물 epoxide hydrolase의 활성 평가

김희숙,이은열,Kim Hee Sook,Lee Eun Yeol 한국생명과학회 2005 생명과학회지 Vol.15 No.3

4-(p-Nitrobenzyl)pyridine (NBP)의 색깔변화를 이용한 epoxide hydrolase활성 측정법을 사용하여 다양한 미생물 세포유래의 epoxide hydrolase 활성을 측정하고 평가하였다. Epoxide hydrolase의 가수분해 반응에 의해 분해되고 남은 에폭사이드 기질에 의한 NBP alkylation 반응을 통한 색깔변화로 손쉽게 epoxide hydrolase 활성을 측정할 수 있었다. NBP 반응에서 triethylamine을 첨가하여 색깔반응 효율을 높일 수 있었으며, 10mM styrene oxide에 대한 최적 세포 사용량은 12.5mg/ml로 결정하였다. 본 연구에서 얻은 colorimetric assay조건에서 대용량의 미생물 후보군집으로부터 유용한 epoxide hydrolase를 가지는 신규 미생물을 효율적으로 선별할 수 있을 것으로 기대된다. Epoxide hydrolase activities of various microbial cells were analyzed by colorimetric assay based on alkylation of epoxides with 4-(p-nitrobenzyl)pyridine (NBP). The epoxide hydrolase activity was determined by measuring the decrease of color intensity at 560 nm due to the decrease of styrene oxide substrate by epoxide hydrolase-catalyzed hydrolysis reaction. The experimental conditions of NBP colorimetric assay were optimized for the efficient measurement of epoxide hydrolase activities from various microbial cells.

이동 컴퓨팅 환경에서 이동 호스트의 자치성 증대를 위한 선택적 캐쉬 일관성 유지 기법

김희숙,황병연,Kim, Hee-Sook,Hwang, Byung-Yeon 한국정보처리학회 2003 정보처리학회논문지D Vol.10 No.4

현재 이동 컴퓨팅 환경에서 이동 호스트가 사용하는 캐쉬는 전력의 한계와 제한된 대역폭이라는 단점을 보완할 수 있는 중요한 장치로서 사용된다. 하지만 서버 데이터와의 일관성을 유지해야 하는 부담을 가지고 있다. 본 논문에서는 선택적 캐쉬 일관성 유지 기법을 제안한다. 서버는 캐쉬 상태 테이블, 데이터 접근 테이블을 유지하여 이동 호스트에서 미래 사용성이 높은 데이터에 대한 선별을 통해 효율적인 방송을 가능하게 한다. 또한 오랜 접속 단절 이후에 연결된 이동 호스트의 요청에 따라 서버가 보관하고 있던 지난 방송 정보를 전달하고 비동기적인 방송을 수행함으로써 다수의 캐쉬 데이터가 버려지는 것을 방지하고, 최신의 데이터를 보유할 수 있도록 한다. 따라서 이동 호스트는 서버에 대한 의존도를 줄일 수 있게 되어 자치성 증대라는 효과를 얻을 수 있음이 실험을 통해서 보여진다. The cache used by mobile host is an important device that recovers the weak points of limited power and bandwidth, in mobile computing environments. However, it has to stand and maintain the consistency with the server data. In this paper, we propose a 'Selective Cache Consistency Scheme'. The server allows an effective broadcasting by selecting data of high usability using 'Cache State Table' and 'Data Access Table'. Moreover, this scheme prevents the loss of data that nay occur by a long period of disconnection, by asynchronous broadcasting and transmitting those broadcast data preserved in the server. This also allows user to possess the latest data. Through experiments, we have found that the enlargement of autonomy is possible by reducing the dependence of server.

베이비붐세대 남성의 자살 예방 프로토콜 구성을 위한 델파이 연구

김희숙,신은정,김갑연,Kim, Hee-SooK,Shin, Eun-Jeong,Kim, Gab-Yeon 한국사물인터넷학회 2021 한국사물인터넷학회 논문지 Vol.7 No.1

본 연구는 베이비붐세대 남성의 자살예방을 위한 프로토콜을 구성하기 위하여 실시되었다. 연구에 참여한 전문가 패널들은 베이비붐세대 남성들의 심리적 특성과 자살에 대한 지식 및 실무적인 경험을 갖춘 전문인력으로 총 17명이 구성되었다. 조사의 첫 번째 단계는 질문지 문항을 구성하는 단계로 다양한 연구 자료를 활용하여 본 연구에 참여한 정신간호학 교수 2인, 정신전문간호사 2인에 의해 문항이 도출되었다. 2단계는 전문가 집단의 1차 델파이 조사로 2015년 10월 13일부터 11월 1일까지 실시되었으며 3단계인 2차 델파이 조사는 2015년 11월 10일부터 12월 4일까지 실시되었다. 조사 결과 영역I '베이비붐세대 남성의 특성', 영역II '베이비붐세대 남성의 자살징후', 영역III '베이비붐세대 남성의 자살위험요인', 영역IV '베이비붐세대 남성의 자살 보호요인', 영역V '자살예측 측정도구', 영역VI '지역사회연계 기관', 영역 VII '베이비붐세대 남성의 정신건강프로그램' 등 총 7개 영역으로 구성되었다. 본연구는 베이비붐세대 남성들의 자살예방을 위한 가이드라인으로써 지역사회 정신보건 실무자들에게 유용한 자료가 될 수 있을 것이다. Purpose: The purpose of this study was to construct a protocol for the prevention of suicide in male baby boomers. Methods: In order to construct the protocol, a three-step expert consensus process was carried out. The first step was to compose questions based on various research data. For this purpose, two professors of psychiatric mental health nursing and two advanced practitioner nurse of psychiatric mental health in the composition. The second step was to conduct the first Delphi survey on expert panelists. The survey period was from October 13, 2015 to November 1, 2015. The third stage, the second Delphi investigation was conducted from November 10 to December 4, 2015. Results: As a result of the survey, a total of 7 areas of protocol configuration items were derived. The derived items include the characteristics of male baby boomers, suicidal signs, suicide risk factors, suicide protection factors, suicide measurement tools, related organizations, and mental health promotion programs. Conclusion: This study can be used as a guideline when intervening suicide prevention of male baby boomers in community mental health centers.

T Cell 에서의 Lectin 에 의한 Phospholipase C - γ1 Tyrosine 잔기 인산화를 통한 Phospholipase C 의 활성화

김희숙,문경호,이영한,윤두희,류성호,서판길 ( Hee Sook Kim,Kyoung Ho Moon,Young Han Lee,Doo Hee Yun,Sung Ho Ryu,Pann Ghill Suh ) 생화학분자생물학회 1993 BMB Reports Vol.26 No.8

Stimulation of the human T cell line, Jurkat, by the addition of mitogenic lectin activates phospholipase C-γ1(PLC-γ1), generating two second messengers, inositol-1,4,5-trisphosphate and diacylglycerol, from phosphatidyl inositide. To investigate the effect of mitogenic lectins, Jurkat cells were treated with PHA, TRA (one of Trichosanthes radix agglutinins) or Con A. The tyrosine phosphorylation of PLC-γ1 occurred rapidly and reached maximum level less than 0.5 min after PHA stimulation in the presence of orthovanadate. In cells prelabeled with [³H]myo-inositol, PHA quickly but persistently stimulates the formation of [³H]inositol-1,4,5-trisphosphate within 0.5 min after stimulation. Two-dimensional phosphopeptide map analysis revealed that the major sites of tyrosine and serine phosphorylation in PLC-γ1 from stimulated Jurkat cells are the same as those in PLC-γ1 from Jurkat cells treated with antibody to CD3 or A431 cells with EGF. Thus, we suggests that mitogenic lectin-dependent increase in phosphoinositide hydrolysis in Jurkat cells can be occur through the phosphorylation of tyrosine residues on PLC-γ1 by a nonreceptor tyrosine kinase(s) coupled to the TCR-CD3 complex.

속도 독립 회로를 위한 직접 합성 시스템

김희숙,정성태,박희순,Kim, Hui-Suk,Jeong, Seong-Tae,Park, Hui-Sun 한국정보과학회 2001 정보과학회논문지 : 시스템 및 이론 Vol.28 No.2

본 논문에서는 자유 선택 신호 전이 그래프와 비동기 유한 상태기로 기술된 회로 명세로부터 직접 속도 독립 회로를 합성하는 시스템에 대해 기술한다. 기존의 상태 그래프 기반의 합성 시스템은 상태의 수가 지수승으로 증가할 수 있기 때문에 큰 규모의 회로에 대해서는 합성에 실패할 수 있다는 문제점을 가지고 있다. 이를 해결하기 위해 여러 직접 합성 방법들이 제안되었는데, 본 논문의 합성 시스템은 마크드 그래프 분할 방법과 임시 전이의 사용을 허용함으로써 합성할 수 있는 회로의 범위를 넓혔다. 기존의 벤치마크 회로에 대한 실험결과 본 합성 시스템은 기존의 상태 그래프 기반의 합성 시스템에 비하여 현저하게 수행 속도를 단축시킬 수 있었고 기존의 직접 합성 시스템에 비하여 보다 확장된 그리고 보다 실용적인 회로 명세를 처리할 수 있었다.

미생물 세포 기반의 에폭사이드 가수분해효소 활성 측정을 위한 분광학적 분석법 최적화

김희숙,이은열,Kim Hee Sook,Lee Eun Yeol 한국생명과학회 2005 생명과학회지 Vol.15 No.1

다양한 라세믹 에폭사이드 기질에 대한 입체선택적 가수분해 반응을 촉매하는 epoxide hydrolase 활성을 측정할 수 있는 미생물 세포 기반의 자외선 활성 분석법을 최적화하였다. 2.5 mg/ml의 세포 농도에서도 비교적 쉽게 흡광도 변화량을 인식할 수 있는 흡광도 범위인 0.5 이상을 얻을 수 있고, 반응 동력학 분석에도 응용할 수 있었다. 기존의 GC, HPLC 분석 법 보다 분석 시간을 줄일 수 있으며, 효소를 별도로 분리$\cdot$정제하지 않고 미생물 세포 자체의 epoxide hydrolase활성 분석이 가능하므로 상업적 특성이 우수한 epoxide hydrolase을 가진 미생물을 효율적으로 선별하는데 응용될 수 있을 것으로 기대된다. Microbial cell-based UV spectrometric assay for the quantitative measurement of epoxide hydrolase activity was evaluated and optimized for the efficient screening of whole cell activity of novel epoxide hydrolase. Epoxide hydrolase activity was determined by measuring the increase of the oxidized product, benzaldehyde. The effects of the concentrations of phenyl-1,2-ethanediol, sodium metaperiodate and cells were optimized for epoxide hydrolase-catalyzed hydrolysis of styrene oxide. The relevant kinetic parameters of Km and $V_{max}$ for the hydrolysis of (R)-styrene oxide by Rhodotorula glutinis were determined from Lineweaver-Burk plot as 41.2 nmol/min$\cdot$mg dcw and 7.5 mM respectively, and coincided well with those from GC analysis.