Instability of Trp Operon Recombinant Plasmids in E. coli

김성훈,최영철,유두영,이세영,Kim, Sung-Hoon,Choi, Young-Chul,Ryu, Dewey D.Y.,Lee, Se-Yong 생화학분자생물학회 1982 한국생화학회지 Vol.15 No.4

Plasmid pBR322와 ${\phi}80h$-pttrp190 혹은 ColEl-trp으로 부터 분리된 tryptophan operon을 T4 ligase에 의해 결합시켜 E. coil JA221 $r_k{^-}m_k{^+}$ recA ${\Delta}trpE5$에 도입해 ampicillin(50 ${\mu}g/ml$)과 tetracycline (10 ${\mu}g/ml$)을 함유한 Vogel Bonner minimal plate에서 그 recombinant를 선별하였다. 그러나 얻어진 transformant의 성장속도는 매우 느렸으며 그들의 $trp^+$ marker를 매우 빠른 속도로 상실하였다. MV12/pVH5 strain에서 tryptophan 생합성의 host repression sysyem이 indoleacrylic acid에 의해 부분적 derepression을 일으켰을 때 tryptophan operon의 효소 활성은, 가해준 indoleacrylie acid의 농도에 따라 증가하는 반면 pVH5의 안정성은 역으로 감소하였다. 또 이 strain을 glucose를 제한한 배지에서 연속 배양하였을 때 약 30세대가 지난 후부터 $trp^-$ variant가 나타나기 시작했으며 $trp^-$ 부분은 점차적으로 증가하였다. 그밖에 여러 다른 배양조건들로 부터 분리된 $trp^-$ 변종들은 원래의 pVH5에 비해 그 분자량이 증가되거나 감소된 형태의 plasmid를 가지고 있거나 plasmid 전체를 상실하였다. pBR322 and trp operon from ${\phi}80$ trp or ColEl-trp was covalently joined by T4 ligase and introduced into E. coli JA221 $r_k{^-}m_k{^+}$ ${\Delta}trpE5$recA, and the recombinant was selected on the VB minimal plate containing ampicillin (50 ${\mu}g/ml$) and tetracycline (10${\mu}g/ml$), The growth rate of transformants obtained was very low and they lost their $trp^+$ marker very rapidly. In MV12/ pVH5, when host repression system of the tryptophan biosynthesis was partially derepressed with indoleacrylic acid, the enzyme activity of trp operon was increased but the stability of pVH5 was inversely decreased with the concentration of indoleacrylic acid added. In the glucose limited continuous culture of this strain, $trp^-$ variant began to appear after about 30 generations and the $trp^-$ fraction increased gradually. $Trp^-$ cells isolated from cultures grown under various conditions have lost their entire plasmids or arbored modified plasmids which increased or decreased in molecular weight compared to original pVH5.

활혈거어약물(活血祛瘀藥物)이 항혈관신생(抗血管新生)에 미치는 영향(影響)에 관(關)한 연구(硏究)

김성훈,심범상,최승훈,안규석,Kim, Sung-Hoon,Shim, Bum-Sang,Choi, Seung-Hoon,Ahn, Kyoo-Seok 대한암한의학회 2001 大韓癌韓醫學會誌 Vol.7 No.1

Object When angiogenesis is excessive, Cancer, RA, Blindness, Psoriasis, Hemangioma, Diabetic retinopathy, Granulation, etc are induced. On the contrary, when it is insufficient, Stroke, Heart disease, Ulcer, Infertility, Scleroderma, artherosclerosis, delay of the wound recovery, etc occur. In recently, the methods which is control of abnormal angiogenesis are researching actively in relathion to anticancer research. This study is search for effective drugs which suppress this angiogenesis, in the ingredients of the herbs that invigorate and dispel blood stasis using to treat intravascular coagulation in the oriental herbal medicine. Methods We maked 80 % methanole extracts of Cnidii Rhizoma, Olibanum, Myrrha, Corydalidis Tuber, Curcumae Radix, Curcumae longe Rhizoma, Zedoariae Rhizoma, Salviae miltiorrhizae Radix, Polygoni cuspidati Rhizoama, Leonuri Herba, Persicae Semen, Carthami Flos, Trogopterorum Faeces, Achyranthis Bidentatae Radix, Manitis Squama, Eupolyphaga, Hirudo, Tabanus, Lycopi Herba, Artemisiae anomalae herba, Vaccariae Semen, Sappan Lignum, Gleditsiae Spina, Draconis Resina, Leonunari Semen, Selaginelliae Folium, Spatholobi Caulis, and these extracts were tested for MTT viabilaty test, BrdU incorporation, Tube foramtion assay on ECV304(immotalized human umbilical vein endothelial cell) at the concentration of $50{\mu}g/ml$, $100{\mu}g/ml$, $200{\mu}g/ml$, $400{\mu}g/ml$ Results All extracts except Draconis Resina have no cytotoxicity at the $100{\mu}g/ml$, and in BrdU incorporation test, proliferation rate were reduced below 60% at the concentaraion of $100{\mu}g/ml$ by Zedoariae Rhizoma, Sappan, Lignum Gleditsiae, Spina Draconis Resina Vaccariae Semen. Zedoariae Rhizoma Sappan Lignum Gleditsiae Spina Draconis Resina Vaccariae Semen Olibanum, Achyranthis Bidentatae Radix showed inhibition effects on tube formation of ECV304 at the concentration of $100{\mu}g/ml$. Conclusion At the concentration of $100{\mu}g/ml$ in which cytotoxicity is not found, Zedoariae Rhizoma, Sappan Lignum, Gleditsiae Spina, Vaccariae Semen showed the inhibition effect on proliferation and tubeformation of ECV304.

생약복합제제 길경탕 및 가미길경탕의 항암효과 (제 1 보)

김성훈,박경식,유시용,Kim, Sung-Hoon,Park, Kyung-Sik,Ryu, Shi-Yong 한국생약학회 1996 생약학회지 Vol.27 No.1

The prescription, Kilkyungtang (KKT), which originally consists of twelve kinds of medicinal plant materials and was used as a decoction for the treatment of malignant tumors and two modified Kilkyungtangs (KKT-1 and KKT-2), supplemented by the additional crude drug to KKT (KKT-1:Houttuyniae herba, and KKT-2:Oldenlandiae diffusae herba) were investigated on their antitumoral properties, in vivo respectively. All KKTs were found to exhibit significant life time-prolonging effects when they were administered orally to Sarcoma-180 bearing ICR mice for 7 days. (ILS was estimated as 20% in KKT, 42% in KKT-1 and 57% in KKT-2). A profound lessening of tumor weights was also observed when KKTs were administered to $B16-F_0$ bearing C57B/6 mice.

우심증에 동반된 심기형과 임상양상

김성훈,홍승아,조윤정,이상락,권태찬,Kim, Sung Hoon,Hong, Seung A,Cho, Yoon Jung,Lee, Sang Lak,Kwon, Tae Chan 대한소아청소년과학회 2002 Clinical and Experimental Pediatrics (CEP) Vol.45 No.5

목 적 : 저자들은 이차적인 병변으로 인한 우심증이 아닌 환아들에서 그들의 임상양상, 동반 심장 또는 심장외 기형과 예후를 분석하고자 하였다. 방 법: 1996년 1월에서 2001년 7월까지 계명대학교 동산의료원 소아과에서 흉부 방사선 소견상 심장이 우측 흉곽에 위치하였던 환아 중 폐나 흉곽 병변에 의한 우전위를 제외한 24례를 대상으로 하였다. 모든 환아들에게 심에코 검사와 복부 초음파 검사를 시행하였고 필요에 따라 심장 조영술, 염색체 검사를 시행하였으며 이들의 진단 당시의 연령과 임상 증상, 이학적 소견, 동반하는 심기형 뿐 아니라 심장외 기형, 치료 후 예후를 조사하였다. 결 과: 총 24례 중 남아가 17례(79.8%)이었으며, visceroatrial situs로 보았을 때 situs solitus가 7례, situs inversus가 10례, situs ambiguous가 7례이었다. 우심증을 처음 발견한 시기는 생후 7일 이내가 21명(87.5%)으로 대부분을 차지하였다. 진단 당시의 증상으로는 청색증과 심잡음이 각각 11례(45.8%)로 가장 많았고 11례(45.8%)는 증상 없이 우연히 발견되었다. Situs solitus와 inversus의 경우는 우연히 발견된 경우가 증상을 보여 진단된 경우보다 많았으나 situs ambiguous의 경우는 청색증(71.4%) 등의 증상으로 발견된 경우가 많았다. 19례(79.2%)에서 심기형을 동반하고 있었으며 situs solitus와 ambiguous는 전례에서 심기형을 동반하였고 situs inversus는 50%에 서 심기형을 동반하였으며 동반된 심기형 중 폐동맥 협착이나 폐동맥 폐쇄가 12례로 가장 많았다. 심장외 다른 기형이 동반된 경우는 7례(29.2%)로 원선, 비후성 유문 협착증, 요도 하열, 수신증, 다지증, 만곡지 등이었으며 염색체 검사를 시행한 4례는 모두 정상이었다. 총 24례 중 11(45.8%)례는 심기형이나 동반된 다른 선천성 기형으로 사망하였으며, 특히 situs solitus와 ambiguous에서 사망률이 높았다. 결 론 : 우심증의 첫 진단 시기는 1주 이내가 많았고, 이들 중 증상 없이 우연히 발견된 경우도 약 반수로 많았으며, situs solitus와 ambiguous는 동반된 심장기형이 100%로 situs inversus의 50%보다 많았으며 예후 또한 불량하였다. Purpose : The purpose of this study is to ascertain the clinical manifestations and associated cardiac anomalies of dextrocardia. Methods : Twenty-four pediatric patients, who were admitted to, or visited, Dongsan Medical Center Keimyung University and were diagnosed with dextrocardia between January 1996 and July 2001, were enrolled in this study. All patients received echocardiogram and abdominal ultrasonogram to identify structural cardiac anomalies and visceral position. Results : Among 24 patients, 7 cases were situs solitus(29.2%), 10 cases(41.6%) were situs inversus and 7 cases(29.2%) were situs ambiguous. Most were diagnosed within a week of life(87.5%). They were most commonly cyanotic(45.8%), but eleven cases(45.8%) had no specific symptoms or signs. Nineteen cases(79.2%) had accompanied cardiac anomalies, and pulmonary stenosis or atresia were the most common among them. All the cases of situs solitus and ambiguous had associated cardiac anomalies, but half of the situs inversus had that. Eleven cases were dead by cardiac or extracardiac anomalies during follow up and the mortality rate was higher in situs solitus or ambiguous group than situs inversus group. Conclusion : Dextrocardia accompanies different cardiac and extracardiac anomalies. It's very important to diagnose dextrocardia and associated cardiac or extracardiac anomalies in the early stages of life to improve prognosis.

점진적 체중지지와 보행속도 증가 훈련이 뇌졸중 환자의 보행에 미치는 효과

김성훈,최종덕,Kim, Sung-Hoon,Choi, Jong-Duk 대한물리치료학회 2013 대한물리치료학회지 Vol.25 No.5

Purpose: The aim of this study was to evaluate the effect of progressive body weight decrease combined with increasing level of overground walking speed training for patients with chronic stroke. Methods: Eighteen subjects with chronic stroke were composed of the control group (5% body weight support combined with increasing speed training) and the experimental group (progressive body weight decrease with increasing speed training); three sets, three times per week over a period of four weeks. Results: Significant differences in terms of comfortable gait speed (CGS) and the rate of change of CGS were observed between the control and experimental groups (p<0.05). However, no significant difference in the dynamic gait index was observed between the control and experimental groups (p>0.05). A significant difference in the 6 minute walking test (6MWT) was observed for the experimental group, and a significant difference in the rate of change for the 6MWT was observed between the control and experimental groups (p<0.05). Conclusion: The progressive body weight decrease combined with increasing in level of overground walking speed training may be a better and more effective method for community walking and reintegration.

법정지선택합의(法定地選擇合意)와 중재계약(仲裁契約)의 적용범위(適用範圍)

김성훈,Kim, Sung-Hoon 대한경영정보학회 2002 경영과 정보연구 Vol.9 No.-

The purpose of this comparative study is to compare and evaluate international arbitration and forum selection agreements. Recent decades have seen an unparalleled expansion of global trade and investment. Business enterprises of every description ann find themselves entangled in legal proceedings with foreign companies or government entities. Thus, the costs of these proceedings and the consequences of losing are often substantial. Almost, every international commercial controversy poses a critical preliminary question - 'where, and by whom, will this dispute be decided?' the answer to this question often decisively affects a dispute's eventual outcome. It can mean the difference between winning and losing. between de minimis damages and a multimillion dollar award. The same dispute can have materially different outcomes in different forums. Because of the importance of forum selection, parties to international contracts often include contractual dispute resolution provisions in their agreements. These provisions significantly reduce the uncertainties inherent in international commercial disputes, and can offer a substantial measure of partisan advantage. as a consequence, it is almost always advisable to include a contractual dispute resolution provision in any international contract. These provisions typically take the form of : (1) forum selection clauses, or (2) arbitration agreements.

수소 플라즈마 에칭과 탄소 확산법에 의한 다이아몬드막 표면의 평탄화

김성훈,Kim, Sung-Hoon 대한화학회 2001 대한화학회지 Vol.45 No.4

Planarization of the free-standing diamond film surface as smooth as possible could be obtained by using the hydrogen plasma etching with the diffusion of the carbon species into the metal alloy (Fe, Cr, Ni). For this process, we placed the free-standing diamond film between the metal alloy and the Mo substrate like a metal-diamond-molybdenum (MDM) sandwich. We set the sandwich-type MDM in a microwave-plasma-enhanced chemical vapor deposition (MPECVD) system. The sandwich-type MDM was heated over ca. 1000 $^{\circ}C$ by using the hydrogen plasma. We call this process as the hydrogen plasma etching with carbon diffusion process. After etching the free-standing diamond film surface, we investigated surface roughness, morphologies, and the incorporated impurities on the etched diamond film surface. Finally, we suggest that the hydrogen plasma etching with carbon diffusion process is an adequate etching technique for the fabrication of the diamond film surface applicable to electronic devices. 철, 코발트, 니켈 합금을 이용한 탄소확산-수소플라즈마 에칭법으로 다이아몬드 자체막의 표면을 매우 평탄하게 할 수 있었다. 이 방법에서의 다이아몬드 자체막을 합금과 몰리브데늄 기판 사이에 위치시켜 금속-다이아몬드-몰리브데늄(MDM) 샌드위치 형태의 샘플 세 트를 이루게 하였다. 이 샘플세트를 마이크로 웨이브 플라즈마 장치에 장착하여 수소 플라즈마를 발생시켜서 기판온도가 섭씨 1,000 이상이 되도록 하였다. 이와 같은 과정들은 탄소확산-수소플라즈마 방법이라고 하였다. 다이아몬드 자체막 표면을 에칭한 후 표면 거칠기, 표면형상, 에칭한 다이아몬드 표면속의 불순물의 침투를 조사하였다. 결론적으로, 탄소 확산-수소 플라즈마 에칭법은 전자 디바이스에 응용할 수 있는 매우 평탄한 다이아몬드 표면을 형성시키는 방법임을 알 수 있다.

Enhancement of Low Temperature Selective Deposition of Diamond Film

김성훈,Kim, Sung Hoon Korean Chemical Society 2001 대한화학회지 Vol.45 No.3

흡수선량 측정 시 동종 원통형 이온함에서 이온함 간 변화

김성훈,허현도,최상현,김혁주,임천일,신동오,최진호,Kim, Seong-Hoon,Huh, Hyun-Do,Choi, Sang-Hyun,Kim, Hyeog-Ju,Lim, Chun-Il,Shin, Dong-Oh,Choi, Jin-Ho 한국의학물리학회 2010 의학물리 Vol.21 No.1

물흡수선량에 기반한 표준 측정법을 사용하여 흡수선량을 측정 시에 여러 요인들이 크건, 작건, 미미하건 간에 선량 측정의 정확성에 영향을 미칠 수 있다. 이온함의 선질 보정 인자(the beam quality correction factor) ${\kappa}_{Q,Q_0}$ 값 또한 그 중 한 요인이 될 수 있다. 본 연구에서는 특정 이온함 유형(PTW30013, PTW, Germany)을 선정하여, 국내에서 사용하고 있는 기관들로부터 9개의 이온함을 수집하였다. 동일한 전위계와 전기선으로 9개 이온함을 국내 이차표준기관으로부터 교정을 받았다. 이렇게 교정받은 이온함들을 사용하여 Siemens ONCOR 장비의 광자 빔 6 MV와 10 MV 그리고 전자 빔 12 MeV에 대해 기준 조건하에서 흡수선량을 측정하였다. 이온함 간 선량 값의 최대 차이는 광자 빔 6 MV의 경우엔 2.4%, 10MV의 경우에 0.8%, 전자 빔 12 MeV의 경우엔 0.8%이었다. 6 MV에서의 큰 차이는 측정 과정에 문제가 없었다면, 동일한 ${\kappa}_{Q,Q_0}$ 값을 모든 이온함에 적용한 게 한 요인이 될 수 있다. 이는 또한 외부 독립검사가 왜 중요한지를 보여 주는 예라 하겠다. For the measurements of an absorbed dose using the standard dosimetry based on an absorbed dose to water the variety of factors, whether big, small, or tiny, may influence the accuracy of dosimetry. The beam quality correction factor ${\kappa}_{Q,Q_0}$ of an ionization chamber might also be one of them. The cylindrical type of ionization chamber, the PTW30013 chamber, was chosen for this work and 9 chambers of the same type were collected from several institutes where the chamber types are used for the reference dosimetry. They were calibrated from the domestic Secondary Standard Dosimetry Laboratory with the same electrometer and cable. These calibrated chambers were used to measure absorbed doses to water in the reference condition for the photon beam of 6 MV and 10 MV and the electron beam of 12 MeV from Siemens ONCOR. The biggest difference among chambers amounts to 2.4% for the 6 MV photon beam, 0.8% for the 10 MV photon beam, and 2.4% for the 12 MeV electron beam. The big deviation in the photon of 6 MV demonstrates that if there had been no problems with the process of measurements application of the same ${\kappa}_{Q,Q_0}$ to the chambers used in this study might have influenced the deviation in the photon 6 MV and that how important an external audit is.

홍바리, Epinephelus fasciatus의 인공수정 전.후 난문의 미세구조적 변화

김성훈,이치훈,주해성,김형배,이영돈,Kim, Seong-Hoon,Lee, Chi-Hoon,Ju, Hea-Sung,Kim, Hyung-Bae,Lee, Young-Don 한국현미경학회 2011 Applied microscopy Vol.41 No.2

홍바리, Epinephelus fasciatus 난의 인공수정 전 후 난문의 미세구조적 특징을 주사형 전자현미경으로 관찰하였다. 홍바리 난문($6.6{\pm}0.41\;{\mu}m$)은 원통형의 분화구형으로 동물극에 1개가 존재하였다. 난문의 vestibular ridge는 시계방향성을 갖는 6~7개의 나선형의 내벽구조로 구성되었다. 난문의 내벽구조물인 나선형의 vestibular ridge는 인공수정 후 부풀어 올라와 돔(dome)형의 수정구로 분화 형성되었다. 홍바리 난은 부상란으로 난막표면에는 pore 가장자리에 고리형의 nodule과 pore 사이에 돌기형의 nodule이 관찰되었으나, 부착사와 유사한 보조 구조물은 관찰할 수 없었다. 난문 주변부에는 동심원상으로 크기가 다른 pore (0.15~0.55 ${\mu}m$)들이 개구된 형태로 혼재하였고, 수정 후 돔(dome)형의 수정구가 분화 형성되면서 pore들이 닫히는 현상을 보였다. 홍바리 난문의 미세구조적 특징은 바리과 어종간에 형태학적으로 상이하여, 바리과 어류의 계통분류학의 형질로 이용될 수 있다고 판단된다. The micropyles on the prefertilized and artificial fertilized eggs of Epinephelus fasciatus were investigated using scanning electron microscope (SEM). The micropyles ($6.6{\pm}0.41\;{\mu}m$) of E. fasciatus eggs were found in the animal pole and theirs shape were observed as a flat crateriform of cylindrical shape. The micropylar vestibule arranged by 6~7 thickened spiral annuli on the ridge and contributed to differentiate and form fertilization cone for blocking to polyspermy by presenting swollen vestibule structure. As E. fasciatus eggs was pelagic, so chorionic surface was an uneven structures such as circular and fillar form nodules. Especially, various pores (0.15~0.55 ${\mu}m$, 230~270 pores) distributed at the only around micropyles, those pores radiately exhibited regular projection structures showing gill filament-shape. These ultrastructural characters of E. fasciatus eggs can be utilized in a taxonomical cue of grouper species.