Purification and Characterization of $\alpha$-Galactosidase from Escherichia coli

김규원,이현재,Kim, Kyu-Won,Lee, Hyun-Jae 생화학분자생물학회 1983 한국생화학회지 Vol.16 No.1

Raffinose 배지에서 배양한 E. coli세포로 부터 $\alpha$-galactopyrosyl linkage를 가수분해시키는 $\alpha$-galactosidase를 순수 분리 정제하였으며, 얻어진 효소는 disc gel 전기영동 실험에서 단일 단백질 임이 밝혀졌다. 이 효소의 비 활성도는 63.0 units/mg protein으로서 비교적 높은 활성도를 갖고 있었으며 SDS-gel에 의한 전기영동 실험과 침강 원심분리 방법에 의한 침강 속도값의 측청 결과에 의한 분자량 값은 각각 55,000과 240,000 dalton이였는바 이로부터 이 효소의 구조가 tetramer 임을 추측할 수 있었다. 이 효소는 식물의 씨앗이나 동물조직으로 부터 얻은 동종의 효소와 비교해 볼때 상이한 기질 특이성을 갖고 있을뿐 아니라 특히 2-mercaptoethanol과 $NAD^+$ 존재하에서 효소 활성도가 크게 증가된다는 점이 특이하며, 효소 희석에 의한 불활성화 현상도 이 효소의 특이성이라 할 수 있다. 한편 이 효소는 $\alpha$-galactoside의 가수분해 반응뿐 아니라 galactosyl group을 cellobiose나 maltose등에 이전시킬 수 있는 transgalatosylation 반응도 촉진시킴을 알 수 있었다. The $\alpha$-galactosidase($\alpha$-D-galactohydrolase, EC 3.2.1.22) was isolated from the cells of E. coli and purified to physical homogeneity by a combination of ammonium sulfate fractionation, DEAE-cellulose ion exchange chromatography, and molecular sieve gel filtration. The final purified enzyme showed a single band on polyacrylamide disc gel electrophoresis and had a specific activity of 63.0 units per mg protein based on p-nitrophenyl-$\alpha$-D-galactoside (PNPGaI) as the substrate. The apparent molecular weight of the enzyme was estimated to be about 55,000 and 240,000 based on the electrophoretical mobility on dodecyl sulfate gel and she $S_{20,w}$ value of 10.7 S, respectively. This suggests the enzyme has a tetrameric structure in its active form. Its optimum pH was 8.3. The enzyme showed a reversible inactivation by dilution, but such an inactivation could be prevented by the presence of $NAD^+$ and mercaptoethanol. In addition, unlike other known glycosidases, this enzyme required $NAD^+$ and mercaptoethanol as the cofactors for its full activity. The substrate specificity of the enzyme was limited toward $\alpha$-galactopyranosides, and the estimated $K_m$ values for PNPGal, melibiose and raffinose were 2.5 mM, 35.6 mM and 26.2 mM, respectively. It was also demonstrated that the enzyme is capable of transgalactosylation from PNPGal to a limited number of galactosyl acceptor sugars such as cellobiose, maltose lactose and sucrose.

MMS를 이용한 암묵적 모바일 컨텐츠 전송 및 제어 기법

김규원,김문정,엄영익,Kim, Kyu-Won,Kim, Moon-Jeong,Eom, Young-Ik 한국정보처리학회 2009 정보처리학회논문지 C : 정보통신,정보보안 Vol.16 No.4

대부분의 이동통신 단말기는 사용자 간에 멀티미디어 메시지를 송수신할 수 있도록 MMS를 지원한다. MMS는 다양한 이동통신 단말기에 적합하게 설계되었고 이미 무선 환경에서 효과적으로 동작하고 있으므로 MMS를 이용한 모바일 컨텐츠 제공 방법은 효율적일 수 있다. 그러나 이동통신 사업자가 사용자에게 모바일 컨텐츠를 제공하기 위해 기존의 MMS를 그대로 이용하는 방법은 몇 가지 단점을 가진다. 본 논문은 이를 해결한 데이터 전송 및 제어 기법을 제안한다. 제안된 기법은 새로운 프로토콜 설계 없이 기존 MMS 시스템의 일부 소프트웨어적인 수정만으로 사용자들에게 보다 쉽게 모바일 컨텐츠를 제공할 수 있도록 지원하는 장점을 가진다. 또한 이동통신 사업자는 제안된 기법을 통하여 이미 제공한 모바일 컨텐츠를 관리할 수 있기 때문에 모바일 일간 뉴스, 자동 S/W 업그레이드 서비스, 모바일 광고 등 다양한 부가서비스를 제공할 수 있다. 본 논문에서는 시뮬레이션을 통해 MMS를 이용하여 이동통신 사업자 스스로 사용자에게 모바일 컨텐츠를 전송하고 제어할 수 있음을 증명하였다. Almost every mobile phone supports MMS to send and receive multimedia messages among users. MMS is suitable for different types of mobile phones and effectively operates in wireless environments. So the mobile content delivery method using MMS can be efficient. However, there would be some problems if a mobile service provider tries to deliver mobile content to subscribers by using the existing MMS. In this paper, we propose an improved data transmission and control scheme for MMS. Our scheme assists mobile service providers to deliver mobile contents easily by modifying the MMS system software. By using our scheme, mobile service providers are able to manage mobile contents stored in mobile devices. Therefore, they can provide various services such as mobile daily news service, automatic software upgrade service, mobile advertising service, etc. We verify the possibility of the proposed scheme through simulation.

나이트로벤젠다이아조늄 양이온의 화학 및 전기화학 반응을 이용한 실리콘 표면상으로의 단백질 고정

김규원,하크 알-몬술,강현주,Kim, Kyu-Won,Haque, Al-Monsur Jiaul,Kang, Hyeon-Ju 한국전기화학회 2010 한국전기화학회지 Vol.13 No.1

전기화학 반응을 이용한 실리콘 표면상으로의 단백질 고정을 연구하였다. 이를 위해 Nitrobenzendiazonium(NiBD) 양이온을 화학적 환원반응을 통해 수식하고 수식된 실리콘 표면을 전기화학적으로 다시 환원시켜 나이트로 기능기를 일차아민 기능기로 활성화하여 단백질 고정에 이용하였다. 활성화 된 표면에 금 나노입자를 고정하여 일차 아민 생성을 확인하였다. 또한 이 방법을 응용하여 실리콘 나노선 어레이 중 선택된 나노선 만을 활성화하고 단백질을 선택적으로 고정하는 연구를 수행하였다. 이 연구를 통하여 NiBD 양이온의 화학 및 전기화학 반응이 실리콘 나노선 표면으로 단백질의 선택적 고정화에 유용하게 사용될 수 있음을 보였다. The immobilization of proteins on silicon surfaces using electrochemical reaction has been studied. Chemical deposition of nitrobenzendiazonium (NiBD) cations is employed to modify silicon surfaces. Electrochemical reduction of nitro-group to primary amine-group have been conducted on the modified surfaces to activate silicon surfaces for the protein immobilization. Attachment of gold nanoparticles was used to prove the reduction. The current method was applied to selective activation of a silicon nanowire and immobilize proteins on the selected nanowire. It has been demonstrated that the use of chemical and electrochemical reaction NiBD is efficient for the selective immobilization of proteins on silicon nanowire surfaces.

Escherichia coli 로 부터 α - Galactosidase 의 분리정제와 효소특성에 관한 연구

김규원,이현재 ( Kyu Won Kim,Hyun Jae Lee ) 생화학분자생물학회 1983 BMB Reports Vol.16 No.1

The α-galactosidase(α-D-galactohydrolase, EC 3. 2. 1. 22) was isolated from the cells of E. coli and purified to physical homogeneity by a combination of ammonium sulfate fractionation, DEAE-cellulose ion exchange chromatography, and molecular sieve gel filtration. The final purified enzyme showed a single band on polyacrylamide disc gel electrophoresis and had a specific activity of 63.0 units per ㎎ protein based on p-nitrophenyl-α-D-galactoside (PNPGaI) as the substrate. The apparent molecular weight of the enzyme was estimated to be about 55,000 and 240,000 based on the electrophoretical mobility on dodecyl sulfate gel and she s_(20, w) value of 10.7 S, respectively. This suggests the enzyme has a tetrameric structure in its active form. Its optimum pH was 8.3. The enzyme showed a reversible inactivation by dilution, but such an inactivation could be prevented by the presence of NAD+ and mercaptoethanol. In addition, unlike other known glycosidases, this enzyme required NAD+ and mercaptoethanol as the cofactors for its full activity. The substrate specificity of the enzyme was limited toward α-galactopyranosides, and the estimated K_m values for PNPGal, melibiose and raffinose were 2. 5 mM, 35. 6 mM and 26. 2 mM, respectively. It was also demonstrated that the enzyme is capable of transgalactosylation from PNPGal to a limited number of galactosyl acceptor sugars such as cellobiose, maltose lactose and sucrose.

축제를 통한 지역 정체성 운동

김규원(Kyu Won Kim) 한국지역학회 2000 지역연구 Vol.16 No.1

The aim of this thesis is the analysis of phenomena of the public feast movements in the contemporary european cities. At first, I tried to work out on the notion of the identity of group and mechanism of identification in the field of regional movement. I suggest, for better understanding, two streamlines of regional identity movement of conceptional and practical modern french ways and german ways and similar cases of neighbouring countries like Swiss and Belgium, Then I related these regional movements and upcoming anti-rational movement through the recent process of the public feast movement in western Europe. For the examples of real case study, I suggest here actual procedure of three different urban celebrations in Europe; in France, La Feria de Nimes, the carnival of Dunkerque and in Spain, the Merce feast (festa major) of Barcelona. In theses parts, my object is to analyse the influences of regional movement, anti-rationalism, and tourism movement as the constructive elements in held the public feasts on the road and in the urban society, by the analyses of their programmes and procedures. For conclusion, I tried to estimate coming direction of public feasts movements in the urban areas and their influences in the post-modern urban society as a new paradigm in social transformation.

데이터 누적을 이용한 반사도 지역 지도 생성과 반사도 지도 기반 정밀 차량 위치 추정

김규원(Kyu-Won Kim),이병현(Byung-Hyun Lee),임준혁(Jun-Hyuck Im),지규인(Gyu-In Jee) 제어로봇시스템학회 2016 제어·로봇·시스템학회 논문지 Vol.22 No.12

For the safe driving of autonomous vehicles, accurate position estimation is required. Generally, position error must be less than 1m because of lane keeping. However, GPS positioning error is more than 1m. Therefore, we must correct this error and a map matching algorithm is generally used. Especially, road marking intensity map have been used in many studies. In previous work, 3D LIDAR with many vertical layers was used to generate a local intensity map. Because it can be obtained sufficient longitudinal information for map matching. However, it is expensive and sufficient road marking information cannot be obtained in rush hour situations. In this paper, we propose a localization algorithm using an accumulated intensity local map. An accumulated intensity local map can be generated with sufficient longitudinal information using 3D LIDAR with a few vertical layers. Using this algorithm, we can also obtain sufficient intensity information in rush hour situations. Thus, it is possible to increase the reliability of the map matching and get accurate position estimation result. In the experimental result, the lateral RMS position error is about 0.12m and the longitudinal RMS error is about 0.19m.

고강도 와이어로프로 나선보강 된 철근콘크리트 기둥의 유한요소해석

김규원(Kim, Kyu Won),김문겸(Kim, Moon Kyum) 대한토목학회 2013 대한토목학회 학술대회 Vol.2013 No.10

DEA 모형을 활용한 유통사업장 물류 효율성 분석 : 유통기업 H사 사례를 중심으로

김규원(Kim, Kyu-Won),우수한(Woo, Su-Han),강슬아(Kang, Seul-Ah) 한국물류학회 2021 물류학회지 Vol.31 No.3

온라인 유통산업이 급성장하고 유통 채널간의 경쟁이 심화되면서, 물리적 공간이 있는 유통사업장의 효율성을 평가하고 운영및 구조를 개선할 필요가 있다. 특히 유통공급업체로서 제한적인 물류 인프라 및 투입비용으로 유통사업장에 대한 물류 운영 효율성을 평가하고 비효율적인 사업장에 대해서는 개선시켜야할 필요가 있다. 본 연구는 유통기업 H사가 납품하는 4개 그룹 유형별(백화점·아울렛, 마트, 소규모사업장, 식재사업장 편의점) 총 69개의 유통사업장을 대상으로 물류 효율성 분석을 실시하였다. 효율성 분석의 투입 변수는 배송비, 용역비, 차량투입량 총 3가지를 선정하였고, 산출 변수는 정상 매입비율, km당 매출액, 총매출액총 3가지를 선정하였으며, DEA Solver 효율성 측정 분석프로그램을 통해 투입지향 CCR과 BCC, 규모의 효율성(SE), 초효율성(S-E) 모형을 활용하여 H사의 물류 운영 효율성을 분석하였다. 분석결과 첫째, 백화점·아울렛이 상대적으로 효율성이 높은 것으로 나타났다. 둘째, 마트사업장은 대부분의 모형에서 효율성이 낮게 평가되었다. 셋째 소규모 사업장과 식재사업장은 저매출·저비용의특성을 가지고 있어 다소 높은 효율성을 보였으며 베스트 프렉티스 사업장과 비효율적인 사업장이 동시에 존재하고 있다. 본 연구는 유통 채널 내에 기업간 물류활동의 효율성을 측정하였다는 점에서 연구측면의 기여가 있다. 또한 유통기업들도 유통채널의 성과를 더 효과적으로 관리하기 위해서 이 모형을 활용하여 물류활동 효율성을 측정할 수 있을 것이다 Since the competition between online and traditional distribution channels with the rapid growth of the online distribution channel, the performance of retailer shops are evaluated and required to improve based on efficiency. From the perspective of distributors which utilize the limited logistics resources for supply, it is necessary to evaluate the relative efficiency of logistics activities between distributor and retail shops. This study, therefore, evaluates relative efficiency of logistics activities of H distribution company which supplies grocery to 69 retail shops. These shops are categorised into four groups that are department store shops, supermarket shops, small-sized shops, and grocery shops. transport cost, labor cost, the number of vehicles are input variables and purchase size, supply per kilometer, total supply are output variables. Input-oriented analysis is undertaken using DEA Solver with CCR, BCC, Scale efficiency and super efficiency models. The findings are: the department stores shops are the most efficient in the input-oriented BCC model whereas the supermarket shops are the least efficient; small-sized and grocery shops are evaluated efficient due to low cost structure some best practices for other groups; transport efficiency and frequency need to be reconsidered and improved for the groups with low efficiency scores. This study contributed to the literatue by analysing efficiency of activities between companies in the distribution channel. In addition, distribution companies nay use this model to evaluate their logistics efficiency to better manage distribution channels.

저비중 지단백 콜레스테를 농도의 측정에 있어서 Friedwald 공식과 면역분리법을 이용한 직접측정의 비교

김규원 ( Gyu Won Kim ),조병동 ( Byung Dong Cho ),이형석 ( Hyung Seok Lee ),정승현 ( Seung Hyun Jung ),오길찬 ( Kil Chan Oh ),윤장욱 ( Jang Uk Yoon ),백승훈 ( Seung Hun Baek ),유규형 ( Kyu Hyung Ryu ),임종윤 ( Chong Yun Rhim ),조 대한내과학회 2003 대한내과학회지 Vol.64 No.1

배경 : 심혈관계 질환의 위험인자로 알려진 고지혈증에서 저비중 지단백 콜레스테롤을 측정할 때 중성지방치가 400mg/dL 이상인 사람에서는 저비중 지단백 콜레스테롤의 측정에 Friedwald의 공식을 적용할 수 없으므로 면역분리법으로 직접 측정한 저비중 지단백 콜레스테롤과 Friedwald의 공식에 의해 구한 저비중 지단백 콜레스테롤치와 비교하여 직, 간접측정방법간의 차이를 확인하여, 향후 고지혈증 치료시 저비중 지단백 콜레스테롤의 수치를 더욱 정확하고 Background : In 2001, the third report the National Cholesterol Education Program (NCEP) has concluded that LDL cholesterol levels should be a major goal for preventing coronary artery disease and atherosclerotic events. Those in the higher risk groups sh

암과 세포의 분화

김규원 ( Kyu Won Kim ) 한국생화학분자생물학회 (구 한국생화학회) 1988 생화학총설집 Vol.2 No.-