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        배추 Myrosinase의 정제 및 효소학적 특성

        강갑석(Kap-Suk Kang),서권일(Kwon-Il Seo),심기환(Ki-Hwan Shim) 한국식품영양과학회 1995 한국식품영양과학회지 Vol.24 No.4

        배추 myrosinase를 DEAE Bio-Gel, Concanavalin-A Sepharose 및 FPLC Mono-Q 칼럼을 이용하여 분리 및 정제하여 SDS-PAGE 상에서 단일밴드를 확인하였으며, 정제된 효소의 비활성도는 15,120units/㎎, 정제도는 약 21배였으며, SDS-PAGE상에서 분자량은 55KD였다. 배추 myrosinase의 활성 최적 pH는 phosphate 및 Tris-HCl 완충액에서 7.0이었고, pH 6.5~7.0에서 가장 안정하였으며, 활성 최적 온도는 37~38℃였다. 배추 myrosinase에 대한 무기염의 영향을 구리 및 수은 이온은 효소 활성을 매우 저해하며, ascorbic acid의 농도별 영향은 1mM일 때 최대 활성을 나타내었다. Ascorbic acid analogue에 대한 활성은 dehydro-ascorbic acid에 대해서는 거의 없었으며, 나머지 analogue들도 ascorbic acid 보다 상당히 활성이 낮았다. 배추 myrosinase에 대한 환원제의 영향은 2-mercaptoethanol과 dithiothreitol에 의해서는 활성을 나타내지 않았으나, 이들을 ascorbic acid 및 2-mercaptoethanol과 함께 첨가하면 활성을 나타내었다. Myrosinase from Korean cabbage (Bogdoli) was purified and its enzymatic properties were investigated. Myrosinase from the Korean cabbage was purified by DEAE Bio-Gel Sepharose, Concanavalin-A, and Mono-Q column chromatography and exhibited a 55KD molecular weight with a single band on the gel of SDS-PAGE. The enzyme was purified about 21-fold compared to its crude enzyme and a specific activity of purified enzyme was 15,120units/㎎. Optimum pH of the myrosinase was 7.0 in both phosphate and Tris-HCl buffer solutions, the enzyme was stable at pH 6.5~7.0. Optimum temperature of enzyme was 37~38℃. The enzyme activity was significantly inhibited by Cu^(2+) and Hg^(2+), but enhanced by ascorbic acid, resulting in a maximum activity at 1mM ascorbic acid. Among the ascorbic acid analogues, dehydro-ascorbic acid did not affect, whereas others showed a little effect on the enzyme activity, but less than ascorbic acid itself. Reducing agents such as 2-mercaptoethanol and dithiothreitol had no effect on the enzyme activity, but the enzyme activity was enhanced when 2-mercaptoethanol was mixed with ascorbic acid.

      • [산ㆍ학ㆍ연 논단] 소시지의 저장 중 propolis 에탄올 추출물의 첨가효과

        오인석(In-Suk Oh),오동환(Dong-Hwan Oh),조영숙(Young-Sook Cho),강갑석(Kap-Suk Kang),손미예(Mi-Yae Shon),서권일(Kwon-Il Seo) 한국식품영양과학회 2002 식품산업과 영양 Vol.7 No.2

        Propolis 에탄올 추출물(EEP)의 천연 보존제로서의 가능성을 확인하기 위하여 80% 에탄올로 추출하여 제조한 propolis추출물을 소시지에 농도별로 첨가한 후 20℃에서 7일 동안 저장하면서 그 효과에 대하여 조사하였다. EEP가 농도별로 첨가된 소시지의 pH는 저장 기간이 지남에 따라 대조군에 비하여 서서히 증가하는 경향이었으며, 생균수 및 대장균 군수는 저장시간이 지남에 따라 농도 의존적으로 낮게 나타나 항균활성이 있음을 나타내었다. 육제품의 선도 판단의 지표가 되는 TBA가 및 VBN 함량도 역시 EEP 첨가 농도에 비례적으로 감소하여 propolis가 식품의 천연 보존제로서의 가능성이 있음을 강하게 시사하였다. 또한 EEP의 아질산염 소거능은 저장기간이 지남에 따라 첨가 농도에 비례하여 감소하는 경향이었는데, 특히 EEP 5% 첨가 소시지가 가장 효과가 우수한 것으로 나타났다.

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        환경호르몬에 의해 유도된 인체 유방암세포의 증식에 대한 당귀로부터 분리한 Decursin 억제효과

        박경욱,최사라,양희선,조현욱,강갑석,서권일,Park, Kyung-Wuk,Choi, Sa-Ra,Yang, Hee-Sun,Cho, Hyun-Wook,Kang, Kap-Suk,Seo, Kwon-Il 한국식품영양과학회 2007 한국식품영양과학회지 Vol.36 No.7

        당귀로부터 분리한 decursin을 환경호르몬에 의해 증식을 유도한 인체 유방암세포(MCF-7)에 처리한 후 그 억제효과를 조사하였다. 인체 유방암세포주인 MCF-7은 20, 40, 60, 80 및 100 ${\mu}g/mL$ 농도로 decursin의 처리 시 20 ${\mu}g/mL$ 이상에서 농도 의존적으로 그 증식이 억제되었다. 호르몬이 제거된 배지로 배양한 세포에 0, 0.01, 0.1 및 1 ${\mu}M$의 농도로 환경 호르몬 $17{\beta}$-estradiol과 bisphenol을 처리한 결과 호르몬이 제거된 배지로 배양한 세포에 비해 세포의 증식을 유도하였으며, Yamada(21)와 본 실험 결과가 유사한 세포성장을 보여 암세포의 성장억제 효과를 측정하기 위한 환경호르몬의 농도를 0.1 ${\mu}M$로 하였다. 환경호르몬에 의해 증식이 유도된 MCF-7 세포에 당귀 메탄올추출물 및 decursin을 1, 3, 10 및 30 ${\mu}g/mL$ 농도로 처리한 결과 농도에 비례하여 세포의 증식을 억제하였으며, 10 ${\mu}g/mL$의 농도 이상에서는 대조구의 증식보다도 낮은 생존율을 나타내어 강한 세포독성을 나타내었다. 또한 hoechst 염색을 통하여 세포 핵의 변화를 알아본 결과 decursin 처리군에서 핵의 응축과 apoptic body가 관찰되어 decursin은 apoptosis를 유도함으로써 환경호르몬이 처리된 MCF-7 세포의 증식을 억제하는 것으로 판단된다. 이들 결과는 decursin이 환경호르몬에 의해 증식이 유도되는 MCF-7 세포의 성장을 apoptosis에 의해 억제한다는 것을 나타낸다. Anti-proliferation effects of decursin from Angelica gigas Nakai were investigated in the MCF-7 cells treated with environmental hormones. The proliferation was decreased in a dose-dependent manner at the concentration over 20 ${\mu}g/mL$ in the MCF-7 cells treated with decursin of various concentrations. The environmental hormones such as $17{\beta}$-estradiol and bisphenol increased the growth of MCF-7 cells in the charcoal-treated FBS (cFBS) medium and the proliferation was the highest at 0.1 ${\mu}M$ among the tested hormone concentration. Decursin was predicted to inhibit the proliferation in a dose-dependent fashion at tested concentrations (1, 3, 10 or 30 ${\mu}g/mL$) in the MCF-7 cells added environmental hormones; however, the survival rate of the cells was lower than that of control cells that were not treated with decursin at 30 ${\mu}g/mL$ concentration. The chromatin condensation and apoptotic body were examined in the decursin treated cells cultured with the cFBS medium added environmental hormones. These results suggest that decursin decreased the proliferation through apoptosis in the MCF-7 cells added environmental hormones.

      • SCOPUSKCI등재

        포도과피 Anthocyanin 색소의 분리 및 안정성

        심기환(Ki-Hwan Shim),강갑석(Kap-Suk Kang),최진상(Jine-Shang Choi),서권일(Kwon-Il Seo),문주석(Ju-Seok Moon) 한국식품영양과학회 1994 한국식품영양과학회지 Vol.23 No.2

        우리나라에서 대량으로 폐기되고 있는 포도과피를 이용하여 천연색소인 anthocyanins을 분리, 동정하고 그들의 이화학적 특성을 조사한 결과는 다음과 같다. 분리한 색소형은 11종으로서 3,5-DG 계열이 5종, 3-MG 계열이 6종이었으며, 그 중 acyl화 색소가 2종이었다. 11종의 anthocyanins중 malvidin계가 각각 2종, cyanidin계가 1종이었다. 그리고 malvidin-3,5-diglucoside와 peonidin-3,5-diglucoside가 총 anthocyanins 114.99㎎/g 중 48% 이상이었다. pH가 중성에 가까워질수록 색소의 파괴가 많았으며, 7일까지의 저장기간에는 안정하였다. 포도과피의 색소액의 각종 당을 첨가하였을 때 농색화현상은 glucose가 가장 높았으며, fructose, sucrose순이었다. 색소액에 ascorbic acid를 첨가하였을 경우 anthocyanins의 파괴 속도가 빨랐으며, 산소를 제거하였을 경우에는 파괴 속도가 둔화되었다. 유기산의 첨가에 의하여 대조구보다 높은 흡광도를 유지하였으며, 7일간의 저장기간에도 안정하였다. Anthocyanins were isloated and identified from grape peels which were wasted much in Korea, and their characteristics were as follows. Isolated pigments from grape peels were 11 varieties such as 5 varieties of 3,5-diglucoside(DG), 6 varieties of 3-monoglucoside(MG), and acylated pigment was 2 varieties of them. Malvidin was 4 varieties, petunidin, peonidin and delphinidin 2 varieties in each, and cyanidin 1 variety of 11 varieties. Malvidin-3,5-diglucoside and peonidin-3,5-diglucoside of anthocyanins were above 48% in total anthocyanins content of 114.99㎎/g in dried skins. Breakdown of anthocyan ins was higher become intimate neutral pH, but stable to storage period for 7 days. Hyperchromic effects were showed when sugars were added in pigment extract of grape peels, the highest value was glucose and the next ordor was fructose and sucrose. Breakdown velosity of anthocyanins was higher when ascorbic acid was added, but its velosity was reduced in anaerobic state. Absorption degree by organic acid treatment was higher than control, and anthocyanins were stable to storage period for 7 days.

      • KCI등재

        산수유 에탄올 추출물의 Sarcoma-180 세포에 대한 항암 효과

        권승혁(Seong-Hyuk Kwon),권순재(Soon-Jae Kwon),김재용(Jae-Yong Kim),강갑석(Kap-Suk Kang),심기환(Ki-Hwan Shim),이미경(Mi-Kyung Lee),서권일(Kwon-Il Seo) 한국식품영양과학회 2010 한국식품영양과학회지 Vol.39 No.7

        산수유를 항암 식품 소재로 활용하기 위하여 sarcoma-180 암세포에 대한 산수유 에탄올 추출물의 증식 억제 및 마우스에서의 수명 연장효과를 검토하였다. 산수유 에탄올 추출물을 10, 100, 300 및 500 ㎍/㎖ 농도로 24, 48 및 72시간 별로 sarcoma-180 암세포에 처리하여 암세포 증식억제 효과를 측정한 결과, 농도 및 시간 의존적으로 억제하였으며, 500 ㎍/㎖ 농도에서 48시간 배양 시 60% 이상의 높은 암세포 증식 억제 효과를 나타내었다. 산수유 에탄올 추출물을 100 ㎍/㎖ 농도 이상으로 처리한 암세포에서는 대조군의 증식이 감소되었으며, 형태학적 변화도 관찰되었다. 또한 산수유 에탄올 추출물은 농도 의존적으로 핵을 응축하고 apoptotic bodies를 생성하였으며, 300 및 500 ㎍/㎖의 농도 에서는 DNA fragmentation을 유도하였고 이러한 apoptosis 유도는 caspase-3 활성과 관련이 있었다. 산수유 에탄올 추출물을 sarcoma-180 암세포가 접종된 마우스 복강에 7일간 100 및 300 ㎎/㎏/day의 농도로 연속적으로 투여하였을 때, 산수유 투여군의 수명이 대조군에 비하여 증가되었다. 따라서 이 결과를 종합하여 볼 때 산수유는 암 예방 기능성 소재로서 활용이 가능하리라 생각된다. To develop Corni Fructus as a cancer preventive food material, the in vitro cytotoxicities and in vivo antitumor activities of various concentrations of 80% Corni Fructus ethanol extract (CFEE) were investigated using sarcoma-180 cancer cell. Viability was decreased and cell death rate was increased in both dose- and time-dependent manners in cells treated with CFEE at 10, 100, 300, and 500 ㎍/㎖ concentrations for 24, 48, and 72 hr. Proliferation was also inhibited more than 60% in cells treated with CFEE at the 100 ㎍/㎖ concentration for 48 hr. In addition, the morphology of cells treated with CFEE at the 100 and 500 ㎍/㎖ concentrations was distorted with shrunken cell masses and lower cell numbers compared to the control cells. In the cells treated with CFEE, the formation of apoptotic bodies and nuclear condensation were observed in dose dependent manners. CFEE also increased DNA fragmentation values at the 100 and 500 ㎍/㎖ concentrations. The apoptosis induced by CFEE was connected to the proteolytic activation of caspase-3. When CFEE was administered at 100 and 300 ㎎/㎏, ip, for 7 consecutive days in mice inoculated with sarcoma-180 cancer cell, the life span of the mice was found to be longer than that of the control mice that did not receive the extract. These results suggest that Corni Fructus may be used as a potential cancer preventive food material.

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