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      • 사람중성구 Cathepsin G의 분리와 Anti-Human Cathepsin G Antibody의 in vivo 합성 및 분리

        배성준,김사열,강구일 고신대학교 의학부 1989 高神大學校 醫學部 論文集 Vol.5 No.1

        Human neurtrophil cathepsin G was purified by two step procedure involving ultrogel AcA54 gel filtration and CM-Sephadex ion exchange chromatography. Highly purified human neutrophil cathepsin G was injected to rabbit for in vivo synthesis of anti-human cathepsin G antibodies. For purificaion of Ab, precipitation by ammonium sulfate, DEAD-cellulose ion exchange chromatography and CNBr-activated sepharose 4B affinity chromatography was applied Purified Antibodies detected by immumoprecipitation showed specificity against human neutrophil cathepsin G but not human neutrophil elastsae.

      • 사람 cytidine deaminase 유전자의 발현조절

        이영선,정해숙,김사열 안동대학교 기초과학연구소 1998 基礎科學 硏究論文集 Vol.9 No.1

        Cytidine deaminase(CDD)는 cytidine 또는 cytidine 유사 화합물을 탈 아미노화하는 효소로서, 백혈구, 간, 태반 등의 정상적인 조직과 각종의 암세포에서 발현된다. 암환자 또는 암세포에 cytidine 유사 화합물을 투여하면, CDD의 활성이 증가된다. Cytidine 유사화합물인 ARA-C 또는 5-AZA-CdR를 대장암 세포주인 Colo 201세포에 투여하였을 때, CDD 전사체의 발현이 증가되는 것이 관찰되었다. 그러므로 CDD 활성의 증가는 전사량의 증가에 의한 것으로 추정되었다. CDD 유전자의 전사 조절 부위를 연구하기 위해서 CDD 유전자의 genomic DNA를 클로닝하여 분석하였다. 프로모터 부위에 CAT 유전자를 연결한 후, deletion 분석방법으로 발현조절 부위를 조사하였다. 프로모터 부위 중, CDD 전사체 발현 조절부위는 167~-7로 나타났다. 167~-7는 cytidine 유사화합물에 의한 전사체발현 증가에도 관계하는 조절부위로 나타났다. 이 부위에서는 TEIID, Sp1, NF-1 또는 c-Fos/c-Jun 등의 전사조절 단백질이 결합할 수 있는 염기서열부위들이 발견되었다. Cytidine deaminase (CDD) is the enzyme which deaminase cytidine or deoxycytidine to undine or deoxyuridine. Cytidine analogues, such as ARA-C or 5-AZA-CdR, which was used as antitumor drugs, also can be used as substrate of CDD. Treatment with cytidine analogues as antitumor agents needed to decrease the level of CDD activity since the level of CDD was increased after treatment and the deamination of cytidine analogues by CDD resulted in a significant loss of antitumor activity. To study the regulation of CDD activity, the regulatory region for trancription of human CDD gene was cloned and analysed. The positive regulatory region of the CDD promoter was -162 to -7. This region of promoter was also responsible for the enhanced transcription by cytidine analogues. TATA, CAAT or GC box were not found in the CDD promoter, but the elements for TFIID, Sp1 or c-Fos/c-Jun and PuF were found in the positive regulatory region. Further study of this region may identify the inducing transcriptional factor(s).

      • INHIBITION OF HUMAN NEUTROPHIL ELASTASE BY DIFFERENT CLASSES OF ANTIBIOTICS

        Sa-Youl Ghim,강구일 고신대학교(의대) 고신대학교 의과대학 학술지 1988 고신대학교 의과대학 학술지 Vol.4 No.1

        사람의 혈액에 있는 호중구 엘라스테이즈에 관한 연구의 진척은, 약물로 사용가능한 생체내 혹은 사용가능한 생체내 혹은 인공합성의 저해제 개발을 동반해 오고있다. 정제된 호중구 엘라스테이즈에 12종의 항생제를 처리하였더니 20mM 미만의 IC₅₀을 보인 것은 oxytetracycline, cefamandole, gentamicin, amikacin, cloxacillin, methicillin, chloramphenicol 등이었고, 10mM 농도에서 50% 이상의 저해율을 나타낸 것은 methicillin, cefamandole, oxytetracycline 등이었다. 그 결과는 세포벽 합성이나 단백질 합성을 저해하는 일반적 항생제의 약리학적 기전과는 다른 차원에서 항생제가 숙주의 조직을 보호할 수 있는 가능성을 보여준 모델이 존재한다는 것을 in vitro 실험에서 확인할 수 있었다.

      • Regulation of Expression of the Bacillus caldolyticus Pyrimidine Biosynthetic Operon by pyrR Gene, an Autogenous Regulator

        Ghim, Sa-Youl Korean Society of Life Science 2001 Journal of Life Science Vol.11 No.2

        The pyrR gene of the pyrimidine biosynthesis (pyr) operon of the thermophile Bacillus caldolyticus, encoding a uracil phosphoribosyltransferase (UPRTase), turned to rely as a pyr operon regulator. It has been proposed that PyrR mediates transcriptional termination-antitermination at three intercistronic regions of the par operon (S.-Y Ghim and J. Neuhard, J. Bacteriol.,176, 3698-3707, 1994). In this research, a plasmid carrying the pyrR region of B. caldolyticus could restore a pyrimidine regulation in a pyrR mutant of B. subtilis. Expression of pyrR was found to increase 6-7 fold during pyrimidine starvation. Additionally, a highly conserved nucleotide sequence which may constitute the binding site for a PyrR protein (PyrR-binding loop) in transcript was staggested. Alternative antiterminator and terminator structures involving three conserved motifs in front of the pyrR, pyrP and pyrB genes, respectively, are proposed to account for the observed regulation pattern.

      • RAPID PURIFICATION AND MOLECULAR CHARACTERIZATION OF HUMAN NEUTROPHIL ELASTASE

        Ghim, Sa-Youl,Bae, Sung Jun,Kang, Kooil 고신대학교 의학부 1989 高神大學校 醫學部 論文集 Vol.5 No.1

        Elastase에 의해 야기되는 질병의 예방 및 치료 응용을 위하여는, 먼저 이 효소가 고순도로 분리되고 그 근본적인 성질의 해명이 이루어져야 한다. 고순도의 elastase를 얻기위해, 사람의 전혈로부터 Hypaque-Ficoll step gradient에 의해 순수한 neutrophil을 얻은 다음 이것을 extract로 만들어 액체크로마토그래피를 실시하였다. Ultrogel AcA54 gel filtration을 거친 후 CM-sephadex 이온교환 크로마토그래피를 적용하였는데, 이때 유출 완충액 속에 0.1% Brij 35를 첨가하여 elastase의 순도를 더욱 높일 수 있었다. 이 정제된 elastase는 SDS-PAGE를 통해 MW 28,000, 29,000, 30,000의 서로 다른 3개 의 밴드로 확인되었으며, 그간 수많은 연구자들간에 elastase의 분자량에 대해 심한 견해 차이를 보여온 것은 그 분자적 성질이나 분자량이 유사한 cathepsin G가 혼재하거나 elastase분자내 혹은 분자간 S-S결합의 차이에 의함을 알 수 있었다.

      • INHIBITION OF HUMAN NEUTROPHIL ELASTASE BY DIFFERENT CLASSES OF ANTIBIOTICS

        Ghim, Sa-Youl,Kang, Kooil 고신대학교 의학부 1988 高神大學校 醫學部 論文集 Vol.4 No.1

        사람의 혈액에 있는 호중구 엘라스테이즈에 관한 연구의 진척은, 약물로 사용가능한 생체내 혹은 인공합성의 저해제 개발을 동반해 오고 있다. 정제된 호중구 엘라스테이즈에 12종의 항생제를 처리하였더니 20mM 미만의 lC_(50)을 보인 것은 oxytetracycline, cefamandole, gentamicin, amikacin, cloxacillin, methicillin, chloramphenicol 등이었고, 10mM 농도에서 50% 이상의 저해율을 나타낸 것은 methicillin, cefamandole, oxytetracycline 등이었다. 그 결과는 세포벽 합성이나 단백질 합성을 저해하는 일반적 항생제의 약리학적 기전과는 다른 차원에서 항생제가 숙주의 조직을 보호할 수 있는 가능성을 보여준 모델이 존재한다는 것을 in vitro 실험에서 확인할 수 있었다.

      • SCOPUSKCI등재
      • KCI등재

        독도 주변의 해수에서 분리한 세균의 다양성과 군집구조 분석

        김사열 ( Sa Youl Ghim ),성혜리 ( Hye Ri Sung ) 한국미생물생명공학회 ( 구 한국산업미생물학회 ) 2010 한국미생물·생명공학회지 Vol.38 No.3

        독도 연안에 존재하는 배양 가능한 미생물의 다양성을 16SrRNA 분석으로 조사하였다. 동도 선착장 주변과 서도 숙소 부근을 중심으로 채취한 시료에서 163개의 해양 미생물을 분리하였다. 분리한 미생물 163종을 16S rRNA 염기서열의 분석을 이용하여 부분동정 할 수 있었다. 부분동정된 미생물은 gamma-proteobacteria(58%), alpha-proteobacteria (20%), bacteriodetes(16%) 계통이 대부분을 차지하고 있었고, 그 외에도 low G+C Gram positive bacteria와 epsilonproteobacteria가소수 동정 되었다. 염기서열이 분석된 미생 물들은 이전에 보고된 미생물들의 16S rRNA 유전자와 93.3%에서 100%의 유사도를 보이며 56속 94종으로 부분 동정되었다. 163종의 부분 동정된 미생물 중 36개의 분리 미생물이 새로운 종으로 분류될 후보군으로 추정되었다. 본 연구의 결과 독도연안 바닷물에는 proteobacteria와 bacteriodetes의 비율이 높게 나타났고, 미생물 다양성을 높게 유지하고 있었다. 이 다양한 미생물로부터 다양한 유용미생물 자원을 확보할 수 있고, 새로운 종으로 분류될 후보군 들은 추후 여러 생리생화학적 실험을 수행하여 새로운 종 또는 새로운 속으로 발표할 수 있을 것으로 판단된다. One hundred sixty three strains showing different colony morphological characteristics on different concentration of marine agar (MA) plates were isolated from ambient seawater near Dokdo island. Bacterial diversity and distributions were studied by phylogenetic analysis of the partial 16S rRNA gene sequences. One hundred sixty three strains were partially sequenced and analyzed phylogenetically. They were composed of 5 phyla, of which gamma-proteobacteria (58%), alpha-proteobacteria (20%), bacteriodetes (16%) were predominant. They were affiliated with 90 species. The 16S rRNA sequence similarity of the isolates was in 93.3 to 100 % range to reported sequence data. Thirty six isolates of among them were assumed to be novel species candidates based on similarity analysis of the 16S rRNA gene sequences. Overall, Proteobacteria and Bacteriodetes of the Dokdo coastal sea water showed a high diversity.

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