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방선균 분리주가 생산하는 Phospholipase C 저해물질인 MT2617-2B의 분리 및 특성
고학룡,이현선,오원근,안순철,김보연,강대욱,민태익,안종석 한국미생물생명공학회 ( 구 한국산업미생물학회 ) 1996 한국미생물·생명공학회지 Vol.24 No.1
방선균 분리주 MT2617-2의 배양액으로 부터 phospholipase C (PLC) 저해물질인 MT2617-2B를 n-butanol 추출 및 column chromatography 법을 이용하여 분리하였다. MT2617-2B는 IR ^13C- 및 ^1H-NMR 그리고 ESI-MS에 의한 구조분석 결과, 한 개의 hemiketal ring, polyhydroxyl 및polymethyl groups으로 구성되었으며 side chain으로 한 개씩의 malonate 및 guanidine group을 가지는 분자량 1057의 macrolide 화합물이었다. 따라서, MT2617-2B를 기존의 macrolide 항생제인 copiamycin 및 niphithricin A로 동정하였다. 한편, MT2617-2B는 methanol 용액에서 실온에서 방치하였을 때 도일한 분자량을 가진 두 개의 이성질체를 생성하였다. PLC γ1과 -β1에 대해 각각 25 및 50㎍/㎖의 IC_50 값을 가지며, Staphylococcus aureus 와 Candida albicans에 대해서는 항균활성을 나타내지만 Escherichia coli에는 나타내지 않았다. A phospholipase C (PLC) inhibitor (MT2617-2B) was isolated from the culture broth of actionmycetes isolate MT2617-2 by the extraction with n-butanol and column chromatographic techniques. The molecular weight of the inhibitor was 1057, by the spectroscopic analyses of IR ^13C- and ^1H-NMR and ESI-MS. The chemical structure of MT2617-2B was found to be a macrolide compound consisted of a hemiketal ring, polyhydroxyl and polymethyl groups, which had a malonate and guanidine group as its side chain. MT2617-2B produced its two isomers having the same molecular weight by standing in methanol solution at room temperature. Therefore, MT2617-2B was identified as copiamycin and niphithricin A, macrolide antibiotics. The values of IC_50 against PLC γ1 and PLC-β1 were 25 and 50㎍/㎖, respectively. MT2617-2B had antimicrobial activities against Staphylococcus aureus and Candida albicans, but not against Escherichia coli.
김치유래 젖산균의 균체지방산 분석을 이용한 분류학적 연구
이정숙,정민철,김우식,이근철,김홍중,박찬선,이헌주,주윤정,이근종,안종석,박완,박용하,민태익 한국미생물생명공학회 ( 구 한국산업미생물학회 ) 1996 한국미생물·생명공학회지 Vol.24 No.2
표준균주를 포함한 230여개의 김치유래 젖산균에 대한 균체지방산(FAMEs)을 분석하였다. FAMEs profiles는 Euclidian Distance 17.5에 의해 7개의 Major Cluster와 1개의 Single Cluster로 나뉘어졌다. 이중 A, B, C 및 Cluster는 Leuconostoc속으로 분석되어졌고, F는 Lactobacillus속으로 분석되어졌다. 그리고 E와 G cluster는 두개의 Genus가 혼재되어 나타났으며 보충적인 연구가 필요하다. 앞으로 김치유래 젖산균의 균체지방산 분석결과를 기반으로 한 데이타베이스에 95가지 탄소원을 이용하는 수치분류학적 접근방법 및 Pyrolysis Mass Spectrometry 등의 화학적 분석 방법과 분자친화적 연구를 통한 종합적 분류정보 체계가 갖추어지면 젖산균의 신속, 정확한 동정 및 연구에 활발히 이용되어질 것이다. Two hundreds and thirty lactic acid bacteria, mostly isolated from Kimchi, including type strains were sued for analysis of cellular fatty acids. The 230 test strains were recoverd in 7 major and 1 single clusters defined a Euclidian distance of 17.5. These aggregate taxa were equivalent to the genus Leuconostoc (aggregate group A, B, C and D), and the genera Leuconostoc and Lactobacillus (aggregate group G). It is concluded as evident that FAMEs (Fatty Acid Methyl Esters) profile of cell can be used as a criterion in classification of lactic acid bacterial from kimchi. Additional comparative taxonomic studies need to be carried out on well chosen representative strains to determine the most appropriate methods of value.
Ahn, Jong-Seog,Hwang, In-Kyu,Jeong, Min-Sun,Mheen, Tae-Ick 한국미생물 · 생명공학회 1989 한국미생물·생명공학회지 Vol.17 No.6
For the purpose of improving glucoamylase productivity of Saccharomyces diastaticus, useful yeast in direct ethanol fermentation of starch, the effects of growth rate on the plasmid stability and glucoamylase productivity of S. diastaticus harboring recombinant plasmid pYES 18 containing glucoamylase gene STA 1 were investigated. In a selective medium, the recombinant plasmids were maintained stably at constant level but glucoamylase productivity was very low. On the other hand, in the complex medium containing starch, growth rate of the cell was stimulated by the supplementation of glucose and plasmid stability was improved by growth stimulation. We can conclude that glucoamylase productivity of S. diastaticus harboring the recombinant plasmid was increased as the maintaining of high plasmid stability in the cell. 전분질의 에탄을 직접발효에 유용한 Saccharomyces diastaticus의 glucoamylase 생산성 향상을 위하여 glucoamylase 유전자 STA1을 함유한 재조합 plasmid pYES 18을 갖는 S. diastaticus의 형질전환 균주에서 성장속도가 plasmid의 안정성에 미치는 영향과 plasmid 안정성에 따른 glucoamylase 생산성을 조사하였다. 최소 선택배지에서는 plasmid가 일정한 수준에서 안정하게 유지되었으나, 균체의 증식과 glucoamylase 생산성은 매우 미약하였다. Starch가 포함된 완전배지에서는 glucose를 첨가해 줌으로써 생육속도를 촉진시킬 수 있었으며 생육속도의 촉진에 의해 plasmid 안정성이 증가되었고 이에 따라 glucoamylase 생산성이 향상됨을 알았다.
방선균 분리주 No. 2007-18이 생산하는 Protein Kinase C 저해물질, MT-2007
안종석,박문수,안순철,박찬선,오원근,윤병대,이현선,민태익 한국산업미생물학회 1993 한국미생물·생명공학회지 Vol.21 No.1
미생물 대사산물로부터 phorbol ester에 의해 유도되는 K562 세포 표면의 소포형성 및 Protein kinase C(PKC)에 대한 저해제를 탐색하여 방선균 분리주 No. 2007-18로부터 용매추출 및 크로마토그래피의 기법을 이용하여 MT-2007을 분리하였다. MT-2007는 503.9 μM의 농도에서 phorbol 12,13-dibutylate에 의해 유도된 K562 세포표면의 bleb 형성을 완전히 저해하였고, PKC 효소의 IC_50값은 31.4 μM이었다. MT-2007의 구조는 물리·화학적 성질과 UV, IR, MS, ^1H-NMR에 의해서 lasalocid A sodium salt로 동정하였다. During the screening of inhibitors against protein kinase C(PKC) and the bleb formation of K562 cell induced by phorbol ester from microbial secondary metabolites, MT-2007 was purified by solvent extraction, and chromatographic techniques from Actinomycetes isolate No. 2007-18. It showed completely suppression of bleb formation of K562 cell surface induced by phorbol 12,13-dibutylate at the concentration of 503.9 μM and IC_50 on PKC was 31.4 μM. Its structure was postulated as lasalocid A sodium salt by physico-chemical properties and UV, IR, MS, ^1H-NMR.
방선균 분리주 No. 1882-5로부터 Phorbol ESter에 의해 유도되는 K562 Cell의 소포형성을 억제하는 물질의 분리와 동정
안종석,안순철,이현선,박문수,오원근,김보연,민태익 한국산업미생물학회 1992 한국미생물·생명공학회지 Vol.20 No.5
Phorbol ester에 의해 유도되는 K562 cell의 소포 형성을 저해하는 물질을 생산하는 방선균 분리주 No. 1882-5를 토양으로부터 분리하였다. 분리주 No. 1882-5로부터 용매추출, Amberlite XAD-4, silica, Lobar low pressure LC를 거쳐 항진균 활성물질 MT 1882-Ⅰ과 K562 cell의 소포형성을 억제하는 활성물질 MT 1882-Ⅱ를 분리하였다. 이 물질들에 대한 이화학적 성질의 조사와 UC, ^1H-NMR, ^13C-NMR, mass spectrum의 분석에 의하여 MT 1882-Ⅰ은 piericidin A_1(C_25H_370_4N, MW 415), MT 1882-Ⅱ는 glucopiericidin A(C_31H_470_9N, MW 577)로 동정하였다. We isolated Actinomycetes strain No. 1882-5, which produces the inhibitor on the bleb formation of K562 cell induced by phorbol ester, from soil sample. Through solvent extraction, Amberlite XAD-4, silica and Lobar low pressure LC, antifungal antibiotic MT 1882-I and bleb forming inhibitor MT 1882-Ⅱ were purified from strain No. 1882-5. MT 1882-Ⅰ was identified as piericidin A_1(C_25H_37O_4N, M.W.415) and MT 1882-Ⅱ as glucopiericidin A(C_31H_47O_9N, M.W.577) from the analysis of physico-chemical properties and UV, ^1H-NMR, ^13C-NMR, and mass spectra of these compounds.