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한수곤,최인영,강찬호,고복래,최정식,이왕휴,Han, Soo-Gon,Choi, In-Young,Kang, Chan-Ho,Ko, Bok-Rai,Choi, Joung-Sik,Lee, Wang-Hyu 한국식물생명공학회 2006 식물생명공학회지 Vol.33 No.1
저온저항성 BN115 gene과 표지유전자로서 kanamycin에 저항성 있는 nptII gene을 가지고 있는 식물발현용 binary vector pBin19/BNl15가 도입된 A. tumefacience MP90을 국화잎과 공동배양 하였다. 또한 particle bombardment를 이용하여 목적으로 하는 유전자가 식물체에 안정적으로 도입되어 발현됨을 PCR 및 Real-Time PCR 검정으로 확인하였다. 국화잎과 공동배양에 사용된 Agrobacterium은 $5.0{\times}1.0{\mu}m$로 non-sporing, motile, rod 형이며, Callus는 pin이나 cork-borer에 의해 상처 난 잎 가장자리로부터 형성되어 식물체가 재분화 되었다. 유전자 도입조건은 Agrobacterium을$O.D._{600}{\approx}0.5$에서 20분간 공동배양 할 때, Particle bombardment는 helium 압력을 1,100 psi, target 거리를 9 cm로 유지했을 때, 가장 효율이 높았다. 5mg/L kanamycin이 들어 있는 배지에서 선발된 형질전환체는 PCR 분석으로 형질전환여부를 판별할 수 있었으며, 선발 10개체 중 9개체에서 purified pBN115와 같은 크기의 밴드가 형성되었다. Taq-Man probe를 이용한 Real-Time PCR 결과 $45{\sim}0.00045ng/{\mu}{\ell}$ 범위에서 pBN115 gene을 10배씩 serial dilution한 amplification plot는 일정한 간격으로 standard curve를 보였으며, slope는 -3.313975, R2는 0.998319이었다. Amplification plots의 형질전환체 $C_T$값은 $20.75{\sim}33.81$범위였으며, 유전자 copy수는 정량분석을 기초로 산출하였다. pBN115의 plasmid DNA를 serial dilution했을 때, standard는 $5.6{\times}10^{10}/45ng{\sim} 5.6{\times}10^5/0.00045ng\;copies/{\mu}{\ell}$이 었으며, 형질전환체는 $3.86{\times}10^8{\sim}12565.71 copies/{\mu}{\ell}$이었다. 따라서 PCR, Real-Time PCR 분석 결과 저온저항성 유전자가 국화의 genome에 안정적으로 도입되었음이 확인되었다. With the use of Agrobacterium and gene-gun, cold regulated gene (BN115) has been injected in Chrysanthemum leaf disc and transgenic plants have been produced successfully on the selection media containing phytohormone. To determine the presence of the transferred cold regulated gene (BN115) in the transgenic Chrysanthemum, PCR-amplification indicated the presence of that gene. Real-Time PCR for confirmation of the putative transgenic plants was established. The copy number of cold regulated gene (BN115) is extrapolated on the basis of a standard curve. Serial dilutions of known number of gene copies were in triplicates. In this diagram, PCR cycles are plotted against the fluorescence intensity. The cycle at which the fluorescence reaches a threshold cycle is inversely proportional to the starting amount of target DNA.
한수곤,강찬호,최인영,임회춘,이진재,오남기,최정식,최소라 한국자원식물학회 2008 한국자원식물학회지 Vol.21 No.2
Nerinefrom south africa and its sparkling flower shape make us estimate it as a hopeful kind of cut follow.There was a few studies on Nerinein korea. We started this study to set bulb propagation methods. The propagation bylot of Bulblet was NAA 00.5 + BA 0.52.0mgL-1 in Nerine bowdenii‘Favourite’and Nerine sarniens‘Red’respectively. The adjust culture media source for tissue culture were glucose 9% as a carbon source and (NH4+NO3)40mM as a nitrogen source. When glucose was used as a carbon source, Bulblet were harvested a little bit low thennerinetissue culture. When weconsist culture media as MS+BA 1.0mgL-1 + sucose 7% + (NH4+NO3) 40mM, the produced Bulblet were reached up to1.7 each per bulb and emergence rate was up to 100% irrespective of acclimatization period. The suitable culture explantfor nerinetissue culture was scale. When scale was cultured with MS+BA 1.0mgL-1+sucose 7%, its propagationefficiency was 54 times greater than using growing point. A proper culture part of the scaly leaf was middle part (8 scalyleaf from outer 8th scaly leaf) when middle part was cultured the number of Bulblet were up to 1.8 each per explant.
한수곤,최정식,문영훈,엄미정,김갑철 한국환경농학회 2000 한국환경농학회지 Vol.19 No.2
동진강 수계의 수질현황을 파악하기 1994∼1998년 까지 4∼9월에 월 1회에 걸쳐 5개년간 조사한 결과를 요약하면 다음과 같다. 월별로는 빗물에 의한 희석효과로 7, 8월에 수질이 가장 양호하였으며, 4월이 다소 불량하였으나 수도생육 피해 한계농도에는 미치지 못하는 수준이었다. 지점별 수질현황은 생활하수 유입지인 정읍천과 지천의 폭이 좁은 원평천의 무기성분 함량이 높았으며 동진천 상류지역에서 가장 양호하였다. 연도별 현황은 '94년 이후 '95년까지는 수질이 악화되는 경향을 보였으나 '95년 이후로는 각 성분 함량이 낮았지는 등 점점 양호해지고 있으며 COD함량으로 볼 때 특히, 정읍천의 수질이 개선되고 있음을 알 수 있었다. 양이온과 음이온의 총당량온 4월에 가장 높았고 7, 8월에 가장 낮았으며 양이온/음이온의 당량비는 5월에 높았고 7월이 가장 낮았으며 지점에 따라서는 총당량은 정읍천, 원평천, 동진천 하류, 중류, 상류의 순위였으며 양이온/음이온 총당량 비율은 원평천이 상대적으로 작은 수치를 보였지만 지역간 큰 차이는 보이지 않았다. 수질 중 각 성분 상호간의 상관관계를 보면, 대개의 성분 상호간에 유의성이 높게 나타났으나, NO₄^--N는 대개의 성분과 유의성이 없었고, PO₄^(3-)-P도 COD, NH₄^+-N, NO₃^--N, SO₄^(2-)과는 유의성을 보이지 않았다. This study was conducted to monitor the irrigation water qualities along Dong-Jin river watershed. The water quality was surveyed at 6 sites from April to september during 1994∼1998. And the results were as follows : In July and August, water quality was better than that of any other months due to dilution with rainwater. Whereas, it became worse in April but it involved lower contents than limitted contents affected to the crop damage. Content of inorganic components was higher at Jeong-up and Won-pyeong stream. The reason for it that Jeong-up stream was deteriorated with sewage water from Jeong-up city, and Won-pyeong stream has narrow width. Water quality in upstream of Dong-Jin river, was evaluated best conditions in all sampling sites. For investigated period, water quality got worse from 1994 to 1995 but it was getting better to 1998 after 1995, especially at Jeong-up stream. The total equivalent of cation and anion was the highest at April through all months and at Jeong-up stream in sampling sites. Equivalent ratio of cation to anions(∑C/∑A) was higher at May than any other months and lower at Won-pyeong streams than any other sites. The value of most inorganic components was highly correlated with those of other components. But the value of NO₃^--N was not correlated with that of most components, and PO₄^(3-)-P was not correlated with COD, NH₄^+-N, NO₃^--N, SO₄^(2-_.