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        틸리피아에서 분리한 Edwardsie tarda 의 성상과 항원성에 대하여

        오명주,전세규 한국어병학회 1988 한국어병학회지 Vol.1 No.2

        1987年 3月 釜山水産 大學 魚病學 實驗室에서 飼育 中이던 틸라피아 (Oreochromis niloticus)에 細菌性 疾病이 發生하여 慢性的으로 몇마리씩 斃死하였다. 本 硏究는 이러한 疾病의 原因을 밝히기 위하여 原因菌을 分離하였으며, 型態的, 生化學的 性狀을 觀察하고 病原性, 藥劑感受性 實驗을 하였으며 試驗抗原을 制作하여 그 抗原性을 조사하였는바, 그 結果를 要約하면 다음과 같다. 1. 病魚에서 分離된 原因菌은 Edwardsiella tarda로 同定되었다. 2. 分離菌을 틸라피아에 접종하여 再現性實驗을 한 結果 전형적인 E. tarda의 감염증상을 나타내고 死亡했으며, 魚類로부터 同一菌을 얻을 수 있었다. 3. 分離菌은 oxytetracycline에서 感受性이 높았고, MIC는 6.9로 나타났다. 4. 分離菌은 病原性이 강한 菌이었으며, 48-LD5O은 10^(6.4)cell/fish 이었다. 5. 試驗抗原으로, 포르말린사균항원, 초음파처리항원, 균여과액항원을 사용하였으며, 이 세가지를 사용한 抗原性試驗 결과 포르말린사균항원의 시험구에서 높은 응집가와 방어력을 나타내었다. In March 1987, a bacterial disease occured among cultured tilapia (Oreochromis niloticus). in the aquarium of Fish Pathology Laboratory of National Fisheries University of Pusan. The diseased fish showed abdominal inflamation of ascites. The causative organisms isolated from the kidney were Gram negative rods. On SS agar colonies developed within 48 hours at 25℃. On the basis of the morphological and biochemical characteristics. the organisms were identified as Edwardsiella tarda. They were sensitive to chloramphenicol, ampicilline and oxytetracycline. The pathogenicity was proved positive by intraperitoneal injection. Three kinds of antigen were prepared with E. tarda for the immune response in tilapia : i.e., by inactivating the strain with 0.4% formalin for 24 hrs at 25℃ ultrasonicating it 3 times with 5 watts for 30 seconds each time and filtrating it through millipore filter. The formalin killed antigen showed good efficacy at the injection concentration of over 10^7 cells per fish of 50g. All the immunized tilapia showed only a little agglutination titer to the three antigens. The highest survival rate was recorded in challenged tilapia immunized with formalin killed cells.

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        양식 능성어로 부터 Fish Nodavirus 분리

        오명주,전세규,손상규,박명애 한국어병학회 1998 한국어병학회지 Vol.11 No.2

        1989년부터 남해안 일원 해상 가두리 양식장에서 사육중이던 능성어가 고수온기에 대량폐사하여 폐사율이 80%이었다. 발병한 병어는 채색흑화, 안구돌출, 평행감각 상실,회전운동과 몸통이 휘어지는 증상을 나타냈고, 조직학적으로는 뇌조직 및 안구망막의 신경세포가 공포 또는 괴사되었다. 병어로 부터 어류주화세포를 이용한 세포배양법으로 원인 바이러스는 분리되지 않았지만, 뇌 신경세포의 세포질에서 크기가 약 30 ㎚이며 외막(envelop)이 없는 다면체 모양의 바이러스 입자가 전가현미경적으로 관찰 되었다. 능성어로 부터 분리된 바이러스는 에테르나 열(50℃, 30분)처리에 의해 병원성이 실활되지 않았으나, 강산(pH 3)이나 강알카리(pH 11)에는 부분적으로 병원성이 실활되었다. 그리고 fish nodavirus인 Striped Jack Nervous Necrosis Virus(SJNNV)의 primer를 이용하여 인위감염 및 자연감염된 능성어를 대상으로 PCR을 한 결과 감염된 능성어의 뇌 및 안구조직에서 악 430 bp정도의 PCR 증폭산물이 검출되므로서 능성어를 폐사시키는 원인 바이러스는 SJNNV와 아주 유사한 nodavirus 였다. Since 1989, mass mortality has repeatly occurred in cage-cultured sevenband grouper, Epinephelus septemfasciatus along the southern coast of Korea in the summer season and usually reached over 80% within a few months. Diseased fish showed the clinical signs of anorexia, dark coloration, loss of eqilibrium, spinal swimming behaviour, vertebral deformity and inflation of swim bladder. Histopathologically, necrosis and/or vacuolation of the nerve cells in the brain and retina were observed. We previously reported that the causative agent was filtrable. The causative agent was not culturable in various fish cells; RTG-2, CHSE-214, BF-2, EPC and FHM. However, electron microscopic observation revealed unenveloped icosahedral viral particles with about 30 ㎚ in diameter in the cytoplasm of nerve cells of the brain. The characteristics of the virus was tested by an artificial infection with the filtrate of the homogenate of diseased fish. The pathogenicity of the virus was retained after treatment with ether or heat (50℃, 30 min) but partly lost by pH 3 or 11 treatment. These results suggest that the causative agent are similar to the fish nodavirus. In order to compare the causative agent with a fish nodavirus, Striped Jack Nervous Necrosis Virus (SJNNV), a polymerase chain reaction (PCR) was performed with primers specific to SJNNV. As a result, about 430 by PCR products were detected from the brain and the eye of both naturally and artificially infected sevenband grouper. All these results represent that the mass mortality in the cultured sevenband grouper is caused by the infection of a nodavirus similar to SJNNV and this is the first report of a fish nodavirus from the cultured sevenband grouper in Korea.

      • KCI등재

        중합효소연쇄반응법(Polymerase Chain Reaction, PCR)에 의한 남해안 양식산 어류로부터 Birnavirus의 검출

        오명주,정성주,김영진,Oh, Myung-Joo,Jung, Sung-Ju,Kim, Young-Jin 한국어병학회 1999 한국어병학회지 Vol.12 No.1

        복부팽만, 안구돌출 및 체색혹화의 외부증상을 대표적으로 나타내며, 세균 및 기생충과 같은 병원체 감염의 원인이 아닌 버나바이러스성으로 판단되어지는 남해안 양식산 넙치, 조피볼락, 농어를 대상으로 RT-PCR 법에 의한 체내 감염 바이러스 검출을 행하였다. IPNV 및 MBV만을 선택적으로 확인 검출 할 수 있으며 감염어체를 사용한 검출에서 배양 세포법(12/50)에 비하여 높은 검출 감도(46/50)를 나타내는 RT-PCR 진단법을 도입하였다. 아울러 우리나라 남해안 양식장에 버나바이러스의 감염이 폭넓게 진행되고 있음을 확인할 수 있었다. To detect birnavirus from cultured marine fish, RT-PCR assay was developed. This method was specific for aquatic birnaviruses that include IPNV Sp., IPNV Ab, IPNV VR-299 and MBV Y6. The birnavirus gene was detected (birnavirus positive samples detected 46/50) from clinical samples signed with abdominal distension and overall darkening even though the samples gave negative results in virus isolation (birnavirus isolate with CHSE-214 cell showed 12/50).

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        단백뇨와 대사증후군의 연관성

        오명주,이미지,이기혁,박민선,고정아 대한가정의학회 2010 Korean Journal of Family Medicine Vol.31 No.6

        Background: Proteinuria is a predictor of chronic kidney disease and a common risk factor for cardiovascular disease. Previous studies have reported that a urinary albumin-creatinine ratio and a glomerular filtration rate was related to the metabolic syndrome. However, there have been few studies on association between the metabolic syndrome and proteinuria by the urine dip-stick test. We examined the association between the metabolic syndrome and the proteinuria by the urine dip-stick test. Methods: The subject of this study included 20,075 adults aged more than 18 years old who visited the Health Promotion Center of the Seoul National University Hospital from April 2001 to March 2007. The metabolic syndrome was defined according to the criteria of the American Heart Association and National Heart, Lung and Blood Institute, and proteinuria was defined as a dipstick test above the ‘1+’ level. The crude and multivariated-adjusted odds ratios of proteinuria were calculated by using logistic regression models with each component of the metabolic syndrome. Results: Proteinuria was noticed in 5.7% of the subjects with metabolic syndrome, and 2.7% without metabolic syndrome. The multivariate-adjusted odds ratios of proteinuria in participants with elevated blood pressure level, elevated plasma glucose level and high triglyceride level were 2.23 (95% confidence interval [CI], 1.95 to 2.55), 2.33 (95% CI, 2.06 to 2.62), 1.64 (95% CI, 1.45 to 1.84). The multivariate-adjusted odds ratio of proteinuria in participants with the metabolic syndrome compared with participants without the metabolic syndrome was 2.30 (95% CI, 1.91 to 2.76), respectively. Conclusion: These findings suggest that proteinuria by the urine dip-stick test might be an important predictor in the metabolic syndrome. 연구배경: 단백뇨는 만성신질환 및 말기신부전의 중요한 예측인자이며 심혈관계질환 사망의 위험인자로 알려져 있다. 요 알부민 크레아티닌비 또는 사구체여과율과 대사증후군의상관관계에 대하여는 알려져 있으나 요 시험지검사를 통한단백뇨와 대사증후군의 관계에 대한 연구는 거의 없다. 본 연구는 외래에서 쉽게 시행할 수 있는 요 시험지검사를 통해 발견된 단백뇨와 대사증후군의 관련성 및 만성질환 예측인자로서의 단백뇨의 의미에 대하여 조사하였다. 방법: 2001년 4월부터 2007년 3월까지 일개 대학병원 건강증진센터를 방문한 18세 이상 성인 남녀 20,075명을 대상으로 하였다. 대사증후군은 American Heart Association/National Heart,Lung, and Blood Institute 진단기준에 따라 정의하였고 단백뇨는 요 시험지검사에서 알부민 1+ 이상인 경우로 정의하였다. 대사증후군 및 각 구성요소에 대한 단백뇨의 비교위험도를단변량 및 다변량 로지스틱 회귀분석으로 시행하였다. 결과: 전체 환자 중 30.8%가 대사증후군에 속하였으며 3.4%가 단백뇨를 보였다. 대사증후군 유무에 따른 단백뇨 유병률은 각각 5.7%, 2.7%이었다(P-value<0.001). 연령, 성별, 흡연, 혈청 크레아티닌, 체질량지수로 보정한 상태에서의 대사증후군의 각 구성 요소에 대한 단백뇨의 비교위험도를 보았을 때 높은 혈압, 고혈당, 고중성지방혈증에 대한 비교위험도가 각각2.23 (95% 신뢰 구간[CI], 1.95-2.55), 2.33 (95% CI, 2.06-2.62),1.64 (95% CI, 1.45-1.84)로 나타났다(P<0.001). 다변량 로지스틱 회귀분석을 통한 대사증후군의 단백뇨에 대한 비교 위험도는 2.30 (95% CI, 1.91-2.76)이었다(P<0.001). 결론: 요 시험지검사를 통해 발견된 단백뇨는 연령, 흡연, 성별, 체질량지수, 혈장 크레아티닌을 보정한 상태에서도 대사증후군과 높은 관련성을 보였다.

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        한외여과막을 이용한 해수내 어류 병원바이러스 농축법

        오명주,김형락,김흥윤,여인규,정성주,김석렬 한국어병학회 2000 한국어병학회지 Vol.13 No.1

        해수중에 소수로 분포하는 어류 병원 바이러스의 검출을 목적으로 해산어류 병원바이러스의 일종인 marine birnavirus (MABV)를 대상으로하여 한외 여과막과 centricon을 이용한 농축효과를 바이러스의 주화세포내 감염에 의해 형성되어지는 CPE (cytopathic effect) 출현에 근거한 바이러스 감염가 측정법인 TCID_(50) 계수법 및 주화세포상의 바이러스 감염에 의해 형성되어지는 plaque 계수법을 통해 검토하였다. 바이러스 희석액 시료 20 L를 1차 중공사한외여과막으로 3 시간 가동하면 200배로 농축되어지고, centricon으로 2차 농축하여 최초 시료 대비 20,000배 (최종량: 1 ㎖)로 농축가능하였다. 바이러스 회수율은 농축 전 바이러스 감염가와 비교하여 TCID_(50)치로서는 94.4%, plaque 계수법으로는 88.7%를 나타내었다. 중공사 한외여과막과 centricon을 이용한 본 농축법은 해수내 바이러스의 검출을 위한 효과적인 농축방법으로 수계 바이러스 연구에 이용되어질 수 있을 것으로 판단되어졌다. A method was developed for concentrating fish pathogenic virus from sea water using membrane ultrafiltration system and centricon. The method consists of passing large volumes (Ca. 20 liter) of sea water through ultrafiltration (PAN) filter followed by cross-flow filtration method and centrifugation use the centricon (Plus-20). This procedure permitted the processing of 20 liter of sea water which resulted in a 20,000-fold reduction in the volume of water and greater than 90% recovery of the seeded MABV.

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        이상유영 증장을 나타내는 연어과 어유에서 분리된 새로운 바이러스의 분자생물학적 특성

        오명주 한국어병학회 1996 한국어병학회지 Vol.9 No.2

        이상유영 증상을 나타내는 연어과 어류에서 분리된 새로운 RNA 바이러스의 역전사 효소활성을 조사하였다. 정제바이러스는 래트로바이러스 특유의 유전자전환 효소인 역전사효소 (RTase) 활성을 가지고 있었다. Sucrose 밀도구배 초원심법으로 바이러스 밀도를 조사한 결과 1.16 g/㎖에서 밴드를 형성하고, 그 부분의 역전사효소 활성이 최고를 나타내었으며, 전자현미경 관찰결과 외막을 가진 크기 85 ㎚의 레트로바이러스 형태를 확인할 수 있었다. 인위감염 어류의 뇌 및 신장 조직내에 감염되어있는 바이러스를 대상으로 RTase 활성을 조사한 결과 높은 활성치를 확인할 수 있었다. 정제 바이러스의 구성 단백질은 전기영동법으로 확인한 결과 11종이었다. 이상의 결과, 새롭게 분리된 바이러스는 레트로바이러스의 일종인 것이 확인되었으므로 그 이름을 RVS (Retrovirus of salmonid)로 부를 것을 제안한다. A new RNA virus isolated from abnormally swimming behavior has caused mortalities in salmonid fish (Oh et al., 1995 a), A reverse transcriptase (RTase) activity of the virus was determined by using poly r(A) : oligo d(T) as templete : primer. This RTase activity was associated with virus particles of buoyant density of 1.16 g/㎖. The virus particles in sucrose fractions were enveloped and were about 85 ㎚ diameter with central electron-dense core. The brain and kidney samples of artificially infected fish showed RTase activity. Virus particle associated proteins about 120, 80, 65, 61, 48, 42, 35, 30, 25, 19, and 15 kDa were observed when examined by polyacrylamide gel electrophoresis analysis. This study showed the presence of a new retrovirus in salmonid fish, which tentatively called RVS (Retrovirus of salmonid).

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        오존처리법에 의한 양어용수 살균에 대하여 : 1 . 해산어류 병원세균의 오존 감수성 1 . Susceptibility of Some Fish-Pathogenic Bacteria Isolated From Cultured Marine Fish

        오명주,김흥윤,조현서 한국어병학회 1999 한국어병학회지 Vol.12 No.1

        해수중 잔류옥시던트(TRO) 농도를 0.1, 0.3 및 0.5 ㎎/liter로 조정하고 시간 경과에 따른 농도의 안정성을 관찰한 결과 0.1 ㎎/liter의 경우 측정 20분까지는 변화를 보이지 않았고, 0.3 및 0.5 ㎎/liter 에서는 1시간 경과시까지 안정하였다. 해수를 오존처리하여 해수중에 생성되는 TRO를 이용하여 해산어류 병원세균인 Edwardsiella tarda, Vibrio sp., Streptococcus sp., Staphylococcus sp.에 대한 살균효과를 실험한 결과 0.1 ㎎/liter에서 3분간의 처리로 99.9% 이상, 0.3∼0.5 ㎎/liter에서는 30초에서 1분간의 반응시간으로 99.99% 이상이 살균되어졌다. The disinfectant effects of total residual oxidants (TROs) produced by ozonization of natural sea water were investigated against fish pathogenic bacteria isolated from flounder and red seabream. The concentration of 0.1 ㎎ TROs/liter was stable for 20 min in filtered natural seawater, and those of 0.3 and 0.5 ㎎ TROs/liter were also stable for more 1 hr. Disinfectant effects of TRO against Edwardsiella tarda, Vibrio sp., Streptococcus sp. and Staphylococcus sp. were observed with a concentration of 0.1 ㎎/liter for 180 sec, and the treatment killed more than 99.9% of bacterial cells. With TROs of 0.3 to 0.5 ㎎/ liter, the viable cells of the bacteria were reduced by more than 99.99% in 60 sec.

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