흰쥐 원위결장에서 저칼륨혈증 효과

안규윤,허탁,이승원,박성식,안규윤,이승원,박성식 대한해부학회 1999 Anatomy & Cell Biology Vol.32 No.4

흰쥐에서 새로운 Na+/HCO3--Cotransporter 변이형의 동정

안규윤,윤한덕,조혜정,정희영,남광일,배춘상,김백윤,박성식 대한해부학회 2005 Anatomy & Cell Biology Vol.38 No.2

The potassium depletion has remarkable and opposite effect on kidney and body growth and has affected the expression of the several ion transporters. Previously, Ahn et al. have reported that HK alpha 1 and 2 subunit gene were upregulated in the hypokalemic rat kidney. To clone the unreported genes expressed in potassium deficiency, differential display PCR-based cloning strategy was used in normal and potassium-depleted rat kidney and a novel gene was isolated. Sequence analysis with blast search program identified a cDNA clone encoding an isoform of kidney sodium bicarbonate cotransporter-1. The tissue and cellular expression pattern of this gene were investigated with Northern analyses and in situ hybridization histochemistry (ISH) in normal and hypokalemic rats. This novel transcript was highly expressed in kidney and brain and at lower levels in distal colon, urinary bladder, and heart but not in salivary gland, stomach, liver, and lung in normal rat. In potassium-depleted rat, this transcript was upregulated in kidney, brain, and distal colon. By ISH, cellular distribution of this gene was highly expressed in S3 segment of proximal tubule, distal convoluted tubule, and cortical collecting duct of kidney and lower third of intestinal glands of distal colon but at lower levels in cortical and medullary thick ascending limb and medullary collecting duct of kidney and middle third of intestinal glands of distal colon. From these results, this candidate gene may play an important role in HCO3- transport by these organs during potassium depletion. 칼륨 결핍은 신장과 신체 성장에 서로 반대되는 결과를 초래하고 이온수송에 관여하는 효소들의 발현에 영향을 미친다고 한다. 본 연구는 흰쥐 Na+/HCO3- cotransporter-1 (NBC-1)의 새로운 변이형을 찾았고 이 유전자의 신장 및 원위결장에서의 발현 및 분포를 알아보고자 하였다. mRNA 수준에서 특이하게 발현되는 유전자를 탐색하는데 유용하게 쓰이는 DD-PCR(Differential Display-Polymerase Chain Reaction) 방법을 이용하여 새로운 유전자를 찾고 이 유전자의 신장 및 원위결장에서의 발현 및 분포는 Northern 분석과 in situ hybridization 조직화학 방법을 이용하였다. 이 유전자는 약 7.6 Kb 크기로 흰쥐 NBC-1과는 매우 유사하였다. 5′-UTR에서 55개의 b.p를 가지고 있고 ORF (open reading frame)는 3,105개 b.p, 즉 1,035개의 아미노산, 3′-UTR에서는 4173개의 b.p를 가지고 있었다. ORF에서는 NBC-1과 비교하여 1967번째와 2213번째에서 T가 C로, 2242번째에서 A가 G로, 2275번째에서 C가 G로 4개의 nucleotide가 전환되었으며 아미노산에서도 해당부위 즉, 656번째 Phe은 Ser으로, 738번째 Leu은 Pro으로, 748번째 Thr은 Ala으로 그리고 759번째 Pro은 Ala으로 전환되었다. Northern 분석소견에서 뇌와 신장에서 아주 강한 signal을 관찰할 수 있었고 그 다음으로 원위결장, 방광 및 심장 순으로 미약하게 관찰되었으나 위, 간, 폐 및 침샘에서는 발현되지 않았다. 뇌, 신장 및 원위결장에서 칼륨제한 식이 3일 후에 상당히 발현이 증가 되었으며 그 이후에는 일정한 수준을 유지하고 있었다. 정상식이 in situ hybridization 조직화학 소견에서 신장 토리쪽세관의 S3 부위, 먼쪽곱슬세관 및 겉질집합관에서는 강한 hybridization signal을 관찰할 수 있었고 속질집합관, 겉질 및 속질오름부분에서는 중등도의 signal을 관찰할 수 있었다. 원위결장에서는 하 1/3의 장선에서 강한 hybridization을, 중 1/3의 장선에서는 중등도의 signal을 관찰할 수 있었다. 그러나 표면상피세포나 상 1/3의 장선에서는 hybridization signal을 관찰할 수 없었다. 이상의 결과로 본 연구에서 clone된 유전자는 새로운 NBC-1 변이형라는 것이고 신장 토리쪽세관의 S3 부위, 먼쪽곱슬세관, 집합관, 겉질 및 속질오름부분, 원위결장의 장선 그리고 뇌에서 HCO3- 수송에 중요한 역할을 할것으로 생각되었다.

Gentamicin 投與가 마우스 近位尿細管 上皮細胞에 미치는 影響에 關한 硏究

安圭胤 全南大醫大 1984 전남의대학술지 Vol.21 No.4

생쥐 췌 장내 Inducible Nitric Oxide Synthase (iNOS)의 발현에 관한 면역조직화학적연구

안규윤,윤한덕,민용일 대한해부학회 1997 Anatomy & Cell Biology Vol.30 No.3

백서 질 조직에서 아쿠아포린(Aquaporin)-1의 발현과 골반신경 자극에 의한 전위

안규윤,이현숙,김선옥,박광성,한호재 대한남성과학회 2007 The World Journal of Men's Health Vol.25 No.3

지연 에스트로겐 보충요법이 토끼 질조직에 미치는 영향

안규윤,박광성,황의창,임창민,김철수,배춘상 대한비뇨의학회 2005 Investigative and Clinical Urology Vol.46 No.5

Purpose: A decline in the circulating levels of estrogen impairs vaginal engorgement, which leads to histopathological changes in the vaginal tissues. The aim of this study was to evaluate the effect of delayed estrogen replacement on the vagina structure in castrated rabbits. Materials and Methods: New Zealand White female rabbits were randomly divided into three groups; two groups(the castration and castration+estrogen replacement groups) were castrated: the control group underwent sham operations. Nine weeks after surgery, the estrogen replacement group received subcutaneous injections of estrogen(50μg/kg/day) for 4 weeks. Vaginal tissue was processed for histology with Masson's trichome stain. The expressions of e-NOS and n-NOS were examined by immunohistochemistry and Western blot. Results: From the histology, marked thinning of the vaginal epithelial layers, and decreased smooth muscle content and submucosal microvasculatures were evident, but with no increase in the collagen fibers in the castrated group was noted. The vaginal tissue of the estrogen replaced animal showed similar morphological features to those in the control rabbits. From the histomorphometry, the percentage of vaginal smooth muscle in the castrated group was significantly decreased compared to those in the control and estrogen replaced groups. The expression and signal intensity of e-NOS were decreased in the vagina of the castrated animals compare to those in the control group. In the estrogen replaced group, the expression of e-NOS was normalized. Conclusions: Delayed estrogen replacement showed structural restoration of vaginal tissues. These results suggest that delayed estrogen replacement therapy could improve the sexual function in menopausal women

저칼륨혈증시 신장 집합관의 적응반응

안규윤 대한신장학회 1997 추계학술대회 초록집 Vol.1997 No.-

정상 및 무칼륨 식이 백서 신장에서 Na⁺-K⁺-ATPase Subunit Isoform mRNA 발현에 관한 연구

안규윤(Kyu Youn Ahn),김석채(Sug Chae Kim),문 범(Bum Moon),김경근(Kyung Keun Kim),김백윤(Baik Yoon Kim) 대한해부학회 1998 Anatomy & Cell Biology Vol.31 No.3

저칼륨혈증은 여러 조직에서 Na+-K+-ATPase 유전자 발현의 정도를 변화시키며 또한 신장의 속질바깥층집합세관에서는 Na+-K+-ATPase 활성과 α1과 β1 subunit 단백을 증가시키지만 겉질집합세관에서는 유의한 변화가 없다는 것은 잘 알려져 있다. 그러나 집합세관을 위시한 다른 콩팥단위 부위에서의 Na+-K+-ATPase subunit isoform들의 적응반응에 관한 연구는 없는 실정이다. 이에 저자들은 정상 및 무칼륨 식이 백서 신장에서 Na+-K+-ATPase subunit isoform mRNA 발현의 상대적인 양과 분포를 구명하기 위해 Northern 분석과 in situ hybridization 조직화학을 실시하였다. Northern 분석 결과, 대조군의 Na+-K+-ATPase subunit isoform mRNA들은 속질바깥층, 겉질 및 속질속층 순으로 발현되었 으나 실험군에서는 속질바깥층, 속질속층 및 겉질 순으로 발현되었다. α1 mRNA 양은 α2, α3 보다 훨씬 많았고, 각 isoform에 대한 mRNA의 양은 속질속층에서 대조군 보다 실험군에서 2~3배 이상 증가하였으나 겉질과 속질바깥층에서는 두 군간에 유의한 차이가 없었다. In situ hybridization 조직화학 결과에서 각 isoform에 대한 mRNA의 분포는 대조군의 토리쪽세관의 S3 부위, 겉질상행후각, 속질상행후각, 먼쪽곱슬세관 및 전 집합세관에서 관찰되었다. 실험군 백서에서 α1, α3 및 β1 isoform의 반응정도는 속질상행후각, 겉질상행후각, 먼쪽곱슬세관 및 겉질집합세관에서 감소하였으나 속질바깥층집합세관 내층 상부와 속질속층집합세관 상부에서는 현저히 증가하였다. α2 isoform은 속질상행후각에서는 감소하였으나 겉질상행후각, 먼쪽곱슬세관 및 겉질집합세관에서 약간 증가하였고 속질바깥층집합세관 내층 상부와 속질속층집합세관 상부에서는 현저히 증가하였다. 이상의 소견으로 저칼륨혈증에 의해 Na+-K+-ATPase subunit isoform 유전자들의 발현은 속질바깥층집합세관 내층 상부와 속질속층집합세관 상부에서 증가되며, 이들 부위에서 유전자들이 K 이온 보존에 관여하고 있음을 암시해 준다. Chronic hypokalemia alters Na+-K+-ATPase gene expression in several tissues. While it is established that Na+- K+-ATPase activity and α1 and β1 subunit protein levels increase during K depletion in the outer medullary collecting duct (OMCD) and do not significantly change in the cortical collecting duct (CCD), little is known about the adaptive responses of the other isoforms in these other nephron segments. Accordingly, this study was performed to characterize the relative levels of expression and cellular distribution of mRNAs encoding the Na+-K+-ATPase subunit isoforms in normal and K-deprived (2 weeks) rats using the Northern analysis and in situ hybridization (ISH). Isoform specific 32Plabeled cDNA (for Northerns) or digoxigenin labeled cRNA (for ISH) probes were used. In normal rats, the order of expression amounts of all isoforms mRNAs from highest was outer medulla > cortex > inner medulla , and that of K-deprived rats was outer medulla > inner medulla > cortex. α1 mRNA levels were much greater than those of α2 or α3 in cortex, outer and inner medulla. mRNA levels for all isoforms were 2~3 folds greater in inner medulla of K-deprived rats compared to controls. In contrasts, the levels of all isoforms mRNAs in cortex and outer medulla were comparable between the two gruops. By ISH, mRNAs for all isoforms were observed in the S3 segment of proximal tubule, the cortical thick ascending limb (CTAL), medullary thick ascending limb (MTAL), distal convoluted tubule (DCT), connecting tuble (CNT), and the entire collecting duct. Both groups exhibited comparable cellular patterns of labeling, but the signal intensity of K-deprived rats was much greater in the proximal portion of the inner stripe of outer medullary collecting duct (OMCDi) and proximal portion of the inner medullary collecting duct (IMCD), and less in the MTAL compared to controls. The signal intensity of α1, α3, and β1 isoforms was less in the CTAL, DCT, and CCD of K-deprived rats, but α2 isoform was slightly increased. These results suggest that chronic hypokalemia enhances expression of Na+-K+-ATPase subunit isoforms in the proximal portion of OMCDi and proximal IMCD, but not other nephron segments, and that these isoforms may participate in potassium conservation by these segments during potassium deprivation.

포스터 발표 : 포스터 연제 ; 흰쥐 신장에서 칼륨식이 변화에 따른 HK α 2a 유전자의 적응반응

안규윤 ( An Gyu Yun ),김보영 ( Kim Bo Yeong ),박성식 ( Park Seong Sig ) 대한신장학회 1999 춘계학술대회 초록집 Vol.18 No.2

특발황반원공에 있어 Indocyanine green 염색을 이용한 내경계막제거술

송병용 ( Song Byeong Yong ) , 안규윤 ( An Gyu Yun ) , 서만성 ( Seo Man Seong ) 대한안과학회 2004 대한안과학회지 Vol.45 No.3