심포지움 연제 : 골이식재가 갖추어야 할 요건

설양조 대한치주과학회 2005 대한치주과학회 학술대회자료집 Vol.2005 No.2

혈소판유래성장인자를 함유한 TCP-chitosan 미세과립이 신생골조직 형성에 미치는 영향에 관한 연구

설양조,이주연,계승범,이영규,김원경,이용무,구영,한수부,이승진,정종평,류인철,Seol, Yang-Jo,Lee, Jue-Yeon,Kye, Seung-Beom,Lee, Young-Kyu,Kim, Won-Kyeong,Lee, Yong-Moo,Ku, Young,Han, Soo-Boo,Lee, Seung-Jin,Chung, Chong-Pyoung,Rhyu, In-C 대한치주과학회 2002 Journal of Periodontal & Implant Science Vol.32 No.3

The purpose of this study was to evaluate newly fabricated tricalcium phosphate(TCP)/chitosan microgranuls as bone substitutes. TCP/chitosan microgranules were fabricated by dropping TCP-chitosan suspension into the NaOH/ethanol solution. The size of microgranules could be controllable via airflow rate. PDGF-BB was loaded into the fabricated granules via freeze-drying methods(300 ng/20 mg). To evaluate cell proliferation, cultured osteoblasts cell lines(MC3T3-El) was dropped on the BioOss(R), chitosan microgranules, TCP/chitosan microgranules and cultured for 1, 7 , 14, and 28 days. Scanning electron microscopic observation was done after 7 days of culture and light microscopic examination was done after 28 days of culture. PDGF-BB release from the microgranules was tested. Rabbit calvarial defects(8 mm in diameter) were formed and chitosan, TCP/chitosan, PDGF-TCP/chitosan microgranules, and BioGran(R) were grafted to test the ability of new bone formation. At SEM view, the size of prepared microgranules was 250-1000 um and TCP powders were observed at the surface of TCP/chitosan microgranules. TCP powders gave roughness to the granules and this might help the attachment of osteoblasts. The pores formed between microgranules might be able to allow new bone ingrowth and vascularization. There were no significant differences in cell number among BioOss(R) and two microgranules at 28 day. Light and scanning electron microscopic examination showed that seeded osteoblastic cells were well attached to TCP/chitosan microgranules and proliferated in a multi-layer. PDGF-BB released from TCP/chitosan microgranules was at therapeutic concentration for at least 1 week. In rabbit calvarial defect models, PDGF-TCP/chitosan microgranules grafted sites showed thicker bone trabeculae pattern and faster bone maturation than others. These results suggested that the TCP/chitosan microgranules showed the potential as bone substitutes.

The Effect of Ethanolic Extracts Mixture from Magnoliae cortex and Carthami semen on the' Progression of Experimental Periodontitis in Beagle Dogs

설양조,배규현,이용무,구영,류인철,한수부,배기환,최상묵,정종평,Seol, Yang-Jo,Bae, Kyoo-Hyun,Lee, Yong-Moo,Ku, Young,Rhyu, In-Chul,Han, Soo-Boo,Bea, Ki-Hwan,Choi, Sang-Mook,Chung, Chong-Pyoung The Korean Academy of Periodontoloy 2001 Journal of Periodontal & Implant Science Vol.31 No.4

후박추출물은 치주병인균에는 항균효과가 있고, 치은섬유아세포에는 세포독성이 적은 것으로 알려져 있으며 홍아씨 추출물은 골아세포를 활성화시키는 효과가 있어 골조직재생에 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 이 실험의 목적은 비글견에 인위적으로 치주염을 유도하고 후박추출물과 홍화씨추출물의 혼합물을 투여함으로써, 이 두 가지 혼합물이 치주염 진행에 예방효과가 잇는지, 또, 치료효과가 있는지 알아보는 것이다. 후박과 홍화씨를 구입하여 에탄올에서 추출하여 정제하고 진공상태에서 건조시켜 농축하였다. 후박추출물과 홍화씨 추출물을 1:5의 질량비로 혼합하고 250㎎씩 캡슐에 넣었다. 비글견의 상하악 소구치와 하악 제1대구치를 8주 동안 철사와 견사로 결찰하여 치주염을 유발하였다. 8주 후에, 실험군 비글견에게는 미리 후박추출물과 홍화씨추출물 혼합물을 매 12시간마다 하루에 1,500㎎ 씩 12주 동안 투약하였다. 대조군 비글견에는 투약을 하지 않았다. 투약을 시작한 후에 치은지수, 부착수준을 매 4주마다 측정하였다. 매 4주마다 치주낭에서 페이퍼포인트를 이용하여 혐기성세균과 호기성세균을 채취, 배양하여 각각의 집락 수를 세었다. 그 결과 실험군의 치은지수는 8주, 12주에서 대조군보다 유의하게 낮았고(p<0.05)), 임상적으로도 상당한 치은염의 개선을 보였다. 실험군의 혐기성세균 집락수는 감소하여 4, 8, 및 12주에서 대조군에 비해 유의하게 낮았고(p<0.001), 호기성 세균 집락수는 4, 8, 및 12주에서 대조군에 비해 유의하게 낮았다.(p<0.05)이 실험 결과, 후박 추출물과 홍화씨 추출물 혼합물이 치주질환의 예방 및 치료에 이용되어질 수 있을 것으로 생각된다.

미노클린 첨부제의 지치주위염에 대한 유효성 및 안전성 평가를 위한 위약대조 이중 맹검 제3상 비교임상시험

설양조,고영경,이용무,구영,류인철,한수부,최상묵,정종평,Seol, Yang-Jo,Ko, Young-Kyung,Lee, Yong-Moo,Ku, Young,Rhyu, In-Cheul,Han, Soo-Boo,Choi, Sang-Mook,Chung, Chong-Pyoung 대한치주과학회 2000 Journal of Periodontal & Implant Science Vol.30 No.3

This clinical study was designed to determine the clinical and microbiological outcomes and safety of using minocycline loaded polycaprolactone strip for pericoronitis patients. 64 patients showing symptoms and signs of pericoronitis were enrolled according to the inclusion criteria in this double blind study. They were randomly assigned to two groups. 32 patients comprised control group and they received only polycaprolactone films in pericoronal spaces, and another 32 patients comprised experimental group and they received polycaprolactone films loaded with 30% minocycline. Informed consent was obtained from all the participants before beginning the study. At the initial visit, gingival index(GI), papillary bleeding index(PBI), amount of gingival crevicular fluid(GCF) were recorded, and microbiological sampling was done. Then, loaded or unloaded polycaprolactone film was inserted into the pericoronal spaces. No drug was prescribed excepting this film. After one week, clinical and microbiological exam was repeated. Presence of any side effects or inconveniences were checked. Chi-square test and t-test was performed to compare outcomes. At baseline, there were no significant differences in all the criteria between experimental group and control group. Experimental group showed significant improvement compared with control group both in GI(p<0.01) and PBI(p<0.01). The amount of GCF of the experimental group was significantly decreased compared with the control group(p<0.01) and baseline(p<0.01). In microbiological study, percentage of motile rod was prominently decreased in the experimental group. Also, aerobic(p<0.001), anaerobic(p<0.001) and black pigmented(p<0.01) bacteria were significantly decreased from the baseline. Furthermore, no side effects or inconveniences was reported in the experimental group. From this study, it was concluded that insertion of polycaprolactone film with 30% minocycline into the pericoronal spaces would be effective and safe treatment for pericoronitis.

Biological Activities of Calcium Polyphosphate

설양조,이재일,이용무,임윤탁,김석영,구영,류인철,함병도,한수부,최상묵,정종평,Seol, Yang-Jo,Lee, Jae-Il,Lee, Yong-Moo,Lim, Yoon-Tak,Kim, Seok-Young,Ku, Young,Rhyu, In-Chul,Hahm, Byung-Do,Han, Soo-Boo,Choi, Sang-Mook,Chung, Chong-Pyoung The Korean Academy of Periodontoloy 2000 Journal of Periodontal & Implant Science Vol.30 No.2

이 연구의 목적은 다공성의 CPP 내부에 쥐의 장골의 골수에서 유래된 세포를 접종하고 3차 원적으로 배양하여 CPP가 골 형성을 위한 조직공학의 지지체로 적용가능한가를 연구하는 것과 Calcium PolyPhosphate(CPP)의 돌연변이 유발성을 검사하는 것이다. 무수 ($Ca(H_2PO_4)$)를 condensation하여 무결정의 ($Ca(PO_3)$)를 얻고 이를 용융하고 냉각시킨 후 분쇄하여 Calcium polyphosphate(CPP) powder를 얻었다. 다공성의 CPP는 5% $SiO_2$를 첨가하여 sponge 형태로 $450-550{\mu}m$ 소공의 크기를 가지는 것과(CPP-45ppi) $200-300{\mu}m$의 소공의 크기를 가지는 것(CCP-60ppi) 2가지로 제작하였다. 각각의 CPP matrices는 $5mm{\times}5mm{\times}1mm$의 블록 형태로 만들었다. 체중 100g 내외의 백서에서 장골(femur, tibia)을 채취하여 백서의 장골 골수 세포를 분리하여 배양한 후 24well에 CPP block을 넣고 CPP block 당 $10^5$개의 배양한 세포를 접종하였다. 배양 1, 7, 14, 및 21 일째에 각 well에서 trypsin EDTA를 이용하여 2회 반복하여 cell을 분리하였고, 원심분리한 후 hemacytometer로 측정하였다. 또, 45ppi와 60ppi, 그 리 고 Tissue Culture Polystyrene(control group)에 접종, 배양된 세포들의 염기성 인산분해효소활성도를 배양 7, 14, 및 21 일째에 각각 측정하였다. 각 기간별로 배양된 세포-CPP 혼합체내에서 세포의 부착 및 증식과 형성된 조직의 3차원적 형태를 관찰하기 위하여 주사전자현미경하에서의 관찰하였다. CPP의 돌연변이 유발성 검사 (mutagenicity test)를 위해 hypoxanthine-guanine phosphoribosyl transferase(HPRT) assay를 하였다. NIH3T3 cell line과 CHO-K1 cell line으로 각각 $1000{\mu}g/m{\ell}$, $100{\mu}g/m{\ell}$, $10{\mu}g/m{\ell}$ 그리고 $1{\mu}g/m{\ell}$의 CPP 농도에서 측정하였다. 통계적 분석을 위해서 모든 측정은 각군당 4개체 이상 시험하였고, 각 측정값은 평균값${\pm}$표준편차로 나타내었다. 각 군간의 통계적 유의성 검정을 위해서 Analysis of variance(ANOVA)를 이용하였고 Tukey의 방법으로 사후분석을 실시하였다. 제작된 CPP matrices 소공들이 서로간에 연결이 잘 되어있는 형태였다. 두 가지로 제조된 CPP(45ppi와 60ppi) 모두에서 세포의 부착이 잘 일어났고, 부착된 세포의 분열도 잘 일어났다. 2 가지의 CPP 모두에서 7, 14, 21일째의 세포 수는 1일째에 비해 유의성 있게 증가하였다(P<0.01). 3차원적 구조인 Calcium PolyPhosphate에서 배양한 세포는 24well dish(tissue culture polystyrene)에서 평면적으로 배양한 대조군의 세포에서 보다 염기성 인산분해효소 (Alkaline Phosphatase)를 유의성 있게 높게 나타냈다. 주사전자현미경에서 세포-CPP 혼합체를 관찰한 결과, CPP block에 세포들이 잘부착되어 있었고, 시간이 지남에 따라 세포가 여러 층을 형성하면서 뭉치는 현상을 보였다. 또, HPRT assay 결과 , Calcium PolyPhosphate는 돌연변이 유발성을 보이지 않았다. 이상의 결과로 볼 때 CPP에는 세포부착이 잘 일어나고, 지지체 상에서 세포의 분열도 활발하게 일어나므로 골조직을 위한 조직공학의 우수한 지지체가 될 수 있을 것으로 사료된다.

전치부에서 임플란트 매식체 식립 시기별 시술과 즉시 임시치관형성

설양조,박경석,이동환 대한치과의사협회 2004 대한치과의사협회지 Vol.42 No.12

연구논문 구연발표 : 골형성단백질 플라스미드 유전자를 이용한 골조직 재생에 관한 연구

설양조,이용무,구영,류인철,이영규,한수부,정종평 대한치주과학회 2003 대한치주과학회 학술대회자료집 Vol.2003 No.2

치과스태프와 함께 하는 강좌 : 치주치료 후 치주낭내 세균에는 어떤 변화가 생길까?

설양조 대한치주과학회 2009 대한치주과학회 학술대회자료집 Vol.2009 No.2

Tat Peptide-based Gene Delivery to Human Bone Marrow StromalCells as a Platform for Tissue Regeneration: In Vitro Study

이주연,설양조,조인호,이승진,김경화,Victor C. Yang,정창평,박정윤 한국생체재료학회 2006 생체재료학회지 Vol.10 No.4

Bone marrow stromal cells (BMSC) hold promise for osteogenic differentiation and can be augmented by the application of genes encoding bone morphogenetic proteins (BMPs). Several gene delivery approaches have been employed to these tissue engineering attempts. Despite some successes of the gene delivery protocol, however, both virus-based delivery and cationic lipid based delivery system have been beset by the immune response as well as inflammatory reaction to those applied delivery carriers. An alternative approach involving complexation of gene products with cell penetrating peptides seems promising. Herein, plasmid DNA coding BMP was condensed with cell penetrating peptide, TAT, and examined internalization, gene expression level as well as differentiation in BMSC. Synthetically prepared TAT peptides were able to condense and form complex with the BMP-coding pDNA, and efficiently transferred the pDNA into nucleus and cytoplasm in a short time period. The produced amount of BMP from the BMSC was higher when cells were treated with TAT-pDNA complex thereby inducing marked mineralization of the cultures. Taken together, the present study suggested that cell penetrating peptide TAT could be a useful and safe tool for enhancing delivery of BMP gene into stem cells, which opens wide applicability in the regenerative therapeutic strategy.

Antiinflammatory Effects of Tetracycline-loaded Biodegradable Membranes in Experimental Periodontitis of Beagle Dogs

전형식,설양조,박윤정,이용무,구영,류인철,이승진,한수부,최상묵,권수경,정종평,Jun, Hyung-Sik,Seol, Yang-Jo,Park, Yoon-Jeong,Lee, Yong-Moo,Ku, Young,Rhyu, In-Cheul,Lee, Seung-Jin,Han, Soo-Boo,Choi, Sang-Mook,Kwon, Soo-Kyoung,Chung, Chon The Korean Academy of Periodontoloy 2000 Journal of Periodontal & Implant Science Vol.30 No.3

조직유도재생술 과정에 사용된 차폐막의 술 후 오염 혹은 시술부위의 감염으로 조직재생유도가 제대로 이루어지지 않는 경우가 많이 있다. 테트라싸이클린은 넓은 범위의 치주 원인균에 효과적이고, 중성구 교원분해효소를 억제 함으로써 결합조직파괴를 억제하기 때문에 전신적 혹은 국소적으로 치주질환 치료에 널리 이용되어져왔다. 이번 연구의 목적은 비글견에 실험적으로 치주염을 유발시킨 후 테트라싸이클린 함유 차폐막을 이용하여 조직유도재생술을 하고서 테트라싸이클린의 유리반응을 관찰하는 것과 테트라싸이클린에 의한 항염, 항균효과를 알아보는 것이다. 실험 2-3개월 전에 비글견의 구강에서 치조골 결손부를 형성하여 치주염을 유발시켰다. 결손부 형성 2-3개월 후 실험군으로 테트라싸이클린 함유 차폐막으로 조직유도재생술을 하였고, 대조군으로 테트라 싸이클린이 함유되지 않은 차폐막으로 조직유도재생술을 하였고, 음성대조군으로 치은판막술만을 하였다. 시술 전과 시술 후 1, 2, 4주 간격으로 치은지수, 치태지수, 치은열구액의 양 및 혐기성 세균과 호기성 세균의 군락수를 측정하였다. 술 후, 1, 3, 5, 7, 및 14일 간격으로 유리된 테트라싸이클린의 농도를 측정하였다. 테트라싸이클린 함유 차폐막은 임상적 치은지수는 술 후 2, 4주째, 치태지수는 1, 2, 4주째 유의하게 감소하였다.(p<0.05) 1주에서 혐기성 및 호기성 세균집락수는 테트라싸이클린 함유 차폐막을 사용한 군이 약물이 함유되지 않은 차폐막보다 유의성있게 적었다.(p<0.001) 테트라싸이클린 함유 차폐막은 처음 1일은 높은 농도로 유리되었고 그 후 1주일 동안 일정하게 MIC 이상으로 유리되었다. 하지만 14일째는 유리가 관찰되지 않았다. 본 연구 결과, 테트라싸이클린 함유 생분해성 차폐막은 1주이상 약제가 MIC 이상 유리되었고, 유리된 테트라싸이클린에 의한 항염, 항균작용이 있어 치주조직 재생유도술시에 초기 치유가 잘 진행되도록 하는 효과가 있을 것이다.