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NIH3T3 세포에서 UVB에 의한 세포고사와 DNA 단사절단에 미치는 fisetin의 효과
박종군,정세진,김돈영,한설희,신상민,차재영,박노복,이정섭 한국생명과학회 2007 생명과학회지 Vol.17 No.2
In the present study, we have investigated the effect of fisetin on the apoptosis and DNA single strand breaks in ultraviolet light B (UVB)-exposed NIH3T3 cells. Exposure of cells to UVB light (200 J/m2) and postincubation in growth medium for 48 hr resulted in about 50% of cells with apoptotic nuclear fragmentation. Addition of various concentrations of fisetin in the postincubation medium, however, significantly reduced the apoptotic nuclear fragmentation as compared with the values expected when the effects are additive and independent. DNA single strand breaks induced by UVB exposure were also significantly decreased by postincubation with fisetin. By Western blot analysis, fisetin postincubation was shown to attenuate the p53 upregulation upon UVB exposure. Furthermore, the decrease of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) level upon UVB exposure was alleviated by fisetin postincubation. These results suggest that fisetin decrease the apoptosis and increae DNA repair in a possible association with alteration of p53 and PCNA levels in UVB-exposed cells. 본 연구에서는 UVB에 조사된 NIH3T3 세포에서 세포고사와 DNA 단사절단에 미치는 fisetin 후처리의 효과에 대해서 연구하였다. 세포에 UVB (200 J/m2)를 조사하고 정상배지에서 48시간 배양한 세포의 세포고사에 수반되는 핵분절은 50% 정도의 세포에서 관찰되었다. 흥미롭게도 배양배지에 fisetin이 첨가될 경우 핵분절을 보이는 세포의 빈도는 상당한 감소를 보였다. 알칼리 아가로스 겔에 의한 DNA 단사절단 분석에서 자외선 조사 후 fisetin 처리는 정상배지 배양시보다 단사절단의 빈도를 감소시켜 DNA 크기의 증가를 유도하였는데 이는 fisetin이 UVB에 의한 DNA 상해의 회복에 긍정적 효과를 나타냄을 시사한다. Western blot 분석에 의해 fisetin은 자외선 조사에 의해 활성화되는 p53의 수준을 유의한 수준으로 감소시키며 자외선 상해의 결과 세포주기의 정지에 수반되는 PCNA의 감소 경향을 다소 완화시켰다. 이러한 결과들은 fisetin이 DNA 회복의 활성을 통해 세포고사의 감소에 기여하며 이 과정에서 p53 및 PCNA의 수준변화와 관련하여 행동함을 시사한다.
알킬화제인 MMS를 선처리한 NIH3T3 세포에서 소목 추출물 의한 세포고사의 촉진
박종군,황성진,이정섭,전병훈,김원신 한국생명과학회 2002 생명과학회지 Vol.12 No.2
본 연구에서는 알킬화제인 methylmethane sulfonate (MMS)를 선처리한 NIH3T3세포에서 소목추출물의 효과를 분석하였다. MTT 분석결과 MMS에 의해서 유도된 세포생존률이 소목추출물에 의해서 감소되었다. 세포형태분석, acridine orange 염색법, 그리고 DNA fragmentation 분석에서 MMS에 의해서 유도된 세포고사의 특징인 핵 응축 및 DNA laddering이 소목추출물에 의해서 증가됨이 관찰되었다. 이러한 결과들로 소목추출물은 NIB73T3 세포에서 MMS에 의해서 유도된 세포고사를 촉진시킴을 보여준다. In this study we have investigated the effect of Caesalpina sappann L. extracts on the apoptosis in NIH3T3 cells exposed to methylmethan sulfonate (MMS), an alkylating agent. MTT assay study showed that Caesalpina sappan L. extracts potentiate the MMS-induced viability. Cell morphology studies, acridine orange (AO) staining, and DNA fragmentation analysis indicated that the postincubation of Caesalpina sappan L. extracts increase the nuclear condensation of MMS-induced apoptotosis. These results suggest that Caesalpina sampan L. extracts contain components potentiating MMS-induced apoptosis of NIH3T3 cells.
분열형 효모에서 유전자 결실에 의해 알킬화제와 3-AMINOBENZAMIDE에 저항성을 나타내는 새로운 유전자의 특성 분석
박종군,차재영,황성진,박세근,김미영,백성민,최인순,이정섭 한국생명과학회 2002 생명과학회지 Vol.12 No.2
진핵세포의 염색체는 전사, 복제, 회복 등의 과정에서 관여하는 단백질의 기능으로 구조가 변하게 된다. 이때 관여하는 단백질은 DNA-단백질의 상호작용에 의해서 이루어지게 되는데, 이때 단백질의 일부분은 일정한 상동성이 존재하게 된다. 이러한 부분은 motif나 domain으로 구성되는데, 예를 들면, SAP domain등을 들 수 있다. S. pombe genomic DNA 데이터베이스를 검색하여 Arabidopsis PARP 과 KU70과 상동성을 보이는 새로운 유전자를 찾았다. 이를 SAPuvs (SAP UV Sensitive)라 명명하였으며, Ura4를 선별표지로 이용하여 S. pombe SAPuvs 유전자 결실세포를 구성하였다. SAPuvs 유전자 결실세포는 자외선 조사 실험에서 정상의 세포에 비해 현저하게 죽었다. 그러나, MMS 또는 MMS와 3AB의 처리 실험에서는 저항성을 보였다. 이러한 결과로 SAPuvs는 DNA 상해회복에서 염색사구조 형성에 연관되어 있음을 확인하였다. The organization of eukayotic chromatin into specific conformation that are associated with transcription, replication, reapir and other nuclear processes are achieved via a series of DNA-protein interaction. These interactions are mediated by a range of DNA-binding domains such as SAP domain et at. By searching S. pombe genomic DNA database, we have found a gene named SAPuvs (SAP UV Sensitive) whose amino acid sequence is in part similar to SAP domain of Arabidopsis poly (ADP-ribose) polymerase and Ku7O. Knock-out cell of S. pombe SAPuvs gene was constructed using Ura4 as a selection marker. Survival analysis of knock-out cell indicated that treatment with UV significantly reduces the survival compared to wild type cell. Potentiation of MMS-induced cytotoxicity by 3AB post-treatment was observed in wild type cells, but not in knock-out cells. These data suggested that the protein encoded by SAPuvs gene is associated with chromatin reorganization during DNA repair.
거저리에서 CHD1 Family에 속하는 Helicase 유전자의 동정
차재영,김완주,이혜숙,황성진,조기정,박종군 圓光大學校 大學院 1999 論文集 Vol.22 No.-
Helicase family is highly conserved among eukaryotes and defines a family of proteins with similarity to has DNA-stimulated ATPase activity. The family containing consensus seven helicase motifs includes proteins from a variety of species with role in cellular processes such as transcriptional regulation, recombination and DNA repair. To identify a new member of eucaryote helicase, two oligonucleotide primers corresponding to stretches of amino acid sequences conserved among eucaryote helicase were designed. After PCR amplification of Tenebrio molitor cDNA, fragment with length 460 bp were subcloned into the pGEM-T vector. The plasmid construct containing the pGEM-T vector and 320 fragment was designated to pPHTC460. Sequence analysis revealed that the amino acid sequences deduced from pPTHC460 was highly homolgous to those in motif 1 and 3 of CHD1 which belong to CHD1 helicase family. The motif 1 and 3 of helicase play an important role in ATPase and DNA dependant helicase function. Results of this study suggested that there is CHD1 helicase family in T. molitor.
핵형분석과 RAPD技法을 利用한 상사화(Lycoris)속의 類綠關係 : Lycoris의 핵형 및 RAPD 분석
조기정,차재영,김완주,박윤점,박종군 圓光大學校大學院 2000 論文集 Vol.24 No.-
Twelve species of Lycoris was selected for establishment of phylogenetic relationships by karyotype and random amplified polymorphic DNA (RAPD) analyses. Our results obtained from karyotype analysis were very similar to those reported previously. For RAPD analysis, we used 10 synthetic oligonucleotides as primers. A total of 110 distinct DNA fragments were obtained by polymerase chain reaction. Pair-wise comparisons of unique and shared amplification products were performed to generate Nei and Li's similarity coefficients. On the basis of the dendrogram constructed with the similarity coefficients, 12 Lycoris species were divided into three clusters. Our results also suggested that L, incanata have originated from a cross between a gamete of L, sprengeri having 22A and another gamete having 4M+3T+1m.
철도역세권 입지적 특성을 고려한 복합개발의 개선방안 연구
박종군(Jong gun Park),장대섭(Dae seop Jang) 한국전자통신학회 2013 한국전자통신학회 학회지 Vol.6 No.1
본 논문에서는 기존 역세권 개발에 대한 토지이용 측면과 도시구조, 개발방식ㆍ도입기능ㆍ대중교통 등에 대해 중점적으로 분석하였고, 이러한 사례 분석을 바탕으로 철도역세권의 문제점으로 알아보고, 실질적인 사업의 개선방안을 제시하고자 하였다.
효모에서 MMS에 의한 DNA 단사절단에 미치는 3-aminobenzamide의 효과
김완주,박종군 圓光大學校 基礎自然科學硏究所 1994 基礎科學硏究誌 Vol.13 No.2
The present study concentrated to the presence of poly(ADP-ribosyl)ation in the yeast Saccharomyces cerevisiae, and its possible relation with regulation of the excision repair in lower and higher eucaryotes. Treatment of 5mM 3AB only resulted no significant change in the amount of DNA strand breaks as compared with that in control. When 3AB was treated after MMS treatment, the rejoing of MMS-induced DNA single strand breaks was accelerated as compared with that in cells incubated in normal medium after MMS treatment.