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LC-MS/MS를 이용한 농산물 중 살균제 tridemorph의 시험법 개발 및 검증
박원민,도정아,임승희,박신민,윤지혜,이동석,장문익 한국식품위생안전성학회 2017 한국식품위생안전성학회지 Vol.32 No.4
The purpose of this study was developed for the determination of tridemorph in agricultural commodities samples. Tridemorph residues in samples were extracted with acetonitrile, partitioned with saline water, and then purified using and aminopropyl (NH2) SPE catridge. The purified samples were quantified and confirmed via liquid chromatograph-tandem mass spectrometer (LC-MS/MS) in positive ion mode using multiple reaction monitoring (MRM). Matrix-matched calibration curves were linear over the calibration ranges (0.005~2.5 ng) into a blank extract with r 2 > 0.999. The limits of detection and quantification were 0.001 and 0.005 mg/kg, respectively. The average recovery ranged between 75.9% and 103.7% at different concentration levels (LOQ, 10 LOQ, 50 LOQ, n = 5) with relative standard deviations (RSDs) less than 9.0%. An interlaboratory study was conducted to validate the method by Korea Advanced Food Research Institute. The average recovery ranged between 87.0% and 109.2% at different concentration levels (LOQ, 10 × LOQ, 50 × LOQ, n = 5) with relative standard deviations (RSDs) less than 8.0%. All values were consistent with the criteria ranges requested in the Codex guidelines (CAC/GL40, 2003) and Food Safety Evaluation Department guidelines (2016). The results prove that the developed analytical methods is accurate, effective and sensitive for tridemorph determination.
박원민 ( Won Min Pak ),김꽃봉우리 ( Koth Bong Woo Ri Kim ),김민지 ( Min Ji Kim ),강보경 ( Bo Kyeong Kang ),박시우 ( Si Woo Bark ),김보람 ( Bo Ram Kim ),안나경 ( Na Kyung Ahn ),최연욱 ( Yeon Uk Choi ),윤성열 ( Sung Ryul Yoon ),안동현 한국응용생명화학회(구 한국농화학회) 2014 Journal of Applied Biological Chemistry (J. Appl. Vol.57 No.4
본 연구는 녹색 및 보라색 콜라비 부위(껍질, 잎, 엽육)에 따른 항산화 효과에 대해서 검증하고자 물 및 95% 에탄올에서 추출하였다. 항산화 활성을 측정하기 위하여 총 폴리페놀 함량, DPPH 라디칼 소거능, 금속봉쇄력, 환원력, rancimat에 의한 산화도를 측정하였다. 그 결과, 녹색 껍질 에탄올 추출물 및 보라색 잎 물 추출물이 각각 12.00 및 11.70 mg/mL로 가장 높은 총 폴리페놀 함량을 가졌다. DPPH 라디칼 소거능의 경우 보라색 잎 및 껍질의 물 및 에탄올 추출물에서 뛰어난 라디칼 소거능을 가졌으며, 금속봉쇄력의 경우 보라색 잎 물 추출물이 가장 높은 금속봉쇄력을 나타냈다. 반면, 환원력 및 rancimat에 의한 항산화도의 경우 콜라비 추출물은 대조구에 비하여 낮은 항산화력을 나타내었다. 따라서, 본 연구는 보라색 콜라비의 잎과 껍질 부위가 항산화 소재로서의 활용 가능성이 높음을 확인하였다. Antioxidant activities of ethanol and water extracts of flesh, leaves, and peels of green and purple Kohlrabi were measured by rancimat method, total phenolic compound (TPC), DPPH radical scavenging effect, chelating effect, and reducing power analysis. The highest TPC was observed in ethanol extract from green peel and water extract from purple leaf with 12.00 and 11.70 mg/g of dry sample, respectively. The ethanol extracts from purple Kohlrabi leaf and peel exhibited strong DPPH radical scavenging effects with reducing power while water extracts from purple Kohlrabi leaf and peel also showed strong DPPH radical scavenging with chelating effects. Antioxidant index of ethanoland water extracts from green and purple Kohlrabi measured by rancimat was lower than butylated hydroxytoluene. These results suggest that extracts from purple Kohlrabi leaf and peel exhibited higher antioxidant activities than those of green Kohlrabi, and can be potentially used as proper natural antioxidants.
박원민 ( Won Min Pak ),김꽃봉우리 ( Koth Bong Woo Ri Kim ),김민지 ( Min Ji Kim ),박지혜 ( Ji Hye Park ),배난영 ( Nan Young Bae ),박선희 ( Sun Hee Park ),안동현 ( Dong Hyun Ahn ) 한국미생물생명공학회(구 한국산업미생물학회) 2016 한국미생물·생명공학회지 Vol.44 No.1
잔가시 모자반 추출물의 피부 노화 억제 효과를 확인하기 위하여 항산화 활성, tyrosinase 저해 활성, collagenase 저해 활성을 측정하였다. 잔가시 모자반 에탄올 및 물 추출물의 폴리페놀 함량은 11.20 mg/g 및 11.70 mg/g으로 차이가 나지 않았다. DPPH radical 소거능에서는 잔가시 모자반 에탄올 및 물 추출물 모두 0.5 mg/ml 농도에서 83.68% 및 79%로 활성이 높게 나타났으며, 금속봉쇄력에서는 에탄올 추출물이 물 추출물보다 높게 나왔으나 대조구인 EDTA보다 활성이 낮게 나타났다. Tyrosinase 및 collagenase 저해 활성은 에탄올 추출물이 물 추출물보다 더 높은 것으로 나타났고, collagenase 저해 활성은 에탄올 추출물이 1 mg/ml 농도에서 80% 이상으로 높은 효소 저해능을 보였다. 따라서, 잔가시 모자반은 에탄올 추출물에서 항산화능, tyrosinase 및 collagenase 저해 활성이 더 높게 나타나 피부 노화 억제를 위한 소재로서 더 효과적으로 이용될 수 있을 것으로 사료된다. Sargassum micracanthum (SM) is a member of the family Sargassaceae and commonly occurs along the coast of Korea. Extracts from SM were evaluated for their antioxidant and collagenase and tyrosinase inhibitory activities based on their total phenolic concentration (TPC), 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging effect, and metal-chelating effect. The TPC of SM ethanol and water extracts used in the study was 11.20 and 11.70 mg/g of dry sample, respectively. Both SM ethanol and water extracts had high DPPH radical-scavenging effect. The metal-chelating effect of SM ethanol extract (40.47% at 0.5 mg/ml) was higher than that of water extract (23.28% at 0.5 mg/ml). With regard to the antiwrinkling effect, SM ethanol extract showed collagenase inhibitory activity with an IC50 value of 488.20 μg/ ml. Lastly, regarding the anti-melanogenesis effect, SM ethanol extract showed higher tyrosinase inhibitory activity (45.08% at 5 mg/ml) than that shown by the water extract (21.29% at 5 mg/ml). These results suggest that SM has the potential to be a resource with natural anti-melanogenesis, anti-wrinkle, and antioxidant effects.
열처리에 의한 Morganella morganii와 Photobacterium phosphoreum 유래 Histidine Decarboxylase의 불활성화
박원민(Won-Min Pak),김꽃봉우리(Koth-Bong-Woo-Ri Kim),김민지(Min-Ji Kim),박지혜(Ji-Hye Park),배난영(Nan-Young Bae),박선희(Sun-Hee Park),안동현(Dong-Hyun Ahn) 한국식품영양과학회 2016 한국식품영양과학회지 Vol.45 No.3
Histamine을 생성하는 Morganella morganii와 Photobacterium phosphoreum으로부터 crude histidine decarboxylase(HDC)를 추출하여 65~121°C로 열처리한 다음 균의 생육 및 효소 활성 변화에 대해 살펴보았다. 그 결과 M. morganii와 P. phosphoreum은 모든 열처리 조건에서 비 가열 처리구와 비교 시 균의 생육이 저해됨을 확인하였다. M. morganii와 P. phosphoreum 유래 HDC의 효소 활성은 65°C에서 90% 이상의 효소 활성이 저해됨을 확인하였고, 온도가 증가함에 따라 유의적으로 활성이 억제되는 것으로 나타났다. SDS-PAGE 결과에서는 65~100°C 범위에서 비가열 처리구와 비교 시 조효소액의 단백질 패턴의 변화가 크지 않았으나, 121°C에서 단백질 band의 강도가 크게 약해졌다. Native-PAGE에서는 65°C 처리 조건에서부터 단백질 패턴의 변화가 크게 나타났다. 따라서 가열처리(65~121°C)는 histamine 생성균인 M. morganii와 P. phosphoreum의 생육을 억제할 뿐만 아니라 HDC의 효소 활성도가 저해됨을 확인하여, 식품산업에서 적용되고 있는 열처리 조건에서 histamine 생성 억제에 큰 효과가 있는 것으로 생각한다. This study was performed to investigate the effects of various thermal treatments on the growth of Morganella morganii and Photobacterium phosphoreum and activity of crude histidine decarboxylase (HDC) obtained from M. morganii and P. phosphoreum. Crude HDC and the two strains were treated at 65°C/30 min, 80°C/10 min, 100°C/10 min, and 121°C/10 min. Activity of crude HDC decreased with increasing temperature. Viable cells counts of M. morganii and P. phosphoreum were not detected in any heated samples. SDS-PAGE patterns of heated HDC did not show significant differences up to 100°C. However, at 121°C, protein band intensity was weakened. In native-PAGE, there was a major change in the pattern of HDC at 65°C. These results suggest that thermal treatment can help to reduce histamine production by reducing HDC activity and growth of M. morganii and P. phosphoreum.
LPS로 유도된 RAW 264.7 cell로부터 NF-κB 조절 억제와 마우스 모델을 통한 큰잎모자반 에탄올 추출물의 항염증 효과
강보경,김꽃봉우리,김민지,박시우,박원민,안나경,최연욱,배난영,박지혜,안동현,Kang, Bo-Kyeong,Kim, Koth-Bong-Woo-Ri,Kim, Min-Ji,Bark, Si-Woo,Pak, Won-Min,Ahn, Na-Kyung,Choi, Yeon-Uk,Bae, Nan-Young,Park, Ji-Hye,Ahn, Dong-Hyun 한국미생물·생명공학회 2015 한국미생물·생명공학회지 Vol.43 No.2
본 연구에서는 큰잎모자반의 항염증 효과를 알아보기 위해 LPS에 의해 염증반응이 유도된 RAW 264.7 세포에 대한 큰잎모자반 에탄올 추출물의 항염증 효과를 살펴보았다. 세포내 염증매개성 cytokine (IL-6, TNF-α 및 IL-1β) 분비량의 측정결과, 농도 의존적으로 유의적 감소를 보였으며, 특히, 100 μg/ml로 처리하였을 경우 LPS 단독 처리와 비교 시 약 48% 이상의 높은 분비량 감소효과를 보였다. 추출물이 iNOS, COX-2 및 NF-kB 발현 억제에 미치는 효과를 알아본 결과, LPS 단독처리구에 의해 각 단백질의 발현량이 현저히 증가하였으나, 추출물을 처리하였을 때 그 발현량이 농도 의존적으로 감소하는 것을 확인할 수가 있었다. 특히 50 및 100 μg/ml 농도에서 PBS 처리구와 유사한 발현량을 보여 우수한 항염증 효과를 가짐을 확인하였다. 귀 부종 억제 효과 및 조직 관찰을 수행한 결과, 추출물 250 mg/kg 농도에서 prednisolone 10 mg/kg 처리와 유사하게 감소함을 보였다. 또한, croton oil로 부종을 유발한 마우스 귀 조직에서 croton oil만을 처리한 경우에 비해 추출물을 100 mg/ml 농도로 처리한 경우 prednisolone 처리구와 유사한 정도로 경피 및 진피 두께가 얇아진 것을 확인하였으며, 조직 내 mast cell 침윤을 현저히 억제함을 보였다. 이 결과를 종합해 볼 때, 큰잎모자반 에탄올 추출물이 염증 치료제로써의 소재로 이용될 가치가 충분할 것으로 사료된다. The anti-inflammatory effect of Sargassum coreanum ethanolic extract (SCEE) was investigated using lipopolysaccharide (LPS)-induced inflammatory responses in this study. It was shown that there was no cytotoxicity in the viability of macrophages treated with SCEE when compared to the control. The production of NO was considerably suppressed by SCEE, approximately up to 50% at 100 μg/ml. This significantly decreased levels of IL-6, TNF-α, and IL-1β. In addition, the expression of iNOS, COX-2, NF-κB was suppressed by SCEE treatment. In in vivo testing, the croton oil-induced mouse ear edema was attenuated by SCEE and there were no mortalities in mice administered with 5000 mg/kg body weight of SCEE over a 2 week observation period. From these results, SCEE inhibits the release of LPS-induced pro-inflammatory cytokines and mediators, suggesting that SCEE could be a potential agent for anti-inflammatory therapies.