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Glucose oxidase-oxygen rate method를 利用한 自動生化學分析裝備용 Glucose 試藥開發에 관한 硏究
마경란,김영기,이갑노,백승룡 고려대학교 의과대학 1992 고려대 의대 잡지 Vol.29 No.1
The detection methods for glucose in clinical pathology have been developed and currently most laboratories measure the glucose level by enzymatic procedures in automated analytical instrument to increase analytical specificity. The most frequently used procedures are glucose oxidase and hexokinase reactions. Beckman Chemistry Autoanalyzer(ASTRA-8® and Glucose Analyzer-2®)adopted glucose oxidase-oxygen rate method employing Oxygen Electrode in glucose module. The Oxygen Electrode senses oxygen concentration and solid state-circuits in the instrument system electronics determine the rate of oxygen consumption and calculate glucose concentration for each sample. Reagent for glucose analysis in ASTRA module is composed of glucose oxidase, alcohol, iodide and buffer solution. Because all reagents used in Korea have been imported from the Beckman or other foreign companies, in this study the author developed and evaluated the new reagent for glucose oxidase-oxygen rate method. The reagent is composed of glucose oxidase, mercuric iodide, propanol and phosphate buffer(pH 6.0). In the evaluation of the newly developed reagent as useful as clinical analytical reagent, the accuracy, precision and linearity tests were performed and compared the results with those obtained by Beckman original method. The results were summarized as follows: 1. The imprecision of newly developed reagent was 0.59 to 2.80% (CV) in the range of 40 to 200 mg/dL. 2. Day-to-day variance for one month was 1.25 to 2.20% in the range of 40 to 400 mg/dL. 3. The accuracy by patient comparison study was excellent with high correlation coefficient (r=0.9994) with the result by original reagent. 4. The recovery rate was in the range of 94.7 to 101.2%. 5. The linearity measured by aqueous standards was good in the range of 0 to 450 mg/dL. 6. The newly developed reagent was stable for 30 days during evaluation period after mixing the reagent at room temperature. In conclusion, the new reagent is satisfactory in precision, accuracy and linearity and may be used for routine laboratory test.
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2% NaCl Mueller-Hinton Agar와 Mannitol Salt Agar를 이용한 황색포도구균의 Methicillin 내성 검출
마경란,이도현,이창규,황선철,김영기,이갑노 대한감염학회 1998 감염 Vol.30 No.6
목 적 : MRSA 중 heteroresistant MRSA 는 온도, 배양시간, 배지 내 염농도 등 다양한 환경 조건에 영향을 받는 것으로 알려져 있다. 이에 저자들은 oxacillin 디스크를 이용하여 2% NaCl이 첨가된 Mueller-Hinton agar 와 mannitol salt agar 에서의 methicillin 내성을 평가하여 보았다. 방 법 : 70주의 S. aureus 에 대해 MH agar, 2% NaCl MH agar, MSA에서 1μg oxacillin 디스크를 이용한 디스크 확산법을 시행하였다. 또한 oxacillin의 MIC를 E-test로 시험하였다. 표준 방법으로 mecA 유전자를 PCR로 증폭하고 agarose gel 에서 전기영동하여 확인하였다. 결 과 : 일반 MH agar 는 12주(18%)의 S. aureus 에서 heterogeneous resistance 를 검출할 수 없었으나, 2% NaCl MH agar 와 MSA homogeneous 와 heterogeneous resistance 를 올바르게 검출할 수 있었다. 변 검체에서는 48%, 변이 아닌 검체에서는 5% 의 heterogeneous resistance 를 보였다. 결 론 : 일반 검사실에서 황색포도구균의 methicillin 내성의 정확한 검출에 2% NaCl MH agar와 MSA가 유용하게 사용될 수 있음을 알 수 있었다. Background : Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) has a heteroresistant nature, so methicillin resistance is influenced by various culture conditions, such as temperature, incubation time, and NaCl content in the medium. Mueller Hinton (MH) agar containing 2% NaCl and mannitol salt agar (MSA) with oxacillin disk were evaluated for the detection of methicillin resistance. Methods : Disk diffusion test on plain Mueller-Hinton (MH) agar, 2% NaCl MH agar, and MSA with 1 μg oxacillin disk was performed in 70 Staphylococcus aureus isolates. Oxacillin MIC was determined by E-test. As a gold standard of methicillin resistance, mecA gene was amplified by PCR and detected by agarose gel electrophoresis. Results : Plain MH agar could not detect heterogeneous resistance in 12 S. aureus isolates (18%), but 2% NaCl MH agar and MSA could correctly detect homogeneous and heterogeneous resistance. S. aureus isolates from stool have as much as 48% heterogeneous resistance, while those from non-stool specimen have 5%. Conclusion : 2% NaCl and MSA can be used reliably for accurate susceptibility testing of methicillin resistance in routine laboratory.
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임채승,마경란,이갑노,김광희,고원규,김민자,김영기,김대성 대한감염학회 1997 감염 Vol.29 No.5
배 경 : 저자들은 1996년 경기도 북부지역에서 감염된 81예의 삼일열 말라리아 환자에서 chloroquine 표준 치료를 실시하였고 치료 시작 전부터 치료후 28일 까지의 임상경과 및 검사결과 추적을 통해 치료효과를 평가 하였다. 재료 및 방법 : 항말라리아 치료를 시작한 환자에서 말라리아의 혈중 농도 측정을 측정하였는데 Giemsa염색을 실시하여 광학 현미경하에서 원추의 존재 유무 및 숫자를 계수하였으며 치료전과 치료 후 3, 14,28. 이레 채취된 혈중 원충의 농도를 비교하였다. 결 과 : 대상 환자는 총 81명으로 모두 남자였으며 경기도 북부지역에 거주한 경력을 가지고 있던 군대의 병사였다. 치료 14일의 치료 실패율은 2.5%(n=2)였으며 28일의 실패율은 0% 이었다. 그러나 항말라리아 치료에 효과적인 반응을 보였던 1명의 환자는 8개월 뒤 재발하였다. 결 론 : 저자들의 말라리아 치료효과 추적 결과 한국에서 재발한 말라리아는 지금보다 좀 더 주의 깊은 치료가 필요하며 특히 혈중의 원충 존재가 사라지기전에 치료를 중지하여서는 안될 것으로 생각된다. Background ; We evaluated the posttreatment response to chloroquine among 81 patients with vivax malaria who were residents in Northern area of Kyunggi province in 1996. the result of chloroquine therapy were followed 28 days after treatment. Material and Methods : Diagnosis of malaria was made by microscopic examination of Giemsa stain of peripheral blood Parasitemia levels from each patient were counted before treatment, 3, 14 and 28 days after treatment. Results : Eight-one patients successfully completed the therapy. All patients were army soldiers, who were residing in Northern area of Kyunggi province. The 14-day cumulative incidence of therapeutic failure for P. vivax was 2.5%(n=2) and 0%(n=81) at day. One patient had a recurrence eight months after completion of antimalarial treatment. Conclusion : The results suggest that recent resurgent malaria in Korea need more careful therapy. Antimalarial treatment should not be completed without microscopic confirmation.
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Plasmodium vivax의 재조함 Circumsporozoite 단백, Merozoite 표면 단백 및 Duffy 혈액형 부착 단백 항원을 이용한 항체반응
서인범,마경란,임채승,이갑노 대한진단검사의학회 2003 Annals of Laboratory Medicine Vol.23 No.3
배경 : Plasmodium vivax 의 표적항원인 circumsporozoite 단백(CSP), merozoite 표면 단백(MSP) 및 Duffy 혈액형 부착단백(DBP) 항원이P. vivax에 대한 면역기능과 관련성이 밝혀지면서 표적항원이 말라리아의 진단 및 백신 개발에 중요 역할을할 것으로 기대된다. 본 연구는P. vivax의 유전자 재조합 CSP,MSP, DBP 항원을 제작하여, 이들 재조합항원을 이용하여 말라리아 항체 진단에서 유용성을 알아보고자 하였으며, 국내의 말라리아 위험지역 및 일반지역에서의 항체반응양상을 측정하여 국내말라리아 예방의 기초가 되는 역학자료를 제공하고자 하였다.방법 : P. vivax의 각 CSP, MSP, DBP 항원을 제작하기 위해 고대 안산병원에서 P. vivax로 진단받은 환자의 전혈을 이용하여 각 항원 포함 부위를 증폭하여 확인한 후, 결찰, 클로닝, 단백질 발현 및 정제 과정을 거친 후, 각 발현된 재조합 항원을 이용하여 말라리아 양성, 음성 대조군에서 항체를 측정하여 각 재조합 항원의 유용성을 평가하였다. 국내 5개 지역 총 1,014명의건강검진 환자를 대상으로, 1) 각각의 재조합 항원을 통합 (CSP,MSP, DBP)하여 이에 대한 항체 반응(polyclonal, monoclonalIgG 및 IgM)과 2) 재조합 항원 각에 대한 IgG 항체 반응을측정하였다.결과 :1. 각 재조합 P. vivax의 CSP, MSP, DBP 항원 및 통합항원에 대한 IgG 항체 검사의 민감도는 각각 75.6%, 62.2%,68.9% 및 97.8%였고, 특이도는 각 92.1%, 84.2%, 81.6% 및97.8%였다. 2. 국내 5개 지역, 총 1,014명을 대상으로P. vivax의재조합 CSP, MSP 및 DBP 통합항원에 대한 항체 반응 검사를한 결과, 말라리아 고위험 지역인 철원 지역이 높은 항체 양성률을 보였다. 3. P. vivax의 재조합 CSP, MSP 및 DBP 항원에 대한 IgG 항체 반응을 측정한 결과, 양성률은 CSP 항원(2.0%)에대해서 가장 높았으며, 항원에 따른 지역별 차이는 보이지 않았다.
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